植物体细胞杂交技术过程
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不能
1、动物细胞融合过程
不同DNA的两个细胞
灭活病毒诱导细胞融合
融合后的细胞 进行有丝分裂
动物细胞融合
植物细胞A 植物细胞B
去壁
原生质体B
原生质体A
杂种细胞
原生 质体 融合
动物细胞A 物理法 化学法
动物细胞B
生物法： 灭活的病毒 常用方法
愈伤组织
杂种植株
植物 组织 培养
杂种细胞
植物体细胞杂交
3、过程
2、动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？
无需，因为动物细胞无细胞壁
3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？
离心、电激等物理方法；PEG等化学方法
4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？
能 还可以利用灭活的病毒进行诱导
5、植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形 成完整的杂种个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？
植物体细胞杂交技术过程
原理？
原理？
植物细胞的融合
方法？
融合 完成 的 标志
植物组织培养
植物细胞A
去壁
原生质体A 原生质体B
去壁
人 工 诱 导
筛选融 合AB 的原生 质体
促进融合 的方法？
杂种 细胞 脱 再 AB 分
生 出 细 胞 壁
化
愈 伤 组 织
再 分 化
杂 种 植 株
植物细胞B
一、动物细胞融合
注射特定 抗原蛋白
培养骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞
多种杂交细 胞
注射到小鼠 体内
交瘤细胞中筛选出能产 检验阳性细胞 B淋巴细胞--- B淋巴细胞 生所需抗体的杂交瘤细 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 体外培 胞。 养 单克隆抗体 特异性强，灵敏度高
培养液中细胞有几 种类型？ （只考 融合 虑两两融合）融合 细胞几种类型？ 5种 B淋巴细胞、骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞 第 1次筛选目的：得到杂 在具有筛选作用的培养基上培养 该细胞继承双亲细胞 B淋巴细胞--- B淋巴细胞 交瘤细胞（多种）。 专一抗体检验阳性 杂交瘤细胞有何特点？ B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 的遗传特性，既能产生专 克隆上述杂交细胞 3种 一抗体又能无限增殖。 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细 第2次筛选目的：在杂 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体， 胞
抗体检测
产生所需 抗体的杂 交瘤细胞
体外培养 单克隆抗体 小鼠腹腔内增殖 动物细胞融合技术 动物细胞培养技术
单克隆抗体制备过程中应用 哪些细胞 工程技术手段？
【堂堂清】
1.单克隆抗体的优点是 特异性强、灵敏度高、可大量制备 ________________________________
2.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的 原因是 每一种 B 淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体 _________________________________ 效应B细胞（浆细胞） 3.产生抗体的细胞是_______________ 杂交瘤细胞 产生单克隆抗体的细胞是__________
诱导方法
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
用途 获得杂种植株 主要用于制备 单克隆抗体
1.能使动物细胞融合的特有的诱导方法是 A．离心 B．灭活的病毒 C．电刺激 D．振动
2.动物细胞融合的目的中最重要的是 A．克服远源杂交不亲和 B．制备单克隆抗体 C．培育新物种 D．生产杂种细胞
思考题
请同学们阅读课本P52 7、你推测一下动物细胞融合有哪些方面的应用吗？ 利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞 8、在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？ 生产单克隆抗体
2.制备过程：
注射抗原的目的是什么 诱导其融合的方法有哪些？
融合后培养液中有几种细胞
两次筛选的原因
大量增殖杂交瘤细胞获得单 抗的方法
课堂小结 2、单克隆抗体制备过程
B淋巴细胞 骨髓瘤细胞
诱导 融合
骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 选择培养 B-瘤细胞
B-B细胞
瘤-瘤细胞
杂交瘤Hale Waihona Puke Baidu胞 （ B-瘤细胞）
克隆化培养
4.杂交瘤细胞的特点: 既能无限增殖，又能分泌特异性抗体 _______________________________ 杂交瘤细胞 5.首次筛选是为了获得_____________
第二次筛选时为了获得
既能无限增殖，又能分泌所需特异性抗体的杂交瘤细 _______________________________ 胞
小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖
杂交细胞
思考： 为什么用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融 合？
因为B淋巴细胞具有分泌特异性抗 体的能力，而骨髓瘤细胞具有在体 外培养条件下大量增殖的本领，所 以由某种B淋巴细胞和骨髓瘤细胞 融合产生的杂交瘤细胞，能够在体 外大量繁殖，并且产生特定的单克 隆抗体。
2、单克隆抗体的制备过程
二、单克隆抗体
1.抗体是由何种细胞产生的？
浆细胞
提 问
２、一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种 抗体吗？ 每个Ｂ淋巴细胞只能分泌一种抗体， 由一个Ｂ淋巴细胞增殖产生的细胞群分 泌的抗体化学成份是单一的。
？
３、一种抗原侵入机体之后，引起机体免 疫反应产生的抗体只有一种吗？ 一种
４. 简述获得抗体的传统途径？
1、动物融合的过程
请同学们阅读课本P52动物融合 ①.细胞融合的概念 ②.诱导动物细胞融合的方法 ③.意义 并用笔画出来
2、动物细胞融合的概念
动物细胞融合也称细胞杂交， 是指两个或多个动物细胞形成一 个细胞的过程
思考题
1、植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？
酶解法，如纤维素酶或果胶酶
不同DNA的两个细胞
灭活的病毒 PEG等
杂交细胞
细胞融合完成的标志:细胞核融合成一个核 4、原理
细胞膜的流动性 制备单克隆抗体
5、最有价值的应用
植物、动物细胞融合的比较
比较项目 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性、
动物细胞融合
细胞膜的流动性
原理 细胞融合的方法
植物细胞全能性
去除细胞壁后诱 使细胞分散后诱 导原生质体融合 导细胞融合 物理（离心、振 物理、化学方法 动、电刺激） （同左）
抗原
刺激
动物体
浆细胞
抗原不纯
抗体 抗体不纯
５、这种方法获得的抗体有什么缺陷？ 特异性差、纯度低； 产量低、反应不够灵敏
6.如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 体外培养单个Ｂ淋巴细胞，提取分泌的抗体 7.体外培养淋巴细胞能无限增殖吗?
不能
怎样解决这个问题？
二、单克隆抗体
设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体
1、动物细胞融合过程
不同DNA的两个细胞
灭活病毒诱导细胞融合
融合后的细胞 进行有丝分裂
动物细胞融合
植物细胞A 植物细胞B
去壁
原生质体B
原生质体A
杂种细胞
原生 质体 融合
动物细胞A 物理法 化学法
动物细胞B
生物法： 灭活的病毒 常用方法
愈伤组织
杂种植株
植物 组织 培养
杂种细胞
植物体细胞杂交
3、过程
2、动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？
无需，因为动物细胞无细胞壁
3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？
离心、电激等物理方法；PEG等化学方法
4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？
能 还可以利用灭活的病毒进行诱导
5、植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形 成完整的杂种个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？
植物体细胞杂交技术过程
原理？
原理？
植物细胞的融合
方法？
融合 完成 的 标志
植物组织培养
植物细胞A
去壁
原生质体A 原生质体B
去壁
人 工 诱 导
筛选融 合AB 的原生 质体
促进融合 的方法？
杂种 细胞 脱 再 AB 分
生 出 细 胞 壁
化
愈 伤 组 织
再 分 化
杂 种 植 株
植物细胞B
一、动物细胞融合
注射特定 抗原蛋白
培养骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞
多种杂交细 胞
注射到小鼠 体内
交瘤细胞中筛选出能产 检验阳性细胞 B淋巴细胞--- B淋巴细胞 生所需抗体的杂交瘤细 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 体外培 胞。 养 单克隆抗体 特异性强，灵敏度高
培养液中细胞有几 种类型？ （只考 融合 虑两两融合）融合 细胞几种类型？ 5种 B淋巴细胞、骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞 第 1次筛选目的：得到杂 在具有筛选作用的培养基上培养 该细胞继承双亲细胞 B淋巴细胞--- B淋巴细胞 交瘤细胞（多种）。 专一抗体检验阳性 杂交瘤细胞有何特点？ B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 的遗传特性，既能产生专 克隆上述杂交细胞 3种 一抗体又能无限增殖。 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细 第2次筛选目的：在杂 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体， 胞
抗体检测
产生所需 抗体的杂 交瘤细胞
体外培养 单克隆抗体 小鼠腹腔内增殖 动物细胞融合技术 动物细胞培养技术
单克隆抗体制备过程中应用 哪些细胞 工程技术手段？
【堂堂清】
1.单克隆抗体的优点是 特异性强、灵敏度高、可大量制备 ________________________________
2.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的 原因是 每一种 B 淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体 _________________________________ 效应B细胞（浆细胞） 3.产生抗体的细胞是_______________ 杂交瘤细胞 产生单克隆抗体的细胞是__________
诱导方法
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
用途 获得杂种植株 主要用于制备 单克隆抗体
1.能使动物细胞融合的特有的诱导方法是 A．离心 B．灭活的病毒 C．电刺激 D．振动
2.动物细胞融合的目的中最重要的是 A．克服远源杂交不亲和 B．制备单克隆抗体 C．培育新物种 D．生产杂种细胞
思考题
请同学们阅读课本P52 7、你推测一下动物细胞融合有哪些方面的应用吗？ 利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞 8、在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用？ 生产单克隆抗体
2.制备过程：
注射抗原的目的是什么 诱导其融合的方法有哪些？
融合后培养液中有几种细胞
两次筛选的原因
大量增殖杂交瘤细胞获得单 抗的方法
课堂小结 2、单克隆抗体制备过程
B淋巴细胞 骨髓瘤细胞
诱导 融合
骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 选择培养 B-瘤细胞
B-B细胞
瘤-瘤细胞
杂交瘤Hale Waihona Puke Baidu胞 （ B-瘤细胞）
克隆化培养
4.杂交瘤细胞的特点: 既能无限增殖，又能分泌特异性抗体 _______________________________ 杂交瘤细胞 5.首次筛选是为了获得_____________
第二次筛选时为了获得
既能无限增殖，又能分泌所需特异性抗体的杂交瘤细 _______________________________ 胞
小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖
杂交细胞
思考： 为什么用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融 合？
因为B淋巴细胞具有分泌特异性抗 体的能力，而骨髓瘤细胞具有在体 外培养条件下大量增殖的本领，所 以由某种B淋巴细胞和骨髓瘤细胞 融合产生的杂交瘤细胞，能够在体 外大量繁殖，并且产生特定的单克 隆抗体。
2、单克隆抗体的制备过程
二、单克隆抗体
1.抗体是由何种细胞产生的？
浆细胞
提 问
２、一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种 抗体吗？ 每个Ｂ淋巴细胞只能分泌一种抗体， 由一个Ｂ淋巴细胞增殖产生的细胞群分 泌的抗体化学成份是单一的。
？
３、一种抗原侵入机体之后，引起机体免 疫反应产生的抗体只有一种吗？ 一种
４. 简述获得抗体的传统途径？
1、动物融合的过程
请同学们阅读课本P52动物融合 ①.细胞融合的概念 ②.诱导动物细胞融合的方法 ③.意义 并用笔画出来
2、动物细胞融合的概念
动物细胞融合也称细胞杂交， 是指两个或多个动物细胞形成一 个细胞的过程
思考题
1、植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？
酶解法，如纤维素酶或果胶酶
不同DNA的两个细胞
灭活的病毒 PEG等
杂交细胞
细胞融合完成的标志:细胞核融合成一个核 4、原理
细胞膜的流动性 制备单克隆抗体
5、最有价值的应用
植物、动物细胞融合的比较
比较项目 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性、
动物细胞融合
细胞膜的流动性
原理 细胞融合的方法
植物细胞全能性
去除细胞壁后诱 使细胞分散后诱 导原生质体融合 导细胞融合 物理（离心、振 物理、化学方法 动、电刺激） （同左）
抗原
刺激
动物体
浆细胞
抗原不纯
抗体 抗体不纯
５、这种方法获得的抗体有什么缺陷？ 特异性差、纯度低； 产量低、反应不够灵敏
6.如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 体外培养单个Ｂ淋巴细胞，提取分泌的抗体 7.体外培养淋巴细胞能无限增殖吗?
不能
怎样解决这个问题？
二、单克隆抗体
设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体