细胞膜通透性的测定

实验结果及分析
按下表情况，记录各组溶血情况
实验结果与分析
• 1.管内液体分两层: 上层浅黄色透明, 下层红色 不透明, 为不溶血. 镜下观察时红细胞完好呈凹 盘状. • 2.如果试管内液体浑浊,上层带红色者, 即不完全 溶血, 镜下观察时有部分红细胞碎片状.
• 3.如果试管内液体变红且透明即完全溶血, 镜下 观察发现细胞全部呈现碎片状.
实验方案
实验方案
• 1.轻轻振荡一下盛有制备好的羊血红细胞悬液的试管,观察悬 液的特点,为一种不透明的红色液体. • 2.观察红细胞在低渗溶液中的溶血现象 在1只试管中加入0.3mL红细胞悬浊液,再加入3mL蒸馏水, 轻轻摇匀,注意观察溶液颜色的变化. 可见溶液由不透明的红色 (隔着它不能看到试管后面纸上的字)变成红色澄清液(此时可以 看到纸上的字),即已发生溶血,记录好时间. • 3.测定红细胞对各种物质的选择通透性 取8只试管,分别加入0.17mol/L氯化钠溶液, 0.17mol/L 氯化铵溶液, 0.32mol/L 葡萄糖溶液, 0.32mol/L 甘油, 0.8mol/L 甲醇溶液, 0.8mol/L 丙三醇溶液, 氯仿, 2%Triton X-100液各3mL,作出标记后,各管均加入红细胞悬液2滴,混匀后 静置于室温中.
细胞膜通透性的测定
By 何浩明 陈少怀
01 原理及应用
原理及应用
• 细胞膜是一种半透膜,具有选择透过性. • 当细胞内的溶质浓度高于细胞外,外界溶液进入细胞使细胞 膜胀破,血红蛋白逸出,发生血融. 此时不透明的红细胞悬 液突然变成红色透明的血红蛋白溶液. • 根据溶质透入的速度不同,可测量溶血时间的不同来估计细 胞膜对各种物质通透性的大小.
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实验设备
• 试管, 试管架, 记号笔, 滴管, 载片, 盖片, 镊子, 滤纸 • 显微镜
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试剂的配制
试剂的配制
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1. 10%小鼠红细胞悬液 取10mL小鼠血加入到90mL生理盐水中混匀,现配现用. 2. 2%Triton X-100液 取2mL Triton X-100液, 加M-缓冲液98mL即可.
• 3.M-缓冲液 • 咪唑, 3.404g; KCl,3.7g ;六水合氯化镁,101.65mg; ECTA,380.35mg; • EDTA,29.224mg; 巯基乙醇,0.07mL; 甘油297mL, 蒸馏水,加至 1000mL. • 用1mol/L HCl调pH至7.2, 室温保存.
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实验用品
实验材料
• 10%羊红细胞悬液,兔红细胞悬液或小鼠红细胞悬液, • 蒸馏水, • 0.17mol/L NaCl溶液, 0.17mol/L 氯化铵溶液, 0.32mol/L 葡萄糖溶液, 0.32mol/L 甘油, • 0.8mol/L 甲醇溶液, 0.8mol/L 丙三醇溶液, 氯仿, 2%Triton X-100液,