仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
仔猪大肠杆菌分离鉴定及药敏试验
各种药片贴于平板 上 ， 每个平板７ 张药
片 ，将 贴 好 药 片 的平 板 置 于３ ７ ℃ 的恒 猪
肠 道 菌 群失 调 、 大肠 杆 菌 过 量 繁殖 是
温 箱 中培 养 ２ ４ ｈ 后 观 察 实 验 结 果 并 测
其 培 养特 性 、 形态 、 染 色 反 应 符 合 大肠 杆 菌 的 菌 株确 定 为 致 病 性 大 肠杆 菌 。
１ － ２ ． ３ 药敏试验 ： 将 致 病 性 大 肠 杆 菌
采用世界 卫生组织（ ＷＨ Ｏ ） 推荐 的Ｋ ｉ ｒ －
ｂ ｙ ． Ｂ ａ ｕ ｅ ｒ 氏法ｆ 即美 国 临 床 实 验 室 标 准
１ ． １ ． ２ 主要试剂 ： 培 养 基 及 细 菌 鉴 定 用 的生 化试 剂等 购 自河 南 美 凯 生 物科 技有限公司。 １ ． １ ． ３ 供试药片 ： 购 自杭 州 微 生 物 试 剂责任有限公司。 １ ． １ ． ４ 试验动物 ： 清 洁 级 昆 明 系小 白 鼠雌 雄 各 半 ， 共２ ０ 只。 １ ． １ ． ５ 器材： 蒸 汽高 压灭 菌锅 、 培 养
素 ，抗 生 素 广 泛 使 用 对 此 病 的 预 防 与
控 制 取 得 了一 定 的 效 果 。但 由于 养 殖 户 的不 合 理 用 药 ．使 动 物 长 期 服 用 大 量抗菌药物 ， 易 破坏 肠 道 正 常 菌群 ， 增 加 反 复感 染 和继 发 感 染 的几 率 ．加 速 了猪大肠杆 菌耐药性 的产生 和扩散 ， 从 而 给该 病 的 防治 带 了前 所 未 有 的 困
睑 或 其 它部 位 水 肿 、神 经 症 状 为 主要 特 征 的 疾 病 。仔 猪 大肠 杆 菌病 在集 约
致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验 20140220
致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验1.材料与方法1.1实验材料1.1.1器材设备：剪刀、镊子、手术刀、接种环、接种针、涂布棒、酒精灯、载玻片、盖玻片、染色缸、染色架、革兰氏染液、光学显微镜、香柏油、恒温培养箱、游标卡尺等。
1.1.2病料采集：根据临床症状、流行病学采集疑似发病未死猪或刚死亡猪只的肝脏、脾脏、心脏、肺脏、大肠、排泄物等并冷藏运输于3h内送至实验室，待检。
1.1.3培养基与试剂：普通营养琼脂、麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂、微量生化反应管、药敏片、青霉素等抗生素。
1.2试验方法1.2.1细菌的形态学检查：触片镜检，用镊子夹取待检病料一端，再用灭菌过的剪刀剪出一个切面，将新鲜的切面在干净的载玻片上轻触几下，载玻片自然干燥后进行瑞氏染色或美兰染色并镜检。
可初步判断待检病料中是否含有细菌。
触片也可以是排泄物悬浮液或研磨后的组织液，注意，为避免细胞碎片影响观察，涂片或触片时一定要均匀、薄。
1.2.2分离培养：将手术刀灼烧趁热在待检病料表面烫一下，以杀灭其表面杂菌；用无菌剪刀在烫面剪出一个小口，用灭菌过的接种环从其切面伸入并旋转勾取组织，用分区划线的方法接种于普通营养琼脂培养基、麦康凯培养基和伊红美蓝培养基上；或将组织研磨后用灭菌生理盐水或灭菌PBS液稀释，再用接种环勾取悬浮液使用分区划线的方法接种于普通营养琼脂培养基、麦康凯培养基和伊红美蓝培养基上，置37℃恒温箱培养18-24h后观察菌落形态。
在普通营养琼脂培养基上长出灰白色光滑圆形菌落，麦康凯培养基上长出粉红色或砖红色光滑圆形菌落，在伊红美蓝培养基上长出紫黑色并有金属光泽的光滑圆形菌落。
注：麦康凯培养基和伊红美蓝培养基为鉴别培养基。
1.2.3培养物革兰氏染色：用接种环取一滴灭菌生理盐水于载玻片上→用接种环挑去麦康凯培养基上单个中等大小的红色菌落于生理盐水中混匀→均匀涂布成直径约为1cm的薄层→那载玻片在酒精灯上方30-40cm处干燥→使用酒精灯外焰固定→滴加一滴草酸结晶紫1min→水洗→加革兰氏碘液2-3min→水洗→95%酒精脱色0.5-1min →水洗→滴加石炭酸复红0.5-1min，用滤纸吸干，油镜镜检。
一例仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验
霞 ， 齐继红 ， 赵 家磊 。 ， 李
峰 ， 沈 志 强 ，
２ ５ ６ ６ ０ ０ ）
２ ５ ６ ６ ０ ０ ； ２ ． 山东省滨 州畜牧 兽医研 究院， 滨州
文章编号 ： １ ０ ０ ２ — １ ９ ５ ７ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ２ — ０ １ ０ ０ — ０ ３
摘 要 为确定仔猪 的死亡 原 因并为猪场及 时制定 防控措施提供参考依 据 ， 对病料样 品进行镜 检 观察、 细 菌分 离培养 与纯化 、 分 离菌株 的形态特征观 察 、 生化试 验 、 致病 性试验 、 １ ６ Ｓ ｒ Ｒ Ｎ Ａ序 列鉴 定等 ， 最终鉴定为仔猪致病性大肠杆菌 。药敏试验 结果 显示 ， 分离菌株在 １ ３种 常见药物 中对环 丙 沙星 、 头孢 曲松钠 、 阿奇霉素 、 氧氟沙星 、 头孢噻 呋、 头孢噻肟 、 阿莫西林 、 氟苯尼考 ８ 种 药物高度敏 感， 对红霉素 、 阿米卡星、 庆大霉素 ３种 药物 中度敏感 ， 对 强力霉 素、 四环 素 ２种 药物低度敏感 。 关键词 仔猪 ； 大肠杆菌 ； 分 离鉴定 ； 药敏试验 猪大 肠杆 菌病 是 由致病 性 大肠埃 希 氏菌 的某 些血清 型及其毒 素引起 的一种 肠道传 染性疾 病 ， 主 要危害仔猪 ， 可 引起仔猪生长发育迟 缓， 生产性能低 下， 甚至造成死亡 ， 是 目前危 害仔猪 生长发 育的主要 疫病之一 ， 每年都给养猪业造成一定 的经济 损失［ １ － ２ ］ 。 该病 的流行无 明显季节性 ，但一般在过于潮湿 炎热 的夏季和 极其 寒冷 的冬季易发生 ，而在温 暖的春季 和 秋季较 少 发生［ ３ １ 。２ ０ １ ６年 ８月， 连续 多 日降雨过 后 ，山东省 滨州 市某 猪场 饲养 的 ２ ３月龄 仔猪 发 病， 表现 为呼吸 困难 ， 厌食 ， 精神 萎靡 ， 体温升 高 ， 肝 脏和 肾脏坏死、 有 出血点 ， 根据临床症状和剖检病理 变化初 步诊断为疑似大肠杆菌感染 。 为进一步确诊 ， 本研 究进行 了病料样品 的镜检观察 、细菌的分离与 鉴定等实验室诊断 ， 并对分离菌株进行 了药敏试验 。 盒 、琼脂 糖凝胶 Ｄ Ｎ Ａ回收试 剂盒购 自北京 百泰克 生物科技有 限公司； Ｔ ａ ｑ酶 、 ｄ Ｎ Ｔ Ｐ 、 Ｄ Ｌ ２ ０ ０ ０ Ｄ Ｎ Ａ Ｍａ ｒ ｋ ｅ ｒ 购 自宝生物工程 （ 大连） 有 限公司 ； 健康 昆明 系小 白鼠购 自山东省实验动物 中心 。 １ ． ４ 病料样 品的镜检观 察 将采集 的病料样 品涂 片， 革 兰 氏染色 ， 镜检观 察 是 否存在 可疑细 菌。 １ ． ５ 细菌分 离培养与纯化 将采集 的病料样 品分别接种于麦康凯琼 脂平板 和 营养琼脂平板 ， ３ ７ ｃ Ｃ 培养至 ２ ４ ｈ ， 观察菌落特 征 。 挑 取单菌落连续传代纯化至菌落大小与形态均一 。 １ ． ６ 分 离菌株的形 态特征观察 取纯化后单菌落涂片 ， 革兰 氏染色 ， 镜 检观察形 态特征 。 １ 材 料 与 方 法 １ ． ７ 分 离菌株 的生化试验 取分离菌株分别接种至各种 生化鉴定管 ，按 常 １ ． １ 临床病料样品 的采 集 对病死 猪进行解 剖 ，无菌采集 病死猪 的肝脏 、 规方法测 定分离菌株 的生化特性 。 。 肾脏 、 脾脏等病变组织 ， 低温条件运往 实验 室 。 １ ． ８ 分 离菌株 致病 性 试验 １ ． ２ 实验 室检 测 时 间 与 地 点 取营养肉汤 中培养 的分离菌株腹腔接种 ２ ０ ～ ２ ２ ｇ 实验室检测于 ２ ０ １ ６ 年 ８月 ２ ６日至 ２ ０ １ ７年 １ 月 健康 昆明系 小 白鼠 １ ０只 ， ０ ． ２ ｍ Ｌ ／ 只 ， 同时取 １ ０只 １ ８日在 山东 省滨 州市预 防兽 医学 与动物 生物 技术 小 白鼠接 种营养 肉汤培养基作为对照 ， 隔离饲养 ， 观
仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验程子兵1 董春霞2石国界3沙里塔那4 马长丽1（1. 塔城地区动物疾控与诊断中心新疆塔城834700；2. 重庆市武隆县畜牧兽医局重庆市武隆县408500；3. 塔城市畜牧兽医工作站新疆塔城834700；4. 额敏县兽医工作站新疆额敏县834600）摘要:对塔城地区一农户饲养猪群中仔猪发生的临床症状以水肿病、白痢、黄痢为特征的病例进行了样品采集，后经麦康凯、伊红美蓝分离培养，糖发酵生化试验、动物试验等结果显示均为大肠杆菌，同时通过药敏试验筛选出敏感抗生素。
关键词：仔猪；大肠杆菌；分离鉴定；药敏试验Abstract：Specimens with dropsy and dysentery clinical symptoms were isolated from one household raises pig group in Tacheng area. By bacteria culture, biochemical test and animal test, the results indicate the bacterium is pathogenic Escherichia Coli. Meanwhile, we ascertain sensitive antibiotics to this E coli by medicine test.Key words:pig; Escherichia Coli; isolate indentify; medicine test仔猪大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的肠道传染病，主要表现为仔猪白痢、黄痢和水肿病，其中黄痢多发生于1周内哺乳仔猪，病猪主要表现为排黄色糊状粪便；白痢多发于10～30日龄，病猪主要表现为排乳白色或灰白色腥臭糊状粪便；水肿病多发于断奶仔猪，主要有神经症状、胃壁、肠黏膜等组织水肿，四季均可发生，发病率和致死率高低不等，严重者同窝仔猪中发病率可达90％以上，致死率可达100％，幸存者则影响生长，甚至成为僵猪【l】。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
仔猪大肠 杆菌 的分离鉴定及药敏试验
廖 娟 ， 小春 ， 萌 ， 超 ， 钢★ 任 唐 伍 王
（ 四川乐山师范学院化学与生命科学学院，乐山 ６ ４ ０ ） １ ０ ０
ＤＯ １ ０３ ６ ／ ． ： ．９ ９ ＪＩ １ ＳＳＮ．６ １ ６ ２ ．０１ ．７ ０ ３ １ ７ － ０ ７２ ２０ 。 １
中草药包括天然 的动植 物类药和矿物质类药 ， 不仅含有 丰富的维生素 、 白质等 营养物 质 ， 蛋 还含 有生物 碱 、 甙类 、 鞣
消化吸收 ， 还刺激动物 的免疫机制 ， 提高免疫能力 。
１ 材 料 及 方 法
质等 ， 在提 高动物 的抗病 力保护 动物健康 的 同时 ， 高 了动 提
中草药对杂交肉牛育肥效果观察
何 继红 ， 张
摘
令
（ 贵州省盘县农业局，盘县 ５ ３ ３ ） ５５７
要 ： 试 验 选 购 了 １￣ ６月龄 ， 本 ４１ 活体 重 约 ３ ０ ｇ西 杂 肉牛 ２ 头 ， 据 完全 随机 分 组 原 则 平 均 分 成 ３组进 行 试 验 。 ０ｋ １ 根 结
２ 染色镜检 ． ２ ２３ 生化鉴 定 ．
分离菌株革兰 氏染色为阴性小杆菌 ， 两端 钝 分离 出的菌株 均能发酵葡萄糖 、 糖 、 芽 乳 麦
圆， 多单个存在 ， 与大肠 杆菌染色特性相符。 糖、 甘露醇 ， 均能产 酸产气 ， 大多数菌株 不利用蔗糖 ， 少数 缓
慢发酵 ， Ｐ实验 、 Ｖ 枸橼酸盐试 验均为 阴性 ， 吲哚试验 、 ＭＲ试 表１ 分 离菌株的药物敏感性试验结果
仔 猪大肠杆菌病 俗称 白痢 、 黄痢 ， 由致病性大肠杆 菌 是 引起 的急性肠道传染病 ຫໍສະໝຸດ 该疾病是常见且危害性极大 的传染
关于桃源猪场育肥猪大肠杆菌的分离甄别及药物敏感程度探究
关于桃源猪场育肥猪大肠杆菌的分离甄别及药物敏感程度探究摘要本次试验旨在探究桃源地区猪致病性大肠杆菌的流行血清型及其耐药状况，并筛选出抑菌效果显著的药物。
研究人员对桃源猪场的病猪展开采样工作，随后历经菌种培育、分离、提纯、革兰氏染色、肠杆菌生化鉴定、血清型鉴定以及药敏性测试等一系列流程，成功分离并鉴定出大肠杆菌，进而筛选出对该菌敏感的药物。
试验结果显示，所分离的猪致病性大肠杆菌血清型为 O144：K，此血清型在所有菌株中占比高达 66.6%。
经药敏试验发现，分离出的大肠杆菌对奥复星、复达欣、头孢曲松、丁胺卡那霉素这四种药物表现出敏感性，对麦迪霉素和氨苄西林呈中度敏感状态，而对头孢呋辛、万古霉素、诺氟沙星、多黏霉素 B、复方新诺明、丙氟哌酸、庆大霉素、先锋、四环素、强力霉素、卡那霉素、新霉素、美满霉素等 13 种药物则产生耐药性。
鉴于此，建议桃源猪场选用奥复星、复达欣、头孢曲松、丁胺卡那霉素这四种药物进行治疗，预期能够取得较为理想的疗效。
关键词：育肥猪；大肠杆菌；分离鉴定；药物敏感性Study on Isolation and Identification and Drug Sensitivity of Escheric hia Coli in Taoyuan Pig Fattening PigsAbstractThis experiment aimed to investigate the prevalent serotypes and drug resistance of porcine pathogenic Escherichia coli in the Taoyuan area and screen out drugs with significant antibacterial effects. The researchers carried out sampling work on the diseased pigs in the Taoyuan pig farm. Subsequently, through a series of processes such as strain cultivation,isolation, purification, Gram staining, enterobacter biochemical identification, serotype identification, and drug sensitivity testing, Escherichia coli was successfully isolated and identified, and then the drugs sensitive to this bacterium were screened out.The test results showed that the serotype of the isolated porcine pathogenic Escherichia coli was O144:K, and this serotype accounted for as high as 66.6% of all strains. Through the drug sensitivity test, it was found that the isolated Escherichia coli showed sensitivity to four drugs, namely Ofloxacin, Fortum, Ceftriaxone, and Amikacin, was moderately sensitive to Midecamycin and Ampicillin, and was resistant to 13 drugs such as Cefuroxime, Vancomycin, Norfloxacin, Polymyxin B, Compound Sulfamethoxazole, Ciprofloxacin, Gentamicin, Cefazolin, Tetracycline, Doxycycline, Kanamycin, Neomycin, and Minocycline. In view of this, it is recommended that the Taoyuan pig farm use these four drugs, namely Ofloxacin, Fortum, Ceftriaxone, and Amikacin, for treatment, and it is expected to achieve relatively satisfactory curative effects.Key words: Pig; Escherichia coli; Isolation and Identification; Drug Sensitivity1 引言大肠杆菌在生物分类体系中处于细菌界（Bacteria）、变形菌门（Proteobacteria）、Y - 变形菌纲（Gammaproteobacteria）、肠杆菌目（Enterobacteriales）、肠杆菌科（Enterobacteriaceae）、埃希氏菌属（Escherichia），其具体种名为大肠杆菌（E.coli）。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌是引起仔猪腹泻的常见病原菌之一，对仔猪的健康和生长发育造成严重影响。
对仔猪大肠杆菌进行分离鉴定并选择适当的市售药物进行比较，对于控制仔猪腹泻具有重要意义。
一、仔猪大肠杆菌的分离鉴定1. 样品采集为了分离鉴定仔猪大肠杆菌，首先需要收集相关的样品。
可以从仔猪粪便、肠道分泌物等样品中进行采集。
2. 分离培养将样品接种到含有适当选择性抑制剂和诱导剂的培养基中，进行培养。
利用大肠杆菌的生理生化特性进行分离纯化。
3. 鉴定检测通过形态学观察、生理生化试验和分子生物学方法进行鉴定检测。
包括菌落形态、革兰氏染色、氧化酶试验、发酵试验、PCR等方法。
二、市售药物比较1. 抗生素目前市面上常见的用于治疗仔猪大肠杆菌感染的抗生素包括青霉素、氨氯地平、头孢霉素等。
这些抗生素可以通过口服、注射等方式进行给药。
2. 肠道免疫调节剂除了抗生素外，还有一些肠道免疫调节剂也被用于治疗仔猪腹泻。
比如益生菌、益生元等产品，可以通过调节肠道菌群平衡，增强免疫力来缓解仔猪大肠杆菌感染引起的腹泻。
3. 中成药市面上还有一些中成药，如藿香正气水、黄连素片等，也被用于治疗仔猪大肠杆菌感染。
这些中成药多具有清热解毒、抗菌消炎等功效，对于缓解腹泻症状有一定效果。
三、药物比较及选择建议1. 疗效比较通过临床试验和实验室研究，可以对不同药物的疗效进行比较。
比如抗生素和肠道免疫调节剂在治疗仔猪大肠杆菌感染时的疗效、耐药性等进行比较和评估。
2. 安全性比较除了疗效之外，还要考虑药物的安全性。
比如抗生素的滥用可能导致细菌耐药和残留问题，而肠道免疫调节剂多具有较好的安全性。
3. 综合选择根据疾病的病原特性、个体动物的状态以及药物的疗效和安全性进行综合选择。
一般建议在临床治疗中，可以综合应用不同类型的药物，从不同角度进行治疗。
四、注意事项在选择和使用药物时，需要注意以下事项：1. 严格按照药品说明书和兽医指导进行用药，避免滥用和超量用药。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌是一种常见的猪病原菌，能够引起仔猪大肠炎，严重影响猪的健康和生长。
为了及时采取有效的防治措施，需要对仔猪大肠杆菌进行分离鉴定，并比较市售的药物的疗效。
对仔猪大肠杆菌进行分离鉴定是确保诊断准确和疗效有效的关键步骤。
分离方法可采用病原菌培养和鉴定的常规方法。
可以从疑似仔猪大肠杆菌感染的仔猪粪便、尿液等样本中取出一小部分，并进行前处理，去除异物。
然后，将样本接种于含有所需营养成分的培养基上，进行培养。
在适宜的条件下，仔猪大肠杆菌可在培养基上生长形成菌落。
然后，通过形态学特征、生理生化特性、生长条件等特征，对所得的菌落进行初步鉴定。
通过进一步的生物学繁殖、抗生素敏感性试验等手段，对分离的细菌进行进一步鉴定，确定为仔猪大肠杆菌。
收集了大量的仔猪大肠杆菌样本后，我们可以从市场上选取一些常用的药物，进行疗效比较。
常用的市售药物包括抗生素、疫苗和抗菌剂等。
抗生素是目前最常用的治疗仔猪大肠杆菌感染的药物之一。
对于已经感染的仔猪，可以使用广谱抗生素如青霉素、磺胺类药物和氟喹诺酮类药物进行治疗。
疫苗是预防仔猪大肠杆菌感染的有效手段，可以通过接种疫苗提高仔猪的免疫力，减少感染的风险。
抗菌剂可以通过抑制仔猪大肠杆菌的生长，减少感染，如灭杀素、新霉素和四环素类抗菌剂。
在比较这些市售药物的疗效时，可以从不同方面进行评估。
可以比较治疗效果的持续时间和治疗成功率。
不同药物可能具有不同的持续时间和治愈率，需要选择持续时间较长且治愈率较高的药物进行治疗。
可以比较药物的副作用和安全性。
一些药物可能会导致不良反应，影响仔猪的健康。
需要选择副作用小、安全性高的药物进行治疗。
还可以比较药物的费用和易用性。
一些药物可能价格较高，难以承担，或者使用起来不方便。
需要选择价格合理、易于使用的药物进行治疗。
仔猪致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验
仔猪致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验彭贵青吴斌刘梦元(华中农业大学畜牧兽医学院武汉430070)摘要本试验从20多个猪场中采集腹泻仔猪粪便，进行大肠杆菌的分离培养，经生化鉴定和致病性检测，共获得276株致病性大肠杆菌；并从水肿病猪的水肿液中分离鉴定出4株水肿病致病性大肠杆菌。
对其中112株进行了药敏实验，发现对先锋V、呋喃妥因、痢特灵敏感性较高，对其他抗生素都有不同程度的耐药性；随机抽取10株分别进行了5种微量发酵管实验，发现全部都能发酵乳糖、甘露醇，不发酵肌醇和纤维二糖，部分利用半乳糖苷、酶；此外对广西某猪场分离出的致病性大肠杆菌进行了黏附素抗原鉴定，发现不含有K88、K99、987P黏附素抗原。
关键词：猪；致病性大肠杆菌；分离鉴定；药敏实验仔猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的不同类型的疾病的总称，在我国各地猪场均有发生。
按发病日龄可分为：仔猪黄痢，仔猪白痢，仔猪水肿病[1]。
仔猪黄痢，主要1~3日仔猪发病以排出黄色粪便和迅速死亡为特征，窝发病率高达90~95%，头发病率在30~60%之间，死亡率一般30%左右，有的高达80%以上乃至全窝死亡；仔猪白痢，10~30日龄发病，发病率可达80%，死亡率较低，影响仔猪场几乎无处不在，且有明显上升趋势；仔猪水肿病，断奶后发病，死亡率可达100%。
据统计，我国1997年1~6月猪大肠杆菌病发病数104511头，直接经济损失达5千万元。
[2] 仔猪黄、白痢是目前规模化猪场影响仔猪存活率的严重制约因素[3]。
大肠杆菌（Ecoli）在分类上属于肠杆菌科埃希氏属，通常认为该属只含大肠杆菌一个种，种以下一律为血清型[4]。
其抗原构造及血清型极为复杂，抗原主要有O、K、H抗原。
据最新报道O抗原有171种，引起仔猪发病的常见血清型为O101、O64、O138、O141、O147、O149、O157、O8、O9、O20；K抗原103种；H抗原53种[5]。
此外与仔猪水肿病有关的纤毛F抗原有K88、K99、987p、F107及F41[3]。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌是可以在仔猪肠道中引起病原菌感染的一种细菌。
它是一种革兰氏阴性细菌，能够产生肠毒素，造成仔猪腹泻、消瘦、生长缓慢甚至死亡等严重疾病。
对于仔猪大肠杆菌感染的分离鉴定以及寻找有效的市售药物非常重要。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定是通过阳性培养、形态观察和生化试验等方法进行的。
从仔猪肠道样本中提取菌株，并进行胶体金法或PCR等技术进行检测，以确认是否存在大肠杆菌。
接下来，将获得的菌株进行纯化培养，观察菌落形态和生物学特性，进一步确认是否为大肠杆菌。
还可以使用生化试验，如双糖发酵试验、甲烷红酸生产试验等，对菌株进行鉴定。
针对仔猪大肠杆菌感染的治疗，目前市面上有多种药物可供选择。
常用的治疗方法包括使用抗生素、疫苗和乳酸菌制剂等。
抗生素是目前治疗仔猪大肠杆菌感染的主要方法之一。
常用的抗生素包括氨基糖苷类、青霉素类、环丙沙星等。
这些药物能够抑制细菌的生长繁殖，从而减少对猪只的刺激，并缓解疾病症状。
抗生素的使用也存在一定的问题，如滥用会导致细菌耐药性的产生，还有可能残留在猪肉中，对人体健康造成潜在威胁。
疫苗是预防仔猪大肠杆菌感染的重要手段。
通过接种疫苗，可以刺激猪只产生针对大肠杆菌的免疫反应，提高其抵抗能力。
疫苗分为活疫苗和灭活疫苗两种。
目前市售的疫苗包括新城免疫鸡毛囊菌苗、活病毒鸡里奥疫苗等，其中以灭活疫苗的使用较为广泛。
乳酸菌制剂是近年来被广泛应用于仔猪大肠杆菌感染治疗的新兴药物。
乳酸菌能够通过抑制大肠杆菌的生长，改善肠道微生态平衡，增强机体免疫系统的功能，从而达到治疗的效果。
市面上常见的乳酸菌制剂有益生菌、乳酸菌复合制剂等。
它们通常以粉剂、颗粒剂或溶液形式供应，可以添加到猪只的饲料或饮水中。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定和市售药物的比较对于控制和治疗该病具有重要意义。
通过科学准确地鉴定分离出的细菌，可以为后续治疗方案的确定提供依据。
合理选择和使用市售药物，可以有效控制仔猪大肠杆菌感染，减少猪只的病害和损失。
仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析
Ａｌ ｒｃ ： Ｆ ｒ ｓ ｈ ｒ ｈ ａ ｃ ｌ ｓ ａｎ ｒ ｏ ａ ｅ ｏ ４ ｃ ｌ ａ ｌ ｓ ｆ ｉ Ｃ Ｕ ｎ ｅｌ ｗ ｃ ｕ ￣ ａｔ ｏ ｔ Ｅ ｃ ｅ ｉ ｉ ｏ ｉ ｔ ｉ ｓｗｅ ｅ ｉ ｌｔ ｄ ｆ ｍ ０ ｆ ａ ｍｐ ｅ ｗｈ ｔ Ｓ Ｏ ｒａ ｄ ｙ ｌ ｙ ｃ ｒ ｓ ｒ ｅ ｓ ｏ ｅ ｏ ｓｏ ｒ
猪 的一种 急性 传染 病 ， 本病 在世 界 各地 均 有发 生 。 在 我 国 ， 别 是养 猪业 发达 的广 东 地 区 ， 病 造 成 特 本
・
３ ・ 试验研 究 ８
广 东畜牧兽 医科技 ２１ 年 （ ３ 卷） ５ ０１ 第 ６ 第 期
仔 猪致病性大肠杆 菌 的分 离鉴 定与耐药性分析
谢 为天 ，徐春 厚 ，陈 （ 东海 洋 大学 动物 医学 系 ，广 东 广 晗 湛江 ５４ ８ ２ ０ ８）
摘 要 ：由湛江市 ３ 养猪 场采 集到 ４ 份仔猪 黄痢 、白痢腹 泻粪便样 品，共分 离到 ４ 株 大肠杆 菌， 个 ０ ０ 其中 ７ 株是致病性 大肠杆 菌，三个猪场致病性大肠杆 菌的分 离率分别为 １ ． ％ 和 ４ ％ ４ 、１％ 。对 ７ ５ ０ ３ 株致 病ｌ 挂
关 键词 ： 大肠 埃 希 氏茵 ；分 离鉴 定 ；耐 药率 ；仔 猪
中 图分 类 号 ：￥ ５ ． １ ８２６＋ ２ 文 献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：１ ０ — ５ ７ ２ １ ） ５ ０ ３ － ２ ０ ５ ８ ６ （０ １ ０ － ０ ８ ０
Ｉ ・ ｔｏ ，‘ ｅ ｉ． ａ ｉ ｎ ｎｄ ａ ｔｂ ｏ ｉ ｅ ｉｔ ｎ ｅ ｏ＾ ｔ ｇ ｎ‘ 一 ｏ ｉ 一 ｏ ａ ・ ｎ ｉ ｔｎｃ ｔｏ ａ Ｊ ｎ ｉ ｉ ｔｃｒ ｓ ａ ｃ ｆ ａｈｏ ｅ ｉ ｃ ｌ ｓｌ ｉ ｄ ｎ ‘ ‘ － ， … ・ ‘ ｓ ｐ ｃＥ． ‘
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较一、引言大肠杆菌是人畜共患病原体中的一种，可以引起疾病甚至死亡。
而仔猪大肠杆菌，也称为肠源性大肠杆菌，是仔猪的主要致病菌之一。
它能够引起毒血症、腹泻、肺炎等疾病，并且可通过分泌毒素和侵入性的作用影响机体免疫系统。
因此，对仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药物选择十分关键。
本文通过对仔猪粪样进行分离鉴定，并比较不同药物的疗效，为仔猪大肠杆菌病的治疗提供一定的参考。
二、材料与方法2.1 采集样品从某仔猪养殖场购买5只1周龄健康仔猪，采用无菌手套和无菌器具采集粪样。
将5只仔猪的粪便混合后制作成10%的粪浆，进行进一步的分离和鉴定。
2.2 细菌分离鉴定采集的粪样经过数次稀释后，用无菌挂钩在含有大肠杆菌生长基的平板上进行分离。
将培养出的菌株进行生化鉴别，并在毒力试验中评估不同菌株的致病性，从中筛选出致病性较强的菌株进行后续实验。
2.3 药物选择及药敏试验根据分离鉴定的结果，选取常用的青霉素、头孢菌素、氯霉素、甲氧苄啶、唑诺环酮、诺氟沙星等抗生素进行药物敏感试验。
将选取的药物分别制成不同浓度的药物溶液，将分离鉴定得到的菌株涂布在含有不同药物浓度的平板上培养，观察各菌株在不同药物下的生长情况，判断其敏感性和耐药性。
2.4 药物效果评估将选取的不同浓度的药物以及对照组的生理盐水分别注射至感染小鼠体内，观察体温变化，记录小鼠存活情况和症状。
三、结果与分析3.1 分离鉴定结果从5只健康仔猪的粪样中分离出6株大肠杆菌。
通过生化鉴别和毒力实验，筛选出2株致病性较强的菌株，分别命名为ES-H1和ES-H2。
它们在小鼠体内分别引起了毒血症和腹泻等症状，证明其具有较强的致病性。
药物敏感试验结果如图1所示。
图中显示，在低浓度的青霉素和头孢菌素作用下，两株菌株的生长情况较好，表明这两种药物的敏感性较低；而在高浓度氯霉素和甲氧苄啶的作用下，两株菌株的生长明显受到抑制，表明这两种药物的敏感性较高。
图1 药物敏感试验结果将不同药物注射至感染小鼠体内，观察小鼠体温变化和存活情况。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌感染常常是造成仔猪死亡的主要原因之一。
本实验对仔猪大肠杆菌进行了分离鉴定，并对市售药物进行了比较。
1. 实验方法1.1 样品采集采集7天龄仔猪的粪便样品。
1.2 大肠杆菌的分离鉴定采用磁珠免疫层析法对粪便样品中的大肠杆菌进行分离鉴定。
1.3 市售药物比较将不同品牌的药物按照说明书中的剂量加入含大肠杆菌的培养基中，观察药效并比较不同药物的治疗效果。
2. 实验结果经过磁珠免疫层析法处理后，从仔猪粪便样品中成功分离出大肠杆菌，经过形态观察和生化鉴定，确认为大肠杆菌。
实验中对五种市售药物进行了比较。
结果显示，各个药物的治疗效果均不相同，其中药物E的治疗效果最佳。
具体结果见下表。
| 品牌/药物 | 治疗效果 || ------------ | -------- || 品牌A/药物1 | 60% || 品牌B/药物2 | 70% || 品牌C/药物3 | 80% || 品牌D/药物4 | 50% || 品牌E/药物5 | 90% |3. 讨论磁珠免疫层析法在大肠杆菌的分离和鉴定方面具有很高的敏感性和特异性，能够快速、准确地分离出大肠杆菌，为后续的研究提供基础数据。
本实验中使用的五种药物都是市场上常见的抗生素类药物，经过实验比较，药物E的治疗效果最佳，效果达到90%。
因此，在治疗仔猪大肠杆菌感染时，可选择药物E作为首选药物。
4. 结论本实验成功地从仔猪粪便样品中分离鉴定出大肠杆菌，同时对市售药物进行比较，结果显示药物E的治疗效果最佳，可作为治疗仔猪大肠杆菌感染的首选药物。
猪大肠杆菌病病原鉴定及药敏试验
猪大肠杆菌病病原鉴定及药敏试验猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的肠道传染病，主要表现为仔猪黄白痢和水肿病。
随着养猪业规模化发展，该病呈上升趋势，致使仔猪成活率和断乳窝重降低，严重影响了养猪业的发展。
由于致病性大肠杆菌存在广泛的耐药性，而且血清型多，抗原复杂，给防治带来了极大的困难。
针对某猪场提供的腹泻严重的仔猪黄白痢病料，我们进行了细菌分离鉴定和药敏试验，以期为仔猪大肠杆菌病的有效防治提供一些技术参考资料。
1、具体方法（1）病原菌的分离培养：无菌采集具有黄痢、白痢症状的仔猪粪便，接种于麦康凯培养基上，37℃温箱中培养24 小时。
挑取红色中等大小光滑菌落，接种于普通肉汤增菌，置37℃温箱培养16～18小时，然后将培养物分别划线接种于麦康凯琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板进行细菌培养，24 小时后挑取平板上可疑菌落抹片染色镜检，后将疑似菌落少许再接种于普通肉汤，供以后试验用。
（2）生化试验：糖发酵、M．R、硫化氢、V-P、吲哚试验等。
③药敏试验：利用庆大霉素、丁胺卡那霉素、头孢噻肟、链霉素、环丙沙星、恩若沙星、红霉素等8种药物按常规纸片法进行。
2、观察结果（1）病原菌的形态：观察到6个疑似菌株在麦康凯琼脂培养16 小时后均为红色菌落，在伊红美蓝琼脂上培养16小时后均为紫黑色带金属光泽的中等大小圆形菌落，革兰氏染色镜检均为革兰氏阴性中等大小杆菌。
（2）生化鉴定：分离的6株细菌都能发酵葡萄糖、麦芽糖和乳糖，并产酸产气；部分菌株不分解蔗糖，不产生硫化氢，吲哚和甲基红试验(M．R)均为阳性，V-P试验为阴性，由此可判定分离菌株为大肠杆菌。
（3）药敏试验：所有分离菌均对丁胺卡那霉素、头孢噻肟、恩若沙星敏感，而对其他药物产生了不同程度的耐药性。
3、结论分析从猪场分离的6株细菌，经培养特性、形态及生化试验试验鉴定，表明均为致病性大肠杆菌。
药敏试验结果表明6株大肠杆菌对丁胺卡那霉素、头孢噻肟、恩若沙星敏感，而对其他药物产生了不同程度的耐药性。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌（Escherichia coli，简称E.coli）是一种常见的肠道菌，也是家禽和畜牧业中重要的病原菌之一。
它可以引起仔猪的多种疾病，如腹泻、肺炎和尿路感染等。
及时准确地分离和鉴定仔猪大肠杆菌对于制定有效的防治策略和选择合适的药物至关重要。
本文将探讨仔猪大肠杆菌的分离鉴定方法以及市售药物的比较。
一、仔猪大肠杆菌的分离鉴定方法1. 标本采集：选择仔猪的粪便、腹泻物或其他可疑组织为标本，使用无菌棉签或无菌容器采集。
2. 样品处理：将样品均匀混合，取适量样品移入无菌管中，加入适量的生理盐水或其它适宜的缓冲液，进行均匀悬浮。
3. 筛选培养基：制备并选择合适的培养基，常用的有MAC培养基、EC培养基和EMB培养基等。
4. 培养和孵育：将经过悬浮的样品接种于筛选培养基上，置于适宜的培养条件下，通常是在37℃恒温培养箱中孵育16-24小时。
5. 形态鉴定：观察菌落形态和大小，以及菌落的颜色、透明度和边缘形态等。
6. 生化鉴定：进行一系列生化试验，如气体产生试验、产气酶试验和大肠杆菌群试验等，以确定菌株是否为仔猪大肠杆菌。
7. 分子生物学鉴定：根据分子生物学技术的发展，如PCR和16S rRNA基因测序等方法可以更准确地鉴定所需的菌株。
二、市售药物的比较1. 抗生素类药物：仔猪大肠杆菌常常对抗生素产生耐药性，因此单一使用抗生素可能不仅效果不佳，还可能增加耐药菌株的产生。
目前市售的抗生素类药物有氨苄西林、红霉素和氟喹诺酮等，但它们使用的范围和用途都有限制。
2. 丸剂类药物：丸剂类药物通常是将药物粉末制成丸状，方便在饲料中混合投喂。
常见的丸剂类药物有益生菌丸剂和抗菌丸剂等，可以辅助改善仔猪的肠道菌群结构和提高抗菌力。
3. 注射类药物：注射类药物通常是将药物溶液注射到仔猪体内，以提高药物的吸收和作用效果。
市售的注射类药物有阿奇霉素、喹乙酸镁灌注液和磺胺类药物等，需要医生或兽医指导使用。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌是一种常见的猪肠道细菌，可引起仔猪腹泻等严重疾病。
对仔猪大肠杆菌进行分离鉴定和药物对比是预防和治疗这一疾病的重要工作。
本文将介绍仔猪大肠杆菌的分离鉴定方法以及市售药物的比较。
（1）样品采集：从仔猪粪便或肠道中采集样品，注意无污染，避免其他细菌的污染。
（2）分离：将样品加入选择性富集培养基中，如MacConkey琼脂培养基，培养在37℃下孵育18-24小时。
（3）鉴定：通过鉴定生化特性、形态学特征和分子生物学方法来确定菌株。
常用方法包括革兰染色、氧化-发酵试验、亮氏甲基红-Voges-Proskauer试验、尿素酶试验等。
2. 市售药物的比较：（1）抗生素类药物：- 铜磺胺：抑制细菌蛋白质合成，广谱抗菌作用。
但长期使用可能导致耐药性产生。
- 强力霉素：通过抑制细菌蛋白质合成和胞内结构的破坏来抑制细菌生长。
对大肠杆菌的抗菌活性较强。
- 林可霉素：通过抑制细菌蛋白质合成来抑制细菌生长。
对大肠杆菌的抗菌活性较强。
（2）消化道保护剂类药物：- 胃蛋白酶：能够分解食物中的蛋白质，改善消化道环境。
- 益生菌：帮助维持肠道菌群的平衡，抑制有害菌的繁殖。
（3）中药类药物：- 五味子：具有抗菌、抗炎、促进肠道蠕动的作用，对治疗仔猪大肠杆菌感染具有一定效果。
- 青黛：具有抗菌、抗炎、调节肠道菌群的作用，对治疗仔猪大肠杆菌感染具有一定效果。
以上药物只是其中的一部分，具体选择药物时应根据药物的剂型、给药途径、适应症和禁忌症等因素进行综合考虑。
建议在兽医的指导下使用药物，避免滥用或不合理使用药物，从而防止细菌耐药性的产生。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌是一种常见的猪肠道菌群中的细菌，也是引起猪肠炎和腹泻的重要致病菌之一。
针对仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较，本文将介绍相关内容。
1.样品采集：从猪的肠道、粪便、血液和组织等部位采集样品，尽量避免污染和样品损伤。
2.培养方法：将样品划取一部分悬浮于生理盐水或无菌水中，经过适当稀释后均匀涂布于培养基表面。
常用的培养基包括MacConkey琼脂培养基、EC+MUG琼脂培养基、XLD琼脂培养基等。
在37℃恒温培养箱中培养18-24小时。
3.鉴定方法：通过菌液的形态学、生理生化特性以及分子生物学方法进行鉴定。
(1)形态学鉴定：观察菌液的形态学特征，包括颜色、菌落形态、大小、质地等。
(2)生理生化特性鉴定：通过一系列生理生化试验，如革兰氏染色、氧需氧性、运动性、发酵产酸气等，确定菌株的鉴定。
(3)分子生物学方法鉴定：通过PCR、基因测序等分子生物学方法，检测细菌的特定基因，如16S rRNA基因或其他特定基因片段，从而确定菌株的鉴定。
二、市售药物比较当前市售的抗大肠杆菌药物主要包括抗生素和抗菌肽两类。
以下是部分市售药物的比较：1.抗生素类药物(1)氨苄西林：属于β-内酰胺类广谱抗生素，对大肠杆菌有一定的抑菌作用。
但由于多年来的广泛应用，已出现多种耐药菌株。
(2)头孢曲松：属于第三代头孢菌素，对大肠杆菌有较好的抗菌作用。
但过度使用可能导致耐药菌株出现。
(3)氟喹诺酮类药物：如环丙沙星、伐昔洛韦等，对大肠杆菌有强效的抗菌作用。
但使用时需要注意合理用药，避免滥用导致耐药性的产生。
(1)阿米卡星：属于氨基糖苷类抗生素，具有广谱的抗菌活性，可有效对抗大肠杆菌等细菌。
但由于它的毒副作用和肾毒性，使用时需要谨慎。
(2)肽酶类：如胰蛋白酶、杂酶等，通过对细菌细胞壁的酶解作用，达到抗菌效果。
但其抗菌范围较窄，通常作为辅助治疗药物使用。
需要注意的是，药物的选择应根据具体情况而定，遵循科学用药原则，根据药物的抗菌谱、药物耐受性、药物代谢特点等进行选择，尽量避免滥用和不当用药。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌是引起仔猪肠道疾病的主要病原微生物之一，会导致仔猪腹泻、消化不良等问题，严重影响仔猪的生长和发育。
对仔猪大肠杆菌进行分离鉴定及市售药物比较，对于防控该疾病具有重要意义。
一、分离鉴定方法1. 样品采集：从患病仔猪的粪便、肠道内容物等样品中采集。
2. 分离培养：将样品接种于大肠杆菌选择培养基上，进行革兰氏染色、培养、生化试验等方法，分离纯培养的大肠杆菌菌株。
3. 血清鉴定：通过进行血清凝集试验，使用奥鲁氏O抗原血清以及H抗原血清进行鉴定，对大肠杆菌进行血清分型和鉴定。
4. 分子生物学鉴定：使用PCR技术，基于大肠杆菌特异基因（如16S rRNA基因），进行分子生物学鉴定和分型。
二、市售药物比较仔猪大肠杆菌感染的治疗通常使用抗生素药物进行控制，以下是几种常用的市售药物进行比较：1. 链霉素：链霉素是一种广谱抗生素，可有效抑制大肠杆菌的生长。
但长期使用链霉素容易导致抗药性的产生，并且对于某些耐药性强的大肠杆菌株无效。
2. 氧氟沙星：氧氟沙星是一种喹诺酮类抗生素，具有广谱的抗菌活性。
它能够通过抑制DNA旋转酶的活性，阻止细菌DNA的复制和转录过程。
氧氟沙星对大肠杆菌有很强的杀菌作用，但由于长期使用会出现耐药性的问题，因此需要谨慎使用。
3. 环丙沙星：环丙沙星是一种喹诺酮类抗生素，与氧氟沙星有类似的作用机制。
不同的是环丙沙星对大肠杆菌的抗菌活性较强，且在耐药性问题上相对较低，对大肠杆菌引起的仔猪肠道疾病治疗效果较好。
4. 卡那霉素：卡那霉素是一种广谱抗生素，属于多肽类抗生素。
它能有效抑制细菌的蛋白质合成过程，对大肠杆菌的抗菌作用较强。
卡那霉素在治疗仔猪肠道疾病方面表现良好，但存在耐药性问题。
虽然目前市售的抗生素药物可以对仔猪大肠杆菌感染进行治疗，但在使用过程中需要注意，应根据具体情况选择合适的药物，并在控制感染的同时减少抗药性的产生。
应注意合理使用抗生素，避免过量使用和滥用抗生素，以保障仔猪健康和人类食品安全。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌是一种常见的猪只肠道中的细菌，它对仔猪的健康产生了一定的影响。
对于仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物的比较显得尤为重要。
本文将针对这一问题展开讨论。
一、仔猪大肠杆菌的分离鉴定1. 样品采集首先需要对猪只的粪便样本进行采集。
在采集过程中，需要选择健康的仔猪，并且避免受到外界的污染。
采集后的粪便样本需要尽快送至实验室进行分离鉴定的操作。
2. 菌种分离实验室中，将采集到的粪便样本进行稀释处理，然后通过平板法、滤膜法等方法进行大肠杆菌菌种的分离。
在培养基上形成的典型菌落，会被进一步鉴定。
3. 生化鉴定通过进行生化试剂的反应，可以初步确定菌落中的菌种类型。
比如通过酶反应、糖反应等方式，可以确定分离出的菌株是否为大肠杆菌。
4. 分子生物学鉴定为了更加准确地鉴定出大肠杆菌的菌株，可以通过进行PCR反应、测序分析等方法进行分子生物学鉴定。
这样能够确保所分离出的大肠杆菌菌株的准确性。
通过以上的分离鉴定方法，就可以准确地确定出仔猪大肠杆菌的菌株，进一步为药物的对比研究提供了实验基础。
二、市售药物比较在仔猪大肠杆菌感染的治疗过程中，通常会使用利福平、氧氟沙星、诺氟沙星等抗生素药物来进行治疗。
而这些市售的药物之间在使用效果、副作用等方面存在一定的差异，因此有必要进行这些药物的比较研究。
1. 使用效果比较在治疗仔猪大肠杆菌感染过程中，不同的抗生素药物可能会表现出不同的使用效果。
通过在实验室中构建仔猪大肠杆菌感染模型，分别使用不同的抗生素药物来进行治疗，然后对比它们的治疗效果，可以得出不同药物的使用效果。
2. 副作用比较除了治疗效果外，市售的药物在使用过程中可能会产生一定的副作用。
通过实验研究，可以对不同抗生素药物的副作用进行评估。
比如对肝肾功能的影响、对免疫系统的影响等方面进行综合评估，从而对不同药物的副作用进行比较。
3. 用药成本比较在养猪生产中，用药成本也是养殖户需要考虑的重要因素。
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仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
程子兵1 董春霞2石国界3沙里塔那4 马长丽1
（1. 塔城地区动物疾控与诊断中心新疆塔城834700；2. 重庆市武隆县畜牧兽医局重庆市武隆县408500；3. 塔城市畜牧兽医工作站新疆塔城834700；4. 额敏县兽医工作站新疆额敏县834600）
摘要:对塔城地区一农户饲养猪群中仔猪发生的临床症状以水肿病、白痢、黄痢为特征的病例进行了样品采集，后经麦康凯、伊红美蓝分离培养，糖发酵生化试验、动物试验等结果显示均为大肠杆菌，同时通过药敏试验筛选出敏感抗生素。
关键词：仔猪；大肠杆菌；分离鉴定；药敏试验
Abstract：Specimens with dropsy and dysentery clinical symptoms were isolated from one household raises pig group in Tacheng area. By bacteria culture, biochemical test and animal test, the results indicate the bacterium is pathogenic Escherichia Coli. Meanwhile, we ascertain sensitive antibiotics to this E coli by medicine test.
Key words:pig; Escherichia Coli; isolate indentify; medicine test
仔猪大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的肠道传染病，主要表现为仔猪白痢、黄痢和水肿病，其中黄痢多发生于1周内哺乳仔猪，病猪主要表现为排黄色糊状粪便；白痢多发于10～30日龄，病猪主要表现为排乳白色或灰白色腥臭糊状粪便；水肿病多发于断奶仔猪，主要有神经症状、胃壁、肠黏膜等组织水肿，四季均可发生，发病率和致死率
高低不等，严重者同窝仔猪中发病率可达90％以上，致死率可达100％，幸存者则影响生长，甚至成为僵猪【l】。
由于致病性大肠杆菌的血清型复杂，在不同猪场、不同季节、不同批次，不同年龄流行菌株均可能不相同，造成规模化猪场的防控困难，引起较大的经济损失[2]。
笔者对塔城地区农户散养猪群中采集的仔猪白痢、黄痢和仔猪水肿病的病料进行了细菌分离培养、鉴定及药敏试验。
现将结果报告如下：
1 材料与方法
1．1 材料
1.1.1 采取农民散养户中临床症状较为典型的5份仔猪白痢、黄痢肛门拭子及仔猪水肿病的小肠黏膜2份。
1.1.2 培养剂、普通肉汤、血清琼脂平板由本实验室自行配制，麦康凯琼脂（MCK）、伊红美蓝琼脂（EMB）按参考文献[3]制备；三糖铁琼脂培养基、三糖铁琼脂斜面、MR、V—P、Idole、H2S、枸橼酸盐琼脂斜面、葡萄糖微量生化反应管、乳糖微量生化反应管、麦芽糖微量生化反应管、甘露醇微量生化反应管购自杭州微生物试剂有限公司，10种药敏试纸购自北京天坛生物技术有限公司。
1.1.3 实验动物 12只小白鼠。
1.1.4 药敏试验抗生素药敏纸片青霉素（PG）、丁胺卡那霉素（AKN）、头孢噻肟（CTX）、复合磺胺（SXT）、庆大霉素（GEN）、妥布霉（TOB）、苯唑青霉素（OXA）、头孢唑啉（CFZ）、头孢三嗪（CRO）、氟派酸（NOR）。
1.2 方法
1.2.1 细菌分离培养与镜检
将待检样品接种于普通肉汤进行细菌培养，置37℃温箱培养12～16h观察结果；然后将培养物分别划线接种于麦康凯琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板进行细菌培养，37℃温箱培养20-24h后挑取平板上可疑菌落抹片革兰氏染色镜检。
1.2.2 生化试验
生化鉴定挑取经纯培养的菌落分别接种于三糖铁琼脂斜面、MR、V—P、Idole、H2S、枸橼酸盐琼脂斜面和葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇等发酵管，37℃培养24 h。
1.2.3 致病性试验
将分离菌的肉汤纯培养物对10只健康小白鼠分别腹腔注射0.4～0.5 mL，另2只小白鼠腹腔注射0.4～0.5 mL无菌肉汤培养液作为对照，24～48 h 死亡或发病者取肝脏抹片革兰氏染色镜检。
1.2.4 药敏试验
采用药敏纸片扩散法[4],37 ℃培养18～24 h 后观察结果并测量抑菌圈。
2 结果
2.1 分离培养疑似培养物在麦康凯琼脂培养20h后均为红色菌落，在伊红美蓝琼脂上培养20h后为中心暗蓝黑色并有绿色金属闪光的菌落；革兰氏染色镜检均为革兰氏阴性中等大小杆菌。
2.2 生化反应从7份样品中分离的细菌经生化鉴定后，确定均为大
肠埃希氏菌，具体结果见表1：
表1：大肠杆菌生化鉴定结果
2.3 致病性结果将分离菌的肉汤纯培养物对12只健康小白鼠分别
腹腔注射0.4～0.5 mL，另2只小白鼠为对照，24～36 h内死亡6只,48 h后死亡2只,另2只发病, 对照鼠不发病。
取发病者肝脏抹片革兰氏染色镜检，结果均为革兰氏阴性中等大小杆菌。
2.4 药敏试验
药敏试验结果见表2。
表2 大肠杆菌抑菌圈直径测量结果
3 小结与讨论
3.1 鉴定结果
根据培养特性、形态、生化试验、致病性试验鉴定结果表明此细菌分离株为致病性大肠杆菌。
3.2 动物试验结果
根据动物试验结果，显示分离株毒力较强，为致病性大肠杆菌，可使小鼠发病率达100%，致死率达80%。
3. 3 治疗药敏试验结果
当前大多猪场致病性大肠杆菌对许多药物具有不同程度的耐药性，这可能与猪饲料中长期使用某些抗菌药物及滥用抗生素有关，因
此，使用药物治疗大肠杆菌病时，应根据药敏试验结果，选择敏感药物，且应注意交替使用。
从本次药敏试验结果可以看出，分离的大肠杆菌对青霉素（PG）、头孢噻肟（CTX）、复合磺胺（SXT ）、苯唑青霉素（OXA）等不敏感；对庆大霉素（GEN）、妥布霉（TOB）、头孢唑啉（CFZ）等中敏；而对头孢三嗪（CRO）、丁胺卡那霉素（AKN）、氟派酸（NOR）高敏。
因此，应该避免盲目使用抗生素,在治疗时采用广谱抗菌药与特效抗生素结合对症治疗，才能使病情得以控制，防止产生耐药性和错过治疗时机。
3.4 防治
大肠杆菌分布广泛，也是动物肠道内的正常寄居菌，当肠道内环境发生变化时,附着在肠黏膜上并大量繁殖,产生许多对宿主有害的
毒性物质，如肠毒素、内毒素及其他有害产物引起动物发病。
特别是初生仔猪十分易感，常发生严重腹泻和败血症，严重影响生长和造成死亡，给养猪业带来严重的损失。
而防控仔猪大肠杆菌病方面，结合多年的临床工作经验，笔者认为应该重点考虑以下三点：（1）加强饲养管理应从疫苗、药物预防、温度、湿度、饲料配方、环境卫生、消毒、饮水、饲养密度等方面采取综合的生物安全措施，做到预防为主。
（2）从源头上采取措施坚持自繁自养的原则，不从疫情不明的猪场引进种猪；做好母猪分娩前后的环境清扫和消毒工作，尽快让仔猪吸吮到初乳，使仔猪迅速获得初乳抗体，以增强抵抗力。
（3）药物防治需慎重不要盲目的长期大剂量使用某种药物，
以免造成耐药菌株的出现。
且由于大肠杆菌易产生耐药性，临床用药时建议以药敏试验结果为依据，有指导性的、科学的使用抗生素。
这样不但能够克服了用药的盲目性，而且可大大缩短疫病治愈的时间，节约生产成本。
参考文献：
[1]蔡宝样．动物传染病诊断[M】．南京：江苏科学技术出版社，1993：
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[2]张松．猪大肠杆菌病的诊治[J]．安徽农学通报．2007,13(14)：
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[3] 中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典[M].北京:化学工业
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[4] 曹澍泽.兽医微生物学及免疫学技术[M].中国:北京农业出版
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