一步一步教你使用NCBI查找DNA、mRNA、cDNA

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ncbi使用指导

ncbi使用指导

ncbi使用指导导言:NCBI(National Center for Biotechnology Information)是美国国家生物技术信息中心,是全球最大的生物信息学数据库。

NCBI提供了丰富的生物学资源,包括基因序列、蛋白质序列、科学文献等。

本文将为您介绍如何使用NCBI来获取和利用生物学信息。

一、注册NCBI账号在使用NCBI之前,首先需要注册一个账号。

在NCBI官方网站()的主页上,点击右上角的“Sign In”按钮,并选择“Register for an NCBI account”。

根据提示提供相关信息,完成注册流程。

二、搜索和获取基因序列1. 打开NCBI网站后,点击主页上的“Search”按钮,进入搜索页面。

2. 在搜索框中输入您感兴趣的基因名称或者序列标识符,如“BRCA1”。

3. 点击“Search”按钮进行搜索。

4. 在搜索结果中,选择您需要的基因序列,点击链接进入该基因的详细信息页面。

5. 在详细信息页面中,您可以获取该基因的序列信息,可以下载或拷贝该序列以供后续分析使用。

三、检索科学文献1. 在NCBI主页上方的搜索框中,选择“PubMed”为搜索目标。

2. 输入您感兴趣的科学文献关键词,如“cancer treatment”。

3. 点击搜索按钮进行检索。

4. 在搜索结果中,选择您需要的文献,点击链接进入该文献的详细页面。

5. 在详细页面中,您可以阅读文章摘要,并根据需要下载全文或进行其他操作。

四、利用NCBI工具进行序列分析1. 在NCBI主页上方的菜单栏中,选择“Tools”进行工具选择。

2. 根据您的需求选择相应的工具,如“BLAST”进行序列比对分析。

3. 进入选择的工具页面后,按照提示上传或输入您的序列数据。

4. 设定参数并运行分析。

5. 分析完成后,您可以查看比对结果、序列保守性等信息,并进行进一步的分析和解释。

五、订阅NCBI数据库更新信息1. 在NCBI主页上方菜单栏中选择“NCBI Account”。

一步一步教你使用NCBI查找DNA、mRNA、cDNA

一步一步教你使用NCBI查找DNA、mRNA、cDNA

一步一步教你使用 NCBI 查找DNA、mRNA、cDNA、...最近看到很多战友在论坛上询问如何查询基因序列、如何进行引物设计、如何使用BLAST 进行序列比对……,这些问题在 NCBI 上都可以方便的找到答案。

现在我就结合我自己使用 NCBI的一些经历(经验)跟大家交流一下 BCBI 的使用。

希望大家都能发表自己的使用心得,让我们共同进步!我分以下几个部分说一下 NCBI 的使用:Part one 如何查找基因序列、mRNA、PromoterPart two 如何查找连续的 mRNA、cDNA、蛋白序列Part three 运用 STS 查找已经公布的引物序列Part four 如何运用 BLAST 进行序列比对、检验引物特异性特别感谢本版版主,将这个帖子置顶!从发帖到现在,很多战友对该帖给与了积极的关注,在此向给我投票的(以及想给我投票却暂时不能投票的)各位战友表示真诚的感谢,谢谢各位战友!请大家对以下我发表的容提出自己的意见。

关于NCBI 其他方面的使用也请水平较高的战友给予补充First of all,还是让我们从查找基因序列开始。

第一部分利用Map viewer 查找基因序列、mRNA 序列、启动子(Promoter)下面以人的 IL6(白细胞介素 6)为例讲述一下具体的操作步骤1.打开Map viewer 页面,网址为:/mapview/index.html在 search 的下拉菜单里选择物种,for 后面填写你的目的基因。

操作完毕如图所示:2.点击“GO”出现如下页面:3.在步骤二图示的右下角有一个Quick Filter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene前面的小方框里打勾,然后点击Filter. 出现下图:说明一下:1、染色体的红色区域即为你的目的基因所处位置。

2、下面参考序列给出了三个,是不同的部门做出来的,经我验证,序列有微小的差异,但总体来说基本相同。

尽管你分别点击后,序列代码、序列代码等有所差异,但碱基基本一致,不影响大家研究分析序列。

应用NCBI查找连续的mRNA cDNA 蛋白序列

应用NCBI查找连续的mRNA cDNA 蛋白序列

应用NCBI查找连续的mRNA、cDNA、蛋白序列(多图) Time:2009-12-30 PM 14:27Author:bioer Hits: 1120timesPart two:如何查找连续的mRNA、cDNA、蛋白序列(以人类的IL6为例)(作者:urbest)一、进入NCBI主页:/在search后面选择Gene,在for后面填写需要查找的基因的名字。

如图所示:点击“Go”,出现以下界面:出现了很多基因序列,在每个序列的右边还有“Order cDNA clone” 的链接,这些序列中有些序列是跟你的目的基因同名的,有些是别名(Other Aliases)与你的目的基因一致,根据每个序列的介绍认真选择你的目的基因。

上图中我需要的IL-6是标号为2的序列。

二、查找cDNA、mRNA和蛋白序列1. 查找cDNA序列①点击Order cDNA clone,出现目的页面如图所示:②点击Clone Sequence后面的链接即可得到cDNA序列。

点击后如图所示(只抓取其中一部分):2. 查找mRNA、蛋白序列回到步骤1点击“Go”之后出现的页面,点击目的基因的名字,出现以下页面(只抓取相关部分):页面的下半部分,即可以获取mRNA和蛋白序列的部分:找到“NCBI Reference Sequences (RefSeq)”,它分为几个板块,第一个“mRNA and Protein”区可以让我们找到连续的编码mRNA序列和蛋白序列。

在mRNA and Protein下面有两个序列代码(中间划有一个箭头),这代表了mRNA序列和蛋白序列。

分别点击就可以得到相应的序列页面。

点击后如图所示,mRNA序列:蛋白序列如下:NCBI Reference Sequences (RefSeq)的第二个板块是Reference assembly,它下面显示的是Genomic ,点击Genomic下面Reference assembly对应的Genbank或FASTA即可出现编码的DNA序列(注意:只是编码序列,其中包括内含子,但一般没有5…非编码区)。

一步一步教你使用 NCBI 查找DNA

一步一步教你使用 NCBI 查找DNA

一步一步教你使用 NCBI 查找DNA 一步一步教你使用 NCBI 查找DNA、mRNA、cDNA、Protein、promoter、引物设计、BLAST序列比对等最近看到很多战友在论坛上询问如何查询基因序列、如何进行引物设计、如何使用 BLAST 进行序列比对……,这些问题在 NCBI 上都可以方便的找到答案。

现在我就结合我自己使用 NCBI的一些经历(经验)跟大家交流一下 BCBI 的使用。

希望大家都能发表自己的使用心得,让我们共同进步~我分以下几个部分说一下 NCBI 的使用:Part one 如何查找基因序列、mRNA、PromoterPart two 如何查找连续的 mRNA、cDNA、蛋白序列Part three 运用 STS 查找已经公布的引物序列Part four 如何运用 BLAST 进行序列比对、检验引物特异性特别感谢本版版主,将这个帖子置顶~从发帖到现在,很多战友对该帖给与了积极的关注,在此向给我投票的(以及想给我投票却暂时不能投票的)各位战友表示真诚的感谢,谢谢各位战友~请大家对以下我发表的内容提出自己的意见。

关于NCBI 其他方面的使用也请水平较高的战友给予补充First of all,还是让我们从查找基因序列开始。

第一部分利用Map viewer 查找基因序列、mRNA 序列、启动子(Promoter)下面以人的 IL6(白细胞介素 6)为例讲述一下具体的操作步骤1( 打开Map viewer 页面,网址为: 在 search 的下拉菜单里选择物种,for 后面填写你的目的基因。

操作完毕如图所示:2(点击“GO”出现如下页面:3( 在步骤二图示的右下角有一个Quick Filter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene前面的小方框里打勾,然后点击Filter. 出现下图:说明一下:1、染色体的红色区域即为你的目的基因所处位置。

2、下面参考序列给出了三个,是不同的部门做出来的,经我验证,序列有微小的差异,但总体来说基本相同。

一步一步教你使用NCBI查找DNA、mRNA、cDNA

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第一部分利用Map viewer 查找基因序列、mRNA 序列、启动子(Promoter)下面以人的 IL6(白细胞介素 6)为例讲述一下具体的操作步骤1.打开Map viewer 页面,网址为:/mapview/index.html在 search 的下拉菜单里选择物种,for 后面填写你的目的基因。

操作完毕如图所示:2.点击“GO”出现如下页面:3.在步骤二图示的右下角有一个Quick Filter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene前面的小方框里打勾,然后点击Filter. 出现下图:说明一下:1、染色体的红色区域即为你的目的基因所处位置。

2、下面参考序列给出了三个,是不同的部门做出来的,经我验证,序列有微小的差异,但总体来说基本相同。

尽管你分别点击后,序列代码、序列代码等有所差异,但碱基基本一致,不影响大家研究分析序列。

应用NCBI的Map viewer查找基因序列

应用NCBI的Map viewer查找基因序列

应用NCBI的Map viewer查找基因序列、mRNA序列、启动时间:2011-06-08 22:23来源:生物吧作者:刘浩点击: 796 次一步一步教你使用NCBI查找DNA、mRNA 、cDNA、Protein、引物设计、BLAST 序列比对等(作者:urbest) 关键词: NCBI 使用方法引物设计序列比对总共分为四个部分介绍一下NCBI的使用:Part one一步一步教你使用NCBI查找DNA、mRNA、cDNA、Protein、引物设计、BLAST序列比对等(作者:urbest)关键词: NCBI 使用方法引物设计序列比对总共分为四个部分介绍一下NCBI的使用:Part one 如何查找基因序列/mRNA/PromoterPart two 如何查找连续mRNA/cDNA/蛋白序列Part three 运用STS查找已经公布的引物序列Part four 如何运用BLAST进行序列比对、检验引物特异性Part one: 利用Map viewer查找基因序列、mRNA序列、启动子(Promoter)[同一个页面即可显示基因序列和启动子]下面以人的IL6(白细胞介素6)为例讲述一下具体的操作步骤一、打开Map viewer页面,网址为:/mapview/index.html在search的下拉菜单里选择物种,for后面填写你的目的基因。

操作完毕如图所示:二、点击“GO”出现如下页面:三、在步骤二图示的右下角有一个Quick Filter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene前面的小方框里打勾,然后点击Filter,出现下图:说明一下:1、染色体的红色区域即为你的目的基因所处位置。

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现在普遍采用的是最上面的那个序列,这一条是世界范围的生物科学家用计算机合成的一个序列。

NCBI上下载基因序列

NCBI上下载基因序列

一、NCBI上下载基因序列、mRNA 、CDS序列的方法1.打开NCBI网站,第一个框选择Gene,第二个框输入基因名称,如ALK基因,点击 Search。

2.进入第二页面后,会看到如下一系列跟ALK基因相关的信息,根据description 和location 的信息,找到自己需要的基因。

空色框中表示的是物种,我需要的是人类的基因,故选择第一个。

点击ALK,进入下一个页面。

3.进入后,会看到以下关于ALK基因的详细信息:文案大全这些信息可以略过,往下查看,点击下图红色框中的See ALK in Genome Data Viewer,进入下个页面。

文案大全4.进入后会看到如下页面,:将鼠标箭头放在图中红色框中的绿色线上2--5秒,不用点击。

会看到下面的界面:(有些基因会出现好几个,根据自己的要求选择)文案大全文案大全第一个红色框中:NP 004295.2 表示蛋白质序列,NP 代表蛋白质,004295是编号,后面的 .2 代表更新状态,数值越大,版本越新。

NM 004304.4 表示mRNA 序列,NM 表示mRNA ,004304是编号,后面的 .4 代表更新状态,数值越大,版本越新。

第二个红色框中:CCDS33172.1 表示CDS 序列,CCDS 表示CDS ,命名规则同上。

第三个红色框中:NC 000002.12(29,192,774...29,921,611) 表示完整的基因序列,NC 表示基因组。

括号中的数字表示这个基因的碱基长度,从29,192,774bp到29,921,611bp。

要下载蛋白序列、mRNA 序列、CDS序列、基因序列,直接点击红色框中的链接即可。

5.这里下载基因序列,点击后出现如下界面:点击右边的Send complete record file format(有好几种格式) Create File。

常用的是FASTA 格式和 GenBank 格式。

GenBank 格式保存的信息更全面。

如何用NCBI和uniprot数据库查找目的蛋白的氨基酸序列或目的基因的碱基序列(mRNA序列)

如何用NCBI和uniprot数据库查找目的蛋白的氨基酸序列或目的基因的碱基序列(mRNA序列)

运用NCBI数据库查找目的蛋白序列或目的碱基序列
第1种方法
1.打开NCBI官网,并选择Gene菜单,如下图。

2.在搜索栏内输入想要查找的蛋白名称或基因名称,此处以基因RSK2为例,如图。

3.在搜索结果中查找目的蛋白,注意Description栏会标明物种信息,以human为例,Aliases 栏会列出目的蛋白的各种别名。

4.在Searchresult页面中点击你要找的蛋白名称(Name/Gene ID),进入页面并在页面找到“”“NCBI Reference Sequences (RefSeq)”条目,并在其子条目中找到“mRNA and Protein(s) ”,查找mRNA碱基序列点击NM,查找蛋白氨基酸序列点击NP,以下以查找mRNA碱基序列为例如下:
点击NM-004586.2进入页面后如下:
在页面下方会列出mRNA的序列:
第2中方法
1.进入Uniplot数据库,在搜索栏中直接输入要查找的基因或蛋白名称,如下图:
2.进入以下页面:
3.在搜索结果Entry name栏中会列出不同物种选项,且会有Protein names及Gene names,点击所要选择物种蛋白,进入以下页面。

4.点击页面页面左侧的Sequence栏,并找到Sequence databases,其下面表格中有RefSeq i,其中包含NP及NM。

5.此处以查找mRNA为例,点击NM,页面会跳转至NCBI的查找页面,如下:。

一步一步教你使用 NCBI 查找DNA、mRNA、cDNA、Protein、promoter、引物设计、BLAST 序列比对等

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NCBI使用指南

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第一部分利用Map viewer 查找基因序列、mRNA 序列、启动子(Promoter)下面以人的IL6(白细胞介素6)为例讲述一下具体的操作步骤1.打开Map viewer 页面,网址为:/mapview/index.html 在search 的下拉菜单里选择物种,for 后面填写你的目的基因。

操作完毕如图所示:2.点击“GO”出现如下页面:3.在步骤二图示的右下角有一个Quick Filter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene 前面的小方框里打勾,然后点击Filter. 出现下图:说明一下:1、染色体的红色区域即为你的目的基因所处位置。

2、下面参考序列给出了三个,是不同的部门做出来的,经我验证,序列有微小的差异,但总体来说基本相同。

NCBI如何查找序列

NCBI如何查找序列

1下面以人的 IL6(白细胞介素 6)为例讲述一下具体的操作步骤1.打开Map viewer 页面,网址为:/mapview/index.html 在 search 的下拉菜单里选择物种,for 后面填写你的目的基因。

操作完毕如图所示:2.点击“GO”出现如下页面:3.在步骤二图示的右下角有一个Quick Filter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene前面的小方框里打勾,然后点击Filter. 出现下图:说明一下:1、染色体的红色区域即为你的目的基因所处位置。

2、下面参考序列给出了三个,是不同的部门做出来的,经我验证,序列有微小的差异,但总体来说基本相同。

尽管你分别点击后,序列代码、序列代码等有所差异,但碱基基本一致,不影响大家研究分析序列。

现在普遍采用的是最上面的那个序列,这一条是世界范围的生物科学家用计算机合成的一个序列。

我也推荐大家使用这个序列。

4.点击上述三条序列第一条序列(即 reference)对应的"Genes seq",出现新的页面,页面下方为:5.点击上图出现的“Download/View Sequence/Evidence ”,即下载查看序列等功能,结果如图所示:先对上面这张图做点简要的说明,在 Sequence Format(序列输出格式)后面是一个下拉式选择菜单,默认的为 FASTA 格式,还有一个是 GenBank 格式。

我推荐大家选择 GenBnak格式,因为这个格式提供了很多该基因的信息,而 FASTA格式只有基因序列。

6.在 Sequence Format 后选择 GenBank,然后点击下面的 Display,目的基因的相关信息和序列就出现在眼前了。

点击后如图所示(网页较大,只抓取一小部分以作示范):在上述打开的网页中,你可以看到基因长度,基因序列,以及这个基因是如何被报道出来的等各种信息。

你会看到: mRNAjoin(3598..3678,3841..4031,5090..5203,5911..6057, 7803..8394) 这代表了从基因的 3598位开始就是转录区了,即我们常说的 mRNA 片断,由于内含子的存在,所以 mRNA 在DNA 序列上分成了几段。

一步一步教你使用NCBI查找DNA

一步一步教你使用NCBI查找DNA

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希望大家都能发表自己的使用心得,让我们共同进步!我分以下几个部分说一下 NCBI 的使用:Part one 如何查找基因序列、mRNA、PromoterPart two 如何查找连续的 mRNA、cDNA、蛋白序列Part three 运用 STS 查找已经公布的引物序列Part four 如何运用 BLAST 进行序列比对、检验引物特异性特别感谢本版版主,将这个帖子置顶!从发帖到现在,很多战友对该帖给与了积极的关注,在此向给我投票的(以及想给我投票却暂时不能投票的)各位战友表示真诚的感谢,谢谢各位战友!请大家对以下我发表的内容提出自己的意见。

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2、下面参考序列给出了三个,是不同的部门做出来的,经我验证,序列有微小的差异,但总体来说基本相同。

NCBI如何查找序列

NCBI如何查找序列

1下面以人的 IL6(白细胞介素 6)为例讲述一下具体的操作步骤1.打开Map viewer 页面,网址为:/mapview/index.html 在 search 的下拉菜单里选择物种,for 后面填写你的目的基因。

操作完毕如图所示:2.点击“GO”出现如下页面:3.在步骤二图示的右下角有一个Quick Filter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene前面的小方框里打勾,然后点击Filter. 出现下图:说明一下:1、染色体的红色区域即为你的目的基因所处位置。

2、下面参考序列给出了三个,是不同的部门做出来的,经我验证,序列有微小的差异,但总体来说基本相同。

尽管你分别点击后,序列代码、序列代码等有所差异,但碱基基本一致,不影响大家研究分析序列。

现在普遍采用的是最上面的那个序列,这一条是世界范围的生物科学家用计算机合成的一个序列。

我也推荐大家使用这个序列。

4.点击上述三条序列第一条序列(即 reference)对应的"Genes seq",出现新的页面,页面下方为:5.点击上图出现的“Download/View Sequence/Evidence ”,即下载查看序列等功能,结果如图所示:先对上面这张图做点简要的说明,在 Sequence Format(序列输出格式)后面是一个下拉式选择菜单,默认的为 FASTA 格式,还有一个是 GenBank 格式。

我推荐大家选择 GenBnak格式,因为这个格式提供了很多该基因的信息,而 FASTA格式只有基因序列。

6.在 Sequence Format 后选择 GenBank,然后点击下面的 Display,目的基因的相关信息和序列就出现在眼前了。

点击后如图所示(网页较大,只抓取一小部分以作示范):在上述打开的网页中,你可以看到基因长度,基因序列,以及这个基因是如何被报道出来的等各种信息。

你会看到: mRNAjoin(3598..3678,3841..4031,5090..5203,5911..6057, 7803..8394) 这代表了从基因的 3598位开始就是转录区了,即我们常说的 mRNA 片断,由于内含子的存在,所以 mRNA 在DNA 序列上分成了几段。

一步一步教你使用NCBI查找DNA、mRNA、cDNA教学资料

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2、下面参考序列给出了三个,是不同的部门做出来的,经我验证,序列有微小的差异,但总体来说基本相同。

NCBI使用简明教程,一步一步教会你使用

NCBI使用简明教程,一步一步教会你使用

NCBI使用简明教程,一步一步教会你使用
NCBI (National Center for Biotechnology Information )是指美国国立生物技术信息中心,是一个内容丰富、功能强大的数据库工具。

几乎每个生命科学研究者都需要使用NCBI,很多刚接触生命科学研究的小伙伴经常会问:如何使用NCBI 查询基因序列、如何进行引物设计、如何使用BLAST 进行序列比对等等?
针对这些问题,我们收集、整理此教程,为科研工作者提供一份相对专业和简明的资料,以作基础参考之用!
主要内容分4部分,包括:
1、如何查找基因序列、mRNA、Promoter
2、如何查找连续的 mRNA、cDNA、蛋白序列
3、运用 STS 查找已经公布的引物序列
4、如何运用 BLAST 进行序列比对、检验引物特异性。

使用 NCBI 查找DNA引物设计BLAST序列比对

使用 NCBI 查找DNA引物设计BLAST序列比对

最近看到很多战友在论坛上询问如何查询基因序列、如何进行引物设计、如何使用BLAST 进行序列比对……,这些问题在 NCBI 上都可以方便的找到答案。

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尽管你分别点击后,序列代码、序列代码等有所差异,但碱基基本一致,不影响大家研究分析序列。

教你使用NCBI查找DNAmRNAcDNA

教你使用NCBI查找DNAmRNAcDNA

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操作完毕如图所示:2.点击“GO”出现如下页面:3.在步骤二图示的右下角有一个Quick Filter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene前面的小方框里打勾,然后点击Filter. 出现下图:说明一下:1、染色体的红色区域即为你的目的基因所处位置。

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尽管你分别点击后,序列代码、序列代码等有所差异,但碱基基本一致,不影响大家研究分析序列。

手把手叫你使用NCBI

手把手叫你使用NCBI

NCBI (National Center for Biotechnology Information), 美国国家生物技术信息中心/NCBI是NIH的国立医学图书馆(NLM)的一个分支。

NCBI提供检索的服务包括:1.GenBank(NIH遗传序列数据库):一个可以公开获得所有的DNA序列的注释过的收集。

GenBank是由NCBI受过分子生物学高级训练的工作人员通过来自各个实验室递交的序列和同国际核酸序列数据库(EMBL和DDBJ)交换数据建立起数据库的。

它同日本和欧洲分子生物学实验室的DNA数据库共同构成了国际核酸序列数据库合作。

这三个组织每天交换数据。

其中的数据以指数形式增长,最近的数据为它已经有来自47000个物种的30亿个碱基。

2.Molecular Databases(分子数据库):Nucleotide Sequence(核酸序列库):从NCBI其他如Genbank数据库中收集整理核酸序列,提供直接的检索。

Protein Sequence (蛋白质序列库):与核酸类似,也是从NCBI多个不同资源中编译整理的,方便研究者的直接查询。

Structure(结构)-——关于NCBI结构小组的一般信息和他们的研究计划,另外也可以访问三维蛋白质结构的分子模型数据库(MMDB)和用来搜索和显示结构的相关工具。

MMDB:分子模型数据库—一个关于三维生物分子结构的数据库,结构来自于X-ray晶体衍射和NMR色谱分析。

Taxonomy(分类学)——NCBI的分类数据库,包括大于7万余个物种的名字和种系,这些物种都至少在遗传数据库中有一条核酸或蛋白序列。

其目的是为序列数据库建立一个一致的种系发生分类学。

3.Literature Databases(文献数据库)(1)PubMed是NLM提供的一项服务,能够对MEDLINE上超过1200万条的上世纪六十年代中期至今的杂志引用和其他的生命科学期刊进行访问,并可以连接到参与的出版商网络站点的全文文章和其他相关资源。

(精编资料推荐)一步一步教你使用 NCBI 查找DNA、mRNA、cDNA、Protein、promoter、引物设计、BLAST 序列比

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一步一步教你使用NCBI 查找DNA、mRNA、cDNA、Protein、promoter、引物设计、BLAST 序列比对等最近看到很多战友在论坛上询问如何查询基因序列、如何进行引物设计、如何使用BLAST 进行序列比对……,这些问题在NCBI 上都可以方便的找到答案。

现在我就结合我自己使用NCBI的一些经历(经验)跟大家交流一下BCBI 的使用。

希望大家都能发表自己的使用心得,让我们共同进步!我分以下几个部分说一下NCBI 的使用:Part one 如何查找基因序列、mRNA、PromoterPart two 如何查找连续的mRNA、cDNA、蛋白序列Part three 运用STS 查找已经公布的引物序列Part four 如何运用BLAST 进行序列比对、检验引物特异性特别感谢本版版主,将这个帖子置顶!从发帖到现在,很多战友对该帖给与了积极的关注,在此向给我投票的(以及想给我投票却暂时不能投票的)各位战友表示真诚的感谢,谢谢各位战友!请大家对以下我发表的内容提出自己的意见。

关于NCBI 其他方面的使用也请水平较高的战友给予补充First of all,还是让我们从查找基因序列开始。

第一部分利用Map viewer 查找基因序列、mRNA 序列、启动子(Promoter)下面以人的IL6(白细胞介素6)为例讲述一下具体的操作步骤1.打开Map viewer 页面,网址为:/mapview/index.html 在search 的下拉菜单里选择物种,for 后面填写你的目的基因。

操作完毕如图所示:2.点击“GO”出现如下页面:3.在步骤二图示的右下角有一个Quick Filter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene 前面的小方框里打勾,然后点击Filter. 出现下图:说明一下:1、染色体的红色区域即为你的目的基因所处位置。

2、下面参考序列给出了三个,是不同的部门做出来的,经我验证,序列有微小的差异,但总体来说基本相同。

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一步一步教你使用 NCBI 查找DNA、mRNA、cDNA、...最近看到很多战友在论坛上询问如何查询基因序列、如何进行引物设计、如何使用BLAST 进行序列比对……,这些问题在 NCBI 上都可以方便的找到答案。

现在我就结合我自己使用 NCBI的一些经历(经验)跟大家交流一下 BCBI 的使用。

希望大家都能发表自己的使用心得,让我们共同进步!我分以下几个部分说一下 NCBI 的使用:Part one 如何查找基因序列、mRNA、PromoterPart two 如何查找连续的 mRNA、cDNA、蛋白序列Part three 运用 STS 查找已经公布的引物序列Part four 如何运用 BLAST 进行序列比对、检验引物特异性特别感谢本版版主,将这个帖子置顶!从发帖到现在,很多战友对该帖给与了积极的关注,在此向给我投票的(以及想给我投票却暂时不能投票的)各位战友表示真诚的感谢,谢谢各位战友!请大家对以下我发表的内容提出自己的意见。

关于NCBI 其他方面的使用也请水平较高的战友给予补充First of all,还是让我们从查找基因序列开始。

第一部分利用Map viewer 查找基因序列、mRNA 序列、启动子(Promoter)下面以人的 IL6(白细胞介素 6)为例讲述一下具体的操作步骤1.打开Map viewer 页面,网址为:/mapview/index.html在 search 的下拉菜单里选择物种,for 后面填写你的目的基因。

操作完毕如图所示:2.点击“GO”出现如下页面:3.在步骤二图示的右下角有一个Quick Filter,下面是让你选择的几个复选框,在Gene前面的小方框里打勾,然后点击Filter. 出现下图:说明一下:1、染色体的红色区域即为你的目的基因所处位置。

2、下面参考序列给出了三个,是不同的部门做出来的,经我验证,序列有微小的差异,但总体来说基本相同。

尽管你分别点击后,序列代码、序列代码等有所差异,但碱基基本一致,不影响大家研究分析序列。

现在普遍采用的是最上面的那个序列,这一条是世界范围的生物科学家用计算机合成的一个序列。

我也推荐大家使用这个序列。

4.点击上述三条序列第一条序列(即 reference)对应的"Genes seq",出现新的页面,页面下方为:5.点击上图出现的“Download/View Sequence/Evidence ”,即下载查看序列等功能,结果如图所示:先对上面这张图做点简要的说明,在 Sequence Format(序列输出格式)后面是一个下拉式选择菜单,默认的为 FASTA 格式,还有一个是 GenBank 格式。

我推荐大家选择 GenBnak格式,因为这个格式提供了很多该基因的信息,而 FASTA格式只有基因序列。

6.在 Sequence Format 后选择 GenBank,然后点击下面的 Display,目的基因的相关信息和序列就出现在眼前了。

点击后如图所示(网页较大,只抓取一小部分以作示范):在上述打开的网页中,你可以看到基因长度,基因序列,以及这个基因是如何被报道出来的等各种信息。

你会看到: mRNA join(3598..3678,3841..4031,5090..5203,5911..6057, 7803..8394)这代表了从基因的 3598位开始就是转录区了,即我们常说的 mRNA 片断,由于内含子的存在,所以 mRNA 在DNA 序列上分成了几段。

CDS join(3660..3678,3841..4031,5090..5203,5911..6057, 7803..7970) CDS 代表编码序列,即蛋白编码区是从 3660 开始的(ATG),由于剪接作用所以 CDS 区也是不连续的。

说到这里,可能很多朋友都已经明白了 promoter 即启动子区域在哪里了。

但我还是再唠叨几句:转录起始位点前面是基因的调控区,启动子区没有明显的位置定义,大家也只是猜测它的大体位置,如果你要研究 promoter 区的话,建议你选择转录起始位点前的 2000个碱基进行研究,一般默认的是这样。

当然你如果觉得长度太长不好研究的话,也可以只研究-1000 到0这一千个碱基,因为一般情况下,启动子区的变异都在这个区域内。

这样大家就可以找到自己的目的基因序列和启动子了,这种方法可能使用的人不是很多,但我个人比较喜欢,因为它最大的优点是可以找到启动子区域和其他调控区域。

希望大家可以发帖交流,让我们把 NCBI 用的更好!6第二部分如何查找连续的mRNA、cDNA、蛋白序列(依然以人类的 IL6 为例)1.进入NCBI 主页:/在 search 后面选择 Gene,在 for 后面填写需要查找的基因的名字。

如图所示:出现了很多基因序列,在每个序列的右边还有“Order cDNA clone” 的链接,这些序列中有些序列是跟你的目的基因同名的,有些是别名(Other Aliases)与你的目的基因一致,根据每个序列的介绍认真选择你的目的基因。

上图中我需要的 IL6 是标号为2的序列。

2.1 查找 cDNA 序列2.1.1 点击Order cDNA clone, 出现目的页面如图所示:2.1.2 点击Clone Sequence 后面的链接即可得到cDNA 序列。

点击后如图所示(只抓取其中一部分)2.2 查找 mRNA、蛋白序列回到步骤 1 点击“Go”之后出现的页面,点击目的基因的名字,出现以下页面(只抓取相关部分):页面的下半部分,即可以获取 mRNA和蛋白序列的部分:找到“NCBI Reference Sequences (RefSeq)”,它分为几个板块,第一个“mRNA a ndProtein ”区可以让我们找到连续的编码 mRNA 序列和蛋白序列。

在 mRNA and Protein下面有两个序列代码(中间划有一个箭头),这代表了 mRNA序列和蛋白序列。

分别点击就可以得到相应的序列页面。

点击后如图所示,mRNA 序列:NCBI Reference Sequences (RefSeq)的第二个板块是 Reference assembly,它下面显示的是 Genomic ,点击 Genomic 下面Reference assembly 对应的Genbank 或 FASTA 即可出现编码的 DNA 序列(注意:只是编码序列,其中包括内含子,但一般没有5‘非编码区)。

一步就不做贴图演示了吧,呵呵。

这样我们就可以找到基因的 cDNA 序列、连续的编码 mRNA 序列、蛋白序列以及含有内含子的编码DNA 序列了。

相信这些操作对很多战友还是有用的。

如果大家有更好的方法,欢迎发帖交流!友情提示:在 NCBI 里打开的每一个页面都会给我们提供大量的信息,大家不妨好好看看,可能会有令我们惊喜的收获!最后唠叨一句:最近我实验比较忙,只能在深夜发帖,可能要过几天再发第三部分[Partthree 运用STS 查找已经公布的引物序列],希望“期待下集”的朋友可以理解。

第三部分运用STS 查找已经公布的引物序列STS,序列标签位点(Sequence Tagged Site):一段短的DNA 序列(200-500 个碱基对),这种序列在染色体上只出现一次,其位置和碱基顺序都是已知的。

在PCR 反应中可以检测处STS 来,STS 适宜于作为人类基因组的一种地标,据此可以判定DNA 的方向和特定序列的相对位置。

以上内容基本是STS 的定义,我主张活学活用,下面就介绍一下我个人用STS 数据库查找引物的一点经验。

还是使用人的IL6 基因为例,呵呵1.打开 NCBI 主页,在 Search 后面的下拉菜单选择 UniSTS,在 FOR 后面填写目的基因。

操作完毕如图所示这是你会发现 NCBI 又提供了很多序列,下面我们还是要初步筛选我们需要的序列。

2.根据物种、目的引物所在染色体的位置等选择相应序列(可能不只一个),点击。

下面以点击第一个进入的画面为例。

你会发现这个页面直接就给出了引物序列,PCR之后的片段长度也是给了的(247bp)。

下面还有很多相关的信息……3.点击GeneBank Accession 后面的代码,进入下一个页面。

啊!前后引物都呈现在眼前了,还有反应体系和反应条件!其中 Primer A 是前引物序列,Primer B 则是后引物序列,并且给出了他们在 DNA 序列中的位置。

有兴趣的朋友可以在序列中找一下,是可以找到的,不过要注意,PCR 是双链扩增,在序列中可以直接找到的是 Primer A 的原序列和 Primer B的互补序列。

在步骤二里面我只点开了一个序列,继续打开其他的可能还会有对自己有用的引物,不过这要你自己慢慢发掘了。

这种寻找引物的方法有点投机取巧的味道,实用程度不是很高,但如果这里面恰好有你想 P 的片段的话,恭喜你,这些引物都是很成熟的引物,可以直接拿过来使用了。

如果想寻找引物,大家可以查阅相关论文,已经报道的引物我们为什么不用呢?!既省时间,可靠性又强。

如果这两种方法都不能找到你需要的引物的话,那就自己设计吧,建议使用 Primer 5 和Oligo。

引物设计的详细内容我在这里就不多说了,推荐两个帖子给大家看一下,第一个是本版版主 liuzeyi2002 发起的,内容很丰富,很值得学习,另一个则是我发的。

/bbs/post/view?bid=64&id=9517792&sty=1&tpg=1&age=0/bbs/post/view?bid=67&id=9523263&sty=1&tpg=1&age=0第四部分如何运用 BLAST 进行序列比对、检验引物特异性提到序列比对,绝大多数战友都会想到 BLAST,但 BLAST 的使用确实又是一个很大的难题,因为他的功能比较强悍,里面涉及到的知识比较多,而且比对结束后输出的结果参数(指标)又很多。

如果把 BLAST 的使用详细的都讲出来,我想我发帖发到明天也发不完,更何况我自己也不是完全懂得 BLAST 的使用。

所以我在这里也就“画龙点睛”——以比对核酸序列为例来给大家介绍一下 BLAST 的使用,也算是 BLAST 的入门课程吧。

请看帖的战友好好体会,如果你用心看,在看帖完毕之后 BLAST 的基本使用(包括其他序列的比对)应该没有问题了。

1.打开BLAST 页面,/BLAST/打开后如图所示:对上面这个页面进行一下必要的介绍:BLAST 的这个页面主体部分(左面)包括了三部分:BLAST Assembled Genomes、BasicBLAST、Specialized BLAST。

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