川贝母中西贝母碱提取工艺优选-王道东
一种贝母生物碱的提取方法及其抗肺纤维化用途
一种贝母生物碱的提取方法及其抗肺纤维化用途随着生物技术的不断发展，生物化学领域的研究也越来越深入。
贝母生物碱是一种具有重要药用价值的天然生物活性物质，被广泛应用于中药制剂中。
本文旨在介绍一种贝母生物碱的提取方法及其在抗肺纤维化方面的应用。
首先，我们需要了解贝母生物碱的化学结构和生物活性。
贝母生物碱属于天然生物碱类化合物，化学式为C27H35NO9，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，贝母生物碱的提取和应用一直备受关注。
贝母生物碱的提取方法可以采用多种技术，如超声波提取、微波提取、酶解提取、有机溶剂提取等。
其中，超声波提取是一种常用的方法，具有操作简便、提取效率高等优点。
具体操作步骤如下：首先，将贝母样品粉碎成细粉末，然后用70%乙醇浸泡1小时；接着，将混合液放入超声波提取仪中，超声波频率为40kHz，功率为400W，提取时间为30分钟；最后，过滤提取液，用旋转蒸发仪浓缩，得到贝母生物碱提取物。
贝母生物碱提取物具有很强的药理活性，可用于治疗多种疾病。
其中，抗肺纤维化是其一项重要的应用。
肺纤维化是一种常见的肺部疾病，其病因未完全明确，但通常伴随着肺部纤维化和瘢痕组织增生。
贝母
生物碱可通过抑制肺纤维化过程中的炎症反应和氧化应激，达到抗肺纤维化的效果。
一些实验研究表明，贝母生物碱的抗纤维化作用与其调节肺组织的基质金属蛋白酶有关。
总之，贝母生物碱具有重要的药理活性，在中药制剂中应用广泛。
本文介绍了贝母生物碱的提取方法及其在抗肺纤维化方面的应用，希望能够为相关领域的研究提供一定的参考和启示。
川贝中生物碱提取工艺优化
川贝中生物碱提取工艺优化孙良顺;郭勇全;申金龙;李峰;苏巧;唐志华【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2010(49)2【摘要】为优化川贝中生物碱的提取工艺,采用超声辅助酸性醇提取法,选取pH值、乙醇体积分数、超声时间、料液比作为考察条件进行单因素试验,并进行L_9(3~4)正交试验.结果表明,pH值、乙醇体积分数对生物碱提取的影响较大.川贝中总生物碱的最优提取组合为A_1B_2C_3D_1,即pH值为1,乙醇体积分数50%,超声时间75 min,料液比1:10.【总页数】3页(P424-426)【作者】孙良顺;郭勇全;申金龙;李峰;苏巧;唐志华【作者单位】陕西理工学院化学与环境科学学院,陕西,汉中,723001;陕西理工学院化学与环境科学学院,陕西,汉中,723001;陕西理工学院化学与环境科学学院,陕西,汉中,723001;陕西理工学院化学与环境科学学院,陕西,汉中,723001;陕西理工学院化学与环境科学学院,陕西,汉中,723001;陕西理工学院化学与环境科学学院,陕西,汉中,723001【正文语种】中文【中图分类】R284.2【相关文献】1.HPLC-ELSD测定不同加工方法川贝母中3种生物碱 [J], 黄林芳;陈士林;刘辉;王丽芝;张艺;罗焜2.不同规格川贝母中总生物碱的含量测定方法 [J], 戴晖;吴梓春3.三蛇胆川贝糖浆中总生物碱含量测定 [J], 黄梦娴4.声光可调–近红外光谱技术即时快速检测川贝母中总生物碱含量方法研究 [J], 武卫红; 杨复森; 孙岱; 董海平5.栽培川贝母的地上部分与鳞茎中总生物碱的比较 [J], 吴启秀;王曙;严晓梁;马静;黄学娣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一种贝母生物碱的提取方法及其抗肺纤维化用途
一种贝母生物碱的提取方法及其抗肺纤维化用途贝母（Fritillaria ussuriensis Maxim.），又称川贝母，是一种常见的中药材，具有止咳化痰、润肺降火等药理作用。
同时，贝母中富含贝母生物碱，也是其主要有效成分之一、贝母生物碱具有多种生理活性，如抗炎、抗氧化和抗肿瘤等作用，对肺纤维化也有一定的抑制作用。
提取贝母生物碱的方法通常包括以下几个步骤：1.制备贝母样品：将贝母干燥后研磨成粉末，可以选择不同粒度的粉末进行提取。
2.提取溶剂选择：选择适合提取贝母生物碱的溶剂，常用的有乙醇、醚类溶剂等。
可以通过试验确定最佳的提取溶剂。
3.提取过程：将贝母粉末与溶剂进行浸泡，在适当的温度条件下进行搅拌或超声波提取，使贝母生物碱溶解到溶剂中。
4.过滤和浓缩：将提取液经过滤纸过滤，去除固体残渣。
然后对过滤液进行蒸发浓缩，得到贝母生物碱的浓缩物。
5.结晶纯化：对浓缩物进行结晶纯化，可以通过加热、冷却或添加其他化学试剂等方法得到纯度更高的贝母生物碱。
提取得到的贝母生物碱可以应用于抗肺纤维化的治疗中。
肺纤维化是一种病理性的肺部疾病，其特征为肺组织纤维化和胶原沉积增多，导致肺功能受损。
已有研究证实，贝母生物碱具有一定的抗纤维化作用，并且能够调节肺组织的炎症反应。
研究表明，贝母生物碱能够通过多种途径发挥抗肺纤维化作用。
首先，贝母生物碱可以减轻炎症反应，抑制炎症细胞的释放。
其次，贝母生物碱可以抑制胶原蛋白的合成和分泌，减少肺间质的纤维化。
此外，贝母生物碱还能够减轻氧化应激反应，抑制肺纤维化过程中产生的自由基。
为了更好地发挥贝母生物碱的抗肺纤维化作用，可以采用口服、注射等不同给药途径。
研究人员还可以根据具体情况，合理地调整贝母生物碱的剂量和使用时间，以达到最佳的治疗效果。
需要注意的是，贝母生物碱的提取方法和抗肺纤维化的应用研究仍处于初步阶段，还需要进一步的临床实验和研究来验证其疗效和安全性。
此外，贝母生物碱作为一种天然产物，与其他药物的相互作用等问题也需要进一步研究。
一种贝母生物碱的提取方法及其抗肺纤维化用途
一种贝母生物碱的提取方法及其抗肺纤维化用途贝母生物碱是一种天然的生物碱,广泛存在于贝母和其他一些植物中,包括百合科、茄科植物等。
贝母生物碱具有多种生物活性,包括抗癌、抗菌、抗病毒、抗纤维化等。
下面是一种提取贝母生物碱的方法及其抗肺纤维化用途:
材料:
- 新鲜贝母
- 乙醇
- 氯仿
- 氨水
- 氢氧化钠
- 甲醇
- 提取液
步骤:
1. 将贝母干燥,然后切片或破碎。
2. 将贝母片或破碎的贝母放入乙醇中浸泡24小时,直至提取出
生物碱。
3. 用氯仿提取生物碱,将提取液倒入另一个容器中。
4. 加入氨水,反应1-2小时,然后氢氧化钠溶液,反应1-2小时,直至提取液变浅黄色。
5. 过滤,收集提取液。
6. 将提取液放入甲醇中,提取2-3次,每次提取1-2小时,直至提取液变浅黄色。
7. 过滤,收集提取液。
8. 将提取液通过细胞膜分离技术提取贝母生物碱。
9. 将生物碱加入醇投资组合,使其保持在较高的纯度和稳定性。
10. 将生物碱应用于肺纤维化治疗中,可以增强患者的免疫力和抗炎能力,改善患者的症状和生活质量。
需要注意的是,提取贝母生物碱需要专业知识和经验,最好在实
验室环境下进行,避免对人类和环境造成伤害。
《浙贝母提取工艺的优化选择》
表4.25 因素水平
水平 溶媒 A 浓度 B（%） 药材处理 C 提取次 数D 提取时间 E 粒度 F 溶媒量 G
1
乙醇
60
10% Na2CO3 浸30min
2
1
2
整粒
9倍
表4.26 试验方案与结果
试验 号
1 2
因素 A 1 1 B 1 1 C 1 1 D 1 2 E 1 2 F 1 2 G 1 2
试验指标 总生物碱含 量（%） 0.163 0.240
3
4 5 6
1
1 2 2
2
2 1 1
2
2 2 2
1
2 1 2
1
2 2 1
2
1 1 2
2
1 2 1
0.280
0.310 0.148 0.128
7
8 Ⅰ Ⅱ
2
2 0.993 0.497
2
2 0.679 0.811
1
1 0.624 0.866
1
2 0.606 0.884
释疑
完善的正交设计要根据因素的个数、水平数 及所考察的交互作用选用合适的正交表，通 常在安排完各因素及交互作用所对应的列后， 还要空出若干列来作为误差项。本资料可选 用大一号的正交表即L16(215)正交表来做表头 设计，这样不仅可以考虑各因素的效应，而 且还可以考虑部分因素的交互作用，留出若 干列来作为误差项，可以使分析的结果更稳 定。
分析
原作者将E、F、G三因素所对应的三列作为误差项，各因 素的均方与误差均方相比得到F值（注：原作者误差的均 方计算有误，应为误差的离均差平方和除以误差的自由度， 此外，其他因素的离均差平方和也存在计算错误），从而 判断各因素不同水平效应之间的差别是否具有显著性意义， 这种做法是不正确的，因为方差分析的思想是把数据变异 的总的离均差平方和分解为各个因素的离均差平方以及误 差的离均差平方和，E、F、G三列的离均差平方和要么作 为各个因素的离均差平方和，要么作为误差的离均差平方 和，如果以此三列作为误差项，是不能分析出E、F、G三 因素的效应的。
不同规格川贝母中总生物碱的含量测定方法
结果 样 品 中总 生物 碱 含量 的平 均值 为 １ ４ ３ ７ ． ９ １ ￣ ｇ ／ ｇ ， Ｒ Ｓ Ｄ值 为
０ ． ７ ４ ％（ ｎ ＝ ６ ） ， 表 明该 测 定 方 法 的重 现 性 好 。
２ ． ８加样 回收率考察 ： 取已知含量 的样 品 ６份 ， 每份 ２ ． ０ ｇ ， 精密称 定后分别加入西贝母碱对照 品适量 ， 放置于 １ ０ ０ ｍＬ具塞锥形瓶 １ ． １仪器 ： 梅特 勒 电子分 析天 平（ 精 密度 ０ ． ０ ０ ０ １ ｍｇ ） ； Ｔ Ｕ 一 ２ ０ ０型 中， 按 照“ ２ ． ２ ” 项 下供试 品溶 液 的配制方 法制备待测 定溶 液 ， 按 双光束紫外 可见分光 光度计 （ 购 于北 京仪器 有 限责 任公 司 ） ； 照“ ２ ． ４ ” 项下线性关 系进行含量测定 ， 计算 回收率 ， 结果见表 １ 。 表 １ 西贝母碱加样回收率结果（ ｎ ＝ ６） Ｈ Ｈ Ｓ 一 ２ １ 型电热恒 温水浴锅 。 １ ． ２试药 ： 川 贝母 （ 购于本市生物科 技有限公司 ） ； 西 贝母 碱对照 品（ 购 于中国药 品生物制 品检定所 ， 批号 ２ ０ １ ３ ０ ９ １ ８ ） ； 三氯 甲烷 、 氨水溶 液 、 甲醇溶液均为分析 纯， 水为双蒸水 。 ２ 方 法 与 结 果 ２ ． １对 照品溶液制 备 ： 精 密称取西 贝母碱对 照 品 １ ９ ． ９ ７ ｍ ｇ ． 置于 １ ０ ０ ｍＬ量瓶 中， 加 入三氯 甲烷溶液定容 至刻度 ， 静 置后放置于一 ２ ０ ＂ Ｃ 冰箱中贮存备用 。 ２ ． ２供试 品溶 液的制备 ： 分别 取不 同规格Ｊ ｌ ｌ 贝母 ４ ． ０ ｇ ， 精密称定 后， 放置于锥形烧瓶 中 ， 加入 浓氨试验 ８ ． ０ ｍＬ ， 浸润 ３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 加入 ２ ． ９样品含量 测定 ： 取５ 种规 格的川贝母 ， 按照供试 品溶液 的制 按 照“ ２ ． ４ ” 项下的线性关系方程测定 吸 三氯 甲烷 ： 甲醇 （ ５ ： ２ ） 混合溶液 ９ ０ ｍ Ｌ 。 置于 ８ ０ ￣ Ｃ 水浴中加热 回流 备 方法配制供试品溶液 ， ２ ｈ ， 放冷后滤过 ， 滤液 置于 ｌ Ｏ Ｏ ｍ Ｌ量瓶 中 ， 上述混合溶液定容至 光 度 值 ，在 标准 曲线 中统 计供 试 品 溶液 中西 贝母 碱 的 质量 刻度后摇匀静置 ， 精密吸取 ｌ Ｏ ｍ Ｌ， 置于 ５ ０ ｍ Ｌ具 塞试 管中 ， 水浴 （ ｇ ） ， 计算不同规格川 贝母 中总生物碱的含量 ， 结果见表 ２ 。 表 ２ 不同规格川贝母总生物碱含量测定 （ ％） 上蒸干后加入 三氯 甲烷 ２ ０ ｍ Ｌ溶解 ，加水 １ ０ ｍ Ｌ，后加入 ６ ｍＬ ０ ． １ ％溴 甲酚绿缓 冲液 ， 密 塞后反复 振摇 ， 静置 后转移 至分液漏 斗中 ， 静置 ６ ０ ｍ ｉ ｎ ， 干燥滤纸滤过 ， 滤液 即得供试 品溶液。 ２ ． ３检测波长 的选择 ：精密 吸取西贝母碱对照 品溶液 １ ． ５ ｍ Ｌ ， 加 三氯甲烷定 容至 １ ０ ｍ Ｌ量瓶 中 ， 静置后倒入锥形烧瓶 ， 精 密加入
12种贝母的西贝素含量测定
12种贝母的西贝素含量测定
李萍;刘理南;徐国钧
【期刊名称】《中草药》
【年(卷),期】1991(22)5
【总页数】2页(P205-206)
【关键词】西贝素;薄层扫描法;含量;测定
【作者】李萍;刘理南;徐国钧
【作者单位】中国药科大学生药室
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.不同规格川贝母的总生物碱,西贝素含量测定 [J], 辛宁
2.HPLC-ELSD测定乌贝益胃胶囊中贝母素甲和贝母素乙含量 [J], 钱春花;何建华;孙志明
3.HPLC法测定半贝丸中腺苷、鸟苷、西贝母碱和西贝母碱苷的含量 [J], 许红莉;邓新红
4.高效液相色谱-蒸发光散射法测定杏贝止咳颗粒中贝母素甲和贝母素乙含量 [J], 杨智慧;程诚;高晓燕
5.4种川贝母的总皂甙、总生物碱及西贝素的含量测定 [J], 赵德永
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9第18卷 第5期 2016 年 5 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 18 No. 5 May，2016川贝母中西贝母碱提取工艺优选王道东1，邵珠德2，刘元涛2（1.山东中医药大学附属医院，山东 济南 250355；2.山东中医药大学，山东 济南 250355）摘 要：目的：优选川贝母中西贝母碱的酸水温浸提取工艺。
方法：以川贝母中西贝母碱提取率为指标，采用单因素试验考察提取方法，选取药材粉碎粒度、温浸温度、溶剂倍量、药液pH、提取时间、提取次数为考察因素，通过正交试验优选西贝母碱的提取工艺。
结果：最佳提取工艺为粉碎过20目筛，加入6倍量pH 为1的盐酸水溶液，60 ℃动态温浸提取3次，每次1 h。
最佳提取工艺的西贝母碱提取率为89.29%。
结论：该方法灵敏度高，稳定性和准确性良好，且优选的工艺稳定可行，川贝母中西贝母碱提取率较高，适用于工业大生产。
关键词：川贝母；西贝母碱；提取率；提取工艺中图分类号：R284 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2016) 05- 0009- 03收稿日期：2015-10-11基金项目：国家“重大新药创制”科技重大专项项目（2013ZX09103002-015）作者简介：王道东（1978-），男，山东聊城人，主任药师，学士，研究方向：药剂学。
Optimization Extraction Process of Sipeimine in Fritillaria CirrhosaWANG Daodong 1，SHAO Zhude 2，LIU Yuantao 2（1.Affiliated Hospital of Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Jinan 250355，Shandong，China；2.Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Jinan 250355，Shandong，China）Abstract：Objective ：To optimization the acid water soaking extraction process of sipeimine in Fritillaria cirrhosa . Methods ：To adopt the extraction rate of sipeimine in Fritillaria cirrhosa as index. Single factor test was used to investigate the extraction method，select the medicinal powder granularity，soaking temperature，solvent volume，extraction time，solution pH，extracting times as factors，orthogonal test for optimization of extraction process by means of sipeimine. Results ：The optimum extraction process is to ground through a 20 mesh sieve，adding 6 times amount of water solution of hydrochloric acid of pH for 1，60 ℃ dynamic temperature soaking and extracting for 3 times，each time1 hours. The extraction rate of the best extraction process of sipeimine as 89.29%. Conclusion ：The method has high sensitivity，good stability and accuracy，and theoptimization process is stable and feasible，and extraction rate of sipeimine in Fritillaria cirrhosa is higher，and is applicable to industrial production.Keywords：Fritillaria cirrhosa ；sipeimine；extraction rate；extraction process 川贝母系百合科植物川贝母（Fritillaria cirrhosaD.Don）的干燥鳞茎[1]。
具有清热润肺、化痰止咳、散结消痈等功效[2]，临床主要用于虚劳咳嗽、肺热燥咳、瘰疬、乳痈、肺痈。
现代研究表明，川贝母具有镇咳、祛痰、平喘、镇静、抗菌等作用，其主要活性成分为西贝母碱等生物碱类成分[3]。
目前对川贝母总生物碱的提取工艺研究报道较少，该药材经提取后常因得膏率高、杂质成分多，导致不能合理应用。
本实验采用酸水提取法通过正交试验优选川贝母中西贝母碱的提取工艺，为川贝母中西贝母碱的提取和工业化生产提供实验依据。
1 仪器与材料1.1 实验仪器LC-2010A 型高效液相色谱仪（日本岛津公司），包括蒸发光散射检测器、CLASS-VP 工作站；METTLER TOLEDO AB135-S 型电子天平；UV1100型紫外可见分光光度计（上海天美科学仪器有限公司）；PHS-3C 型PH 计（上海雷磁仪器厂）；PK-S24型电热恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公司）；KQ-250型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。
1.2 实验材料色谱纯乙腈（美国 DNK 公司），色谱纯磷酸（天津孚赛瑞公司），其余试剂均为分析纯；西贝母碱对照品（质量分数≥98%购自上海源叶生物科技有限公司，批号20120802）。
川贝母药材购自济南建联中药店，经山东中医药大学药学院万鹏教授鉴定为百合科植物川贝母（Fritillaria cirrhosa D.Don）的干燥鳞茎。
2方法与结果2.1 西贝母碱含量测定2.1.1 色谱条件与系统适应性实验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%三乙胺溶液（65∶35）为流动相；体积流量1.0 mL·min -1；柱温30 ℃；选用蒸发光散射检测器，漂移管温度100 ℃；载气流速2.6 mL·min -1，增益1，撞击器关[4]，进样量5μL。
理论板数按西贝母碱峰计算应不低于2000。
结果见图1~图2。
图1 西贝母碱对照品HPLC 图谱DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2016.05.002辽宁中医药大学学报18卷图2 川贝母药材供试品HPLC 图谱2.1.2 标准曲线的绘制取西贝母碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每毫升含0.5 mg的溶液，即得西贝母碱对照品溶液。
精密量取上述对照品溶液各0.1、0.2、0.4、0.6、1.0 mL，分别置于10 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。
按“2.1.1”项下色谱条件进样，以西贝母碱进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，求得回归方程：Y =23785X-0.3918（r=0.9993），线性范围1.90~3.01μg。
2.2药材粉碎粒度的考察由于川贝母粉性较强，故粒度对西贝母碱的浸出及得膏率有较大影响。
本研究以西贝母碱的提取率、得膏率为指标，比较粉碎粒度对西贝母碱提取效果的影响。
取川贝母，分别直接投料、粉碎至20、50、100、150目投料，以6倍量pH为1的盐酸水溶液为提取溶剂，50 ℃温浸提取1 h，测定西贝母碱的提取率及得膏率，结果见表1，图3。
表1 不同粉碎程度西贝母碱提取率及得膏率粒度（目）西贝母碱提取率（%）得膏率（%）未粉碎20.88 6.332046.12 8.955048.2918.9610058.2628.3515060.5131.64图3 不同粉碎程度西贝母碱提取率及得膏率由图3可知，随粉碎粒度增加，西贝母碱提取率及得膏率均增加。
药材粉碎至过20目时，提取率与粉碎至50目以上时相差不大，但得膏率远小于粉碎至50、100、150目的得膏率，因此确定将川贝母粉碎至过20目即可。
2.3药材温浸温度的考察采用酸水提取时温度过高易导致川贝母中所含淀粉水解成支链淀粉[5]。
因此，温度对生物碱的浸出及得膏率有较大影响。
本研究以西贝母碱的提取率及得膏率为指标，比较温度对西贝母碱提取效果的影响。
取川贝母过20目粗粉20 g，以7倍量pH 为1的盐酸水溶液为提取溶剂，分别在40、60、80 ℃条件下温浸提取1 h，测定西贝母碱的提取率及得膏率，结果见表2。
表2 不同温浸温度对西贝母碱提取效果的影响温度（℃）西贝母碱提取率（%）得膏率（%）提取液状态4046.28 8.17透明，稳定6056.15 9.04透明，稳定8061.9935.14黏度大，放冷后浑浊由表2结果可知，温浸温度对西贝母碱的提取率及得膏率影响较大，随温度升高，西贝母碱提取率及得膏率均增加。
但温度高于80 ℃时，淀粉大量溶出，得膏率偏大，且提取液黏稠，放冷后浑浊不稳定。
因此，在保证西贝母碱提取率前提下，确定温浸温度为得膏率较小的60 ℃。
2.4正交优选川贝母酸水温浸提取工艺在前期试验基础上，以西贝母碱提取率为指标，采用L9（34）正交试验对川贝母提取工艺进行优选。
2.4.1 因素水平表的设计以溶剂倍量、药液pH、提取时间、提取次数为因素，每个因素设定3个水平，因素水平表见表3。
表3 川贝母提取工艺正交设计因素水平水平因素A B C（h）D11411226 1.5233823注：A：pH；B：溶剂倍量；C：提取时间；D：提取次数。
2.4.2 正交试验取川贝母20 g，粉碎过20目筛，按照L9（34）正交试验进行试验，并测定西贝母碱的提取率，结果见表4~表5。
表4 川贝母提取工艺正交试验结果试验号因素西贝母碱提取率（%）A B C D1111155.132122267.923133392.184212378.065223160.126231250.627313253.988321365.499332153.06K1215.23187.17171.24168.31K2188.80193.53199.04172.52K3172.53195.86206.28235.73R42.7 8.69 35.04 67.42表5 正交试验方差分析结果因素离差平方和均值自由度F值显著性A309.6164222154.80821122.95*B 13.4882892 6.744144 1.00C228.1176892114.05884416.91D950.9649562475.48247870.50*直观分析：R D>R A>R C>R B，因此A、D为主要因素，B、C为次要因素；A1>A2>A3，A1为最优水平；D3>D2>D1，D3为最优水平；B3>B2>B1，B3为最优水平；C3>C2>C1，C3为最优水平。