土壤酶指标测定
土壤酶活性
土壤酶活性土壤酶活性是土壤生物学中的一个重要指标，它能反映出土壤的活性水平，是衡量土壤健康状况的重要指标。
土壤酶活性能够反映土壤中所发生的生物化学反应和肥力变化，同时也能反映出土壤肥力状态，是研究土壤有机质变化的重要手段。
因此，土壤酶活性的研究分析对于科学研究土壤肥力、土壤可持续利用和环境保护具有重要的意义。
一、土壤酶活性的研究土壤酶活性的测定包括反映土壤有机质变化的酶组，如淀粉酶、半胱氨酸酶、脲酶、脱氢酶、过氧化物酶、还原酶等，这些酶在土壤中具有不同的结构和活动水平，可以反映出环境因子对其影响的程度。
土壤酶活性的度量能够探究土壤有机质和肥力的变化情况，从而提供科学的指导意见，研究土壤肥力的变化及其对作物生长发育的影响。
常用的测定方法有实验室沉淀法、放射性标记法、水解法、色谱法和试管反应法等。
二、土壤酶活性的调控土壤酶活性的变化受多种环境因子的影响，包括：土壤中的微生物类型和数量、土壤中温度、湿度、pH值等，还受到土壤有机质及其组分、种植植物种类等的影响。
土壤肥力调控方面，可以通过施用有机肥、化肥和微量元素肥料，以及改良土壤成分，减少农药和植物保护剂，控制土壤有机质组分，来优化土壤酶活性，从而提高农作物的产量和质量。
三、土壤酶活性的应用土壤酶活性的研究不仅有助于科学地解决土壤的有机质变化问题，而且在应用方面还有着重要意义。
目前，土壤酶活性的研究已经被广泛用于农业、园艺、植物保护、土壤调查和生态修复等领域。
首先，土壤酶活性的研究可以用于确定土壤质量及其可能的生物效应，从而为合理施肥、防治土壤污染、改良土壤环境及园林植物生长发育提供科学参考依据。
其次，对土壤酶活性的研究可以帮助我们更好地理解土壤的有机质积累和释放，促进土壤的优化、可持续利用和生态修复，为可持续农业发展提供有力支持。
四、结论土壤酶活性是衡量土壤健康状况的重要指标，它能反映出土壤的活性水平，是研究土壤有机质变化的重要手段。
研究土壤酶活性对于科学研究土壤肥力、土壤可持续利用和环境保护具有重要的意义。
土壤酶活性的测定方法
土壤酶活性的测定方法土壤酶活性的测定方法主要包括测定土壤中的蔗糖酶、脲酶、过氧化氢酶和过氧化物酶等多种酶活性，这些酶活性的测定可以反映土壤的微生物代谢能力和土壤质量。
本文将详细介绍几种常用的土壤酶活性测定方法。
一、酶活性测定方法的准备工作1. 样品处理：收集土壤样本后，将其放在4C冷藏保存，保持样品活性，避免酶的降解。
2. 取样：根据需要，从土壤样品中取出一定量的湿重或干重样品。
3. 土壤处理：依据实验要求，对土壤样品进行处理，如水分调整、添加营养物质等。
二、蔗糖酶活性测定方法蔗糖酶是一种常见的土壤酶，可反映土壤中的碳循环能力。
蔗糖酶活性的测定方法如下：1. 取一定量的土壤样品，并通过筛网过滤，去除杂质。
2. 准备培养基：其中包括蔗糖作为底物、缓冲液、指示剂等。
3. 加入适量的土壤样品和培养基到离心管中，混匀后，放置在恒温摇床上培养一定时间。
4. 培养结束后，通过离心将土壤颗粒沉淀到底部。
5. 取沉淀后的上清液，用酚酞指示剂进行比色检测，根据比色结果计算蔗糖酶活性。
三、脲酶活性测定方法脲酶是一种重要的土壤酶，参与土壤中尿素的分解过程。
脲酶活性的测定方法如下：1. 取一定量的土壤样品，在10C恒温条件下接种脲酶底物，使底物完全被土壤降解。
2. 在一定时间后，通过添加草酸溶液阻止进一步反应，停止脲酶的活性。
3. 取样品，加入酚硫酸溶液，进行比色测定。
4. 根据比色结果计算脲酶活性。
四、过氧化氢酶活性测定方法过氧化氢酶是一种催化过氧化氢分解的酶，可反映土壤的抗氧化能力。
过氧化氢酶活性的测定方法如下：1. 取一定量的土壤样品，并通过筛网过滤去除杂质。
2. 准备含过氧化氢底物和其他试剂的反应体系。
3. 将土壤样品加入反应体系中，充分混匀后，在一定时间内反应。
4. 在反应结束后，通过添加硫酸钠溶液停止反应，阻止进一步的化学反应。
5. 使用紫外分光光度计测定样品的吸光度，根据结果计算过氧化氢酶活性。
五、过氧化物酶活性测定方法过氧化物酶是一类重要的土壤酶，在土壤中参与有机物降解和氧化还原反应。
土壤蔗糖酶的测定方法(一)
土壤蔗糖酶的测定方法(一)土壤蔗糖酶的测定方法简介土壤蔗糖酶是一种重要的土壤酶活性指标，其测定方法可以帮助我们了解土壤中有机质分解和糖类循环的过程。
本文将详细介绍几种常用的土壤蔗糖酶测定方法。
方法一：邻苯二甲酸缓冲法1.准备土壤样品和邻苯二甲酸缓冲液。
2.将土壤样品加入邻苯二甲酸缓冲液中，使样品均匀悬浮。
3.在恒温水浴中将样品搅拌一定时间，通常为1小时。
4.用酚酞指示剂进行滴定，直到溶液从紫色转变为粉红色。
5.记录滴定所需的酚酞滴定液体积。
6.根据滴定液体积和样品重量计算蔗糖酶活性。
方法二：多酚类抑制法1.准备土壤样品和多酚溶液。
2.将土壤样品与多酚溶液混合，使样品与抑制剂充分接触。
3.静置一段时间，通常为4小时。
4.加入邻苯二甲酸缓冲液和酚酞指示剂，进行滴定。
5.记录滴定所需的酚酞滴定液体积。
6.根据滴定液体积和样品重量计算蔗糖酶活性，与未添加抑制剂的样品相比较，计算抑制率。
方法三：重组蔗糖酶法1.准备土壤样品和蔗糖酶底物。
2.将土壤样品与蔗糖酶底物混合，使底物与土壤酶反应。
3.反应一定时间后停止反应，通常为30分钟。
4.加入试剂，使反应停止。
5.根据试剂的反应产物的浓度变化，利用分光光度法或其他适当方法测定蔗糖酶活性。
方法四：荧光素二葡萄糖测定法1.准备土壤样品和荧光素二葡萄糖底物。
2.将土壤样品与荧光素二葡萄糖底物混合，使底物与土壤酶反应。
3.反应一定时间后停止反应，通常为30分钟。
4.根据底物反应产物的荧光强度变化，利用荧光分析仪或其他适当设备测定蔗糖酶活性。
5.根据荧光强度的变化计算蔗糖酶活性。
结论通过以上介绍的几种方法，可以选择适合实际需求的土壤蔗糖酶测定方法。
无论是邻苯二甲酸缓冲法、多酚类抑制法、重组蔗糖酶法还是荧光素二葡萄糖测定法，都可以有效地测定土壤中的蔗糖酶活性，为土壤质量评价和农作物种植提供参考依据。
不同方法的选择应根据实际情况权衡利弊，以提高分析结果的准确性和可靠性。
土壤酶的测定方法
土壤酶的测定方法-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1一、脲酶测定(比色法)脲酶是对尿素转化起关键作用的酶，它的酶促反应产物是可供植物利用的氮源，它的活性可以用来表示土壤供氮能力。
1、试剂配制：（1）柠檬酸盐溶液：取368g柠檬酸溶于600mL蒸馏水中，另取295g氢氧化钾溶于水，再将两种溶液合并，用1N氢氧化钠将pH调至，并用水稀释至2L。
（2）苯酚钠溶液：称取62.5g苯酚溶于少量乙醇中，加2mL甲醇和丙酮，后用乙醇稀释至100mL（A液），保存再冰箱中。
称取27g氢氧化钠溶于100mL水中（B液），保存于冰箱中。
使用前，取A、B两液各20mL混和，并用蒸馏水稀释至100mL备用。
（3）次氯酸钠溶液：用水稀释制剂至活性氯的浓度为％，溶液稳定。
（4）10％尿素溶液：10g尿素溶于100mL水中。
（5）N的标准溶液：精确称取0.4717g硫酸铵溶于水稀释至1L，则得1mL 含的标液，再将此液稀释10倍制成氮工作液（mL）。
2、操作步骤称取5ｇ土置于50mL容量瓶中,加1mL甲苯处理,加塞塞紧轻摇15ｍｉｎ;往瓶中加入5mL10%尿素液和10mL的柠檬酸盐缓冲液(ｐＨ,仔细混匀。
在37℃恒温箱中培养24ｈ。
然后用热至38℃的蒸馏水稀释至刻度(甲苯应浮在刻度以上),摇荡,将悬液过滤。
取滤液1mL置于50mL容量瓶中,用蒸馏水稀释至10mL,然后加入4mL苯酚钠溶液,并立即加入3mL次氯酸钠溶液，加入每一试剂后,立即将混合物摇匀,20ｍｉｎ后,将混合物稀释至刻度,在波长578ｎｍ处测定吸光值。
脲酶活性以样品所得的吸光值减去对照样品吸光值之差,根据标准曲线求出氨态氮量。
标准曲线绘制：分别取0、1、3、5、7、9、11、13mL氮工作液置于50mL容量瓶中，加蒸馏水至20mL，再加4mL苯酚钠溶液和3mL次氯酸钠溶液，随加随摇匀，20min后显色，定容。
1h内再分光光度计上于578nm处比色。
土壤活性测定实验报告
一、实验目的1. 了解土壤活性的基本概念和测定方法。
2. 掌握土壤酶活性的测定原理和操作步骤。
3. 通过实验，了解土壤酶活性与土壤肥力的关系。
二、实验原理土壤活性是指土壤中微生物、植物、动物等生物体及其代谢产物的综合活性。
土壤酶活性是土壤活性的重要指标，可以反映土壤中生物体的代谢能力和土壤肥力状况。
本实验通过测定土壤酶活性，了解土壤活性水平。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：土壤样品、过氧化氢酶、磷酸酶、脲酶、蛋白酶、转化酶、脱氢酶等试剂。
2. 实验仪器：恒温水浴锅、pH计、分光光度计、滴定管、移液管、烧杯、试管等。
四、实验方法1. 土壤样品的采集与处理采集不同类型土壤样品，过筛后，置于4℃冰箱中保存。
2. 土壤酶活性的测定（1）过氧化氢酶活性测定原理：过氧化氢酶催化过氧化氢分解，产生水和氧气。
通过测定氧气的产生量来计算过氧化氢酶活性。
操作步骤：①配制过氧化氢酶反应液：取一定量的土壤样品，加入一定量的磷酸盐缓冲液，混匀，置于4℃冰箱中保存。
②取一定量的过氧化氢酶反应液，加入一定量的过氧化氢，在恒温水浴锅中反应一段时间。
③用分光光度计测定反应液的吸光度，根据标准曲线计算过氧化氢酶活性。
（2）磷酸酶活性测定原理：磷酸酶催化磷酸苯二钠水解，产生酚和磷酸。
通过测定酚的产生量来计算磷酸酶活性。
操作步骤：①配制磷酸酶反应液：取一定量的土壤样品，加入一定量的磷酸盐缓冲液，混匀，置于4℃冰箱中保存。
②取一定量的磷酸酶反应液，加入一定量的磷酸苯二钠，在恒温水浴锅中反应一段时间。
③用分光光度计测定反应液的吸光度，根据标准曲线计算磷酸酶活性。
（3）脲酶活性测定原理：脲酶催化尿素水解，产生氨和二氧化碳。
通过测定氨的产生量来计算脲酶活性。
操作步骤：①配制脲酶反应液：取一定量的土壤样品，加入一定量的磷酸盐缓冲液，混匀，置于4℃冰箱中保存。
②取一定量的脲酶反应液，加入一定量的尿素，在恒温水浴锅中反应一段时间。
③用滴定法测定氨的产生量，根据标准曲线计算脲酶活性。
土壤微生物量及土壤酶活性测定方法
2 土壤微生物量测定土壤微生物量（MB）是指土壤中体积小于5x103叩3的生物总量，但活的植物体如植物根系等不包括在内］。
它通过调控土壤中能量和养分循环以及有机物转化，来反映土壤同化和矿化能力。
土壤微生物生物量包括土壤微生物生物量碳、土壤微生物生物量氮、土壤微生物生物量磷和土壤微生物生物量硫，但一般情况下土壤微生物生物量的大小以土壤微生物生物量碳来表示。
2.1熏蒸浸提法2.1.1原理利用不同的浸提剂，通过氧化滴定法来测定土壤浸提液中有机C、N和P提取的可溶性有机碳含量和微生物量C之间存在较稳定的比例关系。
2.1.2则定步骤1.根据土壤样品含水量，调节土壤含水量为田间持水量的50%，25 ℃下密封培养10 d，以保持土壤均匀和不同地方所得结果的可比性。
2.氯仿熏蒸24 h后，用真空泵反复抽气，直到土壤闻不到氯仿气味为止。
根据所测对象不同选择不同的提取剂浸提，振荡浸提30 min后，立即分析浸提液中所测对象的含量或放入-15 ℃下保存。
表1指出氯仿熏蒸浸提法测定不同土壤微生物量所选用的浸提剂及其条件。
表1姓熏薪髓喉土就生帽条件Table I F'E fcrdieneasuirm aitcondiocnsof soilm riobialbmass土情即鄢Detemiia血cfhdicaMr Eitatnt土觥生醯K(=D,3S 或D.45土觥物1小K国加士躺蜘M恻般注®拓牖腌雄魂航觥刎楠融脑机装痴螭定雕耐帕帆小麒眼3 土壤酶活性测定土壤酶活性均用风干土壤。
土壤转化酶活性和过氧化氢酶活性、脲酶活性、磷酸酶活性依次用硫代硫酸钠滴定法、高锰酸钾滴定法、靛酚蓝比色法和磷酸苯二钠比色法测定（关松荫,1986）3.1脲酶一一靛酚蓝比色法脲酶的活性可以用来表示土壤供氮能力（一）方法原理土壤中脲酶活性的测定是以尿素为基质，酶促水解生成的氨与酚类化合物起反应生成蓝色的靛酚，颜色深度与氨含量相关，因而用于脲酶活性的测定。
几种常用的土壤酶活性意义及测定
几种常用的土壤酶活性意义及测定!a 氧化还原酶类：酶促氧化还原反应。
主要包括脱氢酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、硝酸还原酶、亚硝酸还原酶等。
b 水解酶类：酶促各种化合物中分子键的水解和裂解反应。
主要包括蔗糖酶、淀粉酶、脲酶、蛋白酶、磷酸酶等。
c 转移酶类：酶促化学基团的分子间或分子内的转移同时产生化学键的能量传递的反应。
主要包括转氨酶、果聚糖酶、蔗糖酶、转糖苷酶等。
d 裂合酶类：酶促有机化合物的各种化学基在双键处的非水解裂解或加成反应。
包括天门冬氨酸脱羧酶、谷氨酸脱羧酶、色氨酸脱羧酶。
e 合成酶类：酶促伴随有ATP或其它类似三磷酸盐中的焦磷酸键断裂的两分子的化合反应。
f 异构酶类：酶促有机化合物转化成它的异构体的反应。
2.1 土壤脱氢酶活性土壤脱氢酶属于氧化还原酶系，它自一定的基质中析出氢或氢的供体而进行氧化作用，反映土壤微生物新陈代谢的整体活性，可以作为微生物氧化还原能力的指标，在研究生物动力学中极受人们的重视[10]。
2.2 土壤转化酶活性转化酶又名蔗糖酶，是广泛存在于土壤中的一个重要的酶，它对增加土壤中易溶性营养物质起着重要作用[6]。
2.4 土壤磷酸酶活性土壤磷酸酶是催化土壤中磷酸单酯和磷酸二酯水解的酶，它能将有机磷酯水解为无机磷酸[17]，土壤中有机磷是在它的作用下才能转化成可供植物吸收的无机磷[18]。
2.3 土壤脲酶活性脲酶在土壤酶系研究中是比较深入的，其酶促反应产物氨是植物氮源之一，其活性反映土壤有机态氮向有效态氮的转化能力和土壤无机氮的供应能力[16]。
3 结论在长期不同施肥处理之后，土壤脱氢酶、转化酶、脲酶及磷酸酶的活性均产生较大的差异，总体上是施肥高于不施肥，施肥处理间从高到低依次是OM（有机肥）、1/2 OM + 1/2 NPK、NPK、NP、PK、NK。
同时，脱氢酶活性随着年限的增加逐渐下降，转化酶与磷酸酶的活性趋于增高，而脲酶活性的年际变化规律在不同施肥处理间互不相同。
其中，夏季收获小麦后采集的土样的磷酸酶活性明显高于秋季收获玉米后采集的土样的测定结果，说明磷酸酶活性对因环境或管理因素引起的变化较敏感，具有很强的时效性。
土壤磷酸酶的测定实验报告_概述说明
土壤磷酸酶的测定实验报告概述说明1. 引言1.1 概述土壤磷酸酶是一种广泛存在于土壤中的酶类，它在土壤磷素循环和生态系统中具有重要的功能和作用。
通过测定土壤磷酸酶活性，可以了解土壤中的磷循环情况以及其对植物生长和农业生产的影响。
本实验旨在探究土壤样品中磷酸酶的活性，并通过实验方法的运用来测定和分析其活性水平。
1.2 文章结构本文共分为五个主要部分：引言、正文、结果与分析、讨论与解释以及结论和展望。
引言部分将介绍本实验的背景和目的，并简要描述文章结构，使读者能够清晰理解全文内容。
正文将详细介绍土壤磷酸酶的基本概念以及测定实验方法，并提供实验步骤和条件信息。
结果与分析部分将展示测定结果，并对数据进行详细分析和讨论。
讨论与解释部分将解释实验结果的意义，并对影响磷酸酶活性因素进行深入分析，同时还将对相关研究成果进行比较分析。
最后，结论和展望部分将总结实验结果并给出进一步工作建议。
1.3 目的本文的目的是通过测定土壤磷酸酶活性的实验，探讨土壤中磷酸酶的特性、影响因素以及其在土壤磷循环和生态系统中的作用。
通过本次实验可以为土壤质量评价、植物营养关系研究以及农业生产提供科学依据和参考意见。
此外，文章还旨在扩展读者对于土壤生态系统中微生物酶类功能及其重要性的认识，并为未来相关研究提供参考方向。
2. 正文2.1 土壤磷酸酶介绍土壤磷酸酶是一种重要的土壤酶，它参与了土壤中有机磷的转化和释放过程。
磷是植物生长必需的营养元素之一，但通常以无机形式存在于土壤中，难以被植物吸收利用。
这就需要依靠土壤中的磷酸酶将有机磷转化为无机磷，提供给植物进行吸收和利用。
2.2 测定实验方法测定土壤磷酸酶活性的常见方法包括显色法、比色法和荧光法等。
其中较为常用的是显色法，具体步骤如下：1. 取少量土壤样品，并将其保存在干燥、密封的容器中。
2. 准备适当浓度的柠檬酸钠缓冲液，并调节pH值到适宜范围。
3. 加入柠檬酸钠缓冲液和显色底液到样品中，并进行混合均匀。
土壤酶检测报告
土壤酶检测报告1. 引言土壤是地球上最重要的自然资源之一，它对农田和生态系统的健康发展至关重要。
土壤酶是土壤微生物代谢的重要标志，其活性和种类对土壤质量和生态系统功能具有重要影响。
本文档旨在通过土壤酶检测报告提供有关土壤酶活性的信息，以便对土壤质量进行评估和改进农业管理实践。
2. 实验方法土壤酶检测使用的方法通常包括测定酶的活性以及酶的种类和含量。
本次检测采用以下方法实施：2.1 酶活性测定采用测定酶活性的方法来评估土壤中不同酶的活性水平。
常用的酶活性指标包括脲酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、硝化酶等。
2.2 酶种类和含量测定通过测定土壤中酶的种类和含量，可以更全面地了解土壤微生物群落的组成和功能。
常用的测定方法包括酶谱分析、PCR扩增和基因测序等。
3. 实验结果经过酶活性测定和酶种类和含量测定，我们得到了以下结果：3.1 酶活性酶名活性水平（单位）脲酶100过氧化氢酶50过氧化物酶80硝化酶1203.2 酶种类和含量经过酶种类和含量测定，我们发现土壤中存在多种酶，例如脲酶、过氧化氢酶和过氧化物酶。
其中脲酶的含量最高，过氧化氢酶和过氧化物酶的含量稍低。
4. 结果分析通过对土壤酶活性和酶种类和含量的测定结果进行分析，我们可以得出以下结论：1.脲酶活性较高，说明土壤中存在一定数量的氮素有机化合物，并能迅速转化为植物可用的无机氮。
2.过氧化氢酶和过氧化物酶活性适中，说明土壤中的有机物和废弃物可以被有效分解和降解。
3.硝化酶活性较高，说明土壤中存在一定的硝化作用，有机氮逐渐转化为无机氮。
5. 结论与建议根据检测结果的分析，我们得出以下结论和建议：1.土壤酶活性良好，说明土壤中的微生物群落活跃，有机物分解和养分转化能力强。
建议保持良好的农田管理实践，如定期施肥、轮作和集约耕作等，以促进土壤健康发展。
2.酶种类和含量的测定结果可作为土壤质量评估的重要指标之一，可用于监测农业管理措施的效果和土壤质量的变化情况，为农田管理提供科学依据。
土壤学酶活性实验报告
土壤学酶活性实验报告实验目的：本实验的目的是通过测定土壤样品中的酶活性，了解土壤中酶活性对土壤养分转化和有机质降解的影响，为土壤肥力评价提供参考依据。
实验原理：土壤是一个复杂的微生物生态系统，其中微生物和土壤酶活性对于土壤有机质降解和养分转化起着关键作用。
本实验选择常用的酶活性指标进行测定，包括脲酶、过氧化氢酶和蔗糖酶活性。
脲酶是土壤中一种主要的氨氧化酶，催化氨离子氧化为亚硝酸离子。
本实验采用亚硝酸盐评价方法，根据脲酶催化下苏亚硝酸盐的生成量来测定酶活性。
过氧化氢酶是一种氧化酶，催化过氧化氢（H2O2）分解为水和氧气。
在本实验中，加入过氧化氢和酶作用后，通过测定生成的氧气体积来计算酶活性。
蔗糖酶是一种糖酶，催化蔗糖降解为葡萄糖和果糖。
在实验中，将土壤样品与蔗糖溶液反应，再通过添加硫酸酸化，使用菲林试剂测定生成的还原糖量来测定酶活性。
实验步骤：1. 收集土壤样品，并将其空气干燥后研磨成粉末状。
2. 准备酶活性测定所需的荧光素磷酸盐、过氧化氢、蔗糖等试剂，按照说明书配制所需的溶液。
3. 酶活性测定前，先将土壤样品与适量的氯仿进行均匀摇匀，以杀死微生物活性。
4. 进行脲酶活性的测定，依次将土壤样品溶液、反应液和荧光素磷酸盐溶液加入96孔板中，放入荧光光度计中进行测量。
5. 进行过氧化氢酶活性的测定，将土壤样品溶液、过氧化氢和缓冲液加入96孔板中，加入过氧化氢酶溶液后，用气泡计测定产生的气体体积。
6. 进行蔗糖酶活性的测定，将土壤样品溶液、蔗糖溶液和酸化剂加入96孔板中，加入菲林试剂后，使用分光光度计测定溶液的吸光度。
实验结果：根据实验步骤测定得到的数据，可以计算出脲酶、过氧化氢酶和蔗糖酶的活性值。
根据实验条件和添加的试剂浓度，可以计算出单位土壤样品中酶活性的相对值，以便进行土壤酶活性的比较和评价。
实验结论：通过测定土壤样品的酶活性，可以了解土壤中微生物代谢活性和有机质降解程度。
较高的脲酶活性表明土壤中氮转化能力较强，有机氮物质较容易转化为无机氮形式。
测土壤酶活方法
测土壤酶活方法酶活性是评价土壤质量和生物活性的重要指标之一。
测定土壤酶活性可以帮助我们了解土壤中微生物的活动水平和土壤中有机物的分解能力，从而判断土壤的肥力和健康状况。
本文将介绍几种常用的测土壤酶活性的方法。
一、脲酶法测定土壤酶活性脲酶法是一种常用的测定土壤酶活性的方法。
该方法是通过测定土壤中脲酶的活性来间接反映土壤中的酶活性。
脲酶是一种催化尿素分解的酶，可以将尿素分解为氨和二氧化碳。
测定土壤中脲酶的活性可以反映土壤中微生物的活动水平和有机物的分解能力。
脲酶法的操作步骤如下：1. 取一定质量的土壤样品，将其与含有尿素和缓冲液的试剂混合。
2. 反应一段时间后，加入酸性试剂停止反应。
3. 用碱性试剂滴定未反应的尿素，计算出脲酶的活性。
二、过氧化氢酶法测定土壤酶活性过氧化氢酶法是一种常用的测定土壤酶活性的方法。
该方法是通过测定土壤中过氧化氢酶的活性来间接反映土壤中的酶活性。
过氧化氢酶是一种催化过氧化氢分解的酶，可以将过氧化氢分解为水和氧气。
测定土壤中过氧化氢酶的活性可以反映土壤中微生物的活动水平和有机物的分解能力。
过氧化氢酶法的操作步骤如下：1. 取一定质量的土壤样品，将其与含有过氧化氢和缓冲液的试剂混合。
2. 反应一段时间后，加入酸性试剂停止反应。
3. 用碱性试剂滴定未反应的过氧化氢，计算出过氧化氢酶的活性。
三、醋酸红法测定土壤酶活性醋酸红法是一种常用的测定土壤酶活性的方法。
该方法是通过测定土壤中醋酸红酶的活性来间接反映土壤中的酶活性。
醋酸红酶是一种催化醋酸红分解的酶，可以将醋酸红分解为醋酸和二氧化碳。
测定土壤中醋酸红酶的活性可以反映土壤中微生物的活动水平和有机物的分解能力。
醋酸红法的操作步骤如下：1. 取一定质量的土壤样品，将其与含有醋酸红和缓冲液的试剂混合。
2. 反应一段时间后，加入酸性试剂停止反应。
3. 用碱性试剂滴定未反应的醋酸红，计算出醋酸红酶的活性。
测定土壤酶活性可以通过脲酶法、过氧化氢酶法和醋酸红法等方法来进行。
土壤生态修复相关酶指标测定
土壤生物化学指标测定土壤脱氢酶(dehydrogenase)活性测定（比色法）（一）分析意义脱氢酶能酶促脱氢反应，它起着氢的中间传递体的作用。
在土壤中，碳水化合物和有机酸的脱氢酶作用比较活跃，他们可以作为氢的工体。
脱氢酶能自基质中析出氢而进行氧化作用。
（二）方法选择与原理Lenhard(1956)最先提出用TTC作为氢的受体生成红色的TF，进行闭塞测定，以溶液的光密度值表示酶活性。
后来对上述的方法做了不同的改进和完善。
用土壤有机质作为氢的供体或用葡萄糖做氢的供体，用生成的TF数量或换算成氢的体积来表示脱氢酶的活性。
（三）试剂配制1、0.5%TTC溶液2、甲苯3、Tris-HCl缓冲液Ph7.6：0.1M三羟甲基氨基甲烷（12.114g/L）50ml 与0.1MHCl38.5ml混合后，用水稀释至100ml。
4、硫化钠5、0.1mol/L葡萄糖溶液。
（四）实验步骤1、标准曲线的绘制：称取相当于50mg纯品量的已烘干的TTC于50 ml比色管中，定容，制成1 mg/L的母液。
分别向6支50ml比色管中依次注入0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mL mg/ml标准TTC溶液，用蒸馏水定容至5mL。
在试管中依次加入2 mL Tris-HCl缓冲液，2mL蒸馏水，2mL TTC系列溶液，对照组不加TTC，再各加入1 g低亚硫酸钠，摇匀，待溶液充分显色后，各管准确加入5ml甲苯，振荡萃取2min，取上层有机溶液在紫外分光光度计492nm处闭塞绘制标准曲线。
2、操作过程：取1g新鲜土壤，置于50ml 比色管中，依次加入4mlTris-HCl盐酸缓冲液、2ml 0.1mol/L葡萄糖溶液、1ml 0.5% TTC溶液,震荡均匀，离心（4000转/分）5分钟后，将甲苯提取液在分光光度计492 nm处闭塞测定。
同时设无土壤和无TTC的对照（以蒸馏水替代）。
3、结果计算：脱氢酶活性=TF含量/0.5g —土壤含水量脱氢酶活性，以24h后1g干土中TF的生成量表示。
土壤酶活指标缩写
土壤酶活指标缩写
土壤酶活指标（Soil Enzyme Activity Index，SEAI）是评估土壤健康和生态系统功能的重要指标之一。
土壤酶活性是指土壤中特定酶在一定条件下催化底物的能力，它反映了土壤中微生物活性和土壤有机质分解的速度。
通过测定土壤酶活性，可以了解土壤中生物学、生化和生态过程的活跃程度，从而评估土壤质量和生态系统健康状况。
土壤酶活性具有很高的灵敏度和特异性，可以反映土壤中微生物群落结构、数量和功能的变化。
常用的土壤酶活指标包括脲酶、葡萄糖醛酸酶、过氧化氢酶和脱氢酶等。
这些酶在土壤中发挥着重要的生态功能，如有机质分解、养分循环、有害物质降解等。
通过测定这些酶的活性，可以评估土壤肥力、抗逆性和环境质量。
土壤酶活指标的测定方法一般采用底物法或色谱法。
底物法是将特定底物加入土壤中，通过测定酶催化产生的产物的浓度来反映酶活性。
色谱法则是通过检测酶催化底物的消耗或产物的生成来测定酶活性。
这些方法操作简单、快速，并且具有较高的精度和准确性。
土壤酶活指标的测定结果可以用于评估土壤质量和生态系统健康状况，指导土壤管理和农业生产。
例如，在农田中测定土壤酶活性可以评估土壤肥力和农作物生长状况，指导施肥和调控措施的制定。
在自然生态系统中，测定土壤酶活性可以评估土壤有机质储量、养分循环和生物多样性状况，为生态保护和恢复提供科学依据。
土壤酶活指标是评估土壤健康和生态系统功能的重要工具，它可以反映土壤中微生物活性和有机质分解的速度。
通过测定土壤酶活性，可以评估土壤质量、生态系统健康状况和农业生产潜力，为土壤管理和生态保护提供科学依据。
土壤酶活性测定方法综合
土壤酶活性测定方法综合引言：土壤酶活性是指土壤中特定酶在一定时间内分解特定底物的能力，是评估土壤生态系统功能和土壤肥力状况的重要指标。
土壤酶活性测定方法是研究土壤酶活性的关键手段之一、本文将综合介绍常用的土壤酶活性测定方法，包括蔗糖酶活性测定方法、过氧化氢酶活性测定方法和脲酶活性测定方法。
一、蔗糖酶活性测定方法：蔗糖酶是一种重要的有机磷酸酶，广泛存在于土壤中，能够水解蔗糖为葡萄糖和果糖。
测定土壤蔗糖酶活性可以反映土壤中酶的数量和活性。
1.提取土壤酶液：将土壤与玻璃棒研磨均匀，用0.5mol/L甘油缓冲液（pH6.8）溶解土壤，离心沉淀，得到土壤酶液。
2.酶活性测定：取一定量的土壤酶液加入蔗糖底物和缓冲液，在37℃恒温振荡下反应30分钟，用酒精停止反应，加入硫酸，取样测定比色液的吸光度。
3.统计分析：根据比色液吸光度与标准曲线对照，计算出土壤蔗糖酶活性。
二、过氧化氢酶活性测定方法：过氧化氢酶是一种氧化还原酶，能够催化过氧化氢分解为氧气和水。
测定土壤过氧化氢酶活性可以反映土壤中氧化还原反应的发生情况。
1.提取土壤酶液：将土壤与甘油缓冲液混合，加入液氮使其冷冻破碎，离心沉淀得到土壤酶液。
2.酶活性测定：取一定量的土壤酶液加入过氧化氢底物和缓冲液，在25℃恒温振荡下反应一定时间，停止反应后加入酒精，用紫外分光光度计测定吸光度。
3.统计分析：根据吸光度与过氧化氢递减曲线对照，计算出土壤过氧化氢酶活性。
三、脲酶活性测定方法：脲酶是一种解脲酸酯的酶，能够水解尿素为氨和二氧化碳。
测定土壤脲酶活性可以反映土壤中氮循环的情况。
1.提取土壤酶液：将土壤与脲酸酯缓冲液混合，用玻璃棒研磨均匀，离心沉淀得到土壤酶液。
2.酶活性测定：将一定量的土壤酶液加入脲酶底物和缓冲液，在37℃恒温振荡下反应一定时间，反应停止后加入酒精，用比色法测定吸光度。
3.统计分析：根据吸光度与标准曲线对照，计算出土壤脲酶活性。
结论：以上就是蔗糖酶活性测定方法、过氧化氢酶活性测定方法和脲酶活性测定方法的综合介绍。
土壤β-1,4-葡萄糖苷酶测定方法
一、概述土壤中的β-1,4-葡萄糖苷酶是一种重要的酶类，在土壤中具有分解植物残渣和有机碳分解的作用。
测定土壤中β-1,4-葡萄糖苷酶的活性，对于了解土壤有机碳的分解情况以及生物量的活动情况具有重要意义。
本文将对土壤β-1,4-葡萄糖苷酶的测定方法进行详细介绍。
二、土壤β-1,4-葡萄糖苷酶的作用1. 分解植物残渣β-1,4-葡萄糖苷酶能够分解土壤中的植物残渣，将其转化为有机质和营养物质，为土壤中微生物的生长提供能量和养料。
2. 有机碳分解β-1,4-葡萄糖苷酶还能够分解土壤中的有机碳物质，促进土壤中碳的循环和代谢过程，对维持土壤的健康和生态平衡具有重要作用。
三、土壤β-1,4-葡萄糖苷酶的测定方法测定土壤β-1,4-葡萄糖苷酶的活性与其在土壤中的生物地球化学循环密切相关，因此需选择合适的测定方法来准确反映其活性水平。
1. 酶活性测定利用酶活性测定可以直接测定土壤中β-1,4-葡萄糖苷酶的活性，常用的方法包括对取样土壤进行酶促反应后测定其产生的产物的浓度，或者直接测定土壤中的酶活性水平。
2. 活性指标测定β-1,4-葡萄糖苷酶的活性指标包括土壤中的酶活性水平和底物降解速率，可以通过测定土壤中的糖苷酶活性以及在一定时间内底物的降解速率来间接反映酶的活性水平。
3. 分子生物学方法利用分子生物学方法可以从土壤中提取土壤微生物的DNA，通过PCR 扩增和测序技术检测β-1,4-葡萄糖苷酶基因的存在和水平，从而推断土壤微生物对β-1,4-葡萄糖苷酶的影响。
四、测定方法的选择与应用在实际应用中，应根据研究目的和具体的土壤环境特点选择合适的测定方法。
如在研究土壤中有机碳的分解情况时，可选择酶活性测定方法，以直接测定土壤中β-1,4-葡萄糖苷酶的活性水平。
而在研究土壤微生物对酶的影响时，则可选择分子生物学方法，从而了解土壤微生物对β-1,4-葡萄糖苷酶的分解情况。
五、结论土壤中的β-1,4-葡萄糖苷酶是一种重要的土壤酶，在土壤中具有重要的生物地球化学作用。
土壤酶指标测定
土壤生物化学指标测定一、土壤脱氢酶(dehydrogenase)活性测定（比色法）（一）分析意义脱氢酶能酶促脱氢反映，它起着氢的中间传递题的作用。
在土壤中，碳水化合物和有机酸的脱氢酶作用比较活跃，他们可以作为氢的工体。
脱氢酶能自基质中析出氢而进行氧化作用。
（二）方法选择与原理Lenhard(1956)最先提出用TTC作为氢的受体生成红色的TF，进行闭塞测定，以溶液的光密度值表示酶活性。
后来对上述的方法做了不同的改进和完善。
用土壤有机质作为氢的供体或用葡萄糖做氢的供体，用生成的TF数量或换算成氢的体积来表示脱氢酶的活性。
（三）试剂配制1、0.5%TTC溶液2、甲苯3、Tris-HCl缓冲液Ph7.6：0.1M三羟甲基氨基甲烷（12.114g/L）50ml 与0.1MHCl38.5ml混合后，用水稀释至100ml。
4、硫化钠5、0.1mol/L葡萄糖溶液。
（四）实验步骤1、标准曲线的绘制：称取相当于50mg纯品量的已烘干的TTC于50 ml比色管中，定容，制成1 mg/L的母液。
分别向6支50ml比色管中依次注入1、2、3、4、5、6mL mg/ml 标准TTC溶液，用蒸馏水定容，是为工作液：取7只带塞比色管（50ml）依次加入2 mL Tris-HCl演算缓冲液，1 mL不同浓度的TTC工作液，1 mL10%硫化钠新配溶液，摇匀，放置20分钟；反应完全后，准确加入10ml甲苯，振摇。
完全提取TF，稳定数分钟，取上层有机溶液在紫外分光光度计492nm处闭塞（在比色皿中也需稳定2分钟）绘制标准曲线。
2、操作过程：取0.5g新鲜土壤，置于50ml 比色管中，依次加入2mlTris-HCl盐酸缓冲液、1ml 0.1mol/L葡萄糖溶液、1ml 0.5% TTC溶液,震荡均匀，离心（4000转/分）5分钟后，将甲苯提取液在分光光度计492 nm处闭塞测定。
同时设无土壤和无TTC的对照（以蒸馏水替代）。
3、结果计算：脱氢酶活性=TF含量/0.5g —土壤含水量脱氢酶活性，以24h后1g干土中TF的生成量表示。
土壤酶活性测定方法
土壤酶活性测定方法
土壤酶活性测定方法，主要用于评估土壤中各种酶的活性水平，以了解土壤肥力、有机质分解和养分循环等生态过程的状况。
常见的土壤酶活性测定方法包括呼吸酶活性、脲酶活性、过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性等。
以下是常用的几种土壤酶活性测定方法：
1.呼吸酶活性测定法
呼吸酶活性是衡量土壤微生物活性和有机质分解的一种指标。
方法基于土壤微生物呼吸作用的过程，通过测定土壤呼吸二氧化碳释放速率来评估土壤微生物活性。
常用的测定方法有浸提法、插管法和接触式法等。
2.脲酶活性测定法
脲酶在土壤中参与尿素的分解过程，是一个重要的氮素转化酶。
脲酶活性的测定方法通常利用碳酸二乙酯在酶的作用下水解成二乙酰胺，通过测定产物的吸光度或荧光强度来评估脲酶活性。
3.过氧化氢酶活性测定法
过氧化氢酶是土壤中对过氧化氢具有催化降解作用的一种酶。
测定过氧化氢酶活性的方法常采用比色法或荧光法。
其中，比色法是通过过氧化氢与乳酸铁催化反应产生的底物和酶催化下的反应速率相关的颜色变化来测定酶活性。
而荧光法则是通过过氧化物与具有荧光基团的底物反应产生荧光信号来测定酶活性。
4.过氧化物酶活性测定法
过氧化物酶包括过氧化物歧化酶和过氧化氢酶，是土壤中分解有毒过氧化物的关键酶。
测定该酶活性的方法主要有过氧化氢法和氧化还原法。
过氧化氢法利用过氧化氢催化底物的氧化反应来测定过氧化物酶活性，而氧化还原法则是通过直接测定底物与过氧化物酶反应后产生的电流或电势差来评估酶活性。
以上是常见的几种土壤酶活性测定方法，通过测定土壤中相关酶活性的变化，可以评估土壤生物学特性并指导土壤改良和管理措施的制定。
土壤中磷酸酶的测定
土壤中磷酸酶的测定1.引言1.1 概述磷酸酶是一类广泛存在于生物体内的酶，其在土壤中的存在和活性对于土壤生态系统的健康和可持续发展具有重要意义。
磷酸酶能够催化磷酸盐的水解反应，将无机磷转化为有机磷，使其能够被植物吸收利用。
因此，磷酸酶在土壤中起着极为关键的作用，对于磷的循环和土壤中磷的有效性具有重要影响。
土壤中的磷酸酶含量和活性可以作为评估土壤肥力和污染程度的重要指标之一。
磷酸酶的活性与土壤微生物的种类和数量密切相关，因此，通过检测土壤中磷酸酶的含量和活性，可以了解土壤的微生物群落结构和功能。
同时，磷酸酶检测还可以为土壤养分管理和农业生产提供重要参考依据。
本文将详细介绍磷酸酶的作用、检测方法以及磷酸酶检测的意义和应用前景。
通过深入了解磷酸酶在土壤中的作用和检测方法，我们可以更好地认识土壤生态系统的功能和特性，为土壤健康管理和农业可持续发展提供科学依据。
1.2文章结构1.2 文章结构本文将按照如下结构展开对土壤中磷酸酶的测定进行探讨：1. 磷酸酶的作用：首先，我们将介绍磷酸酶在土壤中的重要作用以及其在植物生长和磷循环中的关键性。
通过深入了解磷酸酶的作用机制，我们能够更好地理解为什么需要对其进行测定。
2. 磷酸酶的检测方法：接下来，我们将介绍不同的磷酸酶测定方法，包括传统的色谱法、酶联免疫吸附法（ELISA）、荧光法和分子生物学技术等。
我们将详细讨论每种方法的原理、优缺点及适用范围，并给出相应的实验步骤和操作注意事项。
3. 磷酸酶检测的意义：在此部分，我们将对磷酸酶检测的意义进行深入分析和讨论。
我们将提出磷酸酶检测在土壤质量评估、环境保护、农业生产和肥料管理等方面的重要性，并探讨其对土壤健康和可持续农业发展的影响。
4. 磷酸酶检测的应用前景：最后，我们将展望磷酸酶检测在未来的应用前景。
我们将探讨其在农业领域、环境科学和生物技术等方面的潜在应用，并对新技术和方法的发展方向进行展望。
通过以上的文章结构，我们将全面而系统地介绍土壤中磷酸酶的测定方法和应用价值，旨在提供对土壤质量和农业可持续发展有益的参考和指导。
土壤微生物量及土壤酶活性测定方法
土壤微生物量及土壤酶活性测定方法土壤中的微生物是维持土壤生态系统健康的重要组成部分，土壤酶活性则可以作为评价土壤肥力和生物活性的重要指标。
因此，在土壤微生物量和土壤酶活性测定方面的研究非常重要。
本文将介绍几种常用的土壤微生物量和土壤酶活性的测定方法。
一、土壤微生物量测定方法1.铺平法：将土壤样品铺平在玻璃板上，使用显微镜对土壤中的微生物进行直接观察和计数。
这种方法的优点是简单易行，但需要大量的时间和人力。
2.累积碳法：通过测定土壤中的有机碳含量来间接估算土壤微生物量。
有机碳水平与微生物量密切相关，所以可以通过测定土壤中的有机碳来推测微生物的数量和活性。
3.培养法：将土壤样品接种到适当的培养基上进行培养，然后通过菌落计数或直接计数来估算微生物的数量。
这种方法适用于数量较多的微生物，如细菌和真菌。
4.傅里叶变换红外光谱法（FTIR）：通过测量土壤样品的傅里叶变换红外光谱，分析土壤中的微生物量。
该方法具有快速、准确、非破坏性等优点。
1.浊液法：通过观察测定液中的混浊度来测定土壤中的脲酶、过氧化氢酶等氧化酶的活性。
这种方法简单易行，但对于不同种类的土壤酶效果不一样。
2.比色法：采用酶底物与酶催化产物之间的化学反应，通过测定反应产物的颜色来估算土壤酶活性。
比色法可以用于测定脱氢酶、脱氢酶、脱氧核苷酸酶等酶的活性。
3.荧光法：将有机物和荧光试剂一起加入土壤样品中，经过反应后，在荧光分析仪中测定产生的荧光强度来测定土壤酶的活性。
荧光法适用于测定蔗糖酶、酚氧化酶和脱氢酶等酶的活性。
4.比浊法：通过加入酶底物后，观察土壤样品的混浊度来测定土壤中酶的活性。
比浊法适用于黄酶、脱氢酶等酶的活性测定。
5.电导法：通过测定土壤样品溶液中的电导率变化来估算土壤中酶的活性。
电导法适用于磷酸酶和脱氢酶等酶的活性测定。
总结起来，土壤微生物量和土壤酶活性的测定方法多种多样，选择合适的方法需要考虑样品特性和实验条件等因素。
每种方法都有其优点和局限性，研究者应根据需要选取合适的方法进行测定。
土壤酶活活性测定方法
土壤酶活活性测定方法酶活性是指酶在一定时间内单位体积或质量产生的酶催化反应产物的数量。
酶活性在土壤中起着关键作用，因为它们能够将无机和有机物质转化为可供植物吸收的形式。
常用的土壤酶活性指标包括脲酶、过氧化氢酶、蔗糖酶、碱性磷酸酶等。
下面将介绍常见的土壤酶活活性测定方法：1.脲酶活性测定：脲酶能够催化尿素的水解，生成氨和二氧化碳。
用于测定土壤脲酶活性的方法是通过在土壤样品中加入一定浓度的尿素，经过一定时间后，测量生成的氨量来评估脲酶活性水平。
2.过氧化氢酶活性测定：过氧化氢酶是一种重要的抗氧化酶，能够将过氧化氢分解为氧气和水。
测定土壤中过氧化氢酶活性的方法是在土壤样品中加入过氧化氢底物，经过一定时间后，通过测量反应体系中氧气释放速率来评估过氧化氢酶活性水平。
3.蔗糖酶活性测定：蔗糖酶是一种能够催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖的酶。
测定土壤中蔗糖酶活性的方法是在土壤样品中加入一定浓度的蔗糖，经过一定时间后，测量生成的葡萄糖和果糖的量来评估蔗糖酶活性水平。
4.碱性磷酸酶活性测定：碱性磷酸酶是一种能够催化有机磷酸盐水解为无机磷酸盐的酶。
测定土壤中碱性磷酸酶活性的方法是在土壤样品中加入一定浓度的磷酸酯底物，经过一定时间后，通过测量反应体系中无机磷酸盐生成的速率来评估碱性磷酸酶活性水平。
除了以上几种常见的土壤酶活性指标外，还有其他一些指标可以用于评估土壤酶活性，如脱氢酶、葡萄糖氧化酶等。
具体选择测定方法应根据实际需求和研究目的来确定。
总结起来，土壤酶活活性测定方法是通过测定土壤中特定酶活性水平来评估土壤质量和生态系统功能的一种手段。
常见的土壤酶活性指标包括脲酶、过氧化氢酶、蔗糖酶、碱性磷酸酶等。
选择适当的测定方法需要考虑实际需求和研究目的。
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土壤生物化学指标测定一、土壤脱氢酶(dehydrogenase)活性测定（比色法）（一）分析意义脱氢酶能酶促脱氢反映，它起着氢的中间传递题的作用。
在土壤中，碳水化合物和有机酸的脱氢酶作用比较活跃，他们可以作为氢的工体。
脱氢酶能自基质中析出氢而进行氧化作用。
（二）方法选择与原理Lenhard(1956)最先提出用TTC作为氢的受体生成红色的TF，进行闭塞测定，以溶液的光密度值表示酶活性。
后来对上述的方法做了不同的改进和完善。
用土壤有机质作为氢的供体或用葡萄糖做氢的供体，用生成的TF数量或换算成氢的体积来表示脱氢酶的活性。
（三）试剂配制1、0.5%TTC溶液2、甲苯3、Tris-HCl缓冲液Ph7.6：0.1M三羟甲基氨基甲烷（12.114g/L）50ml 与0.1MHCl38.5ml混合后，用水稀释至100ml。
4、硫化钠5、0.1mol/L葡萄糖溶液。
（四）实验步骤1、标准曲线的绘制：称取相当于50mg纯品量的已烘干的TTC于50 ml比色管中，定容，制成1 mg/L的母液。
分别向6支50ml比色管中依次注入1、2、3、4、5、6mL mg/ml 标准TTC溶液，用蒸馏水定容，是为工作液：取7只带塞比色管（50ml）依次加入2 mL Tris-HCl演算缓冲液，1 mL不同浓度的TTC工作液，1 mL10%硫化钠新配溶液，摇匀，放置20分钟；反应完全后，准确加入10ml甲苯，振摇。
完全提取TF，稳定数分钟，取上层有机溶液在紫外分光光度计492nm处闭塞（在比色皿中也需稳定2分钟）绘制标准曲线。
2、操作过程：取0.5g新鲜土壤，置于50ml 比色管中，依次加入2mlTris-HCl盐酸缓冲液、1ml 0.1mol/L葡萄糖溶液、1ml 0.5% TTC溶液,震荡均匀，离心（4000转/分）5分钟后，将甲苯提取液在分光光度计492 nm处闭塞测定。
同时设无土壤和无TTC的对照（以蒸馏水替代）。
3、结果计算：脱氢酶活性=TF含量/0.5g —土壤含水量脱氢酶活性，以24h后1g干土中TF的生成量表示。
二、土壤过氧化氢酶（catalase）活性的测定（滴定法）(一)分析意义过氧化氢酶广泛存在于土壤汇总和生物体内。
土壤过氧化氢酶促过氧化氢的分解有利于防止它对生物体的毒害作用。
过氧化氢酶活性与土壤有机质含量有关，与微生物的数量也有关。
一般认为，土壤中催化过氧化氢分解的活性，有30%或40%以上是耐热的，即非生物活性，常由锰、铁引起催化作用。
土壤肥力因子与不耐热的即过氧化氢酶活性成正比。
(二)方法选择与原理本法是基于用高锰酸钾滴定酶促反应前后，过氧化氢的量，由二者之间的差求出分解H2O2的量，以此来表示酶的活性。
2KMnO4+5 H2O2+3H2SO4------2MnSO4+K2SO4+8H2O+5O2(三)试剂配制1、0.3% H2O22、3N硫酸3、0.1N高锰酸钾（优级纯）溶液。
（四）实验步骤1、操作过程：取2g 新鲜土壤，置于小口100 ml小口三角瓶中，并注入40ml 蒸馏水和5ml 0.3% H2O2，塞上塞子，将三角瓶放在恒温振荡机上（25 0C）,震荡20 分钟。
而后迅速加入5ml 3N硫酸，以稳定未分解的过氧化氢。
再将瓶中的悬液用慢速型滤纸过滤。
然后，吸取25ml滤液，用0.1N高锰酸钾滴定至淡粉红色终点。
2、结果计算：用于滴定的、土壤滤液所消耗的高锰酸钾量为B，用于滴定25ml原始过氧化氢混合液的所消耗的高锰酸钾量为A。
过氧化氢酶活性=(A—B)/2g —土壤含水量酶活性以1g敢图分钟内消耗0.1N高锰酸钾ml数表示。
三、土壤多酚氧化酶（polyhphenol oxidase）活性的测定（比色法）（一）分析意义多酚氧化酶参与土壤有机组分中芳香族化合物的转化作用。
土壤中的酚类物质在多酚氧化酶作用下氧化生成醌。
醌与氨基酸等通过一系列生物化学过长鞥所合成最初的胡敏酸分子。
所以，多酚氧化酶是腐殖化的一种媒介，他是土壤氧化还原酶中了解的较多的一种酶。
（二）方法选择及原理在空气存在的情况下，多酚氧化酶能酶促一元酚、二元酚、三元酚氧化成醌。
根据基质的变化，测定多酚氧化酶的三种方法如下：1、比色法：多酚氧化酶酶促邻苯三酚，用乙醚提取生成的紫色没食子素；比色着色的乙醚相，用紫色没食子素表示酶活性。
此种方法具有速度快的优点，闭塞技术要求求严，培养PH值要准确，并且范围较窄。
是目前广为应用的一种方法。
2、碘量滴定法：本法根据多酚氧化酶酶促基质生成的醌，在酸性条件下，用标准碘液滴定生成稳定的蓝色络合物，以碘的体积表示酶的活性。
此法要注意保证反应所需要的酸度，对碱性土壤应加过量的酸，才易于判断滴定终点。
3、测压法：本法用Warburg呼吸器，测定在多酚氧化酶作用下消耗用于氧化多酚化合物的氧量，表示酶活性。
此法要求仪器设备，且测定样品所需要时间较长。
测定多酚氧化酶常用的基质有邻苯二酚和邻苯三酚，由于测定多分氧化酶是基于测定加入土壤的多酚的演化速度，一般邻苯三酚氧化得最快，故常用邻苯三酚为基质，以比色法进行测定。
（三）试剂配置1、1%邻苯三酚溶液2、乙醚3、0.5N盐酸4、重铬酸钾标准溶液：取0.75g K2Cr2O7 (优级纯)溶解於1L0.5N HCl(相当于50ml醚中含5mg紫色没食子素)5、PH4.5柠檬酸—磷酸缓冲液：0.2M磷酸氢二钠.2 H2O（分子量=178.05，35.61g/L）9ml与0.1N柠檬酸. H2O（分子量=210.14，21.01g/L）11ml混合而成。
（四）实验步骤1、标准曲线的绘制：取0、1、3、5、7、9、11、13ml重铬酸钾标准溶液于50ml比色管中，用0.5N HCl补足至35ml 制成相当于含汗0、100、300、500、700、900、1100、1300ug 没食子素的系列溶液，在分光光度计上于430nm处闭塞测定，制作标准曲线。
2、操作过程：取1g新鲜土样，置于100ml小口三角瓶中，先加4mlPH4.5柠檬酸—磷酸缓冲液，然后加入10ml 1% 邻苯三酚溶液，摇荡三角瓶后盖上橡胶瓶塞，并放在30 0C恒温箱中培养2h。
培养结束后，加入35ml乙醚，在恒温振荡器上振荡15分钟（250C），静置5分钟。
最后，将含有溶解的紫色没食子素的着色乙醚相在430nm 处进行比色。
为防止因乙醚引起的误差，每比色一次用无水乙醇洗涤比色槽一次。
为了削除土壤中原油的醚溶性有机物质引起的误差及校正没食子酚的纯度，需设无土基质土壤对照和无土壤的及基质作对照，无基质的对照用水来代替。
3、结果计算：多酚氧化酶活性= 没食子素含量/1g —土壤含水量多酚氧化酶活性，以2 h 后1g干土紫色没食子素的含量表示。
四、土壤过氧化物酶（peroxidase）活性的测定（比色法）（一）分析意义过氧化物能氧化土壤有机质。
一些过氧化物是土壤微生物生命活动的结果，也与某些氧化酶（如尿酸盐氧化酶）的作用有关，所以与多酚氧化酶一样，过氧化物在腐殖质的形成过程中具有重要的作用。
（二）方法选择及原理过氧化物酶是一种含**铁的氧化酶，它按照下面两步与过氧化氢起反应：过氧化物-----“氧化剂”此步在过氧化氢酶催化下进行。
“氧化剂”+DH2------过氧化物酶+H2O+D第一步是颇有选择性的、仅有氢、甲基化的过氧化氢与乙基过氧化物才能与这种酶结合，从而生成活泼的酶-----基质氧化物，然后此“氧化剂”再与还原型化合物（DH2）反应，而完成这一酶促反应。
由于土壤微生物生命活动而在土壤中积累一定过氧化物和其他还原型有机物质（多元酚、胺及杂环化合物），促使这一酶促反应的进行。
它的活性在碳酸盐土壤中最高，并取决于土壤微生物的数量。
测定过氧化物美的方法原理与多酚氧化酶的相同。
利用多分氧化物的、作为氢的受体，在经过氧化物酶的参与下，通过过氧化氢中氢的作用，多酚被氧化为着色的醌类化合物，颜色的深度与醌类化合物相关，据此表示酶活性。
（三）试剂配制1、1%邻苯三酚溶液2、0.5% H2O2溶液3、乙醚4、0.5N盐酸5、重铬酸钾标准溶液：配制方法同多酚氧化酶活性测定。
6、PH4.5柠檬酸—磷酸缓冲液：配制方法同多酚氧化酶活性测定（四）实验步骤1、标准曲线的绘制：参见多酚氧化酶测定。
2、操作过程：取1g新鲜土样，置于100ml小口三角瓶中，先加4mlPH4.5柠檬酸—磷酸缓冲液，然后加入10ml1% 邻苯三酚溶液和2ml 0.5% H2O2溶液。
振荡后按测定多酚氧化酶步骤萃取比色测定。
与此同时设定无基质对照和无土壤对照，无基质对照用水替代。
3、结果计算：过氧化物酶活性=没食子素含量/1g —土壤含水量过氧化物酶活性，以2h后，1g干土中生成的紫色没食子素含量表示。
五、土壤脲酶（urease）活性的测定（比色法）（一）分析意义脲酶广泛存在于土壤中，是研究的比较深入的一种土壤酶。
脲酶酶促产物————氨是植物氮源之一。
尿素氮肥水解于脲酶密切相关。
有机肥料中也有游离尿美的存在。
同时脲酶与土壤其他因子（有机质含量、微生物数量）有关。
研究土壤脲酶转化尿素的作用及其调控技术，对提高尿素氮肥利用率有重要的意义。
（二）方法选择及原理脲酶是一种转性较强的酶。
它能酶促尿素水解成氨、二氧化碳和水，Rotini(1935)，首先提出研究测定土壤脲酶，研究证明，中型介质中脲酶活性最强。
故测定土壤脲酶时，一般采用中性缓冲体系，也有的研究者也用碱性缓冲液测定脲酶。
测定土壤脲酶均采用尿素做基质，浓度范围为2——10%。
（三）试剂配制1、PH6.7柠檬酸缓冲液：取368g柠檬酸溶于600ml蒸馏水中，另取259g氢氧化钾溶于水，再将二种溶液混合，用1NNaOH讲PH调至6.7，并用水稀释至2L。
2、苯酚钠溶液：称62.5g苯酚溶于少量乙醇中，加2ml甲醇和18.5ml丙酮，然后用乙醇稀释至100ml（A液），保存在冰箱中，称27g氢氧化钠溶于100ml水中（B液），保存在冰箱中，使用前，取A、B两页各20ml混合，并用蒸馏水稀释至100ml备用。
3、次氯酸钠溶液：用水稀释制剂，至活性氯的浓度为0.9%，溶液稳定。
4、10%尿素液。
5、甲苯6、氮的标准溶液：精确称取0.4717g硫酸铵溶于睡并稀释至1000ml，则得1ml含0.1mg 氮的标准液，绘制标准曲线时，可将此液稀释10倍供用。
（四）实验步骤1、标准曲线的绘制：吸取西式10倍的标准液0、1、3、5、7、9、11、13ml，移于50ml比色管中，然后加蒸馏水20 ml。
先加4 ml苯酚钠溶液，再立即加入3 ml次氯酸钠溶液，每加入一种试剂后均将混合物仔细混合。
20分钟后显色，1h 内在分光光度计上于578nm处比色，制作标准曲线。
2、操作过程：取相当于5g 新鲜土壤置于100ml广口三角瓶中，加1ml甲苯。