免疫学检验精品PPT课件
合集下载
免疫学检验概论 ppt课件
（Introduction)
免疫学检验 （ immunological test）
湖北中医药高等专科学校医学基础部 （Hubei college of Chinese medicine）
胡慧琼
(HuHuiQiong)
免疫学检验
我们为什么 会感冒 ？
抵抗力低
注射青霉素后休克
未皮试就注射青霉素后的过敏反应
土重来，后世学者估计，共有多达2亿 人死于这场瘟疫。
1820年代，英国发明了预防天花病的牛 痘疫苗。天花病患者的死亡率仍高达三 分之一。后来，发达国家逐步控制了这 种疾病，但非洲农村仍有流行。
（二）典型成就：
1、中国古代医师 创用了“人痘”疫苗预防天花。
• 湖北中医药高等专科学校
• （Hubei college of Chinese medicine）
型
来源：是人在出生以后才产生的。
特异性免疫 特点：只能对某一特定的病原体 （获得性免疫/适 或异物起防御作用，对其它的病
应性免疫） 原体无效。（专一性）
返回章目录
1.固有免疫与适应免疫
• 一、概念
• 非特异性免疫（固有免疫）-----是指机体对异物的无 选择性地阻挡，排斥和清除
• 适应免疫(特异性免疫)-----免疫系统可以准确地识别对自
(HuHuiQiong)
推动现代生命科学前进的三架马车
• 分子生物学（Molecular Biology） • 免疫学（Immunology） • 细胞生物学（Cell Biology）
3、1901年“免疫学”首先出现在Index Medicus
4、1916年Journal of Immunology创刊 标
（二）典型成就
免疫学检验 （ immunological test）
湖北中医药高等专科学校医学基础部 （Hubei college of Chinese medicine）
胡慧琼
(HuHuiQiong)
免疫学检验
我们为什么 会感冒 ？
抵抗力低
注射青霉素后休克
未皮试就注射青霉素后的过敏反应
土重来，后世学者估计，共有多达2亿 人死于这场瘟疫。
1820年代，英国发明了预防天花病的牛 痘疫苗。天花病患者的死亡率仍高达三 分之一。后来，发达国家逐步控制了这 种疾病，但非洲农村仍有流行。
（二）典型成就：
1、中国古代医师 创用了“人痘”疫苗预防天花。
• 湖北中医药高等专科学校
• （Hubei college of Chinese medicine）
型
来源：是人在出生以后才产生的。
特异性免疫 特点：只能对某一特定的病原体 （获得性免疫/适 或异物起防御作用，对其它的病
应性免疫） 原体无效。（专一性）
返回章目录
1.固有免疫与适应免疫
• 一、概念
• 非特异性免疫（固有免疫）-----是指机体对异物的无 选择性地阻挡，排斥和清除
• 适应免疫(特异性免疫)-----免疫系统可以准确地识别对自
(HuHuiQiong)
推动现代生命科学前进的三架马车
• 分子生物学（Molecular Biology） • 免疫学（Immunology） • 细胞生物学（Cell Biology）
3、1901年“免疫学”首先出现在Index Medicus
4、1916年Journal of Immunology创刊 标
（二）典型成就
医学免疫学免疫学检测技术ppt课件
14
双抗体夹心法、间接法ELISA
15
间接法ELISA
16
ELISA操作图
可调移液器
8孔道可调移液器 17
3. 放射免疫测定（RIA）
常用 125I，测定微量物质 4. 化学发光免疫分析
常用 鲁米诺，测定超微量物质 5. 免疫印迹法（Western Blotting）
先做凝胶电泳将蛋白质分区 再将蛋白质转移至固相载体 后用酶免疫、放射免疫等技术加以测定
1. 免疫荧光法（IFA ）
荧光素可双色；使免疫复合物呈荧光；可定性、定位
（1）直接荧光法 荧光素一抗 对每种抗体作标记 特异 测Ag
（2）间接荧光法： 荧光素二抗 不必标记每种抗体 敏感 测Ag/Ab
12
免疫荧光法
13
2. 酶免疫测定（EIA）: ELISA与酶免疫组化
（1）双抗体夹心法ELISA：查抗原
10
II ) Precipitation （二）沉淀反应
可溶性抗原 + 相应抗体肉眼可见的沉淀物 使用半固体琼脂凝胶为介质——琼脂扩散/免疫扩散
1. 单向免疫扩散：抗原 的定量（Ig、C3 ）
2. 双向免疫扩散：抗原/抗体的定性、组成及Ag相关性分析 3. 免疫电泳： 电泳 + 双向免疫扩散 （抗原分析）
21
3. 细胞因子检测
（1）免疫学检测法—— 夹心法ELISA FCM
（2）生物学检测法—— 细胞增殖（或细胞增殖抑制）试验 细胞毒（或细胞毒抑制）试验
（3） 分子生物学检测法 RT-PCR测定mRNA
4. 皮肤试验： 测试IV型超敏反应能力
22
（二）B细胞功能测定
1. B细胞增殖试验 小鼠：LPS 人： SPA；抗IgM
双抗体夹心法、间接法ELISA
15
间接法ELISA
16
ELISA操作图
可调移液器
8孔道可调移液器 17
3. 放射免疫测定（RIA）
常用 125I，测定微量物质 4. 化学发光免疫分析
常用 鲁米诺，测定超微量物质 5. 免疫印迹法（Western Blotting）
先做凝胶电泳将蛋白质分区 再将蛋白质转移至固相载体 后用酶免疫、放射免疫等技术加以测定
1. 免疫荧光法（IFA ）
荧光素可双色；使免疫复合物呈荧光；可定性、定位
（1）直接荧光法 荧光素一抗 对每种抗体作标记 特异 测Ag
（2）间接荧光法： 荧光素二抗 不必标记每种抗体 敏感 测Ag/Ab
12
免疫荧光法
13
2. 酶免疫测定（EIA）: ELISA与酶免疫组化
（1）双抗体夹心法ELISA：查抗原
10
II ) Precipitation （二）沉淀反应
可溶性抗原 + 相应抗体肉眼可见的沉淀物 使用半固体琼脂凝胶为介质——琼脂扩散/免疫扩散
1. 单向免疫扩散：抗原 的定量（Ig、C3 ）
2. 双向免疫扩散：抗原/抗体的定性、组成及Ag相关性分析 3. 免疫电泳： 电泳 + 双向免疫扩散 （抗原分析）
21
3. 细胞因子检测
（1）免疫学检测法—— 夹心法ELISA FCM
（2）生物学检测法—— 细胞增殖（或细胞增殖抑制）试验 细胞毒（或细胞毒抑制）试验
（3） 分子生物学检测法 RT-PCR测定mRNA
4. 皮肤试验： 测试IV型超敏反应能力
22
（二）B细胞功能测定
1. B细胞增殖试验 小鼠：LPS 人： SPA；抗IgM
免疫检验课件ppt
移植免疫监测
器官移植后，患者需要接受免疫抑制治疗以防止排斥反应。通过监测免疫功能和相关抗体，有助于评估患者的免疫状态和移植效果。
02
CHAPTER
免疫检验基础知识
抗原是指能够刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答的物质，包括外源性抗原和内源性抗原。
抗原
抗体是指机体在抗原刺激下产生的具有高度特异性的蛋白质分子，能够与相应抗原结合，发挥免疫效应。
通过检测T细胞增殖和转化能力，评估机体的细胞免疫功能。
通过检测细胞因子表达水平，了解机体的免疫应答状态。
通过检测免疫细胞的杀伤、吞噬、释放细胞因子等功能，评估机体的免疫功能。
利用基因芯片等技术对免疫相关基因的表达水平进行检测，了解机体的免疫应答机制。
基因表达谱分析
通过制备针对特定抗原的单克隆抗体，用于免疫学检测和免疫治疗。
通过检测炎症因子（如IL-1、IL-6、TNF等）的水平，了解机体的炎症反应状态。
通过检测自身抗体（如类风湿因子、抗核抗体等）的水平，了解机体的自身免疫状态。
04
CHAPTER
常见免疫检验项目及解读
总结词
乙肝两对半检测是常见的免疫检验项目之一，用于检测乙型肝炎病毒的抗原和抗体。
详细描述
乙肝两对半检测包括乙肝病毒表面抗原（HBsAg）、表面抗体（HBsAb）、e抗原（HBeAg）、e抗体（HBeAb）和核心抗体（HBcAb）的检测。通过检测这些抗原和抗体，可以了解个体是否感染了乙型肝炎病毒，以及感染阶段和免疫状态。
01
免疫组学技术
利用免疫组学方法，研究免疫细胞和分子的功能和相互作用，为免疫疾病的诊断和治疗提供新思路。
02
生物信息学
结合生物信息学技术，对免疫相关基因和蛋白质进行大数据分析，挖掘免疫相关疾病的发病机制和潜在治疗靶点。
《免疫学检查》ppt课件
6
标记
7
第一节 免疫球蛋白〔Ig〕的检测
8
❖Ig的产生、构造与功能 Ig通常是指具有抗体活性和〔或〕抗
体样构造的球蛋白，由浆细胞产生，有特 异性识别抗原的功能，但必须与抗原结合 形成免疫复合物后才能启动效应功能。 ❖包括：IgG、A、M、D、E
9
一、IgG
+ 参考值：7.0-16.6g/L, 占70-80％ + 特点：长效、能透过胎盘，抗菌、抗病毒 + 测定方法：单向免疫扩散〔手工〕
1.E花环〔RFC〕 原理：T细胞外表具SRBC受体 正常 58-72％左右
2.淋巴细胞转化试验〔LCT〕 原理：淋T PHA 淋母细胞 正常：同上 意义：T细胞数量↓免疫缺陷、肿瘤、免疫病
20
3．淋巴细胞分化抗原测定
T细胞：CD3-总T标志 CD4-TH标志 CD8-Ts标志
B细胞： CD19、CD20、CD22等 细胞的荧光免疫标记技术 流式细胞仪的应用
3.CA153〔癌抗原153〕－－对乳腺癌有重要
的辅助诊断作用
28
肿瘤标志物的临床应用
1 筛查：高危人群 2 诊断、良/恶鉴别：辅助指标 3 疗效观察：外科—手术切除/残瘤/姑息
保守—药效、放疗效果 4 预后：病员分群,标志物: 5 随访……
29
第五节 自身抗体检测 〔P423〕
--自身免疫病是指免疫系统对自身成 分的免疫耐受性减低或破坏，产生 自身抗体损伤含有相应自身抗原的 组织器官而造成的疾病。
感染、多克隆增高 ↓反复呼吸道感染 非IgA单克隆，如SLE、
免疫缺陷等
11
三、IgM
+ 参考值：0.5-2.6g/L,占5-10％ + 特点：五聚体，大分子
标记
7
第一节 免疫球蛋白〔Ig〕的检测
8
❖Ig的产生、构造与功能 Ig通常是指具有抗体活性和〔或〕抗
体样构造的球蛋白，由浆细胞产生，有特 异性识别抗原的功能，但必须与抗原结合 形成免疫复合物后才能启动效应功能。 ❖包括：IgG、A、M、D、E
9
一、IgG
+ 参考值：7.0-16.6g/L, 占70-80％ + 特点：长效、能透过胎盘，抗菌、抗病毒 + 测定方法：单向免疫扩散〔手工〕
1.E花环〔RFC〕 原理：T细胞外表具SRBC受体 正常 58-72％左右
2.淋巴细胞转化试验〔LCT〕 原理：淋T PHA 淋母细胞 正常：同上 意义：T细胞数量↓免疫缺陷、肿瘤、免疫病
20
3．淋巴细胞分化抗原测定
T细胞：CD3-总T标志 CD4-TH标志 CD8-Ts标志
B细胞： CD19、CD20、CD22等 细胞的荧光免疫标记技术 流式细胞仪的应用
3.CA153〔癌抗原153〕－－对乳腺癌有重要
的辅助诊断作用
28
肿瘤标志物的临床应用
1 筛查：高危人群 2 诊断、良/恶鉴别：辅助指标 3 疗效观察：外科—手术切除/残瘤/姑息
保守—药效、放疗效果 4 预后：病员分群,标志物: 5 随访……
29
第五节 自身抗体检测 〔P423〕
--自身免疫病是指免疫系统对自身成 分的免疫耐受性减低或破坏，产生 自身抗体损伤含有相应自身抗原的 组织器官而造成的疾病。
感染、多克隆增高 ↓反复呼吸道感染 非IgA单克隆，如SLE、
免疫缺陷等
11
三、IgM
+ 参考值：0.5-2.6g/L,占5-10％ + 特点：五聚体，大分子
临床常用免疫学检测PPT课件
四、降钙素原检测
严重全身性细菌感染时升高 动态监测可评估治疗效果
五、特异性IgE检测
介绍了临床常用免疫学检测项目的临床意义及应用，检测方法及参考范围，各 临床免疫学检测项目的特点。
谢谢您的观看！
CA125存在于卵巢癌组织细胞和浆液性腺癌组织中，不存在于黏液型卵巢癌中。
（五）癌抗原242测定 （六）癌抗原153测定
乳腺癌时，30％～50％的病人可见CA153明显升高，但在早期乳腺癌时，它的阳性率仅 为20%～30%左右，因此主要用于乳腺癌病人的治疗监测和预后判断。
诊断学（第9版）
三、酶类肿瘤标志物检测
（一）前列腺酸性磷酸酶测定 （二）神经元特异性烯醇化酶测定
诊断学（第9版）
降钙素
四、激素类肿瘤标志物检测
甲状腺滤泡细胞C细胞合成和分泌的一种单链多肽激素，甲状腺髓样癌病人血清降钙素 明显升高，而且由于降钙素的半减期较短，因此可作为观察临床疗效的标志物。
第四节
自身抗体检测
诊断学（第9版）
一、类风湿因子的检测
一、蛋白质类肿瘤标志物的检测
（一）甲胎蛋白测定
胎儿早期由肝脏和卵黄囊合成的一种血清糖蛋白，出生后，AFP的合成很快受到抑制。
1.原发性肝癌病人血清中AFP的含量明显升高，常>300μg/L 2.病毒性肝炎与肝硬化病人血清中AFP有不同程度的升高，但常300μg/L 3.生殖腺胚胎肿瘤病人血清中AFP可升高 4.妊娠3～4个月，孕妇AFP开始升高，7～8个月达高峰，但多低于400μg/L，分 娩后3周恢复正常
第八章
临床常用免疫学检测
第一节 体液免疫检测 第二节 细胞免疫检测 第三节 肿瘤免疫检测 第四节 自身免疫检测 第五节 感染免疫检测 第六节 抑制免疫检测 第七节 其他免疫检测
严重全身性细菌感染时升高 动态监测可评估治疗效果
五、特异性IgE检测
介绍了临床常用免疫学检测项目的临床意义及应用，检测方法及参考范围，各 临床免疫学检测项目的特点。
谢谢您的观看！
CA125存在于卵巢癌组织细胞和浆液性腺癌组织中，不存在于黏液型卵巢癌中。
（五）癌抗原242测定 （六）癌抗原153测定
乳腺癌时，30％～50％的病人可见CA153明显升高，但在早期乳腺癌时，它的阳性率仅 为20%～30%左右，因此主要用于乳腺癌病人的治疗监测和预后判断。
诊断学（第9版）
三、酶类肿瘤标志物检测
（一）前列腺酸性磷酸酶测定 （二）神经元特异性烯醇化酶测定
诊断学（第9版）
降钙素
四、激素类肿瘤标志物检测
甲状腺滤泡细胞C细胞合成和分泌的一种单链多肽激素，甲状腺髓样癌病人血清降钙素 明显升高，而且由于降钙素的半减期较短，因此可作为观察临床疗效的标志物。
第四节
自身抗体检测
诊断学（第9版）
一、类风湿因子的检测
一、蛋白质类肿瘤标志物的检测
（一）甲胎蛋白测定
胎儿早期由肝脏和卵黄囊合成的一种血清糖蛋白，出生后，AFP的合成很快受到抑制。
1.原发性肝癌病人血清中AFP的含量明显升高，常>300μg/L 2.病毒性肝炎与肝硬化病人血清中AFP有不同程度的升高，但常300μg/L 3.生殖腺胚胎肿瘤病人血清中AFP可升高 4.妊娠3～4个月，孕妇AFP开始升高，7～8个月达高峰，但多低于400μg/L，分 娩后3周恢复正常
第八章
临床常用免疫学检测
第一节 体液免疫检测 第二节 细胞免疫检测 第三节 肿瘤免疫检测 第四节 自身免疫检测 第五节 感染免疫检测 第六节 抑制免疫检测 第七节 其他免疫检测
自身免疫性疾病的免疫学检验ppt课件
SLE、RA、PSS、慢性肝病
斑点型
核内颗粒状荧光
抗ENA
MCTD、SLE、PSS、SS、PM
核仁型
核仁有荧光
抗核仁抗体
PSS、雷诺现象、SLE
着丝点型
核浆细小相同颗粒荧光
抗着丝点
PSS、CREST综合征
34
均质型
抗核抗体核型
着丝点型
核仁型
斑点型
35
例：间接免疫荧光法（IIF法） 测定抗dsDNA抗体
36
用ELISA间接法检测抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体和抗核小体抗体。
2. ELISA法
37
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
待检血清
按分子大小分开不同区带
分离
转印
NC膜上
抗ENA与膜上相应抗原带结合
抗人IgG·HRP
NC—ENA—抗ENA—抗人IgG·HRP—显色
3. IBT法
38
类风湿因子(rheumatoid factor,RF): 是抗变性IgG的 自身抗体，为19S的IgM，也可见7S的IgG和IgA。 与人变性IgG结合，不与正常IgG发生凝集反应。 RF出现在类风湿性关节炎（RA）患者中，约70%～ 90%的血清中和约60%的滑膜液中可检出IgG类RF；
对SLE有高特异性;SLSLE活动期增高
药物疗效
抗dsDNA抗体
抗DNA抗体
26
抗组蛋白抗体（anti-histonic antibody,AHA）： 由H1、H2A、H2B、H3和H4五个亚单位，各自都 有特异性抗体；
AHA
检出百分率
抗dsDNA
50
70
90
100
药物诱导性狼疮只能检出此
斑点型
核内颗粒状荧光
抗ENA
MCTD、SLE、PSS、SS、PM
核仁型
核仁有荧光
抗核仁抗体
PSS、雷诺现象、SLE
着丝点型
核浆细小相同颗粒荧光
抗着丝点
PSS、CREST综合征
34
均质型
抗核抗体核型
着丝点型
核仁型
斑点型
35
例：间接免疫荧光法（IIF法） 测定抗dsDNA抗体
36
用ELISA间接法检测抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体和抗核小体抗体。
2. ELISA法
37
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
待检血清
按分子大小分开不同区带
分离
转印
NC膜上
抗ENA与膜上相应抗原带结合
抗人IgG·HRP
NC—ENA—抗ENA—抗人IgG·HRP—显色
3. IBT法
38
类风湿因子(rheumatoid factor,RF): 是抗变性IgG的 自身抗体，为19S的IgM，也可见7S的IgG和IgA。 与人变性IgG结合，不与正常IgG发生凝集反应。 RF出现在类风湿性关节炎（RA）患者中，约70%～ 90%的血清中和约60%的滑膜液中可检出IgG类RF；
对SLE有高特异性;SLSLE活动期增高
药物疗效
抗dsDNA抗体
抗DNA抗体
26
抗组蛋白抗体（anti-histonic antibody,AHA）： 由H1、H2A、H2B、H3和H4五个亚单位，各自都 有特异性抗体；
AHA
检出百分率
抗dsDNA
50
70
90
100
药物诱导性狼疮只能检出此
《免疫学检验》免疫应答 ppt课件
T细胞功能检测
总结词
T细胞功能检测是评估机体细胞免疫功能的重要手段，通过检测T细胞的增殖、活 化和细胞因子的产生等来判断免疫应答的质量。
详细描述
T细胞功能检测通常采用细胞培养和流式细胞术等方法。通过刺激T细胞增殖、诱 导其产生细胞因子等手段，可以了解T细胞的功能状态和活性。这些方法对于评 估机体对感染、肿瘤和自身免疫性疾病等的免疫应答具有重要意义。
05
免疫应答的调节与干预
Chapter
免疫调节剂的应用
免疫调节剂
指一类能够调节免疫系统功能、影响免疫应答的药物或生物制品 。
免疫调节剂的作用机制
通过影响免疫细胞的分化、增殖、活化以及细胞因子的产生等途径 ，调节免疫应答的强度和方向，从而发挥治疗作用。
常见的免疫调节剂
包括免疫抑制剂、免疫增强剂、生物反应调节剂等。
和功能。
细胞因子之间相互作用形成复杂 的网络，可放大或抑制免疫应答
。
细胞因子网络具有自适应和自调 节功能，可快速响应外界刺激，
维持内环境稳态。
03
免疫应答的检测方法
Chapter
抗体检测
总结词
抗体检测是检测免疫应答的重要手段之一，通过检测抗体水平可以了解机体的免疫状态和免疫反应程 度。
详细描述
抗体检测通常采用血清学方法，通过对抗原特异性抗体的检测来判断机体的免疫应答情况。常见的抗 体检测方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光技术、免疫印迹等。这些方法可用于检测各 类抗体，如IgG、IgM、IgA等，从而评估机体对特定抗原的免疫应答。
04
免疫应答在疾病中的作用
Chapter
感染性疾病
感染性疾病是由病原体（如细菌、病毒、真菌等）引起的疾病，免疫应答在感染性 疾病的预防、控制和治疗中起着至关重要的作用。
免疫学检查PPT课件
Y
YY
Y
Y
Y
Y
酶免疫化学发光仪测定原理：例如竞争法
+ ++
磁性 羊抗鼠 单克隆
微粒
IgG 鼠 抗 茶 碱 抗 体
子
待测血清中 茶碱
ALP标 记 的 茶碱
3 37℃ 7 C
YYY
AM PD
AM PPD
37℃
清洗 3 37℃ 7 C
四、生殖内分泌功能的免疫分析
卵巢储备功能的实验监测 卵巢储备功能是指卵巢内存留卵泡的数量和质量，反映女性的生育能力。
➢ HPV检测方法：传统的细胞学检测方法及其进展:巴氏涂片法、薄层液 基制片技术、计算机辅助检测技术等
➢ HPV-DNA检测方法
➢ HPV检测新技术
HPV-DNA检测方法：通用型引物聚合酶链反应(PCR) 核酸杂交检测 核酸印迹原位杂交 斑点印迹 原位杂交 杂 交 捕 获 法 (hybrid capture- II ， 又 称 HC-Ⅱ 系 统 )
梅毒螺旋体感染的实验室诊断
根据梅毒螺旋体（treponema pallidum，TP） 的生物学及免疫学特 性，检测方法主要有以下几种：
1病原体的检查 2梅毒血清学试验 3基因诊断技术
二、生殖感染的免疫实验诊断
基因诊断技术 ：聚合酶链反应（PCR）从选择的标本扩增梅毒螺旋体 DNA序列，使其拷贝数量增加，再用特异性探针来进行检测，能选择性 地将靶基因扩增106以上，方法敏感特异。
分子生物学检测方法 ：有基因探针、PCR、蛋白表达等方法
二、生殖感染的免疫实验诊断
衣原体感染的免疫学诊断 ： 衣原体包括沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体。寄生于宿主细胞 内，有特殊的生长繁殖周期，在周期中以形态和功能不同的状态存在， 即细胞外具有感染性的原体和细胞内无感染性的始体或网状体。
YY
Y
Y
Y
Y
酶免疫化学发光仪测定原理：例如竞争法
+ ++
磁性 羊抗鼠 单克隆
微粒
IgG 鼠 抗 茶 碱 抗 体
子
待测血清中 茶碱
ALP标 记 的 茶碱
3 37℃ 7 C
YYY
AM PD
AM PPD
37℃
清洗 3 37℃ 7 C
四、生殖内分泌功能的免疫分析
卵巢储备功能的实验监测 卵巢储备功能是指卵巢内存留卵泡的数量和质量，反映女性的生育能力。
➢ HPV检测方法：传统的细胞学检测方法及其进展:巴氏涂片法、薄层液 基制片技术、计算机辅助检测技术等
➢ HPV-DNA检测方法
➢ HPV检测新技术
HPV-DNA检测方法：通用型引物聚合酶链反应(PCR) 核酸杂交检测 核酸印迹原位杂交 斑点印迹 原位杂交 杂 交 捕 获 法 (hybrid capture- II ， 又 称 HC-Ⅱ 系 统 )
梅毒螺旋体感染的实验室诊断
根据梅毒螺旋体（treponema pallidum，TP） 的生物学及免疫学特 性，检测方法主要有以下几种：
1病原体的检查 2梅毒血清学试验 3基因诊断技术
二、生殖感染的免疫实验诊断
基因诊断技术 ：聚合酶链反应（PCR）从选择的标本扩增梅毒螺旋体 DNA序列，使其拷贝数量增加，再用特异性探针来进行检测，能选择性 地将靶基因扩增106以上，方法敏感特异。
分子生物学检测方法 ：有基因探针、PCR、蛋白表达等方法
二、生殖感染的免疫实验诊断
衣原体感染的免疫学诊断 ： 衣原体包括沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体。寄生于宿主细胞 内，有特殊的生长繁殖周期，在周期中以形态和功能不同的状态存在， 即细胞外具有感染性的原体和细胞内无感染性的始体或网状体。
临床免疫检验的质量保证PPT医学课件
Pm=
Pm<5%为失控。此时，阴性标本可以发出报告，所有阳 性标本在查清原因后重做。
根据二项式分布的概率计算
如果一个实验室检测HBsAg，平常病人结果的阳性率为 10%，即p=0.1, 在某一次检测19个样本出现5个阳性结果， 14个阴性结果，则检测过程中是否存在污染的可能性可通 过下述方法计算。即计算在19个样本中出现至少5个阳性结 果的概率，此时的概率为1-（获得0个或1个或2个或3个或4 个阳性结果的概率）即：
本章小结
分析前质量保证包括检验项目的申请、患者的准 备、标本的采集、运送、接收和保存等。
分析中的质量保证包括实验室环境条件、仪器设 备维护校准、试剂方法的性能验证、标准操作程序的 建立、人员培训、标本前处理、室内质量控制、室间 质量评价和实验室间比对等，其中室内质量控制和室 间质量评价是质量保证的重要方面。
本章小结
临床上绝大部分开展的免疫学检验，都是仅能作为 筛查试验或诊断试验，阳性结果仅代表在检测中发生了 抗原抗体的阳性反应，但阳性反应可能是真阳性，也可 能是假阳性，也就是说存在一定比例的假阳性可能。由 于免疫检验方法学的这一局限性，在免疫检验的分析前 、分析中和分析后质量保证中，都涉及到与其他检验项 目不同的特点，突出表现在检验项目的申请（分析前） 和结果的报告与解释（分析后）两个方面。
是对实验室操作和实验方法的回顾性评价，而不是用 来决定实时的测定结果的可接受性。
通过参与EQA，实验室可对自己的实验操作进行纠正， 从而起到自我教育的作用。
第五节 分析后的质量保证
重点提示
结果的报告与解释 检验后标本的保存与处理 咨询服务
结果的报告
基本信息 ①患者的姓名、性别、年龄； ②送检科室或单位名称； ③标本采集时间和实验室接收标本时间；④标本的编号或 条码；⑤检测项目；⑥标本类型；⑦检测方法和主要设备 等。
Pm<5%为失控。此时，阴性标本可以发出报告，所有阳 性标本在查清原因后重做。
根据二项式分布的概率计算
如果一个实验室检测HBsAg，平常病人结果的阳性率为 10%，即p=0.1, 在某一次检测19个样本出现5个阳性结果， 14个阴性结果，则检测过程中是否存在污染的可能性可通 过下述方法计算。即计算在19个样本中出现至少5个阳性结 果的概率，此时的概率为1-（获得0个或1个或2个或3个或4 个阳性结果的概率）即：
本章小结
分析前质量保证包括检验项目的申请、患者的准 备、标本的采集、运送、接收和保存等。
分析中的质量保证包括实验室环境条件、仪器设 备维护校准、试剂方法的性能验证、标准操作程序的 建立、人员培训、标本前处理、室内质量控制、室间 质量评价和实验室间比对等，其中室内质量控制和室 间质量评价是质量保证的重要方面。
本章小结
临床上绝大部分开展的免疫学检验，都是仅能作为 筛查试验或诊断试验，阳性结果仅代表在检测中发生了 抗原抗体的阳性反应，但阳性反应可能是真阳性，也可 能是假阳性，也就是说存在一定比例的假阳性可能。由 于免疫检验方法学的这一局限性，在免疫检验的分析前 、分析中和分析后质量保证中，都涉及到与其他检验项 目不同的特点，突出表现在检验项目的申请（分析前） 和结果的报告与解释（分析后）两个方面。
是对实验室操作和实验方法的回顾性评价，而不是用 来决定实时的测定结果的可接受性。
通过参与EQA，实验室可对自己的实验操作进行纠正， 从而起到自我教育的作用。
第五节 分析后的质量保证
重点提示
结果的报告与解释 检验后标本的保存与处理 咨询服务
结果的报告
基本信息 ①患者的姓名、性别、年龄； ②送检科室或单位名称； ③标本采集时间和实验室接收标本时间；④标本的编号或 条码；⑤检测项目；⑥标本类型；⑦检测方法和主要设备 等。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
我国肿瘤诊治的国策是早期发现，早期诊 断，早期治疗。
实验诊断是肿瘤检查中必不可少的手段之
一，血清、体液、分泌物或排泄物中肿
瘤细胞产生的糖蛋白、激素、酶类及代
谢产物等肿瘤标志物（tumor markers，
TM）检测是目前肿瘤的诊断、疗效观察、
复发判断等的重要手段。
雅安职业技术学院
第一节 概述
在肿瘤诊治的各种方法与手段中，肿瘤标志物虽 然历史悠久，但直到近几十年来随着肿瘤基础理 论与新检测技术的发展才被广泛应用于临床。 在现代医学诊断中，对于无症状的肿瘤病人，肿 瘤标志物常常是唯一的能早期发现肿瘤的线索。
二
糖链抗原类肿瘤标志物
三
酶类肿瘤标志物
四
激素类肿瘤标志物
五
蛋白类肿瘤标志物
六
其他常用的肿瘤标志物
雅安职业技术学院
一、胚胎抗原类肿瘤标志物 胚胎抗原类物质是在胚胎发育阶段由胚胎组织 产生的正常成分，在胚胎后期减少，出生后逐 渐消失或仅存极微量，在癌肿患者中这些胚胎 抗原重新出现。
雅安职业技术学院
甲胎蛋白
肿瘤相关抗原（tumor associated antigen，TAA） 是指非肿瘤细胞所特有的，既存在于肿瘤细胞表 面，也存在于相应的正常细胞中，只是在细胞癌 变时其含量才会明显增加。
雅安职业技术学院
二、肿瘤标志物 （一）肿瘤标志物的定义
肿瘤标志物（tumor marker，TM）是指在恶性肿瘤 发生和增殖过程中，由肿瘤细胞的基因表达而合 成分泌的，或是由机体对肿瘤反应而异常产生和 或升高的，反映肿瘤存在和生长的一类物质。
雅安职业技术学院
临床应用
AFP主要用于辅助诊断原发性肝癌及筛查高危人群。 持续一个月以上AFP﹥500μg/L，并能排除妊娠、活
动性肝炎、睾丸癌或卵巢畸胎瘤Байду номын сангаас，意味着存在 肝癌。 目前在较多国家使用AFP检测来普查肝癌，AFP也用 于肝癌的治疗效果及预后评估。 良性肝脏疾病如肝炎、肝硬化AFP也可升高，但95% 小于200μg/L 。
相关肿瘤 肝细胞癌、胚细胞癌（非精原细胞瘤）
癌胚抗原(CEA) 糖类抗原125(CA125)
结肠癌、直肠癌、胰腺癌、肺癌等 卵巢癌、子宫内膜癌
糖类抗原19-9(CA19-9)
胰腺癌、胃肠癌、肝癌
糖类抗原15-3(CA15-3)
乳腺癌、卵巢癌
神经元特异性烯醇化酶(NSE) 小细胞肺癌、成神经细胞癌、肠癌
在鉴别卵巢包块的良恶性上特别有价值，其值的大小 与肿瘤大小、肿瘤分期相关。
CA125持续增高提示进行性发展或治疗效果不佳，而 下降则为预后良好和治疗有效的标志。
参考区间
化学发光免疫分析法
成人<25μg/L CLIA
甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)在胎儿期分别 由卵黄囊和胎肝合成，在胎儿诞生后18个月，清 蛋白合成增加，AFP浓度下降。
正常成人肝细胞几乎不产生AFP。当肝细胞或生殖腺 胚胎组织等癌变时，有关基因重新被激活，又大 量表达AFP。
雅安职业技术学院
二、 糖链抗原类肿瘤标志物
糖链抗原（carbohydrate antigen，CA）是 由于细胞膜糖蛋白中糖基异常而形成的抗 原。
“CA”也意味着肿瘤，以往也称癌抗原。 正常细胞膜表面都有丰富的糖蛋白，当正常
细胞转化为恶性细胞时，细胞表面的糖蛋 白发生变异，形成了一种和正常细胞不同 的特殊抗原，通常存在于肿瘤细胞表面或 由肿瘤细胞分泌。
雅安职业技术学院
CA 125
参考区间
成人<7.0μg/L
CLIA
一种大分子多聚糖蛋白，存在于胎儿体腔上皮分化 而来的心包膜、腹膜、胸膜等组织。
在浆液性卵巢癌、宫颈内膜腺癌、乳腺癌等高度表 达。但在黏液性卵巢癌不表达。
雅安职业技术学院
临床应用
CA125是目前最重要的卵巢癌相关抗原，主要用于卵 巢肿瘤的诊断，疗效观察。
免疫学检验
雅安职业技术学院药学检验系 ——检验教研室雷娇娇
雅安职业技术学院
第十六章 肿瘤标志物检验
雅安职业技术学院
目录
1 概述 2 常见肿瘤标志物
单克隆免疫球蛋白增殖病的免疫学 3 检测 4 肿瘤标志物的检测和联合应用
返回总目录
雅安职业技术学院
现状
肿瘤严重威胁人们的健康，乃当今世界人 类的头号杀手，全世界每年有700多万人 死于恶性肿瘤。
临床应用
CEA升高主要见于结/直肠癌，其他恶性肿瘤如胰腺 癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、子宫癌CEA也升高。
肿瘤患者手术切除后6周，CEA水平恢复正常，否则 提示有残存肿瘤。
若CEA浓度持续不断升高，或其数值超过正常5～6倍 者均提示预后不良。
良性疾病如肠道炎症、肾功能不全、肝硬化等也可 导致CEA升高。
雅安职业技术学院
癌胚抗原
参考区间 成人<7.0μg/L
CLIA
癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）一 种由641个氨基酸组成的糖蛋白，糖链含岩藻糖、 甘露糖、半乳糖以及唾液酸。
胎儿在妊娠两个月后由消化道分泌CEA，出生后消失。
正常成人血清中CEA含量极低。
雅安职业技术学院
α-L-岩藻糖苷酶(AFU)
肝癌
人绒毛膜促性腺激素(HCG) 胚胎绒毛膜癌、睾丸恶性肿瘤(非精原细 胞)
儿茶酚胺类物质
嗜铬细胞瘤
细胞角蛋白19片段
肺癌
前列腺特异性抗原(PSA)
前列腺癌
铁蛋白
霍奇金病、白血病、肝癌
本周氏蛋白
返回章目录多发性骨髓瘤、游离轻雅链病安职业技术学院
第二节 常见肿瘤标志物
一
胚胎抗原类肿瘤标志物
肿瘤抗原可以是肿瘤标志物，但肿瘤标志物不一定 是肿瘤抗原。
雅安职业技术学院
（二）肿瘤标志物的分类 肿瘤标志物的分类和命名尚未完全统一。 一般可分为胚胎抗原类、糖链抗原类、酶类、
激素类、蛋白质类及基因类标志物等。
雅安职业技术学院
常见的肿瘤标志物
分类 胚胎抗原 类 糖链抗原 类
酶类
激素类
蛋白质类
主要标志物 甲胎蛋白(AFP)
雅安职业技术学院
一、肿瘤抗原 肿瘤细胞是由正常细胞转化而来，与正常细胞不同
的是高速占位性增殖、浸润与转移。 肿瘤抗原（tumor antigen）是指在肿瘤发生、发
展过程中新出现的或过度表达的抗原物质。 目前主要是根据肿瘤抗原和肿瘤的关系分类，可分
为肿瘤特异性抗原和肿瘤相关抗原。
雅安职业技术学院
肿瘤特异性抗原（tumor sepific antigen，TSA） 指只存在于肿瘤细胞表面，而不存在于正常相应 组织或细胞的大分子物质。