发酵罐操作规程

发酵罐系统操作规程

一.准备工作

1.检查电源是否正常，空压机、微机系统和循环水系统是否正常工作。

2.检查系统上的阀门、接头及紧固螺钉是否拧紧。

3.开动空压机，用0.15Mpa压力，检查种子罐、发酵罐、过滤器、管路、阀门等密封性是否良好，有无泄漏。罐体夹套与罐内是否密封（换季时应重点检测），确保所有阀门处于关闭状态（电磁阀前方的阀门除外）。

4.检查水（冷却水）压、电压、气（汽）压能否正常供应。进水压维持在0.12Mpa，允许在0.15-0.2Mpa范围变动，不能超过0.3Mpa，温度应低于发酵温度10℃；罐体可靠接地；输入蒸汽压力应维持在0.3Mpa；空压机压力值0.8Mpa，空气进入压力应控制在0.25-0.30MP（空气初级过滤器的压力值）。

5温度、溶氧电极、PH电极校正及标定，详见触摸屏PH、DO的标定帮助。

6.检查各电机能否正常运转（共4个）。电磁阀能否正常吸合（整套系统共11

个电磁阀）。

二.灭菌操作

1.空气管路的灭菌

1.1空气管路上有三级预过滤器、冷干机和除菌过滤器。预过滤器、冷干机不能用蒸汽灭菌，因此，在空气管路通蒸汽前，必须将通向预过滤器的阀门关闭，使用蒸汽通过减压阀、蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器。

1.2除菌过滤器的滤芯不能承受高温高压，因此，通过蒸汽减压阀调整0.13Mpa，不得超过0.15MPa，严禁用过热蒸汽对除菌过滤器灭菌。

1.3空消过程中，除菌过滤器下端的排气阀应微微开启，排除冷凝水。

1.4空消时间应持续30分钟左右，当设备初次使用或长期不用后启动时，最好采用间歇空消，即第一次空消后，隔3～5小时再空消一次，以便消除芽孢。1.5经空消后的过滤器，应通气吹干，约20～30分钟，然后将气路阀门关闭。保持空气管道正压。

2.种子罐（酸碱罐消泡罐）空消

2.1种子罐空消前，应将打开排污阀Q22打开（使夹套内的压力不超压），即将夹套的水放掉。

2.2关闭Q14，微开Q15,打开蒸汽阀门Q12，打开Q13向罐内通蒸汽；打开Q18、Q19通过取样口向罐内直接通蒸汽。

2.3将罐上的接种口，排气阀Q9及排污（料路）管路上的阀门Q24、Q25微微打开，使蒸汽通过阀门排出，当湿度达到1220C后开始计时，调整阀门Q9、Q13、Q19的开度，保持罐压在0.13～0.15Mpa（温度1220C~1280C），可根据工艺调整空消的温度与压力。

2.4当空消30～40min后应关闭Q13、Q15、Q19，然后再关闭Q12、Q18，打开空气管路上的阀门Q14、Q13向罐内通空气冷却，使罐内保持正压0.03MPa-0.05MPa 之间，空消时最好将夹套的排水阀打开，以防夹套水排不干净。

2.5需要快速冷却时则关闭夹套排污阀门Q22，打开冷却水阀门Q27/DC1向夹套通水冷却，达到常温后关闭冷却水。特殊情况下，可采用间歇空消（隔3～5小时再空消一次，以便消除芽孢）。

2.6空消结束后将罐内冷凝水排掉，并将排空阀门打开，防止冷却后罐内形成负压损坏设备。

2.7空消时溶氧、PH电极取出，妥善保存，以延长其使用寿命。

3.种子罐（酸碱罐消泡罐同种子罐）的实消

实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程。

3.1空消结束后，关闭进气阀门Q13,打开Q9卸去罐内压力，将校正好的PH、DO 电极装好，尽快将配好的培养基从加料口加入罐内，此时夹套内应无冷凝水。

3.2培养基在进罐之前，应先糊化，一般培养基的配方量应根据工艺要求确定，发酵液的最终容积为罐体全容积的70％左右(泡沫多的培养基为60-65％左右，泡沫少的培养基可达75～80％)，考虑到冷凝水、接种量及是否流加补料，初定容由生产根据工艺的要求自行决定，要在实践中摸索。

3.3先开启机械搅拌装置，低速（50-100r/min）转动，使罐内物料均匀混合。

3.4为减少冷凝水，先打开套排污阀Q22、蒸汽阀Q21，对罐内培养基预热（采用夹套通汽预加热）。当罐内温度升到90℃时（具体温度应按蒸汽质量而变动），关闭夹套进汽阀Q21，关闭Q14，全打开进汽阀Q12,打开Q13通入蒸汽，全开Q18，微开Q19通过取样口向罐内通蒸汽，关闭Q25、Q26，全开Q23,微开Q24向罐内直通蒸汽，微开尾气阀门Q9（三路通汽灭菌），关闭电机搅拌，当罐内温度升到105℃时，缓缓打开排气阀将罐顶冷空气排掉，持续5min，关闭排气阀。

3.5当温度上升到121—123℃，罐压升至0.12Mpa时（不得超过0.2Mpa），控制蒸汽阀门Q9、Q19、Q13、Q24的开度大小，保持温度与罐压不变，开始计时，微开火焰接种口向外排蒸汽，30分钟后，关紧焰接种口，关闭Q24（关闭前应人为地开大蒸汽量几次，避免培养基残留于阀门处）,关闭Q23，关闭Q19、18，关闭Q13、Q12停止供汽。

3.6关闭夹套排污阀门Q22，打开冷却水阀Q27/DC1向夹套通水冷却，打开电机搅拌，当压力降到0.05MPa时微微开启排气阀和空气进气阀门Q14、Q13向罐内通空气搅拌，加快冷却速度，并保持罐压为0.05Mpa，直到罐内培养基温度降至接种温度。当罐内温度降至比发酵工艺所要求的温度高2－3℃时，关闭阀门

Q27/DC1停止通冷却水。

注：

1）在空消实消时一定排尽夹套内的余水，否则会导致罐体压扁，造成设备损坏。2）在空消、实消结束后冷却过程中，严禁种子罐产生负压，以免造成污染。

三.种子罐接种（移种）

1.接种

1.本系统采用火焰封口接种，接种前应事先准备：酒精棉花、钳子、镊子、接种环、石棉网手套、Z字扳手。

2.菌种装入三角烧瓶内，接种量根据工艺要求确定。

3.将酒精棉花围在接种环周围点燃，将菌种瓶口在火焰上烧一会儿，用Z字扳手拧开接种口，迅速将菌种倒入罐内，此时应向罐内通气，使接种口有空气排出（压力接近与零，但不能为零）。

4.将接种口盖在火焰上灭菌后拧紧。接种后，罐压保持在0.03-0.07Mpa

（0.05Mpa），调节通风量。