基因工程原理期末复习思考题
基因工程期末试题及答案
基因工程期末试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 基因工程是指利用现代生物技术手段对DNA进行操作和控制的一种技术。
2. 基因工程的主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
3. DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
4. 在基因工程中，限制性内切酶用于切割DNA分子，产生特定片段。
5. 基因工程可以产生转基因生物，通过对生物基因进行改造，使其具有特定的特性。
6. CRISPR/Cas9是一种常用的基因编辑工具，可以精确地修改基因组中的特定片段。
7. 基因工程在医学领域可以用于基因治疗，通过修复或替换异常基因，治疗遗传性疾病。
8. 在农业领域，基因工程可以用于改良作物，提高产量和抗病虫害能力。
9. PCR是一种常用的基因扩增技术，可以通过复制DNA片段来放大特定基因。
10. DNA梯度离心是基因工程中常用的分离DNA片段的方法。
二、问答题（每题10分，共30分）1. 请简要介绍基因工程的基本原理和主要方法。
基因工程的基本原理是通过对DNA进行操作和控制来改变生物的遗传性状。
其主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
基因克隆是通过将特定DNA片段放入载体中，然后转化到宿主细胞中，使重组DNA在宿主细胞中大量复制。
PCR是一种基因扩增技术，通过在DNA复制过程中加入特定引物，使特定基因片段在体外大量扩增。
DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
2. 什么是转基因生物？请举例说明。
转基因生物是指经过基因工程改造，将外源基因导入到目标生物体中，使其具有新的遗传性状的生物。
例如，将耐旱基因导入水稻，使其具有抗旱能力；将Bt毒素基因导入棉花，使其具有抗虫能力。
3. 基因工程在医学领域有哪些应用？举例说明。
基因工程在医学领域可以用于基因治疗、疫苗研发等。
例如，利用基因工程技术可以修复或替换患者体内异常基因，治疗遗传性疾病。
另外，基因工程也可以用于疫苗研发，通过基因工程技术将病原体的基因导入宿主细胞，产生病原体的抗原蛋白，从而刺激免疫系统产生抗体，用于预防传染病。
基因工程期末考试试题及答案
基因工程期末考试试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然突变B. 基因的人工重组C. 基因的自然选择D. 基因的自然淘汰答案：B2. 下列哪项不是基因工程常用的工具酶？A. 限制性内切酶B. DNA连接酶C. 反转录酶D. 聚合酶链反应酶答案：C3. 基因枪技术主要用于：A. 植物基因转化B. 动物基因转化C. 微生物基因转化D. 病毒基因转化答案：A二、填空题1. 基因工程中，常用的载体有________、________和________。
答案：质粒、病毒、人工染色体2. 基因工程中，________是基因表达的调控元件。
答案：启动子三、简答题1. 请简述基因工程的基本步骤。
答案：基因工程的基本步骤包括：目标基因的获取、目标基因与载体的连接、转化宿主细胞、筛选含有重组DNA的宿主细胞、目的基因的表达和检测。
2. 基因工程在医学领域的应用有哪些？答案：基因工程在医学领域的应用包括：生产重组蛋白质药物、基因治疗、疾病诊断、疫苗开发等。
四、论述题1. 论述基因工程对农业生产的影响。
答案：基因工程对农业生产的影响主要体现在以下几个方面：提高作物的抗病虫能力、增强作物的抗逆性、改善作物的营养价值、提高作物的产量和质量、促进农业可持续发展。
2. 基因工程在环境保护中的应用。
答案：基因工程在环境保护中的应用主要包括：开发生物修复技术，用于污染土壤和水体的净化；利用基因工程改造微生物，用于处理工业废水和废气；通过基因工程改良植物，用于重金属污染土壤的修复等。
五、案例分析题1. 某公司利用基因工程技术成功开发了一种抗虫棉，该抗虫棉能够减少农药的使用，降低农业生产成本。
请分析该技术可能带来的社会、经济和环境效益。
答案：该技术可能带来的社会效益包括提高农民的生活质量，减少因农药使用带来的健康风险。
经济效益包括降低农药成本，提高作物产量，增加农民收入。
环境效益包括减少农药对环境的污染，保护生态平衡，促进农业的可持续发展。
基因工程思考题
《基因工程》思考题第一章绪论1. 简述基因操作、基因重组和基因工程的关系。
2. 为什么说基因工程是生物学和遗传学发展的必然产物？3. 简述基因的结构组成对基因操作的影响。
4. 谈谈你对gene的认识，并简要说说gene概念的演变过程.5. 如何理解gene及其产物的共线性和非共线性？6. 试从理论和技术两个方面谈Gene Engineering诞生的基础.第二章基因工程的基本原理与支撑技术1. 试比较原核基因组与真核基因组的结构和功能特点2. 试比较原核基因和真核基因表达调控的主要方式和特点3. 分析比较琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳的异同点？4. 琼脂糖凝胶电泳中，简述影响DNA在凝胶中迁移速率的因素.5. 小量制备质粒DNA，用质粒中特定的酶切发现切割不动，试分析可能原因及克服方法？6. 在基因操作实践中有哪些检测核酸和蛋白质分子量的常规方法？7. 印迹分子杂交有哪些种类，并说明在什么情况下需要使用这些方法。
8. 核酸分子的标记有哪些方法，各有何特点？9. 由mRNA反转录成cDNA和DNA的PCR扩增是两个完全不同的酶催化反应过程，如何将两个过程联系在一起，实现由mRNA起始扩增出DNA？10. Primer是PCR反应体系的四大要素之一，PCR的许多应用都是通过primer设计来实现的，请问primer设计的一般原则是什么？11. 在PCR反应的后期，或者循环次数过多时，反应体系中就会出现一种所谓的平台效应（Plateau effect），请问什么叫Plateau effect？产生Plateau effect的原因有哪些？12. 在对PCR产物进行电泳检测时，有时会出现拖带或非特异性扩增条带，请分析其原因？如果检测结果是看不到DNA带或DNA带很弱，那又是为什么？13. 通过双向蛋白质电泳发现某蛋白质与某植物的一种表型密切相关，若要利用编码该蛋白质的基因来转基因植物，试问如何分离得到该基因？14. 现有一序列已知的DNA片段和一序列未知的DNA片段，你分别如何设计测序策略？15. 设想一下在什么情况下你希望知道一个基因或一段DNA的序列？16. 什么叫有性PCR？有性PCR导致DNA重组的分子机制跟体内重组有何异同？17. Explain the PCR. List the steps in carrying it out; include all the components and special conditions, explaining why each one is used. Illustrate the process with appropriate labels. Use the correct scientific terminology in your explanation.第三章基因工程操作的基本条件1. 试指出影响限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）切割效率的因素.2. 在酶切缓冲液中，一般需加入BSA，请问加入BSA的作用是什么？并简述其原理？3. 何谓Star activity？简述Star activity的影响因素及克服方法.4. 某DNA序列中存在DpnI酶切位点，以此DNA为模板，在体外合成DNA序列，当用该酶进行酶切时，发现切割不动，试分析可能原因？5. 天然的质粒载体（plasmid vectors）通常需经改造后才能应用，包括去除不必要的片段，引入多克隆位点等。
基因工程课后思考题
基因工程原理课后思考题第一篇：基因操作原理第一章：基因工程概述P（12）：1 简述基因操作，基因重组和基因工程的关系？2 为什么说基因工程是生物学和遗传学发展的必然产物？3 简述基因的结构组成对基因操作的影响？第二章：分子克隆工具酶P（38）：1 限制性内切酶可分为哪几种类型，各有何特点？2 哪些酶可用于DNA片段的末端标记？3 DNA聚合酶有哪些类型，各有什么活性？4 在分子克隆中所用的酶主要作用于哪些底物？第三章：分子克隆载体P（69）：1 作为一个最基本载体，它必须具备哪些功能元件？2 何为α-互补，在载体构建中有何作用？3 请简要描述λ噬菌体溶原状态和裂解循环的基因调控模式及其在构建载体中的作用？4 简述M13KO7辅助噬菌体的遗传学特性和生物学功能及其在制备单链DNA中的作用？第四章：人工染色体载体P（84）：1 大容量克隆载体有哪些种类，各有何特点？2 简述用Y AC克隆载体构建基因文库的原理？3 BAC克隆载体有哪些显著的优点？第六章：基因工程操作中大分子的分离和分析P（116）：1 在基因工程操作中有哪些检测核酸和蛋白质相对分子量的常规方法？2 印迹分子杂交有哪些种类，并说明在什么情况下需要使用这些方法？3 核酸分子的标记有哪些方法，各有何特点？4 DNA转化有哪些方法，各有何优点？第七章：基因芯片技术P（132）：1 基因芯片技术与传统的Northern杂交技术相比有何异同？2 简述DNA在芯片上的固定原理及基因芯片的制作过程？3 简述mRNA反转录标记方法的类型及特点？4 结合自己的专业试述cDNA芯片技术的用途及前景？第八章：PCR技术及其应用P（154）：1 如何理解PCR扩增的原理和过程？2 通过PCR技术扩增已知序列侧翼的未知序列的关键问题是什么？用PCR作染色体步查有何特点？3 PCR产物的克隆与一般的DNA片段克隆有何异同点？4 为什么在定量PCR中要引入Ct值的概念？第十章：DNA诱变P（186）：1 DNA诱变有哪些种类，各有何特点？2 什么叫有性PCR？有性PCR导致DNA重组的分子机制与体内重组有何异同？3 简述Kunkel定点诱变的基本原理？第十一章：DNA文库的构建和目的基因的筛选P（209）：1 基因组DNA文库有哪些类型？其相关的特点是什么？2 构建大片段基因组文库过程中需要注意哪些问题？3 均一化cDNA文库构建的基本原理是什么？4 扣除cDNA文库构建的基本原理是什么？主要用途是什么?5全长cDNA文库构建的基本原理和基本类型是什么？6 基因克隆筛选的几种方法和相关技术特征有哪些？第十二章：基因组研究技术P（225）：1 简要叙述真核生物基因组物理图的构建方法和原理？2 鸟枪法和克隆重叠群法这两种基因组测序法各自有何优缺点，适用范围有何不同？3 如何对基因组测序获得的序列进行注解以确定哪些序列为编码序列？对这些预测的基因如何进行功能鉴定？4 讨论基因组研究作为平台技术在基因工程中的应用?5基因组工程利用了哪些技术手段？第二篇：基因工程应用第十三章：植物基因工程P（225）：1 什么叫植物基因工程？试比较植物基因工程与常规植物育种的异同点？2 试阐述植物基因工程快速发展的原因？3 简述植物基因工程的方法及其原理和优缺点？4 转基因植株的鉴定方法有哪些，作为一组完整的转基因植株鉴定的数据至少包含哪些参数？5植物基因工程的发展向世界展现出了一幅壮丽画面，试进行阐述？第十四章：动物基因工程P（272）：1 简述反转录病毒在动物基因工程中的作用？2 试述基因敲除与基因敲入的区别？3 质粒载体和病毒载体有何异同？4 试述转基因动物的鉴定方法？5谈谈你对转基因动物生物安全性的看法？6 真核细胞转染有哪些方法？7 简述转基因小鼠的制备过程？。
基因工程原理期末复习思考题
《医用基因工程》复习思考题第一章基因和基因组及基因工程的概念一、名词概念①移动基因（插入序列；转位子）；②断裂基因；③RNA剪辑；④内含子（间隔序列）与表达子；⑤重叠基因；⑥重复序列；⑦假基因；⑧启动子与终止子；⑨起始位点、终止位点。
二、讨论题1.什么叫基因何谓基因的新概念基因的主要功能是什么2. 一种基因一种酶的提法妥否？3.基因密码子三联体间是否存在着逗号？4.基因表达的产物中，氨基酸序列相同时，基因密码子是否一定相同为什么5.6.何谓转位子和转位作用转位的后果如何7.8.基因中最小的突变单位和重组单位是什么？9.基因工程应包括哪些内容何谓基因工程的四大里程碑和三大技术发明10.11.真核细胞基因组中常有内含子存在，能否在原核细胞获得表达能，为什么不能，为什么第二章基因工程中常用的工具酶1.什么是限制性核酸内切酶?2.什么是R/M现象如何解释3.4. II型核酸内切酶的基本特点有哪些？5.影响II型核酸内切酶活性的因素有哪些如何克服和避免这些不利因素6.7. DNA连接酶有哪两类有何不同8.9.甲基化酶有哪两类有何应用价值10.11.什么叫同尾酶、同裂酶在基因工程中有何应用价值12.13.平末端连接的方法有哪些？（图示）14. Klenow酶的特性和用途有哪些？举例说明。
15.反转录酶的特性有哪些有何应用价值16.17.列举碱性磷酸酶BAP/CAP的应用之一。
18.列举末端核甘酸序列转移酶的应用之一。
19.质粒单酶切点的基因连接如何降低本底和防止自我环化和提高连接效率？20.基因片段与载体的平末端连接的方法有哪些？21.用寡核甘酸和衔接物DNA的短片段连接时为使基因内部的切点保护，常用何种办法解决？第三章基因克隆载体1.基因工程常用的载体有哪5种其共同特性如何2.3.什么是质粒质粒分哪几种有哪两种复制类型，质粒的分子生物学特性有哪些4.质粒存在的三种形式是什么？5,分离质粒的基本步骤有哪些？6.分离纯化质粒的方法有哪几种？简述CsCl密度梯度（浮密度）分离法、碱变性法的原理，如何选择合适的分离方法？7.作为理想质粒载体的基本条件有哪些？8.什么叫插入失活，举例说明之。
基因工程期末复习
这是我整理的老师布置的思考题，不一定齐全也不一定正确，不过可以选择性地参考下。
1、DNA提取常见问题，原因分析及其对策问题一：DNA样品不纯，抑制后续酶解和PCR反应。
原因：1.DNA中含有蛋白、多糖、多酚类杂质2.DNA在溶解前，有酒精残留，酒精抑制后续酶解反应3.DNA中残留有金属离子对策：1.重新纯化DNA，去除蛋白、多糖、多酚等杂质（具体方法见前）2.重新沉淀DNA,让酒精充分挥发3.增加70%乙醇洗涤的次数（2-3次）问题二：DNA降解。
原因：1.材料不新鲜或反复冻融2.未很好抑制内源核酸酶的活性3.提取过程操作过于剧烈，DNA被机械打断4.外源核酸酶污染5.反复冻融对策：1.尽量取新鲜材料，低温保存材料避免反复冻融2.液氮研磨或匀浆组织后，应在解冻前加入裂解缓冲液3.在提取内源核酸酶含量丰富的材料的DNA时，可增加裂解液中螯合剂的含量4.细胞裂解后的后续操作应尽量轻柔5.所有试剂用无菌水配制，耗材经高温灭菌6.将DNA分装保存于缓冲液中，避免反复冻融问题三：DNA提取量少。
原因：1.实验材料不佳或量少2.破壁或裂解不充分3.沉淀不完全4.洗涤时DNA丢失对策：1.尽量选用新鲜（幼嫩）的材料2.动植物要匀浆研磨充分；G+菌、酵母裂解前先用生物酶或机械方式破壁3.高温裂解时，时间适当延长（对于动物细胞、细菌可增加PK的用量）4.低温沉淀，延长沉淀时间5.加辅助物，促进沉淀6.洗涤时，最好用枪头将洗涤液吸出，勿倾倒2、猪肝脏总RNA的提取？ RNA提取常见问题，原因分析及其对策问题一：RNA的降解（1）新鲜细胞或组织的RNA降解RNA降解：1.裂解液的质量2.外源RNase的污染3.裂解液的用量不足4.组织裂解不充分5.另外某些富含内源酶的样品（如脾脏，胸腺等），很难避免RNA的降解。
建议在液氮条件下将组织碾碎，并且匀浆时使用更多裂解液。
（2）冷冻样品的RNA降解1.样品取材后应立即置于液氮中速冻，然后可以移至-70℃冰箱保存。
基因工程期末复习题(含答案)
一、填空题1、基因文库的构建通常采用cDNA 法和鸟枪法两种方法。
2 、限制性内切酶识别序列的结构普通为具有 180 度旋转对称的回文结构。
3、DNA 连接酶主要有两种：T4 噬菌体和大肠杆菌 DAN 连接酶。
4、根据质粒在宿主细胞中所含拷贝数的多少，可以把质粒分为两种类型：密切型质粒和松弛型质粒。
5、原核受体细胞通常包括大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和蓝细菌。
6、原核生物或者低等真核生物，将外源重组 DNA 导入受体细胞的方法有借助生物载体的转化、转染、转导。
7、对细菌细胞进行转化的关键是细胞处于感受态。
8、基因工程是_____1970’____年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
9、部份酶切可采取的措施有：(1)减少酶量； (2)缩短反应时间； (3)增大反应体积等。
10、第一个分离的限制性内切核酸酶是EcoK；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是EcoRl。
11、DNA 聚合酶 I 的 Klenow 大片段是用枯草杆菌蛋白酶切割 DNA 聚合酶I 得到的份子量为 76kDa 的大片段，具有两种酶活性：(1)5'-3'合成酶的活性； (2)3'-5'外切核酸酶的活性。
12、为了防止 DNA 的自身环化，可用_碱性磷酸酶__去双链 DNA_ 5’端的磷酸基团_。
13、测序酶是修饰了的 T7 DNA 聚合酶，它惟独5'-3'合成酶的活性，而没有 3'-5' 外切酶的活性。
14、切口移位(nick translation)法标记 DNA 的基本原理在于利用 DNA 聚合酶 I 的5'一 3'合成酶和 5'一 3'合成酶的作用。
15、欲将某一具有突出单链末端的双链 DNA 份子转变成平末端的双链形式，通常可采用S1 核酸酶切割或者DNA 聚合酶补平。
16、反转录酶除了催化 DNA 的合成外，还具有核酸水解酶 H 的作用，可以将DNA-RNA 杂种双链中的 RNA 水解掉。
基因工程复习思考题带答案(中国药科大学生物工程所有课件)
第一章基因工程复习思考题一．专业符号Tet r四环素抗性 R/M体系寄主控制的限制和修饰现象Amp r氨苄青霉素抗性 pBR322 质粒载体M13 单链噬菌体载体 cosmid 科斯质粒IPTG 异丙基-β-D硫代半乳糖苷 DNA ligase DNA连接酶EcoRI 一种限制酶 host 宿主Plasmid 质粒 Ori 复制起始位点vector 载体 cDNA 互补DNAsouthern blot DNA印迹转移技术 MCS 多克隆位点二．名词解释生物工程bioengineering：利用生物有机体（包括微生物和动、植物）或其组成部分（包括器官、组织、细胞、细胞器）和组成成分（包括DNA、RNA、蛋白质、酶、多糖、抗体等），形成新的技术手段来发展新产品和新工艺的一种技术体系。
也是采用先进生物学和工程学技术，有目的、有计划定向加工制造生物产品的一个新兴技术领域。
基因工程：基因工程是指按照人们的意愿，在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其他载体分子，构成遗传物质的新组合，并使之转入到原先没有这类分子的宿主细胞内，形成能持续稳定繁殖的新物种。
其目的是为人类提供有用产品及服务。
R/M体系：大多数的细菌对于噬菌体的感染都存在一些功能性障碍，即所谓的寄主控制的限制(restriction)和修饰(modification)现象，简称R/M体系。
回文结构：核苷酸顺序通常呈双重旋转对称结构，即呈回文结构。
如：同裂酶：识别顺序与切割方式均相同者，谓之同裂酶。
同尾酶：来源各异，识别的靶子序列也各不相同，但都产生出相同的粘性末端，称为同尾酶。
同聚物加尾法：利用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)转移核苷酸的特殊功能，将同种核苷酸（dNTP)加到DNA 分子单链延伸末端的3‘-OH上。
如果在目的基因两侧加polydA，则在载体两侧加polydT。
衔接物：指用化学方法合成的一段由10~12个核苷酸组成，具有一个或数个限制酶识别位点的平末端的双链寡核苷酸段片断。
基因工程思考题答案
基因工程思考㼵答案一、填空题1．702．(1)分子水平上的操作；(2)细胞水平上的表达3．克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择4．限制性酶切图谱5．属名的第一个字母；种名的前两个字母；株名6．(1)减少酶量；(2)缩短反应时间；(3)增大反应体积7．EcoK；EcoRl8．GGCC；异源同工酶（同裂酶）9．枯草杆菌蛋白酶；(1)5'-3'合成酶的活性；(2)3'-5'外切核酸酶10．碱性磷酸酶；5’端的磷酸基团11．Ca2+13．DNA聚合酶I：5'一3'外切核酸酶；5'一3'合成酶14．S1核酸酶切割；DNA聚合酶补平15．核酸水解酶H；RNA16．质粒DNA；病毒DNA；质粒和病毒DNA杂合体17．复制区：含有复制起点；选择标记：主要是抗性基因；克隆位点：便于外源DNA的插入18．质粒消除(或治愈)19，pMBl；pSCl01；pSF2124(R质粒)20．1000kb；300kb21. 严紧22．pBR322和M13；pMBl；转座子23．它在细菌中能够大量繁殖，这样有利于外源DNA的扩增；对某些噬菌体(如λ噬菌)的遗传结构和功能研究得比较清楚，其大肠杆菌宿主系统的遗传也研究得比较详尽24．没有合适的限制性内切核酸酶识别位点；选择标记25．质粒；λ噬菌体；4526．(1)分子量大，(2)酶的多切点，(3)无选择标记27．复制区；IG区28．75％～105％29．螯合Mg2+离子，抑制核酸酶的活性30．中和DNA分子的负电荷，增加DNA分子间的凝聚力31．(1)合成探针；(2)合成cDNA；(3)用于PCR反应；(4)进行序列分析32．T—载体33．第二链合成时形成的发夹环34．乙醇使DNA分子脱水35．(1)保持正确的可读框(2)能够使其转录的启动子(3)具有翻译的起始和终止信号36．接受外源DNA的生理状态37．(1)黏性末端连接；(2)平末端连接；(3)同聚物接尾连接；(4)接头连接法38．基因组DNA克隆；基因组DNA文库39．cDNA克隆；cDNA文库40．聚合酶链式反应(PCR)41．0︒C；42︒C42．(1)遗传学方法；(2)物理筛选法；(3)核酸杂交法；(4)表达产物分析法43．插入外源片段的种类较多，大小又极为相似的重组体的筛选44．基因组DNA；cDNA45．Klenow酶填补的方法；T4DNA聚合酶46．(1)用M13噬菌体载体合成单链DNA探针；(2)从mRNA反转录合成单链cDNA探针；(3)用不对称PCR合成单链DNA探针47．外源基因是否进行了转录48．两种不同的细胞群体能够表达不同的基因，即在一个群体中能够表达一些基因，而在另一个细胞群体中不能表达这些基因49．Northern印迹50．Southern印迹51．5’→3’合成酶；3’ →5’外切核酸酶52．(1)克隆的是完整的基因；(2)使用的是表达载体；(3)不含内含子53．(1)印迹的对象不同：Northern是RNA，Southern是DNA；(2)电泳条件不同，前者是变性条件，后者是非变性条件54．(1)抗体能够被吸附到固体支持物上；(2)同一个抗原可以同几种抗体结合；(3)抗体能够被标记二、选择题(单选或多选)1．c；2．c；3．b；4．b 5．b，C，d，e；6．c；7．b；8．d；9．d；10．B；11．a；12．a；13．d；14．b 15．d；16．c；17．a，b；18．a；19．c；20．d；21．c；22．C；23．b；24．C；25．d；26．a，C，d；27．b；28．c；29．b；30．a；31．c；32．a,c,d,e，33．a，b，c；34．b；35．c；36．c；37．d；38．b；39．c；40．a；41．c；42．a，b，c；43．b；44．b；45．d；46．a；47．a；48．c；49．c；50．b；51．c；52．c；53．b；54．a,c,d；55．a；56．b；57．a，b；58．c；59．a；60．d；61．b；62．c；三、简答题1．答：Sanger DNA测序法是建立在两个基本原理之上：(1)核酸是依赖于模板在聚合酶的作用下由5'端向3'端聚合(DNA聚合酶参与了细菌修复DNA合成过程)；(2)可延伸的引物必须能提供游离的3'羟基末端，双脱氧核苷酸由于缺少游离的3'羟基末端，因此会终止聚合反应的进行。
（完整版）基因工程思考题答案--删减后学习
（完整版）基因工程思考题答案--删减后学习第二章1. 名词解释（1）顺反子(cistron)：基因所对应的一段核苷酸序列被称为顺反子（cistron），一个顺反子编码一种完整的多肽链。
它是遗传的功能单位。
（3）转位因子（transposable elements）：是指可以从染色体基因组上的位置转移到另一个位置，甚至在不同的染色体之间跃迁的基因成分。
（4）基因组（genome）：细胞中，一套完整单倍体的遗传物质的总合。
（5）启动子（promoter）：是DNA链上一段能与RNA聚合酶结合并能起始转录的序列，其大小不等，具有转录目标基因的mRNA 的功能。
启动子是基因表达不可缺少的重要元件。
（6）基因（gene），基因是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。
（7）顺反子(cistron)：基因所对应的一段核苷酸序列被称为顺反子（cistron），一个顺反子编码一种完整的多肽链。
它是遗传的功能单位。
（8）终止子（terminator），在基因3 端下游外侧与终止密码子相邻的一段非编码的核苷酸短序列，具有终止转录的功能，叫做终止子（terminator）。
（9）断裂基因（split gene），真核生物的结构基因是不连续的，编码氨基酸的序列被非编码序列所打断，因而被称为断裂基因（split gene）。
在编码序列之间的序列称为内含子（intron），被分隔开的编码序列称为外显子（exon）。
（10）顺式作用元件（cis-acting elements），指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的DNA序列。
包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。
（11）反式作用因子（trans-acting elements），可结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子称为反式作用因子（trans-acting elements）。
基因工程思考题答案
基因工程思考题答案【篇一：基因工程习题及答案】选题1. 在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（b）a ． i 类限制酶 b. ii 类限制酶 c. iii 类限制酶 d. 核酸内切酶e. rnaase2. 下列关于同裂酶的叙述错误的是 (b )a. 是从不同菌种分离到的不同的酶 , 也称异源同工酶。
b. 它们的识别序列完全相同。
c. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。
d. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。
e. 两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。
3. 多数限制酶消化 dna 的最佳温度是（a）a. 37 ℃b.30 ℃c.25 ℃d.16 ℃e.33 ℃4. 下列关于限制酶的叙述错误的是 (b)a. i 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp 和 s- 腺苷蛋氨酸。
b. ii 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp 。
c. iii 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp ， s- 腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。
d. i 、 iii 类限制酶对 dna 有切割和甲基化活性， ii 类限制酶对dna 只有切割活性而无甲基化活性。
e.ii 类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。
5. 如果一个限制酶识别长度为 6bp , 则其在 dna 上识别 6bp 的切割概率为 ( d )a. 1/44b. 1/66c. 1/64d.1/46e. 1/1066. 多数 ii 类限制酶反应最适 ph 是 (c )a. ph:2-4b. ph:4-6c. ph:6-8d. ph:8-10e. ph:4-107. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( d)a.限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。
b.许多限制酶对线性 dna 和超螺旋 dna 底物的切割活性是有明显差异的。
c.有些限制酶对同一dna 底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。
《基因工程》思考题
基因工程》双语课每章思考题第一章1什么是基因工程？2基因工程的操作步骤有哪些？3基因工程的应用范围？基因操作可以应用在哪些领域？4什么是GMO?5在基因工程领域有重要贡献的科学家有哪些？试例举三位及其贡献。
6基因工程的三个发展阶段？第二章1 DNA、RNA勺主要区别？2 DNA (or RNA )的组成？3 DNA变性概念及诱发因素。
4中心法则的主要内容。
5遗传密码子的概念。
6基因的概念、类型。
7基因的表达。
8原(真)核生物基因的结构及区别。
9遗传物质及其相互联系。
10某研究小组对一个克隆的DNA序列(非模板)进行测序，其碱基顺序(假定)如下：5* ・CCGGCGGCAATGGCGGCGTCGGCGACCCAGGAGGCCGACTAA'CGGACCG ・3(1 )请写出模板链的碱基顺序及转录的碱基序列(2) 翻译从何处开始、何处结束(3) 可能编码的氨基酸序列(4) 如果基因突变，那部分区段变异会影响该基因编码和蛋白质功能(密码子见下表)1 DNA提取的三个基本条件。
2在DNA提取中，酚/仿提抽的目的是什么?3纯化DNA或RNA时，通常将DNA溶解在哪种物质中，为什么?4利用紫外分光光度比值来确定提取的DNA或RNA纯度时：当A26O=1时，相当于』有g?ml dsDNA或卩g?ml ddDNA'当AQ60/A280=1 .8时，为较纯的，当A260/ A 280 =2.0时，为纯当A260/ A 280>2.0有杂质，当A260/ A 280<1 .8有残留的物质5请简述Southern杂交的原理和过程6 请简述Southern Blotting、Northern Blotting 和Western Blotting 的区别？7请简述核酸电泳的原理。
第四章1限制性核酸内切酶三种类型的特点？为什么基因工程中需选II型酶。
2 Type II restriction endonucleases 的命名原则。
基因工程复习资料
第一章基因工程概述一、名词解释基因、基因操作、基因工程、重组DNA技术基因：是编码产生蛋白质或RNA等具有特定功能产物的一段具有遗传效应的DNA片段，是控制生物性状的基本遗传单位。
基因操作：是指对基因进行分离、分析、改造、重组、转移、检测和表达等操作的简称。
基因工程：专指为实践应用而进行的基因重组事件，具体是指通过基因操作来定向改变或修饰生物体，并具有明确应用目的的活动。
重组DNA技术：又称基因工程。
二、思考题1、简述基因工程操作的基本步骤。
（1）获得目的基因（2）目的基因与克隆载体连接，形成重组子（3）将重组子转化受体细胞，获得转化子（4）转化子检测和筛选（5）目的基因在受体中被表达，获得所需的遗传性状或产物2、简述基因工程操作的理论依据。
（1）基因具有相同的物质基础（2）基因是可切割和粘合的（3）基因是可转移的（4）多肽与基因之间有对应关系（5）遗传密码通用（6）基因可以复制遗传3、简述基因工程诞生理论上的三大发现和技术上的三大发明。
理论三大发现：遗传物质是DNA（基因） DNA的双螺旋结构和半保留复制中心法则和氨基酸技术三大发明：限制性核酸内切酶 DNA连接酶 DNA聚合酶第二章基因工程的工具酶一、名词解释限制性内切酶、同裂酶、同尾酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、逆转录酶限制性内切酶：是一类能识别双链DNA分子内部某种特殊的核苷酸序列，并使每个核酸链上特定部位相邻的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开的一类核酸内切酶。
同裂酶：指来源不同，但识别相同靶序列，切割产生不同或相同末端的限制性内切酶。
即不同来源的限制性内切酶可切割相同的序列。
同尾酶：指来源各异，识别靶序列各不相同，但切割产生相同末端的限制性内切酶。
同尾酶切割DNA得到的产物可进行互补连接。
DNA连接酶：催化DNA片段两侧（相邻）核苷酸的3'羟基和5'磷酸基之间形成磷酸二酯键，使断开的DNA连接起来的酶。
DNA聚合酶：催化DNA合成的酶逆转录酶：依赖RNA的DNA聚合酶二、思考题1、简述限制性内切酶命名的基本原则。
基因工程总复习题答案
基因工程总复习题答案1. 基因工程的定义是什么？基因工程是指在体外将目标基因通过人工“剪切”和“拼接”等方法，按照预先设计的蓝图，对生物遗传信息进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物或创造出新的生物类型。
2. 基因工程的基本操作步骤包括哪些？基因工程的基本操作步骤包括：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞以及目的基因的检测与鉴定。
3. 目的基因的获取方法有哪些？目的基因的获取方法主要有：从基因文库中获取、利用PCR技术扩增、人工合成。
4. 基因表达载体的组成包括哪些部分？基因表达载体的组成包括：目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点。
5. 常用的基因工程受体细胞有哪些？常用的基因工程受体细胞有：大肠杆菌、酵母菌、动物细胞和植物细胞。
6. 基因工程在农业上的应用有哪些？基因工程在农业上的应用包括：抗虫转基因植物、抗病转基因植物、耐除草剂转基因植物和抗旱转基因植物等。
7. 基因工程在医学上的应用有哪些？基因工程在医学上的应用包括：基因治疗、生产重组蛋白药物、生产疫苗和基因诊断等。
8. 基因工程可能带来的伦理问题有哪些？基因工程可能带来的伦理问题包括：基因歧视、基因隐私、基因改造生物的安全性和生物多样性的保护等。
9. 基因工程的安全性评价包括哪些方面？基因工程的安全性评价包括：食品安全性评价、环境安全性评价和生态安全性评价。
10. 基因工程的监管措施有哪些？基因工程的监管措施包括：制定相关法律法规、加强伦理审查、建立风险评估体系和实施严格的监管制度。
基因工程原理与技术思考题
基因工程原理与技术思考题基因工程，这玩意儿听起来就像是科幻小说里的东西，但其实它已经悄悄地走进了我们的生活。
想象一下，如果我们能够通过改变植物的基因来让它们长得更快、更耐旱，或者让农作物含有更多的营养成分，那会怎样？这不仅仅是可能，而且已经在某些地方实现了。
举个例子，科学家们曾经通过基因工程培育出一种抗虫害的棉花。
这种棉花的基因里被植入了一种来自细菌的基因，这种基因能够产生一种对某些害虫有毒的蛋白质。
这样一来，棉花就自己有了“保镖”，不需要太多农药就能生长得很好。
这不仅减少了农药的使用，还降低了成本，对环境也有好处。
但是，基因工程并不是没有争议的。
有些人担心，我们这样随意地改变生物的基因，会不会对生态系统造成不可预知的影响。
比如，那些抗虫害的棉花会不会对其他非目标昆虫产生影响？会不会通过花粉传播，影响到其他植物？这些都是需要考虑的问题。
而且，基因工程在人类医疗上的应用也让人既兴奋又害怕。
想想看，如果我们能够通过基因编辑技术，比如CRISPR-Cas9，来修正那些导致疾病的基因突变，那是不是就能治愈很多遗传性疾病？这听起来像是打开了潘多拉的盒子，但同时也像是找到了一把打开健康之门的钥匙。
不过，技术的进步总是伴随着伦理的考量。
基因编辑技术如果用在人类胚胎上，那产生的孩子会带有我们设计的特征。
这不仅涉及到“设计婴儿”的伦理问题，还可能引发社会不平等的问题。
毕竟，不是每个人都能负担得起这样的技术，这可能会导致基因上的“贫富差距”。
所以，基因工程这把双刃剑，用得好可以造福人类，用不好可能会带来灾难。
科学家们在研究的时候，必须小心翼翼，确保每一步都是在严格的伦理审查和监管下进行的。
同时，公众也需要对这些技术有足够的了解，这样我们才能共同做出明智的决策。
基因工程的未来是光明的，但道路是曲折的。
我们需要更多的研究，更多的讨论，更多的透明度，才能确保这项技术能够安全、公正地服务于人类。
毕竟，我们都是这个星球上的一份子，我们的未来紧密相连。
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《医用基因工程》复习思考题
第一章基因和基因组及基因工程的概念
一、名词概念
①移动基因(插入序列；转位子)；②断裂基因；③RNA剪辑；
④含子(间隔序列)与表达子；⑤重叠基因；⑥重复序列；⑦假基因；⑧启动子与终止子；⑨起始位点、终止位点。
二、讨论题
1.什么叫基因?何谓基因的新概念?基因的主要功能是什么?
2.一种基因一种酶的提法妥否？
3.基因密码子三联体间是否存在着逗号？
4.基因表达的产物中，氨基酸序列相同时，基因密码子是否一定相同？为什么？
5.何谓转位子和转位作用?转位的后果如何?
6.基因中最小的突变单位和重组单位是什么？
7.基因工程应包括哪些容？何谓基因工程的四大里程碑和三大技术发明?
8.真核细胞基因组中常有含子存在，能否在原核细胞获得表达？能，为什么？不能，为什么？
第二章基因工程中常用的工具酶
1.什么是限制性核酸切酶？
2.什么是R/M现象？如何解释？
3.II型核酸切酶的基本特点有哪些？
4.影响II型核酸切酶活性的因素有哪些？如何克服和避免这些
不利因素？
5.DNA连接酶有哪两类？有何不同？
6.甲基化酶有哪两类？有何应用价值？
7.什么叫同尾酶、同裂酶？在基因工程中有何应用价值？
8.平末端连接的方法有哪些？(图示)
9.Klenow酶的特性和用途有哪些？举例说明。
10.反转录酶的特性有哪些？有何应用价值？
11.列举碱性磷酸酶BAP/CAP的应用之一。
12.列举末端核苷酸序列转移酶的应用之一。
13.质粒单酶切点的基因连接如何降低本底和防止自我环化和提高连接效率？
14.基因片段与载体的平末端连接的方法有哪些？
15.用寡核苷酸和衔接物DNA的短片段连接时为使基因部的切点保护，常用何种办法解决？
第三章基因克隆载体
1.基因工程常用的载体有哪5种？其共同特性如何？
2.什么是质粒？质粒分哪几种？有哪两种复制类型，质粒的分子生物学特性有哪些？
3.质粒存在的三种形式是什么？
4.分离质粒的基本步骤有哪些？
5.分离纯化质粒的方法有哪几种？简述CsCl密度梯度(浮密度)分离法、碱变性法的原理，如何选择合适的分离方法？
6.作为理想质粒载体的基本条件有哪些？
7.什么叫插入失活，举例说明之。
8.构建pBR322质粒载体的亲本质粒有哪些？
9.什么叫插入型和替换型噬菌体载体?插入型和替换型入噬菌体
Cosmid容纳外源DNA的最大容量是多少？
10.将外源性DNA克隆到β-半乳糖苷酶失活的插入型入噬菌体上后，如何筛选重组噬菌体？
11.简述细线状噬菌体M13在基因工程中的应用。
12.什么是Cos质粒、Cos位点和Cos细胞？
13.什么叫cccDNA和ocDNA？
14.酶母载体有哪三种类型？它们构成的成分各有哪些？什么叫穿梭载体？
15.改造后的SV40载体有哪几种类型？各举例说明之。
第四章目的基因的分离和克隆
一、名词解释
①基因组文库；②cDNA文库。
二、问答
1.目的基因克隆时常用哪些方法分离和获得基因？
2.构建基因组库的意义及构建过程？
3.构建cDNA文库的意义、常用载体及构建过程？
4.目的基因与载体的连接方法有哪些？各有哪些优点？基因重组时在两个酶切位点中其中有一个不相匹配时，你如何解决连接问题？
5.试述T-A克隆法的原理和用途？
第五章重组DNA导入宿主细胞与转化子的筛选
一、名词解释
①转化；②转染；③转导；④α-互补。
二、问答
1.重组DNA向宿主细胞的导入方法有哪些？
2.影响CaCl2转化率的因素有那些？
3.如何利用抗性标记基因筛选阳性克隆？
4.如何利用LacZ标记基因筛选阳性克隆？
5.如何从所克隆到的基因重组载体中鉴定目的基因的存在和正确性
第六章外源基因在大肠杆菌中的表达调控
一、名词解释
①基因表达；②启动子；③操纵子；④Lac启动子；⑤Trp 启动子；⑥Tac启动子；⑦RNA聚合酶；⑧转化的弱化作用；⑨核糖体结合位点(SD序列)；⑩起始密码子。
二、问答
1.原核表达系统常采用的启动子有哪些？Lac、Tac、trp其特点如何？
2.强终止子如何发挥终止作用？弱终止子如何发挥作用？
3.克隆的外源基因在大肠杆菌中表达需要的条件有哪些？
4.影响外源基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些？
5.构建原核表达载体应具备哪些基本要素？
第七章外源基因在真核细胞中表达及调控
一、名词概念
原病毒；锌指结构；亮氨酸拉链；RNA编辑；tk基因
二、问答
1.真核表达调控的顺式作用元件有哪些？其作用特点是什么？
2.真核表达调控的反式作用因子有哪些？其作用特点是什么？
3.真核表达载体所必备的条件有哪些？真核表达载体常采用的选择标记基因有哪些？
4.什么叫tk基因？在作选择标记基因的克隆筛选中有何应用价值？
5.常用的真核病毒载体有那些？并简述其特点？
6.真核细胞基因表达的过程是什么？主要有哪些调控机理？
7.简述真核、原核两大表达系统的优缺点。
第八章基因突变
一、名词概念
①突变；②基因突变；③突变体；④突变基因；⑤野生型基因；⑥无义突变；⑦错义突变；⑧同义突变；⑨区域随机诱变
二、问答
1.寡核苷酸介导的点突变技术的原理是什么？简述其诱变程序（最好结合图示说明之）。
2.什么叫Kunkel定点诱变法？什么叫硫代磷酸的核苷酸诱变法？什么叫大引物PCR诱变法？（最好结合图示说明之）。
3.基因突变技术在分子生物学研究和蛋白质工程研究中的有哪些应用?
第九章基因工程技术与国民经济的关系及作用（自学从略）第十章基因工程药物的研究开发及其产业化
一、名词概念
①基因拼接；②基因确失；③比活性；④IFNs类似物；⑤IFNs 杂合体；⑥重组病毒载体；⑦重组质粒型载体；
二、问答
1.基因工程药物包括哪几大类？
2.基因工程药物的基本操作程序有哪几步？
3.基因改造常用的技术手段有哪些？举例说明之。
4.如何获得基因？常用的载体有哪几种？
5.目的基因表达系统有哪几种？其特点如何？
6.如果目的基因的基因结构中有含子存在，而且要采用原核表达系统，你应如何分离克隆基因？
7.基因工程药物的纯化常用哪些方法？杂蛋白来自何方？
8.基因工程药物质量控制点要点包括哪些？
第十一章基因工程疫苗的研究与开发
一、名词概念
①基因工程多肽疫苗；②基因重组病毒活疫苗；③基因缺失
活疫苗；④基因重组多价疫苗。
二、讨论题
1.基因工程疫苗研究开发应遵循的原则是什么？
2.基因工程疫苗有哪几种？举例说明之。
3.基因工程疫苗的研究开发常用的途径是什么？(最好采用示意图回答)
第十二章基因工程抗体和导向药物
一、名词概念
①CDR；②嵌合抗体；③单链抗体(ScFV)；④FV片段；⑤重组Fab片段。
二、讨论题
1.CDR1、CDR2、CDR3分别由Ig的H链及L链中哪些基因片段组成？
2.人ScFV的基因组成、功能有哪些？有何优点？
3.基因工程的人源化抗体的导向药物包括哪些？在疾病诊断和
生物治疗中有什么应用价值？
4.何谓基因工程抗体的噬菌体表面呈现技术？有何价值？主要程序包括哪些？
第十三章基因治疗
一、名词概念
①基因置换；②基因修正；③基因修饰；④基因失活；⑤基因治疗；⑥抑癌基因的基因疗法；⑦反义RNA基因疗法；⑧核酶药物自杀基因疗法；⑨反基因疗法；○10肽核酸；○11瘤苗基因疗法；○12多重耐药性(MDR)基因疗法.
二、讨论题
1.基因治疗所采用的基因转移方法有哪些？简要说明之。
2.病毒载体转移基因有何特点？
3.肿瘤基因治疗有哪些方法？简要说明之。
4.药物自杀基因的基因治疗原理、种类和应用如何？
5.抗病毒基因治疗的方法有哪些？简要说明之。
6.有哪几种反义核苷酸基因失活疗法？简述其作用原理。
7.基因治疗的策略包括哪些？
第十四章转基因动物和动物克隆
一、名词概念
转基因动物；转基因的“动物药厂”；乳腺反应器；动物克隆；基因敲除；ES细胞
二、讨论题
1.何谓转基因动物？举例说明。
2.转基因动物在培育新物种和基因制药方面有什么应用价
值？
3.靶向性基因敲除小鼠模型实施步骤有哪些？
4.何谓动物克隆技术？有何应用价值？
5. 你对“克隆人”有何看法？。