实验三 茎尖培养技术

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2.超净工作台使用前用75%的乙醇擦拭,打开鼓风机20分 钟左右; 3.接种前用品摆放合理; 4.接种过程中工具应充分灼烧,镊子、解剖刀及瓶口要在 酒精灯上灼烧; 5. 接种前用75%乙醇擦拭手和手臂,以减少污染。
六、思考题:
1. 以种苗快繁为目的的茎尖培养包括哪些阶段,各个 阶段对培养基条件有哪些要求,外植体选取要注意哪 些问题? 2. 无菌操作过程中需注意哪些问题?
2011年4月19日
来自百度文库
三、实验原理:
以茎尖为外植体经表面灭菌处理后,接种于诱导培养基 上,促进茎尖萌发成苗,获得无菌系,并可在适当浓度的 植物激素和生长调节剂的作用下进一步增殖和生根,获得 完整植株。 茎尖培养包括起始培养、增殖培养和生根培养及驯化移 栽等阶段,不同培养阶段要求不同的植物激素和生长调节 剂条件。 茎尖培养主要用于优质种苗和脱毒种苗的繁殖。
四、实验步骤:
1. 外植体的准备:去除老化叶片,保留1-2片幼叶,洗净 后在流水中冲洗10-20分钟; 注意选取幼嫩茎尖,大小要适当;选取生长旺盛的茎尖。
2. 表面灭菌:将茎尖材料放到灭国菌的罐头瓶内,加入 75%的乙醇处理30秒,然后倒出,加入1%的次氯酸钠 灭菌10分钟(大蒜处理20min),处理后用无菌水冲 洗4-5次;
3. 茎尖分离及接种:用镊子和解剖刀分离茎尖,用镊子 将分离的茎尖组织接种到培养基上,盖好瓶盖,贴好 标签。
4. 接种材料的培养:接种后的材料放到25℃,12h光照 条件下培养,3-4天可以观察到茎尖开始萌发生长。
五、无菌操作注意事项:
1. 保持接种室的洁净,使用前打开紫外灯照射20-30分钟, 然后关闭紫外灯,排出臭氧等气体;
实验三 植物茎尖培养技术
一、实验目的:
1. 学习并掌握植物茎尖离体培养的原理和方法;
2. 学习并掌握无菌操作技术。
二、实验材料:
1.大蒜、小白菜;
2. 培养基:MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L+蔗糖 3%+ 琼脂7.0g/L。 3. 75%的乙醇,1%次氯酸钠。
4. 酒精灯、培养皿、灭菌滤纸、镊子、解剖刀等。
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