红外分光光度法

如果同时考虑溶液的浓度和液层的厚度都变化， 都影响物质对光的吸收，则上述两个定律可合并 为朗伯-比耳定律，得到：A=Kbc 此式为光吸收定律的数学表达式。
式中A称为吸光度； K是比例常数，与入射光的波长、 物质的性质和溶液的温度等因 素有关。
吸收系数 A=Kbc中比例常数K称为吸收系数； 物理意义：单位浓度的溶液液层厚度为1 cm 时，在一定波长下测得的吸光度。

紫外-可见分光光度计的类型
单光束分光光度计:
常用的有751G型、752型、721型、722型。 双光束分光光度计 ：
常用的有710型、730型、UV-210型等。 双波长分光光度计 ： 与单波长分光光度计的主要区别在于采用双单色 器。
T6新世Hale Waihona Puke Baidu紫外-可见分光光度计
三、红外分光光度法


紫外-可见分光光度计

仪器的基本组成部件
一般由光源、单色器、吸收池、检测器和信号显 示器（数据处理系统）五部分组成。
光源 单色器 吸收池 检测器 显示
光源 钨灯或卤钨灯——可见光源，325～2500nm 氢灯或氘灯——紫外光源，185～375nm 单色器（分光系统） 包括狭缝、透镜系统（准直镜）和色散元件
红外分光光度法（IR，分子振-转光谱）： 利用红外吸收光谱对物质进行分析的方 法，吸收光波长范围2.5—1000m，主要 用于已知结构的有机化合物鉴别（定性）
二、紫外-可见分光光度法
光的基本特性 物质对光的选择性吸收 吸收定律 紫外吸收光谱的应用 紫外-可见分光光度计

光的基本特性
单色光：单波长的光（由具有相同能量的光子 组成） 白光（太阳光）：由各种单色光组成的复合光 如果把适当颜色的两种光按一定强度比例混 合，也可成为白光，这两种颜色的光称为互 补色光。
绿 黄
580-600
500-580
青
490-500
橙
600-650
白光
青蓝
480-490
红
650-780
紫
400-450
-胡罗卜素
咖啡因
阿斯匹林
几种有机化合物 的分子吸收光谱 图
丙酮
吸收定律
朗伯（Lambert）和比耳（beer）分别于1760年 和1852年研究了光的吸收与有色溶液按液层的厚 度及溶液浓度的定量关系，奠定了分光光度分析 法的理论基础。
吸光度：单色光通过溶液时被吸收的程度，用A表示。
Lamber定律： A l Beer定律： A C
药品质量检测技术
第六章 仪器分析
学习目标
教学目标 1.掌握紫外分光光度法及可见分光光度法的 基本原理 2.掌握色谱法基本理论 3.了解分光光度法和色谱法在工业生产和科学研究 中的应用 知识要点 1.吸收光谱与物质结构的关系和光吸收基本定律 2.色谱法基本理论 技能要点 1.紫外-可见分光光度计的应用 2.GC、HPLC、TLC的基本应用
红外吸收产生的原理与条件 红外光谱法的应用 红外光谱仪

红外吸收产生的原理与条件
原理：当分子中某个基团的振动频率和红外光的 频率一致时，分子就吸收红外光的能量，从原来 的基态振动能级跃迁到能量较高的振动能级。物 质对红外光的吸收曲线称为红外吸收光谱。 根据试样的红外吸收光谱进行定性、定量分 析和确定分子结构等分析的方法，称为红外分光 光度法。

第一节 分光光度法
一、概述 二、紫外-可见分光光度法 三、红外分光光度法
一、概述
分光光度法： 测定被测物质在特定波长处或 一定波长范围内对光的吸收度，对物质进行 定性、定量分析的方法称为分光光度法。 主要包括:

紫外分光光度（电子光谱）法：吸收光波 长范围200～400nm，可用于物质的定性和 定量分析。 可见分光光度（电子光谱）法：吸收光波 长范围400～760nm，主要用于有色物质的 定性和定量分析。 二者合称为紫外-可见分光光度法即UV-ViS
吸收池（比色皿）
玻璃—能吸收紫外光，仅适用于可见光区； 石英—不能吸收紫外光，适用于紫外和 可见光区； 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致） 为了消除误差提高测量的准确度，两只比色 皿应配套使用
检测器（又叫接受器、光电转化器） 光电池 光电管 光电倍增管（检测弱光常用） 二极管阵列检测器
信号显示器 早期使用的是检流计、微安表、电位计、 数字电压表、自动记录仪等。 现代的分光光度计广泛采用数字电压表、 函数记录仪、示波器及自动记录型装置和数据 处理台（称为工作站）。
光是一种电磁波，具有波粒二象性。光的波 动性可用波长、频率、光速c、波数（cm1）等参数来描述： = c ； 波数 = 1/ = /c 光是由光子流组成，光子的能量： E=h=hc/ （Planck常数：h=6.626 × 10 -34 J × S ) 光的波长越短（频率越高），其能量越大。

摩尔吸收系数ε
当式中浓度c的单位为mol/L，液层厚度的单位 为cm时，则用另一符号ε表示，称为摩尔吸收 系数，它表示物质的浓度为1mol/L，液层厚度 为1cm时，溶液的吸光度。其单位为L/mol· cm。 这时朗伯-比耳定律就变为： A＝εbc
紫外吸收光谱的应用
鉴别：同一物质在相同条件下，测得的紫外可见吸收光谱应具有完全相同的特征。 对比吸收光谱特征参数 比较吸收度比值的一致性 对比吸收光谱的一致性 杂质检查：药物与杂质的吸收光谱有明显差别 含量测定：朗伯-比耳定律 对照品比较法 吸收系数法 计算分光光度法
蓝
450-480
光的互补色示意图
物质对光的选择性吸收
物质的颜色是基于物质对光有选择性吸收的结果 而物质呈现的颜色则是被物质吸收光的互补色。
物质的吸收光谱曲线： 将不同波长的光依次通过某一固定浓度和 厚度的有色溶液，分别测出它们对各种波 长光的吸收程度，以波长为横坐标，以吸 光度为纵坐标作图，画出曲线，此曲线即 称为该物质的光吸收曲线（或吸收光谱曲 线）

在药品检验的实际工作中，通常有两种表示方 法：
质量吸收系数a 当c的单位为g/L，b的单位为cm时，K用a表 示，称为质量吸收系数这时朗伯-比耳定律为： A＝abc。

在药品检验中经常使用的是百分吸收系数，用 （E1%1cm）表示。 物理意义:当吸光物质溶液浓度为1%(1g/100mL) ，液层 厚度为1cm时，在一定条件下的吸收度。