GB沙门氏菌检验
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GB 沙门氏菌检验
沙门氏菌(Salmonella)的检验
• 沙门氏菌：革兰氏阴性肠道杆菌 • 导致胃肠炎、伤寒和副伤寒。 • 蛋、家禽和肉类产品是沙门氏菌病的主要传播媒介。
2
《GB 4789.4-2010 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》-1
3
《GB/T4789.4-2010 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》-2
Nutrient Agar
BactiDrop™ Kovacs Indol RapID™ ONE system
靛基质试剂 Indole reagent
R21522
R8311006
商品化的生化鉴定系统
6
结果观察
BS琼脂
• 产硫化氢菌落为黑色有金属光泽、 棕褐色或灰色，菌落周围培养基可呈 黑色或棕色； • 有些菌株不产生硫化氢，形成灰绿 色的菌落，周围培养基不变。
2 days
18
11
How Inhibigens™ Work
The L-AEP Inhibigen
Inhibigen
Substrate (L-alanine) Inhibitor component L-AEP
Uptake via peptide permease
-
X
Free inhibitor in medium is not actively taken up
该方法通过AFNOR（法国标准化协会）的验 证(UNI 03/06 – 12/07)，依照 ISO16140:2003，与ISO 6579:2002的方法 具有等效的结果
17
Precis 沙门氏菌快速培养检测法
增菌 沙门氏菌ONE肉汤
平板分离 Brilliance™ 沙门氏菌显色培养基
确认 Oxoid沙门氏菌乳胶凝集试剂盒 or ISO 6579 methods
XLD培养基
CM0469B
500g
XLD Medium
Hektoen Enteric Agar Brilliance Salmonella Agar Base Salmonella Selective Supplement HE琼脂 沙门氏菌显色 琼脂基础 沙门氏菌选择 性添加剂 三糖铁琼脂 营养琼脂 BactiDrop™ Kovacs吲哚 RapID™ ONE 肠杆菌鉴定系 统 CM0419B CM1092B 500g 500g
货号 CM0509B 或 CM1049B（ ISO配方）
规格
前增菌
缓冲蛋白胨水
Buffer Peptone Water
500g
四硫磺酸钠煌绿 增菌液 选择性 增菌
Tetrathionate Broth,TTB
Muller-Kauffmann Tetrathionate Broth Base
CM1048B
4
GB 4789.4-2010沙门氏菌(Salmonella)检验的解决方案-1
GB使用的培养 基（中文名称） GB使用的培养 基（英文名称） Buffer Peptone Water,BPW Oxoid中文 名称 缓冲蛋白胨 水 MullerKauffmann 连四硫酸肉 汤基础
用途
Oxoid英文名称
10
Inhibigen Technology
Inhibigen molecule
Substrate component
If organism possesses target enzyme for utilising the substrate it can take up Inhibigen from the medium
或：沙门氏菌显色培养 基 Triple Sugar Iraon Agar,TSI
SR0194E
CM0277B CM0003B
10小瓶
500g 500g 50个， 0.75ml/ 安瓿 20板/ 盒
三糖铁琼脂(TSI) 营养琼脂 鉴定
Triple sugar Iraon Agar
Nutrient Agar
7
结果观察
• XLD 琼脂 菌落呈粉红色，带或不带 黑色中心，有些菌株可呈现 大的带光泽的黑色中心，或 呈现全部黑色的菌落；有些 菌株为黄色菌落，带或不带 黑色中心。
8பைடு நூலகம்
结果观察
• HE 琼脂： 蓝绿色或蓝色，多数菌落中 心黑色或几乎全黑色；有些 菌株为黄色，中心黑色或几 乎全黑色。
9
结果观察
• 沙门氏菌显色培养基 （CM1092B+SR0194E） • 样本中往往大肠杆菌含量很高，培 养基中的Inhibigen分子专门抑制非 目标菌，增强沙门氏菌的恢复。 • 两种显色底物与特定的酶——辛酸 酯酶和β-葡萄糖苷酶作用。 • 沙门氏菌含有辛酸酯酶，与显色底 物反应形成清晰的紫色菌落。 • 其他肠杆菌属会被抑制或通过与β葡萄糖苷酶底物作用形成蓝色菌落
4-5 天
16
Precis沙门氏菌快速培养检测法
• Day 0 一步增菌：沙门氏菌ONE肉汤，42℃培养18h; • Day 1 平板分离：Brilliance沙门氏菌显色琼脂， 37℃培养24h； • Day 2 确认：沙门氏菌乳胶凝集试剂盒、O.B. I.S 沙门氏菌检测试剂盒、 血清学试剂、生化鉴定试剂盒等（或传统的ISO6579：2002的确认试验）
用途 GB使用的培养基（中文 名称） 亚硫酸铋琼脂(BS) 木糖赖氨酸脱氧胆盐（ XLD）琼脂 分离 或：HE琼脂 GB使用的培养基（ 英文名称） Bismuth Sulphite Agar,BS Xylose Lysine Deoxycholate Agar,XLD Hektoen Enteric Agar Oxoid英文名称 Bismuth Sulphite Agar Oxoid中文名称 亚硫酸铋琼脂 货号 CM0201B 规格 500g
Escherichia coli ATCC® 25922
13
Brilliance Salmonella
肺炎克雷伯菌
Klebsiella pneumoniae ATCC® 11228
弗氏柠檬酸杆菌
Citrobacter freundii NCTC 8581
14
Precis沙门氏菌快速 培养检测法
《GB 4789.4-2010 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》-1
Inhibitor component
Once released inside the cell inhibitor component becomes toxic to the organism
Inhibigen bond
Target enzyme cleaves bond and releases inhibitor component
Inhibition of cell wall synthesis Specific enzyme hydrolysis
Cell death from lysis
12
Brilliance Salmonella
鼠伤寒沙门氏菌
Salmonella typhimurium ATCC® 140248
大肠埃希氏菌
500g
碘溶液、煌 绿溶液 亚硒酸盐胱氨酸 增菌液(SC)
Selenite Cystine Broth Base Sodium biselenite 亚硒酸胱氨 酸肉汤基础 CM0699B 500g
Selenite Cystine Broth，SC
亚硒酸氢钠
LP0121A
100g
5
GB4789.4-2010沙门氏菌(Salmonella)检验的解决方案-2
沙门氏菌(Salmonella)的检验
• 沙门氏菌：革兰氏阴性肠道杆菌 • 导致胃肠炎、伤寒和副伤寒。 • 蛋、家禽和肉类产品是沙门氏菌病的主要传播媒介。
2
《GB 4789.4-2010 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》-1
3
《GB/T4789.4-2010 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》-2
Nutrient Agar
BactiDrop™ Kovacs Indol RapID™ ONE system
靛基质试剂 Indole reagent
R21522
R8311006
商品化的生化鉴定系统
6
结果观察
BS琼脂
• 产硫化氢菌落为黑色有金属光泽、 棕褐色或灰色，菌落周围培养基可呈 黑色或棕色； • 有些菌株不产生硫化氢，形成灰绿 色的菌落，周围培养基不变。
2 days
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How Inhibigens™ Work
The L-AEP Inhibigen
Inhibigen
Substrate (L-alanine) Inhibitor component L-AEP
Uptake via peptide permease
-
X
Free inhibitor in medium is not actively taken up
该方法通过AFNOR（法国标准化协会）的验 证(UNI 03/06 – 12/07)，依照 ISO16140:2003，与ISO 6579:2002的方法 具有等效的结果
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Precis 沙门氏菌快速培养检测法
增菌 沙门氏菌ONE肉汤
平板分离 Brilliance™ 沙门氏菌显色培养基
确认 Oxoid沙门氏菌乳胶凝集试剂盒 or ISO 6579 methods
XLD培养基
CM0469B
500g
XLD Medium
Hektoen Enteric Agar Brilliance Salmonella Agar Base Salmonella Selective Supplement HE琼脂 沙门氏菌显色 琼脂基础 沙门氏菌选择 性添加剂 三糖铁琼脂 营养琼脂 BactiDrop™ Kovacs吲哚 RapID™ ONE 肠杆菌鉴定系 统 CM0419B CM1092B 500g 500g
货号 CM0509B 或 CM1049B（ ISO配方）
规格
前增菌
缓冲蛋白胨水
Buffer Peptone Water
500g
四硫磺酸钠煌绿 增菌液 选择性 增菌
Tetrathionate Broth,TTB
Muller-Kauffmann Tetrathionate Broth Base
CM1048B
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GB 4789.4-2010沙门氏菌(Salmonella)检验的解决方案-1
GB使用的培养 基（中文名称） GB使用的培养 基（英文名称） Buffer Peptone Water,BPW Oxoid中文 名称 缓冲蛋白胨 水 MullerKauffmann 连四硫酸肉 汤基础
用途
Oxoid英文名称
10
Inhibigen Technology
Inhibigen molecule
Substrate component
If organism possesses target enzyme for utilising the substrate it can take up Inhibigen from the medium
或：沙门氏菌显色培养 基 Triple Sugar Iraon Agar,TSI
SR0194E
CM0277B CM0003B
10小瓶
500g 500g 50个， 0.75ml/ 安瓿 20板/ 盒
三糖铁琼脂(TSI) 营养琼脂 鉴定
Triple sugar Iraon Agar
Nutrient Agar
7
结果观察
• XLD 琼脂 菌落呈粉红色，带或不带 黑色中心，有些菌株可呈现 大的带光泽的黑色中心，或 呈现全部黑色的菌落；有些 菌株为黄色菌落，带或不带 黑色中心。
8பைடு நூலகம்
结果观察
• HE 琼脂： 蓝绿色或蓝色，多数菌落中 心黑色或几乎全黑色；有些 菌株为黄色，中心黑色或几 乎全黑色。
9
结果观察
• 沙门氏菌显色培养基 （CM1092B+SR0194E） • 样本中往往大肠杆菌含量很高，培 养基中的Inhibigen分子专门抑制非 目标菌，增强沙门氏菌的恢复。 • 两种显色底物与特定的酶——辛酸 酯酶和β-葡萄糖苷酶作用。 • 沙门氏菌含有辛酸酯酶，与显色底 物反应形成清晰的紫色菌落。 • 其他肠杆菌属会被抑制或通过与β葡萄糖苷酶底物作用形成蓝色菌落
4-5 天
16
Precis沙门氏菌快速培养检测法
• Day 0 一步增菌：沙门氏菌ONE肉汤，42℃培养18h; • Day 1 平板分离：Brilliance沙门氏菌显色琼脂， 37℃培养24h； • Day 2 确认：沙门氏菌乳胶凝集试剂盒、O.B. I.S 沙门氏菌检测试剂盒、 血清学试剂、生化鉴定试剂盒等（或传统的ISO6579：2002的确认试验）
用途 GB使用的培养基（中文 名称） 亚硫酸铋琼脂(BS) 木糖赖氨酸脱氧胆盐（ XLD）琼脂 分离 或：HE琼脂 GB使用的培养基（ 英文名称） Bismuth Sulphite Agar,BS Xylose Lysine Deoxycholate Agar,XLD Hektoen Enteric Agar Oxoid英文名称 Bismuth Sulphite Agar Oxoid中文名称 亚硫酸铋琼脂 货号 CM0201B 规格 500g
Escherichia coli ATCC® 25922
13
Brilliance Salmonella
肺炎克雷伯菌
Klebsiella pneumoniae ATCC® 11228
弗氏柠檬酸杆菌
Citrobacter freundii NCTC 8581
14
Precis沙门氏菌快速 培养检测法
《GB 4789.4-2010 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》-1
Inhibitor component
Once released inside the cell inhibitor component becomes toxic to the organism
Inhibigen bond
Target enzyme cleaves bond and releases inhibitor component
Inhibition of cell wall synthesis Specific enzyme hydrolysis
Cell death from lysis
12
Brilliance Salmonella
鼠伤寒沙门氏菌
Salmonella typhimurium ATCC® 140248
大肠埃希氏菌
500g
碘溶液、煌 绿溶液 亚硒酸盐胱氨酸 增菌液(SC)
Selenite Cystine Broth Base Sodium biselenite 亚硒酸胱氨 酸肉汤基础 CM0699B 500g
Selenite Cystine Broth，SC
亚硒酸氢钠
LP0121A
100g
5
GB4789.4-2010沙门氏菌(Salmonella)检验的解决方案-2