植物组织培养(精)PPT课件
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植物组织培养PPT教学课件
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①每接种一块外植体前,镊子需放入体积分 数为75%的酒精溶液中消毒一次,然后在酒 精灯火焰上烧一遍,冷却后再接种
②外植体在培养基中要分布均匀,放置外植体 数量根据锥形瓶的大小确定,每瓶接种6-8 块外植体。
③插入时应注意方向,不要倒插。
思考:你打算做几组重复?你打算设置对照实 验吗?
答:每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养 基的锥形瓶,与接种操作后的锥形瓶一同培养, 用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。
B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等
C、有机物、植物激素
讨论:你能说出各种营养物质的作用吗?同专题 2中微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方 有哪些明显的不同?
答:微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必 需的无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞 的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满 足离体植物细胞对特殊营养的需求。微生物培养 基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS 培养基则需提供大量无机营养。
(三)接种
1、接种室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子,接种 室消毒是至关重要的。用70%的酒精喷雾使空 气消毒, 酒精或新洁尔灭擦洗工作台并用紫外 线照射20分钟
2、无菌操作要求
操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后, 都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。
3、材料的切取和接种
4、接种注意事项
生长素 < 细胞分裂素: 有利于芽的分化,抑 制根的分化
生长素 = 细胞分裂素: 促进愈伤组织生长
(4)pH、温度、光照
pH控制在5.8左右,温度控制在18-22。C,每 日用日光灯照射12h
3、植物组织培养过程:
②外植体在培养基中要分布均匀,放置外植体 数量根据锥形瓶的大小确定,每瓶接种6-8 块外植体。
③插入时应注意方向,不要倒插。
思考:你打算做几组重复?你打算设置对照实 验吗?
答:每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养 基的锥形瓶,与接种操作后的锥形瓶一同培养, 用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。
B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等
C、有机物、植物激素
讨论:你能说出各种营养物质的作用吗?同专题 2中微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方 有哪些明显的不同?
答:微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必 需的无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞 的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满 足离体植物细胞对特殊营养的需求。微生物培养 基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS 培养基则需提供大量无机营养。
(三)接种
1、接种室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子,接种 室消毒是至关重要的。用70%的酒精喷雾使空 气消毒, 酒精或新洁尔灭擦洗工作台并用紫外 线照射20分钟
2、无菌操作要求
操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后, 都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。
3、材料的切取和接种
4、接种注意事项
生长素 < 细胞分裂素: 有利于芽的分化,抑 制根的分化
生长素 = 细胞分裂素: 促进愈伤组织生长
(4)pH、温度、光照
pH控制在5.8左右,温度控制在18-22。C,每 日用日光灯照射12h
3、植物组织培养过程:
植物细胞组织培养(PPT)
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主要有:
➢ 原生质体(Protoplast)培养 ➢ 悬浮细胞培养 ➢ 组织(愈伤组织Callus、茎尖分生组织)培
养 ➢ 器官(胚,花药,子房,根和茎)培养
其中最常见的是愈伤组织培养。
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植物细胞组织培养范畴:
(广义)又叫离体培养:指从植物体分离出 符合需要的组织、器官或细胞、原生质体等, 通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养 以获得再生的完整植株或生产具有经济价值 的其他产品的技术。
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三、植物组织培养的生理依据
植物生长调节物质对于植物细胞组织的分化和决定具 有关键性作用。它包括:生长素类、细胞分裂素类、 赤霉素、脱落酸、乙烯等
生长素类主要用于愈伤组织的形成,体细胞胚的产生及试管 苗的生根。常用的有2,4-D、NAA、IBA、IAA等。其作用强 弱为2,4-D>NAA>IBA>IAA。
细胞分裂素类则有促进细胞的分裂与分化,延迟组织的衰老, 促进芽的产生等作用。常用的有Zip(异戊烯腺嘌呤)、KT、6BA、ZT等作用强弱顺序为。Zip>KT>6-BA>ZT。
赤霉素则有促进已分化的芽伸长生长,打破种子休眠的作用。 常用的为GA3。
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四、植物组织培养的原理
★植物细胞全能性(Cellular totipotency): 任何具有完整细胞核的植物细胞,都拥有形成
种子培养
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3. 组织或愈伤组织培养(tissue, callus culture) :是对植物体的各部分
组织进行培养,如茎尖分生组织、形成层、 木质部、韧皮部、表皮组织、胚乳组织和薄 壁组织等等;或对由植物器官培养产生的愈 伤组织进行培养,二者均通过再分化诱导形 成植株.
《植物组织培养技术》课件
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04 植物组织培养技术的应用实例
快速繁殖技术
快速繁殖技术是指利用植物组 织培养技术,快速、大量繁殖
植物种苗的一种方法。
该技术广泛应用于花卉、果树 、林木等植物的快速繁殖,能 够大大缩短繁殖周期,提高繁
殖系数。
快速繁殖技术还可以通过控制 培养条件,实现植物的定向繁 殖,如矮化、无病毒等。
快速繁殖技术具有高效、环保 、可重复利用等优点,是现代 农业和林业生产的重要手段之 一。
濒危植物保护与复壮是保护生 物多样性和维护生态平衡的重 要手段之一,具有深远的社会 意义和生态意义。
05 植物组织培养技术的挑战与前景
技术瓶颈与解决方案
技术瓶颈
目前植物组织培养技术面临的主要瓶颈包括培养基的优化、外植体的选择与处 理、污染控制以及基因转化效率等。
解决方案
针对这些问题,研究者们正在探索新型的培养基成分、优化外植体的选择标准 、开发新型的消毒方法以及改进基因转化技术,以期提高植物组织培养的效率 和成功率。
指任何一个植物细胞都包含该物种的 全套遗传信息,具有发育成完整个体 的潜在能力。
植物细胞全能性证明
植物细胞全能性的应用
植物组织培养技术利用植物细胞的全 能性,通过离体培养获得完整的植株 ,广泛应用于植物繁殖、品种改良、 基因工程等领域。
许多植物细胞如胡萝卜、烟草、草莓 等在适宜条件下能够发育成完整的植 株,证明了植物细胞的全能性。
技术发展趋势与展望
发展趋势
随着生物技术的不断发展,植物组织培 养技术也在不断进步和完善。未来,该 技术将更加注重与基因编辑、合成生物 学等新兴技术的结合,以实现更为精准 和高效的植物育种和种质资源保护。
VS
展望
未来,植物组织培养技术有望在农业、园 艺、林业等领域发挥更大的作用,为解决 全球粮食安全、生态恢复等问题提供有力 支持。
植物组织培养ppt课件
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三、植物组织培养的发展简史
四个阶段
探索阶段(1902-1929年) 奠基阶段(1930-1960年) 迅速发展阶段(1960-1980) 生产上广泛应用阶段(1980-今)
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1. 探索阶段(1902-1929年)
Haberlandt:
贡献: 提出细胞全能性假说 首次进行离体细胞培养
有不同的培养反应。 (6)植物种类的差异。 一般双子叶植物比单子叶植物
及裸子植物容易。
25
4、愈伤组织(Callus)培养
①愈伤组织生长过程
在脱分化的过程中,多形成Callus, 其细胞结构无明 显极性。
• (1)诱导期:细胞准备进行分裂, 细胞大小几乎不变,
生理生化变化大,迅速合成蛋白质和核酸。
RNA
27
28
③愈伤组织的继代培养 在多数情况下,随着培养时间的延长,Callus长势
下降、褐变、分化和形态发生能力下降甚至死亡。主 要原因:染色体畸变,基因突变, 生理因素(代谢产 物),细胞或组织内激素平衡的改变,细胞对外源生 长物质的敏感性改变,培养基损耗等。
29
④愈伤组织形态发生 (1)准备:外层细胞分裂逐渐减慢并停止;内部较深
19
2 、细胞分化(Cell differentiation)
①概念
(1) 分化:是指植物体各个部分出现异质性的现象,
包括细胞分化、组织分化和器官分化。
(2)细胞分化:指同一来源的细胞逐渐产生出形态结 构、功能特征各不相同的细胞类群的过程,其结果是 在空间上细胞产生差异,在时间上同一细胞与其从前 的状态有所不同。
35
②影响细胞再分化因素: 从理论上讲,在离体培养条件下经过再分化可获 得各种
三、植物组织培养的发展简史
四个阶段
探索阶段(1902-1929年) 奠基阶段(1930-1960年) 迅速发展阶段(1960-1980) 生产上广泛应用阶段(1980-今)
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1. 探索阶段(1902-1929年)
Haberlandt:
贡献: 提出细胞全能性假说 首次进行离体细胞培养
有不同的培养反应。 (6)植物种类的差异。 一般双子叶植物比单子叶植物
及裸子植物容易。
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4、愈伤组织(Callus)培养
①愈伤组织生长过程
在脱分化的过程中,多形成Callus, 其细胞结构无明 显极性。
• (1)诱导期:细胞准备进行分裂, 细胞大小几乎不变,
生理生化变化大,迅速合成蛋白质和核酸。
RNA
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③愈伤组织的继代培养 在多数情况下,随着培养时间的延长,Callus长势
下降、褐变、分化和形态发生能力下降甚至死亡。主 要原因:染色体畸变,基因突变, 生理因素(代谢产 物),细胞或组织内激素平衡的改变,细胞对外源生 长物质的敏感性改变,培养基损耗等。
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④愈伤组织形态发生 (1)准备:外层细胞分裂逐渐减慢并停止;内部较深
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2 、细胞分化(Cell differentiation)
①概念
(1) 分化:是指植物体各个部分出现异质性的现象,
包括细胞分化、组织分化和器官分化。
(2)细胞分化:指同一来源的细胞逐渐产生出形态结 构、功能特征各不相同的细胞类群的过程,其结果是 在空间上细胞产生差异,在时间上同一细胞与其从前 的状态有所不同。
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②影响细胞再分化因素: 从理论上讲,在离体培养条件下经过再分化可获 得各种
植物组织培养【优质PPT】
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2、植物组织培养技术的初步形成(1930-1960年)
1933年,我国植物生理学家李继侗培养银杏胚胎,并发现银杏胚乳提取 液可促进离体胚的生长。
1937年,White发现B族维生素对离体根培养的重要性。并指出IAA对植 物生长发育的控制起重要作用。
1937,1938年,Gantheret在培养基中加入上述生长因子,使得柳树形成层 诱导形成的愈伤组织连续生长。Nobecomt对烟草种间杂种茎段的形成层细 胞培养也得到了类似的结果。
(3)液体培养(Liquid Culture):震荡、旋转或静置培 养。
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固体培养: 液体培养
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三、植物组织培养技术的理论基础
植物细胞的全能性(Plant cellular totipotency)
从理论上讲,植物体的每个生活细胞都具有该 植物体的全部遗传信息,在特定的离体培养条件 下,具有发育成完整植株的潜在能力。
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3、植物组织培养技术的发展(1960年以后)
1960年,Morel利用兰花茎尖培养对兰花进行营养繁殖;
1962年,Murashige和Skoog开发出最著名的Murashige和Skoog培养基 (MS基本培养基),并被后来广泛采用的基本培养基。
1964年,印度人Guha和Maheshwari利用曼陀罗花粉培养获得第一例 单倍体植株。从而开辟了单倍体育种技术。
细胞团培养
茎尖分生组织培养 原生质体培养
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矮牵牛茎尖离体培养培养
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大蒜根尖培养及植株
植物组织培养PPT课件

在植物体内
限制
游离
表现
植物体的任何一个细胞,都有长成完整个体的潜在能力
.
5
01
培养基
在组织细胞生长过程中提供所需的营养物质
.
6
02
组培苗的生长过程
.
7
02
组培苗的生长过程
转苗
出瓶
.
8
03
植物组织培养的意义
.
9
03
快速繁殖
稀有植物 繁殖能力低或不能用种子繁殖的植物 受地理环境及季节因素限制的植物
.
10
04
组培的实验条件
.
11
04
超净工作台
提供无菌无尘的工作环境
照明灯
紫外线灯
风机
视频介绍
.
12
04
培养室
控制光照、温度,并 保持相对的无菌环境
.
13
05
转苗操作步骤
.
14
05
操作步骤
准备工作 01
1.将操作时需要用到的物品(酒精灯、一对镊子、托盘、培养基等) 放于超净工作台台内喷洒70%酒精后开启超净台紫外灯照射消毒 30min左右 2.戴口罩,70%酒精消毒双手 3.取一对镊子于酒精灯火焰的外焰灼烧约1-2min后放置至恢复室温 备用
.
18
05
每瓶接7-10株
接苗深度:将根部插入培 养基,露出根茎结合部 (过深不利于苗的生长) 尽量使苗直立固定
.
19
The end 希望同学们学有所成
.
20
1.取适量的苗于托盘中后,将培养瓶盖上盖子 (盖前同样转动灼烧瓶口) 2.左右手各持一把镊子,将托盘里的苗分成一株 株同时把夹带的培养基、枯叶等杂质与苗分开
植物的组织培养技术(共27张PPT)
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➢按培养方法分为
固体培养 液体培养
看护培养 微室培养
按培养过程分为
初代培养
继代培养
离体的植物器官、组织、细胞 将植物的器官如胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、花和幼果的部分组织接种在无菌培养基上进行培养。
初代培养 继代培养 运用组织培养的途径,一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株,而且均来自一单一的个体,遗传性状一致。
再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件 下可有转变为各种不同细胞类型的能力。
4.植物组织培养分类
➢按材料的类别分
愈伤组织培养 细 胞 培养
器 官 培养
原生质体培养
最为常见的组织培养
悬浮细胞培养 单细胞培养
胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、 花和幼果的部分组织的培养
⑴愈伤组织培养
将外植体接种在人工培养基上,由于植物生长调节剂的存 在,而其细胞脱分化形成愈伤组织,然后通过再分化形成再 生植株。它是最为常见的。
1.组织培养定义
组织培养是指用
无菌方法使植 物体的离体器
官、组织和细胞 在人为提供的条 件下生长和发育 的所有培养技术 的总称,也称之 为离体培养。
(二)奠基阶段(从20世纪30
年代末到50年代中):
1934年,White 用番茄根尖 建立起第一个活跃生长的无性繁 殖系,从而使非胚器官的培养首 先获得成功。
脱 分 化
离体的植物器官、 组织、细胞
愈伤组织
植物全能性 的表达
根、芽
胚状体 再生植株
游离单细胞 或原生质体
人工种子
培养条件:基 本培养基和适 宜的植物生长 调节物质,适 宜的温度、空 气、无菌环境、 适合的PH、 适时光照等。
脱分化:将分化组织的已停止分裂的细胞从植物体 部分的抑制性影响下解脱出来,恢复细胞的分裂活性。
植物组织培养学PPT课件

20
• 培养室:培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。培养室的大小可根
据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空 间和节省能源为原则。高度比培养架略高为宜,周围墙壁要求有绝热防火 的性能。
培养材料放在培养架上培养。培养架大多由金属制成,一般设5层,最 低一层离地高约lOcm,其他每层间隔30cm左右,培养架即高1.7m左右。 培养架长度都是根据日光灯的长度而设计, 如采用40W日光灯,则长 I.3m,30W的长lm,宽度一般为60cm。
• ②生长周期短,繁殖率高 植物组织培养是由于人为控制培养条件,根据不同植物不同部位的不同要求 而提供不同的培养条件,因此生长较快。另外,植株也比较小,往往20— 30d为一个周期。所以,虽然植物组织培养需要一定设备及能源消耗,但由 于植物材料能按几何级数繁殖生产,故总体来说成本低廉,且能及时提供 规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。
13
植物细胞全能性的表达
• 脱分化(dedifferentiation):将来自已分 化组织的已停止分裂的细胞从植物体部 分的抑制性影响下解脱出来,恢复细胞 的分裂活性。
• 再分化(redifferentiation):经脱分化的组 织或细胞在一定的培养条件下可有转变 为各种不同细胞类型的能力。
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接种室宜小不宜大,一般7~8平米,要求地面、天花板 及四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒。配置拉动门,以 减少开关门时的空气扰动。
接种室要求干爽安静,清洁明亮。在适当位置吊装1~2 盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。最好安装一小型空调,使 室温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外界空气对流。
接种室应设有缓冲问,面积1m2为宜。进入无菌操作室 前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。缓冲间最 好也安一盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。
• 培养室:培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。培养室的大小可根
据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空 间和节省能源为原则。高度比培养架略高为宜,周围墙壁要求有绝热防火 的性能。
培养材料放在培养架上培养。培养架大多由金属制成,一般设5层,最 低一层离地高约lOcm,其他每层间隔30cm左右,培养架即高1.7m左右。 培养架长度都是根据日光灯的长度而设计, 如采用40W日光灯,则长 I.3m,30W的长lm,宽度一般为60cm。
• ②生长周期短,繁殖率高 植物组织培养是由于人为控制培养条件,根据不同植物不同部位的不同要求 而提供不同的培养条件,因此生长较快。另外,植株也比较小,往往20— 30d为一个周期。所以,虽然植物组织培养需要一定设备及能源消耗,但由 于植物材料能按几何级数繁殖生产,故总体来说成本低廉,且能及时提供 规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。
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植物细胞全能性的表达
• 脱分化(dedifferentiation):将来自已分 化组织的已停止分裂的细胞从植物体部 分的抑制性影响下解脱出来,恢复细胞 的分裂活性。
• 再分化(redifferentiation):经脱分化的组 织或细胞在一定的培养条件下可有转变 为各种不同细胞类型的能力。
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接种室宜小不宜大,一般7~8平米,要求地面、天花板 及四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒。配置拉动门,以 减少开关门时的空气扰动。
接种室要求干爽安静,清洁明亮。在适当位置吊装1~2 盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。最好安装一小型空调,使 室温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外界空气对流。
接种室应设有缓冲问,面积1m2为宜。进入无菌操作室 前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。缓冲间最 好也安一盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。
植物组织培养PPT
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3、为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响,某 研究小组在MS培养基中加入6-BA和IAA,配制成四种培养基(见下表), 灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体,在适宜 条件下培养一段时间后,统计再生丛芽外植体的比率(m),以及再生丛芽 外植体上的丛芽平均数(n),结果如下表。
10
4. 生根培养基:1 000mL MS 培养基+含 0.38mg NAA 的溶 液+30g 蔗糖+20g琼脂,再加蒸馏水至 2 000mL,混合均匀 ,加热至琼脂融化后,分装至 100mL 的三角瓶中,每瓶 40mL,共 50 瓶。灭菌操作同步骤 3。
三角瓶加上封口膜后 1kg 压力下在灭菌锅中灭菌 20min
基中,盖上 封口膜 。
生芽培养 在日光灯下保持18~25 ℃ 的温度培养,每天 光照 不少
于14.5 h,培养(2~3周后)至长出 丛状苗
生根培养 在 无菌 条件下,将丛状苗转入 生根 培养基中,在
适宜条件下继续培养
移栽和定 植
待生根后,将苗移至 草炭土或蛭石 中,逐渐降低 行 锻炼 。最后转移至土中培养( 定植 )
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4、培养
⑴在日光灯下保持18-25℃培养,每天的光照不少于 14.5h ⑵先生芽培养,然后再生根培养 2~3 周后将生长健壮的丛状苗 在无菌条件下一个个 转入生根培养基中,在上述条件下继续培养。
注意事项:
①无菌箱中培养并定期消毒
②如果培养顺序颠倒,则不容易诱导芽的形成
③一般情况下,愈伤组织形成不需要光,试管苗形成后需要见光培养
外植体上残留的杂菌会和外植体争夺培养基中的营养物质,并 且产生大量对外植体有害的物质,导致外植体死亡,所以要先 消毒再接种。
《植物组织培养》课件
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《植物组织培养》PPT课 件
通过植物组织培养,我们可以在无菌条件下培养和繁殖植物细胞、组织和器 官。这种技术在农业和科学研究中具有重要的意义。
培养的定义和意义
1 定义
植物组织培养是一种无菌条件下培养和繁殖植物细胞、组织和器官的技术。
2 意义
植物组织培养可以实现植物繁殖和改良,加快育种速度,解决病虫害和环境胁迫等问题。
植物组织培养的未来发展方向
基因工程
利用植物组织培养技术进 行基因编辑和转基因繁殖, 加速育种进程。
环境修复
利用植物组织培养技术繁 殖适应环境的植物品种, 用于环境修复和产药用植物和人工合成药 物,为医疗领域带来新的 可能性。
植物组织培养的历史和研究方法
1
历史
植物组织培养起源于20世纪50年代,经过多年的发展和研究,如今已广泛应用 于植物学和农业领域。
2
研究方法
常用的植物组织培养方法包括悬浮培养、固体培养、愈伤组织培养等,每种方法 都有其适用的场景。
植物激素的作用
生长素
促进细胞分裂和分化,调 控植物生长和发育。
赤霉素
促进植物伸长和营养物质 的转运。
细胞分裂素
促进细胞分裂和植物器官 的生长。
植物花卉组织培养技术及其应用
技术
植物花卉组织培养技术包括愈伤组织培养、鲜花 切花养护、芽体分化培养等,广泛应用于花卉生 产和观赏。
应用
植物花卉组织培养应用于兰花、玫瑰等种类的繁 殖和育种,有效提高了花卉产量和改良品种。
植物细胞休眠和复苏技术
1
休眠
植物细胞休眠是植物适应环境变化而
复苏
2
进入的一种休息状态,存在于种子、 芽和各种组织中。
植物细胞在适宜的环境条件下,从休
通过植物组织培养,我们可以在无菌条件下培养和繁殖植物细胞、组织和器 官。这种技术在农业和科学研究中具有重要的意义。
培养的定义和意义
1 定义
植物组织培养是一种无菌条件下培养和繁殖植物细胞、组织和器官的技术。
2 意义
植物组织培养可以实现植物繁殖和改良,加快育种速度,解决病虫害和环境胁迫等问题。
植物组织培养的未来发展方向
基因工程
利用植物组织培养技术进 行基因编辑和转基因繁殖, 加速育种进程。
环境修复
利用植物组织培养技术繁 殖适应环境的植物品种, 用于环境修复和产药用植物和人工合成药 物,为医疗领域带来新的 可能性。
植物组织培养的历史和研究方法
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历史
植物组织培养起源于20世纪50年代,经过多年的发展和研究,如今已广泛应用 于植物学和农业领域。
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研究方法
常用的植物组织培养方法包括悬浮培养、固体培养、愈伤组织培养等,每种方法 都有其适用的场景。
植物激素的作用
生长素
促进细胞分裂和分化,调 控植物生长和发育。
赤霉素
促进植物伸长和营养物质 的转运。
细胞分裂素
促进细胞分裂和植物器官 的生长。
植物花卉组织培养技术及其应用
技术
植物花卉组织培养技术包括愈伤组织培养、鲜花 切花养护、芽体分化培养等,广泛应用于花卉生 产和观赏。
应用
植物花卉组织培养应用于兰花、玫瑰等种类的繁 殖和育种,有效提高了花卉产量和改良品种。
植物细胞休眠和复苏技术
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休眠
植物细胞休眠是植物适应环境变化而
复苏
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进入的一种休息状态,存在于种子、 芽和各种组织中。
植物细胞在适宜的环境条件下,从休
组织培养PPT课件
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自来水
75%酒精 10~30s
无菌水冲洗2~3次
2 ~10% NaClO3 10~15min
0.1~0.2% HgCl2 5~10min
无菌水冲洗4~5次
无菌滤纸吸干
切割
.
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(2).果实、种子
自来水
75%酒精
果实:2% NaClO3 10min 无菌水清
洗数次 剖出种子或组织
种子: NaClO3 20—30min~几小时 视种皮的硬度而定,种皮太硬的,先去
从植物体上获取外植体后,要先用自来水冲洗
10min[表面不光滑的,需冲洗1~2h,可用洗衣粉/洗洁
精清洗,必要时可用毛刷]
滤纸吸干水分 消毒[可
先在70%的酒精溶液中浸泡30s]
.
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1).常用的消毒剂
消毒剂
用法&用量
处理时间
优缺点
漂白粉 饱和液取上清
酒精
70~75%
H2O2
6~12%
升汞(HgCl2) 0.1~0.2%
KCl 0.4~0.8mol/L
甘露醇: 0.4~0.6mol/L
山梨醇 :0.8~1.2mol/L
.
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四.植物组培的培养基
1).组成 ①.激素
生长素:IAA、NAA、2,4-D、IBA
分裂素:KT 6-BA 玉米素
用量:0.1~10mg/L
②.无机盐 总浓度 25mmol/L 左右
NO3- 25~40mmol/L
0.5×0.3×0.2㎝3 易产生Callus
大蒜蒜瓣
0.2×0.2×0.1 ㎝3 较少/不产 生
.
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3).分离原生质体(Protoplast)
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植物组织培养
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目录
一. 植物分生组织培养 二. 植物愈伤组织培养 三. 植物薄层组织培养
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一.分生组织培养
分生组织培养:是指对植物的分生 组织进行离体培养的技术。
分生组织包括:根尖、茎尖等顶端 分生组织和形成层组织。
特点:他们具有很强的分裂与分化 能力,离体培养时可以形成完整植 株。
3
• 以茎尖培养为例:
6
茎尖离体培养后,可能会出现 的反应:
① 生长太慢; ② 生长过旺,愈伤增多; ③ 生长正常;
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二.植物愈伤组织培养
• 愈伤组织培养:是指诱导植物外植体产生无序生 长的薄壁细胞及对其培养的技术。
• 产生原因:经过灭菌或切割后,在适当的环境下 产生的。
• 一般薄壁细胞和形成层易形成愈伤组织。
• 特点:或疏松或致密;颜色不一;可形成一些 “胚胎发生丛(EC)”或胚性愈伤组织;生长迅速, 通常在黑暗或弱光下进行。
-
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• 茎尖培养广泛应用于种苗快速繁殖,脱毒 苗的生产,品种改良和基础理论研究。快 速繁殖可取数毫米大小,脱毒苗培育要求 取小于1mm的茎尖。
为什么茎尖培养可用于脱毒苗的生产? 原因:病毒在植物体内分布的不均一性;
植物病毒具有系统系统侵染的特点,在 植物体中除生长点外的各个部位均可带毒。
-5Leabharlann 茎尖组织可能发育的方向: ① 芽萌发; ② 产生胚状体; ③ 产生不定器官; ④ 形成愈伤组织;
-
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愈伤组织
-
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三.植物薄层组织培养
• 薄层组织培养:是指对植物的薄细胞层组织进行 离体培养的技术。
• 外植体材料:薄细胞层( 一般3~6层),在适宜 条件下,可以获得不同的器官。 如烟草花序轴3~6层表皮及表皮下细胞组成的薄壁 组织。
• 培养条件:培养基,激素,环境因子。
• 诱导结果:在不同培养基中可得到花芽、营养芽、 根或愈伤组织。
-
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11
• 茎尖培养是切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分, 进行无菌培养。这是组织培养中用得最多的一个取 材部位。
• 根据培养目的和取材大小可分为微茎尖培养和普通 茎尖培养。微茎尖指带有1-2个叶原基的生长锥,其 长度不超过0.5mm。普通茎尖指较大的茎尖(如几 mm到几十mm)、芽尖及侧芽。
• 特点:技术简单,操作方便,茎尖容易成活,成苗 所需时间短。
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目录
一. 植物分生组织培养 二. 植物愈伤组织培养 三. 植物薄层组织培养
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一.分生组织培养
分生组织培养:是指对植物的分生 组织进行离体培养的技术。
分生组织包括:根尖、茎尖等顶端 分生组织和形成层组织。
特点:他们具有很强的分裂与分化 能力,离体培养时可以形成完整植 株。
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• 以茎尖培养为例:
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茎尖离体培养后,可能会出现 的反应:
① 生长太慢; ② 生长过旺,愈伤增多; ③ 生长正常;
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二.植物愈伤组织培养
• 愈伤组织培养:是指诱导植物外植体产生无序生 长的薄壁细胞及对其培养的技术。
• 产生原因:经过灭菌或切割后,在适当的环境下 产生的。
• 一般薄壁细胞和形成层易形成愈伤组织。
• 特点:或疏松或致密;颜色不一;可形成一些 “胚胎发生丛(EC)”或胚性愈伤组织;生长迅速, 通常在黑暗或弱光下进行。
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• 茎尖培养广泛应用于种苗快速繁殖,脱毒 苗的生产,品种改良和基础理论研究。快 速繁殖可取数毫米大小,脱毒苗培育要求 取小于1mm的茎尖。
为什么茎尖培养可用于脱毒苗的生产? 原因:病毒在植物体内分布的不均一性;
植物病毒具有系统系统侵染的特点,在 植物体中除生长点外的各个部位均可带毒。
-5Leabharlann 茎尖组织可能发育的方向: ① 芽萌发; ② 产生胚状体; ③ 产生不定器官; ④ 形成愈伤组织;
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愈伤组织
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三.植物薄层组织培养
• 薄层组织培养:是指对植物的薄细胞层组织进行 离体培养的技术。
• 外植体材料:薄细胞层( 一般3~6层),在适宜 条件下,可以获得不同的器官。 如烟草花序轴3~6层表皮及表皮下细胞组成的薄壁 组织。
• 培养条件:培养基,激素,环境因子。
• 诱导结果:在不同培养基中可得到花芽、营养芽、 根或愈伤组织。
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• 茎尖培养是切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分, 进行无菌培养。这是组织培养中用得最多的一个取 材部位。
• 根据培养目的和取材大小可分为微茎尖培养和普通 茎尖培养。微茎尖指带有1-2个叶原基的生长锥,其 长度不超过0.5mm。普通茎尖指较大的茎尖(如几 mm到几十mm)、芽尖及侧芽。
• 特点:技术简单,操作方便,茎尖容易成活,成苗 所需时间短。