17_雌二醇对双齿围沙蚕幼虫SOD_CAT和GST活性的影响
双齿围沙蚕浸膏生物活性的研究
双齿围沙蚕浸膏生物活性的研究双齿围沙蚕（Larvae of Dendrolimus kikuchii）是一种松毛虫，广泛分布于亚洲地区。
其幼虫会食用松树的叶子，对松树的危害较大。
为了控制松毛虫的危害，出现了多种杀虫剂，但是其对环境的危害以及对非靶标物种的影响成为越来越大的关注点。
因此，越来越多的研究将目光投向了天然存在植物提取物，特别是中药材，探索其中成分的杀虫效果。
双齿围沙蚕浸膏属于中草药研究的范畴，其主要成分来自于双齿围沙蚕及其幼虫的体内。
双齿围沙蚕浸膏常常用于中药材中，其药效在传统中药方剂中的应用也越来越广泛。
在先前的研究中，双齿围沙蚕浸膏显示出优秀的抗菌和抗炎作用，随着进一步的研究，也有力地证明了其对昆虫的毒杀效果。
双齿围沙蚕浸膏对双齿围沙蚕的毒杀效果已被多次证明。
在一项实验中，将浸膏涂在松叶上，然后将双齿围沙蚕放置在上面，经过一段时间后，发现显著的死亡率。
考虑到中药材的毒杀效果与其毒杀剂量息息相关，这项发现表明双齿围沙蚕浸膏这一中药材具有一定的昆虫毒杀效果。
进一步的研究表明，双齿围沙蚕浸膏对多种昆虫均具有毒杀效果，包括其他松毛虫和某些害虫。
该研究认为，双齿围沙蚕浸膏中的一些成分能够影响昆虫的神经系统和呼吸系统，导致昆虫死亡。
此外，有研究发现双齿围沙蚕浸膏还具有较好的抑制卵孵化和幼虫食欲的效果。
卵孵化是昆虫种群增长的首要环节，双齿围沙蚕浸膏能够延迟卵的孵化，从而减缓种群的增长速度。
此外，幼虫通常需要不断摄食以维持生长，而双齿围沙蚕浸膏可以干扰其对营养物质的吸收和利用，从而抑制幼虫的食欲，降低它们的代谢能力和免疫力。
虽然双齿围沙蚕浸膏的毒杀效果已经被证明，但现在仍有一些问题需要解决。
首先，目前尚不明确其毒杀剂量。
其次，尚不清楚其对非靶标昆虫或人类的生物活性。
最后，双齿围沙蚕浸膏的物理性质和有效成分的生物利用度需要进一步研究。
总之，双齿围沙蚕浸膏是一种进一步研究的潜在天然昆虫杀虫剂。
其具有多种生物活性，特别是对松毛虫具有昆虫毒杀效果，对于控制该害虫的危害提供了新的思路和方法。
17β-雌二醇对巨噬细胞内Ca2+的影响
17β-雌二醇对巨噬细胞内Ca2+的影响洪敏;邵建华;华永庆;孙小玉;李晓冬;朱荃【期刊名称】《现代中西医结合杂志》【年(卷),期】2011(020)014【摘要】目的观察17β-雌二醇(E2)对巨噬细胞胞浆游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响及可能的作用途径.方法小鼠腹腔巨噬细胞用Flou-3/AM负载,用激光共聚焦显微镜检测,[Ca2+]i以细胞内荧光强度表示.结果 100 nmol/L的17β-雌二醇能使小鼠腹腔巨噬细胞的[Ca2+]i明显提高(提高率39.8%).巨噬细胞在无钙的条件下,加入E2后[Ca2+]i升高10.6%,在补充入Ca2+后,[Ca2+]i更有明显升高.用维拉帕米、肝素和普鲁卡因预先处理后,E2诱导的[Ca2+]i升高分别被抑制了52.8%,16.6%和36.7%.结论 E2诱导的腹腔巨噬细胞胞浆游离钙的升高是外钙内流和内钙释放共同作用的结果,并且这种作用与L-型钙通道、IP3受体和ryanodine受体关系密切.【总页数】3页(P1705-1707)【作者】洪敏;邵建华;华永庆;孙小玉;李晓冬;朱荃【作者单位】南京中医药大学,江苏,南京,210029;南京中医药大学,江苏,南京,210029;南京中医药大学,江苏,南京,210029;南京中医药大学,江苏,南京,210029;南京中医药大学,江苏,南京,210029;南京中医药大学,江苏,南京,210029【正文语种】中文【中图分类】R-332【相关文献】1.17β-雌二醇对大鼠肺泡巨噬细胞溶菌酶分泌的影响 [J], 成春英;汤银娟;王建钧;谢应桂;彭梁杰2.17β-雌二醇对大鼠腹腔巨噬细胞免疫活性影响 [J], 袁文丹;崔勇;刘巍;蔡虹静3.17-β雌二醇对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、一氧化氮产生和诱导型一氧化氮合酶表达的影响 [J], 孙爱平;王芳;段长恩;宋向凤4.17雌二醇对小鼠腹腔巨噬细胞的影响 [J], 高玉民5.17β-雌二醇对仔兔DRG神经元内Ca2+浓度的影响 [J], 郭雅茹;张金;张莹利;赵建帅;杜宜楠;辛先萌;徐永平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
环境激素睾丸酮和雌二醇对卜氏晶囊轮虫繁殖影响
doi: 10.7541/2018.020环境激素睾丸酮和雌二醇对卜氏晶囊轮虫繁殖影响刘露露卢绪鑫叶天韵金司晨闵元棋韩亚杰杨家新(南京师范大学生命科学学院, 南京 210023)摘要: 采用生态学实验方法, 研究睾丸酮(Testoterone)和雌二醇(Estradiol)单一及组合对卜氏晶囊轮虫生命周期中主要发育阶段历时和种群增长率的影响。
结果显示: 睾丸酮(T)的48h LC50为9.56 mg/L, 直线回归方程为Y=1.98X+3.06 (R2=0.92);雌二醇(E) 48h LC50为8.18 mg/L,直线回归方程为Y=3.53X+1.78 (R2=0.92)。
除0.5 mg/L浓度组外, 睾丸酮和雌二醇均显著缩短轮虫平均寿命、减少后代幼体个数以及降低种群增长率(r)。
其中8 mg/L睾丸酮与对照组相比显著延长轮虫生殖前期11.71%、平均寿命缩短52.22%,后代个数减少82.20%; 8 mg/L雌二醇与对照组相比,生殖前期显著延长7.10%,平均寿命缩短49.75%,后代个数减少83.33%。
在2种激素定量组合(8 mg/L)实验中, 与对照组相比, 各实验组的生殖前期显著延长34.17%—48.01%,平均寿命显著缩短31.56%—42.12%, 后代个数明显减少24.44%—80.33%; 第5天, 处理组T6E2、T4E4、T8E0、T0E8和T2E6的r值比对照组分别降低30.00%、37.14%、41.43%、60.00% 和65.71%。
研究结果显示睾丸酮和雌二醇对卜氏晶囊轮虫生长发育及种群增长率有明显影响, 并且卜氏晶囊轮虫对雌二醇表现更为敏感, 2种激素呈现出协同作用。
关键词: 睾丸酮; 雌二醇; 卜氏晶囊轮虫; 生殖前期; 平均寿命; 种群增长率中图分类号: Q178.1 文献标识码: A 文章编号: 1000-3207(2018)01-0155-07轮虫是重要的淡水浮游生物类群, 由于其个体小, 生活史周期和世代时间短、生殖速度快, 自20世纪70年代初期开始, 轮虫被用作毒理学研究的重要受试动物[1, 2], 如Buikema等[3]采用轮虫评价重金属离子的毒性, 并获得理想效果。
雌二醇、壬基酚、多氯联苯、镉和锌暴露对唐鱼体内超氧化物歧化酶活性的影响
Ｄ ｉｔ ． ９ ９ ｊｉ ｎ １ ０ －８ ７ ２ ｌ ． １ ０ ９ ｏ ：０ ３ ６ ／．ｓ ． ０ ５４ ４ ． ０ ２ ０ ． ０ ｓ
Ｅｆｅ ｔ ｆ ｅ ｔ ａ ｉ ｌ ｏ ｙ ｐ ｎｏ ，ｐ ｌ ｃ ｌ ｒｎ ｔ ｄ ｂ ｐ ｅ ｙ ｓ ａ ｍｉ ｍ ｎ ｆ ｃ ｓ ｏ ｓｒ ｄ ｏ ，ｎ ｎ ｌ ｈｅ ｌ ｏ ｙ ｈ ｏ ｉ ａ ｅ ｉ ｈ ｎ ｌ ，ｃ ｄ ｕ ａ ｄ ｚ ｎ ｎ ｔ ｃ ｉ ｉｙ ｏ ｕｐ ｒ ｘ ｄ ｓ ｕｔ ｓ ｎ Ｔ ｎｉｈｔ ｙ ｌ ｏ ｕｂ ｓ ｉ ｃ ｏ ｈｅ ａ ｔｖ ｔ ｆ ｓ ｅ ｏ ｉ ｅ ｄｉｍ ａ ｅ ｉ ａ ｃ ｈ ｓ ａ ｂ ｎ ｅ
【 键词 】 超氧化物歧化酶 ； 关 内分 泌 干 扰 物 ； 物 化 学 ； 鱼 ； 性 作 用 生 唐 毒 【 图分 类 号 】Ｑ１６ ；９ —３ 中 ７ Ｑ ５３ 【 献 标 识 码 】Ａ 文 【 文章 编号 】１０ －８７ ２ １ ） １０ ８ ９ ０ ５ ４ （ ０２ ０ －３ － ４ ０
的 趋 势 ； ｃ 、ｎ 各 浓 度组 都 对 唐 鱼体 内 的 Ｓ Ｄ 活 性 产 生 了一 定 的抑 制 作 用 ， 且 抑 制 程 度 随 着 时 间 的 延 长 ④ ｄ ｚ Ｏ 并
而 加 深 。 结 论 Ｅ 、 Ｐ Ｐ Ｂ 、ｄ 、ｎ 对 唐 鱼 的 Ｓ Ｄ酶 活 力 有 明显 影 响 ， 们 单 独 作 用 时 的 Ｓ Ｄ 活 性 与 暴 露 浓 ，Ｎ 、Ｃ ｓＣ “ Ｚ Ｏ 它 Ｏ 度 之 间 存 在 良好 的 剂 量 一 应 关 系 。联 合 作 用 效 应 与 暴 露 时 间 和 （ ） 物 质 浓 度 有 关 ， 部 分 表 现 为 毒 性 增 强 。 效 或 各 大
ｐ ｅ ｙｓ（ ＣＢ ），Ｃｄ ，Ｚ “ ａ ｄｔｅｒｍｉｔｒ ｎ ｔｅ Ｓ Ｄ ａ ｔ ｉ ｎ Ｔ ｎｃ ｔｙ ｌｏ ｕ ｅ．Ｍ ｅｈ ｄ ｈ ｎｌ Ｐ ｓ “ ｎ ｎ ｈ ｉ ｘｕｅｏ ｈ Ｏ ｃｉ ｔ ｉ ａ ｉｈｈ ｓａｂ ｎ ｂｓ ｖቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ｔｏ ｓ ａｂ ｎ ｂｓ ｌｏ ｕ ｅ
蝉花ＳＬＧＹ－２对斜纹夜蛾生长发育及体内保护酶活性的影响
蝉花ＳＬＧＹ－２对斜纹夜蛾生长发育及体内保护酶活性的影响作者：张胜兰刘健锋邹晓杨茂发商胜华来源：《山地农业生物学报》2020年第04期摘要：为探究蝉花Isaria cicadae SLGY-2对斜纹夜蛾生长发育和体内3种保护酶活性的影响。
采用不同浓度的蝉花SLGY-2对斜纹夜蛾2龄幼虫侵染处理，观察后期生长发育;并对不同时间段处理后斜纹夜蛾体内酶活性进行测定。
结果表明：不同浓度孢子悬浮液处理后，斜纹夜蛾幼虫发育历期显著延长，化蛹率和羽化率显著降低，同时产卵量也顯著降低;对蛹重和卵的孵化率无显著影响。
孢子悬液浓度在1×108个/mL时，虫体内SOD活性在处理16h时达到最高，为75.98U/mg，酶的比活力为同期对照组的2.49倍，CAT活性为88.46U/mg;处理24h时，POD活性为7.56U/mg，3种酶活性的值大于浓度为1×107个/mL条件下的处理值，且与同期对照处理结果差异显著。
结果表明：斜纹夜蛾在抵御蝉花SLGY-2侵染过程时，虫体内3种保护酶均出了应激反应，且随着菌株孢子浓度增加，酶活性逐渐上升，但最终表现为下降。
关键词：斜纹夜蛾;棒束孢;生长发育;保护酶活性中图分类号：S433.4文献标识码：A文章编号：1008-0457（2020）04-0030-07 国际DOI编码：10.15958/ki.sdnyswxb.2020.04.004Abstract：In order to investigate the effect of Isaria cicadae SLGY-2 on the development of Spodoptera litura and the activities of three protective enzymes.Different concentrations of I.cicadae SLGY-2 were used to infect the 2nd instar larvae of S.litura， and the growth and development in the later period were observed; and the enzyme activity in S.litura was determined after treatment at different time periods. The results showed that the development period of S.litura larvae was significantly prolonged the pupation rate and the emergence rate were significantly reduced， and the egg production was also significantly reduced.There was no significant effect on the pupal weight and the hatchability of eggs.When the spore suspension was 1×108 per milimeter，the SOD activity in the worms reached the highest at 16 h，75.98 U/mg.The specific activity of the enzyme was 2.49 times that of the control group during the same period，and the CAT activity was 88.46 U/mg.POD activity was 7.56 U/mg when treated for 24 h， and the activities of the three enzymes were all greater than the first two concentrations，and the results were significantly different from the control treatments of the same period. During protection against the infestation of I.cicadae SLGY-2， S.litura responded to the three protective enzymes in the insect body， and the enzyme activity gradually increased with the increase of the spore concentration of the strain， but eventually showed a decline .Keywords：Spodoptera litura; Isaria; growth and development; protective enzyme activity斜纹夜蛾Spodoptera litura属鳞翅目夜蛾科，是一种杂食性、暴食性、迁飞性的重要农业害虫，寄主植物多达100余种[1]，在较短时间内会给农作物造成重大的经济损失[2-3]。
双齿围沙蚕浸膏生物活性的研究
（ 大 连 海 洋 大 学 食 品科 学 与 工 程 学 院 ， 辽宁 大连 １ １ ６ ０ ２ ３ ）
摘 要 ： 用 ７ Ｏ 乙醇 对 双 齿 围沙 蚕 进 行 热 浸提 后 ， 得 到 双 齿 围沙 蚕 浸 膏 。 然 后 对 得 到 的浸 膏 依 次 用 石 油 醚 、
产物具有结构新颖独特 、 生物活性较强 的特点。
齿 围沙 蚕 ， 匀浆 粉碎 后置 于 圆底烧瓶 中 ， 加入 ４倍
体积（ Ｖ／ ｗ） ７ Ｏ 乙醇热 浸提 ２ ｈ ， 滤 出提取 液 ， 残 渣 中继 续 加 ４倍 体 积 （ Ｖ／ Ｗ） ７ ０ 乙醇 提取 ， 重 复 ３次 。合 并浸 提液 ， 离心 取 上 清液 进 行 减压 浓 缩 ， 将 浓缩 液 冻干后 得 双齿 围沙 蚕总浸 膏 。 将 上述 得 到 的 总 浸 膏 依 次 用 等 体 积 的 石 油
测 定参 照朱 晓杰 的方 法 ［ ５ ］ 。用 含 有 ６ ． ８ ｍｍｏ ｌ ・ Ｌ Ｎａ Ｃ １ 的 ０ ． ２ ｍｏ ｌ ・Ｌ 硼 酸 盐 缓 冲液 （ ｐ Ｈ一
８ ． ３ ） ， 将 Ｈｉ ｐ — Ｈｉ ｓ —Ｌ ｅ ｕ配 成 ７ ． ６ ｍｍｏ ｌ ・ Ｉ 一 的
乙酸 乙 酯及 正 丁 醇进 行 萃 取 ， 得 到 ３部 分 萃 取 物 。 对 双 齿 围沙 蚕 浸 膏及 各 有机 溶 荆 萃取 部 分 进 行 抑 菌 试 验 和
血 管 张肽 Ｉ 转化酶（ ＡＣ Ｅ ） 抑 制测 试 。 结果 表 明 ， 双 齿 围沙 蚕 浸 膏及 各 有 机 溶 剂 萃 取 部 分 均 具 有 抑 制 ＡＣ Ｅ
《 河 北渔 业￣ ２ ０ １ ５年 第 ９期 （ 总第 ２ ６ １期 ）
3种农药对天幕毛虫超氧化物歧化酶活性的影响
3种农药对天幕毛虫超氧化物歧化酶活性的影响查黎春;胡春祥;曹传旺;王志英;梁臣【期刊名称】《东北林业大学学报》【年(卷),期】2011(039)005【摘要】利用氮蓝四唑(NBT)法测定了高效氯氰菊酯、阿维菌素和辛硫磷对天幕毛虫4龄幼虫离体超氧化物歧化酶(SOD)和活体幼虫体内SOD活性的影响.结果表明:质量浓度为480、960μg/L的高效氯氰菊酯对离体SOD活性具有激活作用,质量浓度为1 920、3 840μg/L的高效氯氰菊酯表现抑制作用;质量浓度为480 μg/L的高效氯氰菊酯对活体幼虫体内SOD表现为激活作用,而质量浓度为3 840μg/L则表现为抑制作用.质量浓度为0～640μg/L的阿维菌素处理天幕毛虫幼虫离体SOD 和质量浓度为40、320μg/L的阿维菌素处理天幕毛虫活体幼虫后,其SOD活性均高于对照,表现诱导增加作用.质量浓度为0～10 240μg/L的辛硫磷处理天幕毛虫幼虫,离体SOD活性均高于对照,且质量浓度为2 560μg/L的辛硫磷激活作用最强,比对照提高33.46%.质量浓度为40μg/L和2 560μg/L的辛硫磷处理天幕毛虫幼虫48 h,其活体幼虫体内SOD的活性也均高于对照,且处理48 h时间点的SOD活性激活作用最强,分别比对照提高207.78%和287.46%.研究结果表明,天幕毛虫幼虫SOD参与了3种农药作用响应,增强了体内自由基的清除能力.【总页数】3页(P105-107)【作者】查黎春;胡春祥;曹传旺;王志英;梁臣【作者单位】东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040;黑龙江省鸡西市林业局【正文语种】中文【中图分类】Q965.9【相关文献】1.农药防治柞蚕场天幕毛虫的试验：Ⅲ防治天幕毛虫的最佳施药... [J], 高德三;王文航2.农药防治柞蚕场天幕毛虫的试验研究：II.药剂对柞蚕的残毒期试验 [J], 高德三3.黄褐天幕毛虫4种生物农药药效比较及使用建议 [J], 敖特根; 那顺勿日图; 翟秀春; 陈晨; 李文娇4.3种农药对柞园天幕毛虫的防效 [J], 赵鸿宇;李喜升;陈增良;董绪国;穆秀奇;赵世文5.菊芋提取物对黄褐天幕毛虫营养状况及酶活的影响 [J], PHAM HUNG HAI;邹航;吴德东;曾健勇;张国财;张杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
三种药物对双齿围沙蚕（Perinereisaibuhitensis）的急性毒性及其体内抑菌..
分类号密级U D C 编号硕士学位论文三种药物对双齿围沙蚕（Perinereis aibuhitensis）的急性毒性及其体内抑菌效果的研究苏筱竺（20160908013061）指导教师姓名杨大佐研究员专业名称水产养殖论文答辩日期 2019年6月1日学位授予日期 2019年 6 月Thesis for the Degree of MasterAcute toxicity of three drugs to Perinereis aibuhitensis and their bacteriostatic effect in vivoSuperviso: Professor Yang DazuoMaster candidate: Su XiaozhuDALIAN OCEAN UNIVERSITY, DALIAN, LIAONING, P. R.CHINA摘要据不完全统计我国每年对虾的养殖产业规模每年可达4000亿元，可以说对虾养殖是我国水产养殖业重要的支柱性产业。
近年来，受宏观经济和病害发生等影响，我国对虾养殖产量虽有所下降，但基本维持稳定。
而种质是对虾养殖产业可持续发展的前提，在对虾苗种培育过程中，亲虾性腺的人工促熟与卵细胞培育是优质对虾苗种培育的基础环节，营养与饵料的选择是对虾亲虾促熟培育关键。
目前开展对虾养殖和苗种培育的国家，在对虾亲虾培育与促熟中常用活体饵料为多毛类动物，但据相关报道双齿围沙蚕体内存在高浓度致病菌，可能会通过摄食作用将病菌转移到对虾中。
因此，基于上述生产实践现状与问题，亟需我们研究减少双齿围沙蚕体内致病微生物的方法，为预防对虾养殖疾病调控策略提供新的思路。
本研究采用了硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基（TCBS琼脂培养基），通过平板涂布法初步筛选双齿围沙蚕体内可培养的优势菌种及其菌落总数，并对筛选到的菌株进行16S rDNA序列分析，开展沙蚕体内微生物研究。
论文进行了庆大霉素、聚六亚甲基双胍以及氟苯尼考等三种不同药物对双齿围沙蚕急性毒性研究，揭示上述三种药物对沙蚕的安全浓度。
PFOS对多齿围沙蚕CYPs、GST基因转录及酶活性的毒性效应
Ｅｆ ｆｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ ＰＦＯＳ ｏ ｎ ｔ ｈｅ Ｇｅ ｎ ｅ ｓ Ｔｒ ａ ｎ ｓ ｃ ｒ ｉ ｐ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ Ｅｎ ｚ ｙ ｍｅ ｓ Ａｃ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ ＣＹＰｓ ，Ｇ Ｓ Ｔ ｉ ｎ Ｐｏ ｌ ｙ ｃ ｈ ａ ｅ ｔ ｅ Ｐｅ ｒ ｉ ｎｅ ｒ ｅ ｉ ｓ ｎ ｕ ｎ ｔ ｉ ａ
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１ ． Ｊ ｉ ｍｅ ｉ Ｕｎ ｉ ｖｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ，Ｘｉ ａ ｍｅ ｎ ３６１ ０ ２１ ，Ｃｈ ｉ ｎａ
２ ． Ｋｅ ｙ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ ｏ ｆ Ｈｅ ａ ｌ ｔ ｈ ｙ Ｍａ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ｆ ｏ ｒ ｈｅ ｔ Ｅ ａ ｓ ｔ Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ Ｓ ｅ ａ ， Ｍｉ ｎ ｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ｏ ｆ Ａｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ， Ｐ Ｒ． Ｃｈ ｉ ｎ ａ ， Ｘｉ ａ ｍｅ ｎ ３ ６ １ ０ ２ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ
ＤＯＩ ：ｌ ０． ７ ５ ２ ４ ／ ＡＪ Ｅ． １ ６ ７ ３ ． ５ ８ ９ ７ ． ２ ０１ ６ ０ ４ １ ３ ０ ０１
陈西， 阎希柱， 宿丽丽． Ｐ Ｆ ＯＳ对多齿围沙蚕 Ｃ Ｙ Ｐ ｓ 、 Ｇ Ｓ Ｔ基 因转 录及酶活性的毒性效应岍． 生态毒理学报 ， ２ ０ １ ６ ， １ ｌ （ ６ ） ： １ ０ ２ 一 ｌ １ Ｉ
的剂量． 效应关 系并在胁迫 第 １ ４天表现 出最高 的可诱 导性 ； Ｃ Ｙ Ｐ ４系基 因 ＣＹ Ｐ ４ ２ ４ Ａ１的转 录在 ４ 、 ８ ｍｇ ・ Ｌ 。 处理组 中与 Ｐ Ｆ Ｏ Ｓ
17β-雌二醇对大鼠腹腔巨噬细胞活性的影响
17β－雌二醇对大鼠腹腔巨噬细胞活性的影响[摘要]①目的：研究17β-雌二醇（Estradiol, E）对大鼠腹腔巨噬细胞的影响。
②方法：以大鼠腹腔巨噬细胞为对象，采用吞噬中性红法，观察不同剂量、不同时间雌激素处理后腹腔巨噬细胞的吞噬功能的变化。
并HE染色进行形态学观察。
③结果：剂量为10-4、10-6可引起腹腔巨噬细胞吞噬功能抑制，该作用在E处理后的2h、6h、16h均明显，随时间延长，作用增加。
剂量10-8可增强吞噬功能。
并有形态学变化。
④结论：17β-雌二醇具免疫增强和免疫抑制双重功效，并随时间、剂量大小有变化。
[关键词]17β-雌二醇腹腔巨噬细胞免疫抑制免疫增强雌二醇（Estradiol,E）是具有广泛调节作用激素之一，对免疫系统的影响颇受研究者的注目。
临床观察，雌激素与一些自身免疫性疾病和乳腺癌等肿瘤的发生有着较密切的关系[1]，以及用雌激素的替代疗法可治疗某些疾病等，这些都提示雌激素对免疫系统的维持和调节方面可能起着一定的作用。
巨噬细胞(macrophage,M)是机体免疫体系中重要的免疫效应细胞，具有非特异性直接清除各种异物，杀伤病原体和肿瘤细胞的功能，并具有抗原提呈作用[2]。
本实验选用大鼠腹腔巨噬细胞进一步研究在离体条件下雌激素对其功能的影响。
以试图发现其在免疫调节中的作用及发现新的治疗靶点。
一、材料和方法（一）实验材料。
动物：6周龄雄性Wistar大鼠，（购于本校实验动物中心）。
（二）1.腹腔巨噬细胞的收集。
大鼠腹腔注射2%的无菌淀粉15ml，第三天断头处死大鼠，用冰冷D-Hanks液10ml冲洗腹腔2次，合并冲洗液，离心，去上清，D-Hanks液洗涤3次后，用含10%FCS的RPMI-1640培养液调细胞浓度为2×106/ml，经台盼蓝染色检查细胞活性大于95%。
2.E对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响（中性红法）。
将该上述细胞悬液加96孔板，每孔100ul。
置37℃贴壁2h,去掉未贴壁细胞，用D-Hanks液洗3次后，分别于各孔加入E和RPMI-1640培养液，使E终浓度为10-4，10-6，10-8，置37℃、5%CO2恒温箱分别孵育2h，6h,16h后，弃去上液，每孔加入中性红100ul，37℃作用30min后，用D-Hanks 液洗3次，加100ul细胞溶解液，置4℃冰箱过夜，上酶联免疫测试仪于490nm 处测各孔OD值。
滞育诱导温度和光照节律对家蚕sod基因和cat基因的表达的影响
滞育诱导温度和光照节律对家蚕sod基因和cat基因的表达的影响陶卉;李茜;徐丽;季明明;徐世清【期刊名称】《江苏蚕业》【年(卷),期】2010(32)3【摘要】家蚕(Bombyx mori)是卵滞育性鳞翅目模式昆虫,其滞育性受亲代卵孵化期(催青期)温度、光节律等环境因子诱导.为了研究家蚕滞育与温度和光照节律的关系,本文调查了温度、光照节律对家蚕sod基因和cat基因表达的影响.催青期中除了孵化期,25℃持续光照下(25 LL)卵的sod mRNA均保持在较高水平,另外,sod基因在20℃光照黑暗(20 LD)12h交替环境下的表达量要高于15℃持续黑暗(15 DD)条件,且孵化后期这种现象更加明显.cat基因在25 LL、20 LD和15 DD环境之间的表达量无差异,但是孵化后期(积温2 160-3 600℃·h),cat基因表达水平显著上调,这与在此阶段的蚕卵胚胎对滞育诱导环境温度和光节律比较敏感的结论相一致.此外,本文还调查了子代卵中sod基因和cat基因的表达情况.sod基因在人工活化卵(DTE)中的表达水平显著高于非浸酸的滞育性卵(DDE);卵龄24-192h,25 LL子代卵逐渐进入滞育,sod基因表达量下调.低温黑暗条件会上调家蚕子代卵sod基因的表达水平.在初期的盐酸活化卵(DTE)中,cat表达量低于滞育卵(DDE),而后逐渐上升,直至接近滞育卵表达量,这表明盐酸可能会抑制cat基因表达.在恒温条件下,黑暗条件会促进子代卵上调cat表达.在温度光照协同作用下,20 LD子代卵中cat表达量低于25 LL和15 DD.【总页数】7页(P6-12)【作者】陶卉;李茜;徐丽;季明明;徐世清【作者单位】苏州大学医学部应用生物学系,江苏,苏州,215123;苏州大学医学部应用生物学系,江苏,苏州,215123;苏州大学医学部应用生物学系,江苏,苏州,215123;苏州大学医学部应用生物学系,江苏,苏州,215123;苏州大学医学部应用生物学系,江苏,苏州,215123;现代丝绸国家工程实验室【正文语种】中文【中图分类】S881.2;Q78【相关文献】1.滞育诱导发生温度与光周期对家蚕羽化激素基因表达的影响 [J], 吴成家;韩慧慧;司马杨虎;徐世清2.滞育诱导发生温度与光周期对家蚕垂体同源框激素基因Pitx表达的影响 [J], 陈息林;韩慧慧;张达燕;司马杨虎;徐世清3.光照处理对'大同黄花'开花节律及光周期关键基因HcCOL14表达特性的影响 [J], 杜崴;李森;公菲菲;刘娟;高阳;熊雄;王金耀;亢秀萍4.大鼠松果体Clock基因和芳烷脘N-乙酰基转移酶基因的昼夜节律性表达及光照影响 [J], 王国卿;杜玉珍;童建5.滞育诱导温度与光照对家蚕近日节律基因per表达的影响 [J], 徐丽;宋艳;朱晓苏;司马杨虎;梁辉;韩慧慧;徐世清因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
雌二醇对日本沼虾肝胰腺的脂肪酸含量及组织结构的影响
文章编号：1004－2490（2014）06－0542－07雌二醇对日本沼虾肝胰腺的脂肪酸含量及组织结构的影响收稿日期：2014－06－24基金项目：国家自然科学基金资助项目（日本沼虾卵黄蛋白原合成代谢分子调控机制研究，31101887）；江苏省自然科学基金资助项目（日本沼虾“性早熟”的分子调控机制研究，BK2011419和双齿围沙蚕17β－雌二醇的发生及其繁殖内分泌调控机制研究，BK2012675）作者简介：赵卫红（1973－），女，江苏东台人，副教授，博士，主要从事水产经济动物繁殖生理与营养研究。
E-mail ：misszwh@163．com通讯作者：陈立侨，男，教授。
Tel ：021-62233637，E-mail ：lqchen@bio．ecnu．edu．cn 赵卫红1，2，3，王资生1，2，张余霞1，2，於叶兵1，2，吕富1，2，吕林兰1，2，陈立侨3（1．盐城工学院化学与生物工程学院，江苏盐城224051；2．江苏省沿海池塘养殖重点实验室，江苏盐城224051；3．华东师范大学生命科学院，上海361005）摘要：日本沼虾（Macrobrachium nipponense ）肝胰腺为卵巢发育提供脂类等营养，日本沼虾肝胰腺中含有与卵巢发育有关的雌二醇，日本沼虾卵巢发育过程中，肝胰腺中脂肪酸的含量及组织结构会发生相应的变化，本文研究雌二醇对日本沼虾肝胰腺中脂肪酸的含量及组织结构的影响。
实验设3个试验组和1个对照组，试验组日本沼虾肌肉分别注射5、0．5和0．05μg ·g －1体重的雌二醇，对照组注射生理盐水，5d 注射1次，共注射2次，10d 后测定肝胰腺中脂肪酸的含量及其组织结构的变化，从而研究雌二醇对日本沼虾肝胰腺中脂肪酸含量及组织结构的影响。
测定结果表明，日本沼虾肝胰腺中主要脂肪酸为C16ʒ0、C18ʒ1n9和C18ʒ12n6（亚油酸），且单不饱和脂肪酸（MUFA ）和多不饱和脂肪酸（PUFA ）含量较高，分别为39．05%ʃ1．16%和42．71%ʃ2．56%。
17β-雌二醇(E2)对大型溞(Daphnia magna)生殖、发育和相关基因转录的影响
生态毒理学报Asian Journal of Ecotoxicology第15卷第5期2020年10月V ol.15,No.5Oct.2020㊀㊀基金项目:国家重点研发计划资助项目(2017YFF0211203)㊀㊀第一作者:李晓东(1994 ),男,硕士研究生,研究方向为水生态毒理学,E -mail:185****************㊀㊀*通讯作者(Corresponding author ),E -mail:**************DOI :10.7524/AJE.1673-5897.20200110001李晓东,袁思亮,李俊,等.17β-雌二醇对大型溞(Daphnia magna )生殖㊁发育和相关基因转录的影响[J].生态毒理学报,2020,15(5):128-137Li X D,Yuan S L,Li J,et al.Effects of 17β-estradiol (E2)on reproduction,development and transcription of related genes in Daphnia magna [J].Asian Journal of Ecotoxicology,2020,15(5):128-137(in Chinese)17β-雌二醇(E2)对大型溞(Daphnia magna )生殖㊁发育和相关基因转录的影响李晓东,袁思亮,李俊,刘春生*华中农业大学水产学院,武汉430070收稿日期:2020-01-10㊀㊀录用日期:2020-04-11摘要:17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)是一种环境内分泌干扰物质,相关研究表明,E2对脊椎动物的生长和发育能够产生不良影响,但是E2对无脊椎动物,如大型溞(Daphnia magna )的毒性研究较少,其具体的毒性效应和致毒机制有待阐明㊂以E2为研究对象,以大型溞(<24h)为实验动物,按照经济合作与发展组织(Economic Co -operation and Development,OECD)规定的标准试验程序开展为期21d 的标准暴露实验,评估不同浓度E2暴露对大型溞发育㊁生殖以及相关基因转录的影响㊂研究发现,1360μg ㊃L -1E2暴露对大型溞产生了显著的致死效应,降低了大型溞蜕皮个数,增加了大型溞的产溞量,而其他低浓度的E2(1.36㊁13.6和136μg ㊃L -1)暴露没有对大型溞产生显著的毒性效应㊂荧光定量PCR 结果显示,1360μg ㊃L -1E2暴露显著下调了大型溞蜕皮激素代谢相关基因细胞色素P450基因18a1(cytochrome P45018a1,cyp18a1)和蜕皮激素受体基因(hormone receptor 3,hr3)的转录,说明E2可能是通过抑制大型溞的蜕皮进而引起了发育和生殖毒性㊂关键词:雌二醇;大型溞;生殖毒性;发育毒性文章编号:1673-5897(2020)5-128-10㊀㊀中图分类号:X171.5㊀㊀文献标识码:AEffects of 17β-Estradiol (E2)on Reproduction ,Development and Tran-scription of Related Genes in Daphnia magnaLi Xiaodong,Yuan Siliang,Li Jun,Liu Chunsheng *College of Fisheries,Huazhong Agricultural University,Wuhan 430070,ChinaReceived 10January 2020㊀㊀accepted 11April 2020Abstract :As an environmental endocrine disruptor,relevant studies have demonstrated that,17β-estradiol (E2)has adverse effects on the growth and development of vertebrates,but the effects on invertebrates,such as Daphniamagna ,have been rarely studied,and the specific toxic effect and mechanism need to be clarified.In this study,Daphnia magna (<24h)was used as an experimental animal to conduct a 21-day standard exposure experiment in accordance with Organization for Economic Co -operation and Development (OECD)regulations to evaluate the effects of E2on the growth,reproduction and gene transcription.The results demonstrated that,1360μg ㊃L -1E2exposure caused significant lethal effect,and significantly reduced the number of molting as well as increased the a -mount of offspring,while treatment with other lower exposure concentrations (1.36,13.6and 136μg ㊃L -1)did not第5期李晓东等:17β-雌二醇(E2)对大型溞(Daphnia magna)生殖㊁发育和相关基因转录的影响129㊀cause obvious effects.In addition,fluorescence quantitative PCR results showed that the transcriptions of cyto-chrome P45018a1(cyp18a1)and hormone receptor3(hr3)were significantly inhibited in1360μg㊃L-1exposure group,which proved that E2might cause developmental and reproductive toxicity by inhibiting the molting of Daphnia magna.Keywords:E2;Daphnia magna;reproductive toxicity;developmental toxicity㊀㊀环境中的多种化合物具有内分泌干扰效应,能够干扰生物体正常的内分泌功能,对个体及其子代产生不良影响,而类雌激素效应物质是环境中最主要的内分泌干扰物㊂长期以来,由于环境雌激素浓度低㊁急性毒性小等特点,长期以来不为人们所重视[1]㊂近些年来,由于环境介质中雌激素物质浓度的逐步升高,释放到环境中的雌激素效应物质可能会干扰生物体的内分泌系统[2]㊂畜禽养殖是产生雌激素的重要来源,更值得引起注意的是,由于活禽养殖的粪便被用作土壤肥料,因此造成环境雌激素的广泛分布,且在众多环境雌激素中,17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)具有较高的生物活性[3]㊂E2作为最典型的雌激素效应物质,大量应用在生物医药领域,并在环境中被频繁地检测到且具有较高的环境浓度㊂与其他污染物类似,E2首先在污水厂进出水口中被检测到㊂在德国污水处理厂中,检测到E2的最高浓度为19ng㊃L-1[4],巴西㊁意大利和以色列污水处理厂中检测到的E2浓度分别为21㊁16.1和141.9ng㊃L-1[5-6]㊂在中国沿海地区,检测3家污水处理厂进出水口的E2浓度,范围分别为39.6~90.1ng㊃L-1和2.2~54.6ng㊃L-1[7-8]㊂在对地表径流的检测中,E2在日本和美国河流中的浓度为1.8~2.1ng㊃L-1[9]和9ng ㊃L-1[10]㊂在中国天津地区的3条河流以及珠江检测到E2最高浓度分别为32.4ng㊃L-1[11]和7.5ng㊃L-1[12]㊂大量的毒理学研究证明,水环境中的雌激素物质对鱼类[13]和两栖类[14]等水生脊椎动物有发育毒性㊁生殖毒性和内分泌干扰效应等多种毒性效应㊂李国超等[15]报道E2暴露能够引起斑马鱼中雌性比例上升,并上调部分雌性相关基因的转录,下调部分雄性相关基因的转录㊂侯彦峰等[16]报道0.1ng㊃L-1 E2暴露导致日本青鳉肝脏内卵黄蛋白原基因转录显著上调㊂树蛙暴露于E2导致间性个体的出现并干扰肝脏中相关基因的转录[17]㊂徐伟等[18]报道6月龄非洲爪蛙暴露于2.72μg㊃L-1E2中6d,可导致雌性个体输卵管发生形态改变㊂目前,有关水体雌激素风险或危害评价研究大多集中在高营养级的水生脊椎动物中[19],而其对低营养级水生无脊椎动物的毒性效应缺乏系统性的研究和分子机制上的探究㊂大型溞(Daphnia magna)是一类小型的枝角类浮游甲壳动物,广泛分布于亚洲㊁欧洲㊁北美洲以及非洲[20-21],其生命周期和繁殖周期短,繁殖量大,在环境条件良好的状况下进行孤雌生殖,是一种模式毒理学生物[22]㊂大型溞作为低等的水生生物,处在水环境食物链的中间位置,占据重要生态位㊂因此,有关大型溞毒性效应的研究对整个水生环境食物链具有一定的参考作用[23]㊂Brennan等[24]报道了E2对大型溞的48h半致死浓度(48h-LC50)为2.87mg㊃L-1,且1.0mg㊃L-1E2暴露21d显著降低大型溞存活率至60%,同时E2暴露对大型溞的累积蜕皮个数与累积产卵个数没有显著性影响㊂李根[25]报道了1.28mg㊃L-1E2急性暴露抑制了大型溞抗氧化酶的活性,但是21d慢性暴露对其平均繁殖次数和产溞数没有显著性影响㊂Torres等[26]报道了在巴西Pi-racicaba河流中E2的浓度为137ng㊃L-1,进一步揭示河水中的E2对大型溞有较低的急性毒性风险并强调开展慢性E2暴露的环境风险评估的必要性㊂已有的有关E2对大型溞毒性效应和环境风险评估的研究仅仅统计了部分表观指标的改变,而未涉及分子机制上的探究㊂基于此,本研究在总结已有文献结果的基础上,为了进一步探究E2对大型溞的发育和生殖等的毒性效应以及相应的分子机制,选择0㊁1.36㊁13.6㊁136和1360μg㊃L-1为E2的暴露浓度,开展了为期21d的慢性暴露实验㊂实验期间,统计并分析了大型溞存活率㊁累积产溞量㊁累积蜕皮个数㊁母代与子代体长㊁母代与子代游泳速度等终点指标,并利用荧光定量PCR技术(qRT-PCR)评估了大型溞发育和生殖相关基因的转录水平,在分子机制上探讨了E2对大型溞毒性效应的机理㊂1㊀材料与方法(Materials and methods)1.1㊀实验试剂E2购自日本东京化成工业株式会社,CAS号为50-28-2,纯度>97%㊂有机助溶剂二甲基亚砜(DM-SO)购自美国Sigma公司,CAS号为67-68-5,纯度> 99%㊂实验前,取不同量的E2溶解于DMSO中,制130㊀生态毒理学报第15卷备成相应浓度的贮备液,存放于4ħ㊂RNA提取所需的RNAiso Plus试剂㊁反转录试剂PrimeScript TMRT reagent kit及荧光定量试剂SYBR®Primex Ex Taq TMⅡ购自中国TaKaRa公司㊂此外,RNA提取所用氯仿(CAS号67-66-3)㊁异丙醇(CAS号67-63-0)和无水乙醇(CAS号64-17-5)均购自中国国药集团化学试剂有限公司,为国产分析纯级㊂1.2㊀大型溞的培养本研究所用大型溞已在本实验室中连续培养多代,日常持续培养在光照培养箱中,并设置培养箱内的温度为(22ʃ1)ħ,光照/黑暗时长比为16h/8h㊂大型溞培养所用水体为连续曝气48h的过滤自来水㊂以小球藻(Chlorella pyrenoidosa)和斜生栅藻(Scenedesmus obliquus)的混合液喂食大型溞,喂养密度为4.5ˑ104cells㊃mL-1,待到大型溞开始产卵后喂食9.0ˑ104cells㊃mL-1的小球藻和斜生栅藻的混合液,每天上午喂食一次,每次投喂2mL㊂1.3㊀慢性暴露实验慢性暴露实验在1L的玻璃烧杯中进行,按照OECD Test Guideline211[27]相关指导方案㊂因为Brennan等[24]报道了E2对大型溞48h-LC50为2.87 mg㊃L-1,并且1.0mg㊃L-1E2对大型溞21d慢性暴露没有引起显著性效应㊂因此,为了探究不同浓度范围的E2暴露对大型溞的影响,本实验设置了5个浓度梯度,分别为0㊁1.36㊁13.6㊁136和1360μg㊃L-1,每个浓度梯度设置3个平行㊂采用OECD Test Guideline211[27]指导方案中的半静态暴露方法,暴露液每2d更换一次,每个平行烧杯中含有900mL 暴露液和30只幼溞(<24h),对照组和处理组中DMSO浓度均为0.1ɢ,暴露时间为21d㊂暴露期间每天统计大型溞的死亡个数㊁产溞数以及蜕皮个数,并绘制累积蜕皮曲线和累积产卵曲线㊂1.4㊀体长测量与游泳速度检测在暴露的第7㊁14和21天每个暴露缸取10只溞用于体长的测定,在第21天取10只(<24h)子一代小溞,用于体长的测定,使用软件Image Pro Plus和LEICA DFC450C(德国)测量体长,用动物行为仪DanioVision(荷兰Noldus公司)检测F0㊁F1代游泳速度㊂检测用24孔板,每个暴露缸取4只溞,每个孔板中放置1只溞,每个浓度组共12个平行㊂检测程序设置为25min,包括5min黑暗适应时间和2个10min的光暗循环,每个光暗循环包括5min光照时间和5min黑暗时间,在每个5min光照或黑暗时长中间给予一个轻拍刺激㊂1.5㊀qRT-PCR21d暴露结束后,每个暴露缸取10只溞,用TRIzol法提取总RNA,所提取的RNA用Epoch Mi-croplate分光光度计(美国BioTek Instruments,Inc.公司)进行纯度检验㊂检验方法根据RNA样品在260nm/280nm波长下的比值,若比值在1.90~2.10之间,则确定所得RNA的纯度较高,可以用于反转录㊂RNA的浓度则根据260nm波长下的吸光度数值确定,将所提取的RNA在200μL EP管中稀释至100ng㊃L-1㊂反转录使用Prime Script RT reagent kits(中国Takara公司)试剂,所需RNA的量为500 ng㊂将反转录所需所有试剂配制为10μL体系,具体试剂用量如下:5ˑPrime Script Buffer(for real time)2μL㊁Prime Script RT Enzyme Mix0.5μL㊁Oli-go dT Primer(50μmol㊃L-1)0.5μL㊁Random6mers (100μmol㊃L-1)0.5μL㊁RNase Free dH2O1.5μL和Total RNA5μL㊂反转录体系加样完成后,经离心后放置在PCR仪中进行反转录㊂PCR仪反应条件设置如下:37ħ,15min;85ħ,5s㊂反应完成后得到cDNA,在200μL EP管中加入RNase Free dH2O 90μL,cDNA被稀释10倍,均匀混合后置于-20ħ中保存备用㊂qRT-PCR使用SYBR Green Primex Ex TaqⅡkits(中国Takara公司)试剂㊂根据SYBR Green Primex Ex TaqⅡkits试剂盒说明,配制20μL 反应体系:SYBR Green Mix试剂10μL㊁DEPC水6μL㊁ROX Reference Dye试剂0.4μL㊁Primer F0.8μL㊁Primer R0.8μL和cDNA2μL㊂将此20μL体系置于qRT-PCR专用96孔板中,每个浓度组设置3个平行,每个暴露缸中的10只溞混样为一个平行㊂qRT-PCR扩增条件设置为:95ħ,2min;95ħ,15s;60ħ,1min;共计40个循环㊂数据采用CT值计算,采用2-әәC T法分析㊂实验所选取的与蜕皮和生殖有关基因选自相关文献的报道[28-33],如表1所示㊂根据相关文献的研究,在雌激素物质暴露中,ubc的转录水平更为稳定[28],因此本实验选定ubc为内参基因㊂1.6㊀数据分析所有数据均采用SPSS20.0(SPSS,芝加哥)软件进行分析㊂所有数据均采用单因素方差分析(one-way analysis of variance,ANOV A)方法中的Tukey s 多量程检验来确认对照组与暴露组之间的显著差异,P<0.05定义具有显著性差异㊂所有的数据结果第5期李晓东等:17β-雌二醇(E2)对大型溞(Daphnia magna)生殖㊁发育和相关基因转录的影响131㊀均表示为平均值ʃ标准差(meanʃSD)㊂实验结果中所有图片均用软件Prism Graphpad6绘制㊂2㊀结果(Results)2.1㊀E2慢性暴露的致死率如图1所示,21d暴露实验结束,0㊁1.36㊁13.6㊁136和1360μg㊃L-1暴露组大型溞存活率分别为97.78%ʃ1.92%㊁97.78%ʃ1.92%㊁98.89%ʃ1.92%㊁93.33%ʃ6.67%和71.11%ʃ17.10%㊂与对照组相比,1360μg㊃L-1暴露组大型溞的存活率显著降低,对大型溞的致死效应显著㊂2.2㊀E2暴露的发育毒性2.2.1㊀E2暴露对累积蜕皮个数的影响如图2(a)所示,E2暴露21d后,0㊁1.36㊁13.6㊁136和1360μg㊃L-1暴露组中,平均每只溞的累积蜕皮个数分别为(9.16ʃ0.05)㊁(8.89ʃ0.05)㊁(9.00ʃ0.10)㊁(8.91ʃ0.13)和(8.37ʃ0.28)个㊂与对照组相比, 1360μg㊃L-1暴露组平均累积蜕皮个数降低了8.62%,表明E2暴露能够显著地抑制大型溞的蜕皮,减缓其发育过程㊂表1㊀大型溞生殖和发育有关基因引物序列Table1㊀The primer sequences of the genes related to the reproduction and development of Daphnia magna序号No.基因Gene引物序列(5 ~3 )Primer sequence(5 ~3 )功能Function来源Origin1ubc-Fubc-RTCACCTGCACTCACCATTTCAATCTCCGGAACCAAAGGAT内参Reference[28]2cyp314-Fcyp314-RACTATGTATGGACTTCCCTGGTGTTATCGCGGGTGTCAACG3cyp18a1-Fcyp18a1-RTACCCGATCGTCGGTTACCTGAGCGCCGTCAGCTCTTC4ecra-Fecra-RCAGTTCGTCCATGTCGATGAGCGAAGGCGGTAAGGTAGAATG5ecrb-Fecrb-RCACCACAACCAACTGCATTTACCCATTAATGTCAAGATCCCACA6usp-Fusp-RTAGGCCACTCGGGTTACTTAAAGAGTGGGTGGTTAGGTGGATAA7hr3-Fhr3-RAAGGTCGAGGATGAAGTGCGAAAGACGCTACTATCGGGCG8ftz-f1-Fftz-f1-RTCTTACCGGACATTCACGCCACAGCCGTTGAGATGCTTGA9cut-Fcut-RAGCCAGTGGAACTACGTCCAGCATCATCAGCG10cht-Fcht-RCAGAGCAAATAGGGCGAGAGGCGATTGTGCCGTGTATTT11cht3-Fcht3-RTGTTGCTTTTTGATCGCGCAAATGCAGGAGGAAGTGTCGG12cpa1-Fcpa1-RCCGACATTCACGTCAGTCCTCGTAGGTGTGATAGTT发育Development[29][30][31][32][32][30][30][31][30][30][31]13vtg1-Fvtg1-RGCTACCCACGTCAAGTAATGGCTGCCGTAGTCTCAACAGAA14vtg2-Fvtg2-RCACTGCCTTCCCAAGAACATATCAAGAGGACGGACGAAGA15vmo1-Fvmo1-RTATTACGCGGTTCAGACGTGGTTGTCCGCCTCACTACCAT生殖Reproduction[31][33][30]132㊀生态毒理学报第15卷图1㊀17β-雌二醇(E2)21d暴露对大型溞的致死效应注:E2浓度为0㊁1.36㊁13.6㊁136和1360μg㊃L-1;数据表达为平均值ʃ标准差;*代表P<0.05,与对照组相比有显著性差异㊂Fig.1㊀The lethal effect of17β-estradiol(E2)exposure on Daphnia magna after exposure for21d Note:The concentrations of E2are0,1.36,13.6,136,1360μg㊃L-1;data was represented by meanʃstandard deviation;*represented that the exposure group had significantdifference at P<0.05level when compared with control. 2.2.2㊀E2暴露对大型溞F0代体长及游泳速度的影响如图2(b)所示,0㊁1.36㊁13.6㊁136和1360μg㊃L-1这5个暴露组在第7天时体长分别为(2.41ʃ0.13)㊁(2.38ʃ0.15)㊁(2.36ʃ0.13)㊁(2.33ʃ0.20)和(2.12ʃ0.28)mm㊂E2暴露对大型溞体长呈现剂量依赖性抑制效应,并且1360μg㊃L-1暴露组中大型溞F0代体长受到显著抑制㊂但是在第14天和第21天时暴露组与对照组相比体长均没有受到显著性抑制效应,说明E2对大型溞生长发育早期有明显抑制效应㊂随着暴露时间的延长,暴露组与对照组之间的差异逐渐减小㊂1360μg㊃L-1暴露组与对照组相比,体长虽有所减少,但已经没有显著性差异㊂如图2(c)所示,0㊁1.36㊁13.6㊁136和1360μg㊃L-1这5个暴露组中,F0代游泳速度分别为(0.52ʃ0.04)㊁(0.46ʃ0.10)㊁(0.53ʃ0.06)㊁(0.55ʃ0.07)和(0.47ʃ0.03)cm㊃s-1㊂所有暴露组与对照组相比,速度均无显著性差异㊂2.3㊀E2暴露的生殖毒性2.3.1㊀E2暴露对大型溞幼溞产量的影响㊀㊀如图3(a)所示,暴露21d后,0㊁1.36㊁13.6㊁136和1360μg㊃L-1这5个暴露组中,平均每只母溞的累积产溞量分别为(13.50ʃ0.68)㊁(12.96ʃ0.91)㊁(11.41ʃ0.37)㊁(13.16ʃ1.38)和(18.28ʃ1.39)个㊂与对照组相比,1360μg㊃L-1暴露组大型溞平均累积产溞量显著提高35.40%,表明E2暴露能够显著增加大型溞产溞量,干扰大型溞的生殖㊂2.3.2㊀E2暴露对大型溞F1代体长和游泳速度的影响如图3(b)所示,0㊁1.36㊁13.6㊁136和1360μg㊃L-1这5个暴露组中,F1代体长分别为(0.84ʃ0.05)㊁(0.87ʃ0.04)㊁(0.87ʃ0.05)㊁(0.85ʃ0.04)和(0.82ʃ0.03) mm㊂与对照组相比,暴露组F1代体长并无显著性差异㊂如图3(c)所示,0㊁1.36㊁13.6㊁136和1360μg㊃L-1这5个暴露组中,F1代游泳速度分别为(0.52ʃ0.04)㊁(0.46ʃ0.10)㊁(0.53ʃ0.06)㊁(0.55ʃ0.07)和(0.47ʃ0.03)cm㊃s-1㊂与对照组相比,暴露组F1代游泳速度无显著性差异㊂2.4㊀E2暴露对相关基因转录的影响如图4(a)所示,在与大型溞发育有关的基因转录中,1360μg㊃L-1E2暴露显著性地降低了大型溞蜕皮激素代谢相关基因cyp18a1(0.42ʃ0.04)和蜕皮激素受体基因hr3(0.52ʃ0.16)的转录,同时也降低了大型溞表皮蛋白合成基因cut(0.70ʃ0.66),并促进了表皮蛋白代谢基因cht(2.05ʃ1.11)和cht3(1.60ʃ0.74)的转录,但是与对照组相比没有统计学上的显著性差异㊂在与大型溞生殖有关的基因转录中,如图4 (b)所示,所有暴露组中生殖相关基因vtg1㊁vtg2和vmo1的转录均与对照组无显著性差异㊂3㊀讨论(Discussion)本研究依据OECD Test Guideline211[27]测试方法,评价了E2对大型溞存活㊁发育和生殖的影响㊂结果表明,只有最高浓度组(1360μg㊃L-1E2)中,暴露21d后大型溞会有显著死亡,其死亡率约为30%,说明高浓度E2对大型溞有显著致死效应㊂Brennan等[24]曾报道1.0mg㊃L-1E2暴露21d可对大型溞产生40%的致死率,与本研究结果基本一致㊂李根[25]探究了E2急性暴露对大型溞抗氧化酶系统的影响,发现0.64mg㊃L-1E2暴露48h会抑制大型溞幼溞过氧化氢酶(CAT)㊁超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽S-转移酶(GST)等抗氧化酶的活性,这说明E2暴露可能会通过影响大型溞氧化应激水平,降低大型溞的存活率㊂蜕皮是大型溞生殖和发育所必需的重要生理过程,蜕皮后大型溞体长增加,卵囊空间增大,有利于其生长和产卵[34]㊂本研究结果表明,E2显著地抑制第5期李晓东等:17β-雌二醇(E2)对大型溞(Daphnia magna)生殖㊁发育和相关基因转录的影响133㊀图2㊀E2的21d暴露对大型溞发育的影响注:E2浓度为0㊁1.36㊁13.6㊁136和1360μg㊃L-1;数据表达为平均值ʃ标准差;**代表P<0.01,与对照组相比有显著性差异㊂Fig.2㊀The effect of E2exposure on the development ofDaphnia magnaNote:The concentrations of E2are0,1.36,13.6, 136,1360μg㊃L-1;data was represented by meanʃstandard deviation;**represented that the exposure group had significant difference at P<0.01level when compared withcontrol.图3㊀E2的21d暴露对大型溞生殖的影响注:E2浓度为0㊁1.36㊁13.6㊁136和1360μg㊃L-1;数据表达为平均值ʃ标准差;*代表P<0.05,与对照组相比有显著性差异㊂Fig.3㊀The effect of E2exposure on the reproduction ofDaphnia magnaNote:The concentrations of E2are0,1.36,13.6,136,1360μg㊃L-1;data was represented by meanʃstandard deviation;*represented that the exposure group had significant difference at P<0.05level when compared with control.134㊀生态毒理学报第15卷图4㊀E2的21d暴露对大型溞发育(a)和生殖(b)相关基因转录的影响注:E2浓度为0㊁1.36㊁13.6㊁136和1360μg㊃L-1;数据表达为平均值ʃ标准差;*代表P<0.05,与对照组相比有显著性差异㊂Fig.4㊀The effect of E2exposure on the transcriptions of genes relevant to development(a)and reproduction(b)of Daphnia magnaNote:The concentrations of E2are0,1.36,13.6,136,1360μg㊃L-1;data was represented by meanʃstandard deviation;*represented that the exposure group had significantdifference at P<0.05level when compared with control.了大型溞的平均累积蜕皮个数,此外,E2暴露7d 显著抑制了F0代大型溞的个体生长,但是随着暴露时间延长,处理组和对照组体长之间的差异逐渐缩小,这说明E2可能对大型溞早期发育抑制效应更为显著,从而导致其发育减缓㊂对于E2的生殖毒性,本研究表明,E2暴露会导致大型溞21d累积产溞数显著升高,但对F1子代的个体生长和运动行为没有影响㊂这说明,E2能干扰F0代大型溞的生殖能力,但E2的母代暴露不会影响子代的发育㊂相关研究用1mg㊃L-1E2连续染毒两代大型溞,发现F0代产溞量没有显著变化,但是暴露至F1代时,其产溞量与F0代相比,显著性降低[30]㊂本研究与此研究结果的差异可能是由暴露方式和浓度不同导致的,但两者均说明E2暴露会对大型溞产生生殖毒性㊂为进一步探究E2对大型溞毒性效应的分子机制,本研究利用qRT-PCR技术对大型溞蜕皮和生殖相关基因的转录进行了评价㊂大型溞蜕皮主要受20-羟基蜕皮激素(20-HE)的直接控制[35],并且蜕皮激素在蜕皮过程中的代谢对大型溞的蜕皮至关重要[36]㊂在大型溞中,cyp18a1负责编码将蜕皮激素20-HE催化成26-羧基酸的酶[36],因此,cyp18a1转录结果的降低会干扰大型溞蜕皮激素20-HE的正常代谢㊂蜕皮激素20-HE与蜕皮激素受体(EcR)和超气门蛋白(USP)共聚物结合后引发蜕皮激素受体基因hr3的转录[37]㊂蜕皮激素受体基因hr3是引发蜕皮激素下游信号通路的非常关键的基因,当沉默hr3基因时,可以导致蜕皮的延迟和失败[38-39]㊂在本研究中,E2暴露显著地降低了cyp18a1及hr3这2个基因的转录,这与1360μg㊃L-1E2处理组中累积蜕皮个数减少的结果一致㊂在大型溞中,一个完整的蜕皮过程包括旧有的表皮水解㊁角质蛋白分泌㊁旧蛋白水解与重吸收㊁旧表皮脱落以及新的表皮形成等过程[39]㊂其中,cut基因负责角质蛋白的生成[37], cht和cht3基因负责水解角质蛋白[31]㊂本研究中, E2暴露导致cut转录的下调和cht转录的上调,继而可能导致了大型溞旧表皮水解和新角质蛋白分泌过程被干扰,最终减少了大型溞蜕皮个数,抑制了大型溞的蜕皮㊂Zou和Fingerman[40]曾指出,在大型溞中,具有多个苯环的外源性化学物质可以与蜕皮激素受体结合,对内源性蜕皮激素产生拮抗作用,干扰正常的蜕皮过程[40]㊂Mu和Leblanc[41]总结了他们之前的研究,认为能够表现出干扰蜕皮激素代谢或者与蜕皮激素产生拮抗效应的外源性化学物质对大型溞可以表现出蜕皮抑制和生殖干扰作用[41-44]㊂然而,qRT-PCR结果显示,E2暴露并未对大型溞生殖相关基因vtg1㊁vtg2和vmo1基因的转录有显著性影响㊂这表明,E2主要是通过干扰大型溞蜕皮激素的代谢,从而影响了大型溞的蜕皮和生殖周期,并干扰了大型溞的生殖能力㊂综上所述,1360μg㊃L-1E2暴露对大型溞产生了明显的致死效应,以及较高的生殖毒性效应和较第5期李晓东等:17β-雌二醇(E2)对大型溞(Daphnia magna)生殖㊁发育和相关基因转录的影响135㊀低的发育毒性效应㊂此外,1360μg㊃L-1暴露抑制了大型溞蜕皮激素代谢关键基因cyp18a1和蜕皮激素受体基因hr3的转录,干扰了蜕皮激素代谢,并且抑制了大型溞表皮蛋白合成基因cut的转录,同时促进了大型溞表皮蛋白分解基因cht㊁cht3的转录,从而干扰了大型溞蜕皮和生殖㊂同时,E2暴露显著地促进大型溞产卵量,干扰了大型溞正常的生殖过程㊂以上结果表明,E2暴露对大型溞产生较低的环境风险㊂本研究揭示了E2对大型溞生殖㊁发育及相关基因转录的影响,为环境中E2的风险评估提供了相关的理论依据㊂有关E2暴露对大型溞生殖发育影响的具体分子机制需要进一步的研究㊂同时,由于自然界中化学物质的多样性和持续存在性,联合暴露和多代暴露在进一步的研究中也具有重要意义㊂通讯作者简介:刘春生(1982 ),男,博士,教授,主要研究方向为水生态毒理学㊂参考文献(References):[1]㊀李国超.17β-雌二醇对斑马鱼的毒性研究[D].北京:中国农业科学院,2015:1-2Li G C.Toxicity of17-beta-estradiol for zebrafish[D].Beijing:Chinese Academy of Agricultural 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家蚕体内孕酮类似物含量的变化
家蚕体内孕酮类似物含量的变化
华刚;张坚;朱江
【期刊名称】《蚕业科学》
【年(卷),期】1993(19)3
【摘要】<正> 随着科学发展、检测手段的不断完善,国内外学者已开始广泛注意高等脊椎动物激素在昆虫体内的存在和生理作用。
长岛荣一等曾发现蚕体内存在类似雄激素的免疫活性物质,Ohnishi E.和Ogiso M.等在家蚕卵巢内测定到雌二醇,并证明雌二醇能影响产卵量,此外在其它昆虫体内已检测到数十种非蜕皮酮甾体激素,国内学者何首林等利用~3H-睾丸酮,发现蚕体不同器官对雄激素的吸收和清除率不同,但至今还没有报道蚕体中是否存在孕酮类似物。
本试验利用放射免疫分析法(RIA),测定了家蚕四龄至蛾期血液、脂肪体、中肠和卵巢中内源性孕酮类似物的含量。
现将结果报告如下。
【总页数】3页(P172-174)
【关键词】家蚕;蚕体;孕铜
【作者】华刚;张坚;朱江
【作者单位】苏州蚕桑专科学校
【正文语种】中文
【中图分类】S881.2
【相关文献】
1.母鸡在排卵周期和抱窝血浆“黄体生成素类似物”和孕酮的浓度变化 [J], 傅伟龙;陈鹭江;谢德麃
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3.家蚕1-脱氧野尻霉素含量与体内糖苷酶活性的相关性 [J], 陈红霞;刘月琴;潘刚;赵明;欧阳臻
4.氟化物添食对家蚕耐氟品种和敏感品种5龄幼虫体内蛋白质及谷胱甘肽硫转移酶含量的影响 [J], 李冬兵;赵凯;刘学锋;王一;曾泽彬
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家蚕幼虫不同龄期体内主要解毒酶及其基因表达的性别差异
昆虫学报Acta Entomologica Sinica，May2010，53（5）：479－486ISSN0454-6296家蚕幼虫不同龄期体内主要解毒酶及其基因表达的性别差异刘海涛1，李兵1，2，赵国栋1，张婷1，高瑞娜1，卫正国1，2，沈卫德1，2，*（1.苏州大学医学部，江苏苏州2151232.苏州大学蚕桑研究所，江苏苏州215123）摘要：为了研究家蚕Bombyx mori性别与抗性的关系，本研究采用Thermo酶活性测定法和实时荧光定量PCR法，比较不同龄期雌雄家蚕起蚕体内解毒酶活性及其基因的表达差异。
结果表明：解毒酶及其基因在雌雄个体之间均存在明显差异，谷胱甘肽S-转移酶活性及其基因BmGSTe5的表达量在1 3龄表现为雌蚕高于雄蚕，4龄和5龄则表现相反，其中4龄雄蚕酶活性和基因表达量分别是雌蚕的3.65倍和5.11倍，推测与雄蚕精巢在4龄初迅速发育有关。
雄蚕乙酰胆碱酯酶活性在2 4龄分别是雌蚕的1.48，1.34和1.40倍；乙酰胆碱酯酶基因Bm-ace1在2龄和3龄性别差异不明显，Bm-ace2在2 4龄为雄性高于雌性，雄性分别是雌性的1.75，2.17和2.40倍，提示Bm-ace2对性别间该酶活性的差异影响较大。
羧酸酯酶活性在2龄和3龄雄蚕较高，分别是雌蚕的1.23和1.87倍，4 5龄雌蚕较高，分别是雄蚕的1.23和1.22倍；羧酸酯酶基因BmCarE-5和BmCarE-10在性别间的差异规律均与酶活性相反，即羧酸酯酶表现为较高的基因表达量对应较低的酶活性，推测在家蚕体内可能存在“羧酸酯酶突变”现象。
结果为研究基因表达产物的修饰方式及其功能开辟了新的研究路径，为家蚕性别与抗药性的研究提供了重要参考。
关键词：家蚕；性别；抗性；解毒酶；基因表达；酶活性中图分类号：Q965.9文献标识码：A文章编号：0454-6296（2010）05-0479-08Sexual differences in main detoxification enzymes and their gene expression in different instars of Bombyx mori larvaeLIU Hai-Tao1，LI Bing1，2，ZHAO Guo-Dong1，ZHANG Ting1，GAO Rui-Na1，WEI Zheng-Guo1，2，SHEN Wei-De1，2，*（1.Medical College，Soochow University，Suzhou，Jiangsu215123，China； 2.Institute of Sericulture，Soochow University，Suzhou，Jiangsu215123，China）Abstract：In order to study the relationship between resistance and sex in male and female Bombyx mori，Thermo enzyme activity measurement and Real Time fluorescent quantitative RT-PCR were performed to compare differences of the activities of detoxification enzymes in male and female B.mori larvae and their genetic expression of newly exuviated larvae at different instars.The research demonstrated significant differences in detoxification enzymes and their related genes existed between male and female B.mori larvae.The activities of glutathione S-transferases（GSTs）and BmGSTe5showed higher expression in males than those in1st－3rd instar females，while the opposite phenomena were found in4th and5th instar larvae.The ratios of enzyme activity and gene expression in the male and the female were3.65and5.11，respectively，which were attributed to the fast development of testis in4th instar larvae.The enzyme activities of acetylcholine esterase（AchE）in the male were1.48，1.34and1.40times compared to those of the female from2nd to4th instars，while its gene Bm-ace1showed insignificant differences between male and female B.mori at2nd and3rd instars.The expression amount of gene Bm-ace2in the male were1.75，2.17and2.40times as high as that in the female from2nd to4th instars，suggesting that Bm-ace2plays amore important role in sex differences.The enzyme activities of carboxylesterase（CarE）in male were1.23 and1.87times compared to that in female at2nd and3rd instars，and the activity ratios in the female and the male were1.22and1.23at4th and5th instars，respectively.The expression of BmCarE-5and BmCarE-10showed the opposite trend to enzyme activities between different sexes，i.e.，low-level gene基金项目：国家重点基础研究发展规划（“863”计划）项目（2006AA10A118）；江苏省高校自然科学基金项目（07KJB230102）作者简介：刘海涛，男，1984年生，山东泰安人，硕士研究生，主要从事家蚕抗药性相关研究，Tel.：0512-********；E-mail：moyun-jinchi @*通讯作者Corresponding author，Tel.：0512-********，E-mail：shenwd@收稿日期Received：2009-12-09；接受日期Accepted：2010-04-26480昆虫学报Acta Entomologica Sinica53卷expression and high carboxylesterase activity.We so speculate that carboxylesterase mutation phenomenon exists in B.mori.These results break a new road for research on modification of genetic expression products and their function，and make further contribution to the study of relations between the gender and the abilityof drug resistence in B.mori.Key words：Bombyx mori；sex；resistance；detoxification enzyme；gene expression；enzyme activity昆虫的代谢抗性是昆虫的主要解毒机制，已有的研究表明，与杀虫剂代谢相关的解毒酶的解毒能力增强是昆虫对杀虫剂产生抗性的主要原因之一（Hemingway and Karunaratne，1998；Devonshire et al.，1998；Kostaropoulos et al.，2001）。
EB对果蝇机体内SOD、CAT活力及MAD含量的影响
EB对果蝇机体内SOD、CAT活力及MDA含量的影响摘要目的：探讨溴化乙锭（EB）对果蝇机体内超氧化物歧化酶(SOD)活力、过氧化氢酶(CAT)以及丙二醛(MDA)含量的影响。
方法:用含不同浓度EB的培养基培养果蝇,测定其对果蝇机体内SOD、CAT活力及MDA含量。
结果:处理6天后的EB 组SOD活力(U/mg prot)下降,其中高强度组(225.3±15.8)、中浓度组（227.3±4.8）、低浓度度组(259.55±4.75)与对照组(335.15±11.45)比较,各组间差异有显著性(P<0.01)；CAT活力(U/mg prot)下降,其中高强度组（20.59±1.42）、中浓度组（21.80±3.03）、低浓度度组(28.48±1.89)与对照组(38.78±0.62)比较,各组间差异有显著性(P<0.01)；MDA含量(μmol/mg)升高,其中高强度组(1.320±0.063)、中浓度组（1.257±0.066）、低强度组(1.101±0.024)与对照组(0.914±0.029)比较,各组间差异有显著性(P<0.01)。
结论:果蝇接受EB的毒害6天后对机内组织产生较明显的损害。
关键词果蝇超氧化物歧化酶(SOD)过氧化氢酶(CAT)丙二醛(MDA)溴化乙锭(Ethidium bromide,EB)是一种高度灵敏的荧光染色剂，用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。
它是一种具有平面结构的小分子物质,它能嵌入DNA的双链中,改变DNA分子构型,进而破坏其模板作用,阻碍DNA的复制[1]。
EB本身是强诱变剂,具有高致癌性，但国内对EB具体的生物毒害作用并未太多报道。
本无主要是通过设置不同浓度EB处理果蝇不同天数的实验，以研究EB对果蝇机体的影响。
1材料及方法1.1试剂和仪器总蛋白检测试剂盒、SOD、CAT活性检测试剂盒及MDA含量检测试剂盒（购自南京建成生物工程研究所）；恒温生化培养箱［(25±2)℃，相对湿度（50％～70％）］；培养瓶；组织匀浆器；高速冷冻离心机(centrifuge5840R，德国)等。
17_雌二醇对双齿围沙蚕幼虫SOD_CAT和GST活性的影响
1
1. 1
材料与方法
试验材料
试验所用沙 蚕 幼 虫 为 笔 者 实 验 室 繁 育 。 挑 选 均 质 量
2. 3
17 β雌二醇对 SOD 的影响
［11 ］
素分析
围沙蚕幼虫 CAT、 SOD 和 GST 具有显著影响， 两者比较， 暴露时间影响更大（ 表 1 ） 。17 β雌二醇和暴露时间对这 3 种 抗氧化酶具有交互作用 （ P ＜ 0. 05 ） 。
。在脊椎动物中，天然或人工合成的环境激素可干扰
［11 － 12 ］
鱼类细胞的氧化还原反应环境 ， 产生氧自由基胁迫， 从而 影响机体的 抗 氧 化 防 御 系 统 。 已 有 研 究 表 明， 石 油
Effect of 17 βestradiol on activities of SOD， CAT and GST in larvae of Perinereis aibuhitensis
2 DONG Xuexing1， ，L Linlan1 ，L Fu1 ，ZHAO Weihong1 ，YU Yebing1
L 来，有学者研究发现环境雌激素壬基酚 （ 10 μg· 性
［16 ］
－1
· L － 1 ） 能 显 著 诱 导 琥 珀 刺 沙 蚕 （ Nereis succinea ） GST 活 μg 。李霞等
［17 ］
研究了双酚 A 和 17 β雌二醇对双齿围沙
蚕生长、性别和卵母细胞发育的影响 。 而 17 β雌二醇对双 齿围沙蚕抗氧化酶的影响还未见有报道 。 该试验以双齿围 沙蚕幼虫为试验对象， 研究了 17 β雌二醇对其 SOD、 CAT 和 GST 活性的影响，以期为双齿围沙蚕生态毒理学研究提 供参考。
［13 － 15 ］
雌激素对双齿围沙蚕性比、生长和卵母细胞发育的影响
雌激素对双齿围沙蚕性比、生长和卵母细胞发育的影响李霞;宋贞坪;王福景;秦艳杰;杨大佐;周一兵【期刊名称】《大连海洋大学学报》【年(卷),期】2011(026)002【摘要】将性未分化的双齿围沙蚕Perinereis aibuhitensis暴露在双酚A和17β-雌二醇两种雌激素下,研究了雌激素对双齿围沙蚕雌雄比例、个体生长、死亡率及卵母细胞发育的影响。
结果表明,两种雌激素各浓度下的试验组沙蚕均为雌性。
与对照组相比,双酚A浓度为50、100μg/L时,对沙蚕有极显著的促生长作用（P 〈0.01）;浓度为10、150μg/L时,对沙蚕的促生长作用显著（P〈0.05）;浓度为200μg/L时,对沙蚕的促生长作用不明显;沙蚕的死亡率随双酚A浓度的提高而增加。
与对照组相比,当17-β雌二醇浓度为1、5、15 mg/L时,对沙蚕有极显著的促生长作用（P〈0.01）;浓度为30 mg/L时,对沙蚕的促生长作用显著（P〈0.05）;浓度为45 mg/L时,对沙蚕的促生长作用不明显;随着浓度的提高,沙蚕的死亡率明显加大。
双酚A浓度为10~150μg/L、17β-雌二醇浓度为1~30 mg/L时,对沙蚕卵母细胞的生长有明显的促进作用（P〈0.01）;而双酚A浓度为200μg/L（P〈0.05）和17β-雌二醇浓度为45 mg/L（P〈0.01）时对卵母细胞的生长有抑制作用。
【总页数】5页(P97-101)【作者】李霞;宋贞坪;王福景;秦艳杰;杨大佐;周一兵【作者单位】大连海洋大学辽宁省海洋生物资源恢复与生境修复重点实验室,辽宁大连116023【正文语种】中文【中图分类】Q959.19【相关文献】1.雌激素对双齿围沙蚕性比、生长和卵母细胞发育的影响2.若干生态因子对双齿围沙蚕生长发育的影响3.饲料过氧化水平对双齿围沙蚕生长、体组成及抗氧化指标的影响4.饵料对双齿围沙蚕生长发育的影响5.植物蛋白替代鱼粉对双齿围沙蚕生长、体组成及养殖底质总氮的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
17β-雌二醇对大鼠子宫平滑肌自发和激发收缩活动的抑制作用
17β-雌二醇对大鼠子宫平滑肌自发和激发收缩活动的抑制作用马勤;李红芳;金姗;豆兴成;张英福;张立雪;都中蕊【摘要】目的:探讨17β-雌二醇(EST)对离体SD大鼠子宫平滑肌收缩活动的影响.方法:将SD大鼠子宫平滑肌放置于灌流肌槽中,累积加入不同浓度EST溶液,记录肌肉收缩活动的变化.结果:E ST可浓度依赖性地抑制子宫平滑肌自发性节律收缩,明显降低其收缩张力和节律性收缩频率,减小收缩波振幅(P＜0.01)；也可抑制KCl、Ca-Cl2及前列腺素F2α(PGF2α)激发的收缩运动.在EST抑制KCl激发收缩运动中,用线性回归法计算:IC50=7.278μmol/L,pD2=-0.862;在EST抑制CaCl2量效曲线收缩活动中,用线性回归法计算:EC50=1.422×10-3mol/L,pD2=2.847(对照组)；EC50=3.028×10-3mol/L,pD2=2.519(EST组).结论:E ST可抑制子宫平滑肌自发和激发收缩活动,其作用可能主要通过抑制电压依赖性钙通道介导的胞外Ca2+内流实现.【期刊名称】《中国应用生理学杂志》【年(卷),期】2013(029)004【总页数】5页(P305-309)【关键词】17β-雌二醇;子宫平滑肌;自发性节律收缩;激发收缩;张力【作者】马勤;李红芳;金姗;豆兴成;张英福;张立雪;都中蕊【作者单位】兰州大学基础医学院生理学教研室,甘肃兰州730000;甘肃省新药临床前研究重点实验室,甘肃兰州730000;兰州大学基础医学院生理学教研室,甘肃兰州730000;甘肃省新药临床前研究重点实验室,甘肃兰州730000;兰州大学基础医学院机能实验室,甘肃兰州730000;兰州大学基础医学院生理学教研室,甘肃兰州730000;兰州大学基础医学院生理学教研室,甘肃兰州730000;兰州大学基础医学院机能实验室,甘肃兰州730000;兰州大学基础医学院生理学教研室,甘肃兰州730000;甘肃省新药临床前研究重点实验室,甘肃兰州730000;兰州大学基础医学院生理学教研室,甘肃兰州730000;甘肃省新药临床前研究重点实验室,甘肃兰州730000【正文语种】中文【中图分类】R337.2雌性动物进入初情期后，子宫会在孕激素和雌激素作用下，发生有规律的周期性变化。
雌激素及植物雌激素对去卵巢大鼠子宫组织VEGF表达和形态的影响
雌激素及植物雌激素对去卵巢大鼠子宫组织VEGF表达和形态的影响杨丽娜;段颖;张英福;田治锋;邱小青;李红芳【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2009(25)8【摘要】目的比较雌激素及植物雌激素对去卵巢大鼠子宫组织VEGF和形态表达的影响.方法48只Wistar大鼠随机分为8组:假手术组(Sham)、去卵巢组(Ovx)、17β-雌二醇组(Ovx+Est)、17-β雌二醇+黄体酮组(Ovx+Est+Pro)、黄体酮组(Ovx+Pro)、染料木素组(Ovx+Gen)、白黎芦醇组(Ovx+Res)、根皮素组(Ovx+Phl).给药21 d,用蛋白免疫印迹法观察各组子宫VEGF的表达、并用免疫组化对VEGF的表达部位和其形态学变化进行观察.结果与Sham 组比较,Ovx组的VEGF表达下调;与Ovx比较,Ovx+Est和Ovx+Est+Pro两组VEGF表达均明显上调.Gen、Res和Phl对卵巢切除大鼠VEGF无影响.大鼠卵巢切除后,子宫明显萎缩且重量下降.皮下注射Est或Est合并Pro后,子宫组织密度增加,子宫被覆上皮细胞和腺体明显增生.皮下注射Gen和Phl后,子宫形态变化类似卵巢切除大鼠,注射Res可促进去卵巢大鼠子宫腺体的增生,但作用没有雌激素强.结论雌孕激素使VEGF 表达明显上调;植物雌激素Res有促进腺泡增生作用.【总页数】4页(P1041-1044)【作者】杨丽娜;段颖;张英福;田治锋;邱小青;李红芳【作者单位】兰州大学基础医学院生理学教研室;甘肃省新药临床前研究重点实验室;兰州大学基础医学院生理学教研室;兰州大学基础医学院医学机能实验室,甘肃,兰州,730000;兰州大学基础医学院医学机能实验室,甘肃,兰州,730000;兰州大学基础医学院医学机能实验室,甘肃,兰州,730000;兰州大学基础医学院生理学教研室;甘肃省新药临床前研究重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R-332;R322.65;R329.24;R341;R347.913;R977.12【相关文献】1.植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠骨组织雌激素受体α和β mRNA的影响[J], 李少春;段斐;程炜;高文;崔娜2.雌激素加间断孕激素对去卵巢大鼠绝经后骨质疏松模型子宫及骨组织形态计量学的影响 [J], 郭影;底建敏;马秀敏;闫晓娟;庞义存3.雌激素及植物雌激素对去卵巢大鼠乳腺组织形态和ERα亚型表达的影响 [J], 张华;李红芳;杨丽娜;张英福;田治锋;邱小青;陈新年4.植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠骨组织形态学变化的影响 [J], 李少春;段斐;程炜;孙晓芳;石瑜;孟洁;刘未华;高文5.补肾调冲方对去卵巢大鼠性激素水平及下丘脑雌激素受体α、雌激素受体β mRNA表达的影响 [J], 杜永红;李沛霖;韩冰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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素分析
围沙蚕幼虫 CAT、 SOD 和 GST 具有显著影响， 两者比较， 暴露时间影响更大（ 表 1 ） 。17 β雌二醇和暴露时间对这 3 种 抗氧化酶具有交互作用 （ P ＜ 0. 05 ） 。
。在脊椎动物中，天然或人工合成的环境激素可干扰
［11 － 12 ］
鱼类细胞的氧化还原反应环境 ， 产生氧自由基胁迫， 从而 影响机体的 抗 氧 化 防 御 系 统 。 已 有 研 究 表 明， 石 油
L 来，有学者研究发现环境雌激素壬基酚 （ 10 μg· 性
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· L － 1 ） 能 显 著 诱 导 琥 珀 刺 沙 蚕 （ Nereis succinea ） GST 活 μg 。李霞等
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研究了双酚 A 和 17 β雌二醇对双齿围沙
蚕生长、性别和卵母细胞发育的影响 。 而 17 β雌二醇对双 齿围沙蚕抗氧化酶的影响还未见有报道 。 该试验以双齿围 沙蚕幼虫为试验对象， 研究了 17 β雌二醇对其 SOD、 CAT 和 GST 活性的影响，以期为双齿围沙蚕生态毒理学研究提 供参考。
第 10 卷第 6 期 2014 年12 月 doi： 10. 3969 / j. issn. 2095 － 0780. 2014. 06. 012 ·研究简报·
南 方 水 产 科 学
South China Fisheries Science
Vol. 10 ，No. 6 Dec. ，2014
17 β-雌二醇对双齿围沙蚕幼虫 SOD、 CAT 和 GST 活性的影响
1
1. 1
材料与方法
试验材料
试验所用沙 蚕 幼 虫 为 笔 者 实 验 室 繁 育 。 挑 选 均 质 量
2. 3
17 β雌二醇对 SOD 的影响
［13 － 15 ］
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17 β雌二醇对 CAT 的影响
试验结果表明，暴露第 2 天， 双齿围沙蚕 CAT 活性随
烃、重金属等对沙蚕的抗氧化物酶活性有影响
。近年 和 100
17 β雌二醇 质 量 浓 度 增 大 表 现 为 先 上 升 后 下 降 ， 其 中 10 μg · L － 1 浓度组 CAT 活性比空白对照升高了 34. 28% （ P ＜ 0. 05 ） （ 图 1 － a） 。暴露第 4 天时各浓度组 CAT 活性无显著 · L － 1 和 1 μg · L － 1 浓度组 CAT 被 差异。暴露第 6 天时 0. 1 μg 抑制，分别比空白对照低 44. 49% 和 47. 18% （ P ＜ 0. 05 ） 。 · L － 1 浓度组外，其他浓度组呈现 暴露第 8 天时，除 1 000 μg 出 CAT 活性被不同程度诱导的现象 ， 但差异不显著。 同一 浓度下暴露于第 4 、第 6 和第 8 天的 CAT 活性显著低于第 2 天。溶剂对 CAT 活性无显著影响。
Key words： To evaluate the effect of 17βestradiol on the antioxidative enzymes in larvae of Perinereis aibuhitensis，we exposed the worms to 17βestradiol at different concentrations （ 0. 1 μg · L － 1 ，1 μg · L － 1 ，10 μg · L － 1 ，100 μg · L － 1 and 1 000 μg · L － 1 ） ，and measured the superoxide dismutase （ SOD） ，catalase （ CAT） and glutathione Stransferase （ GST） activities on 2 nd ，4 th ，6 th and 8 th day，respectively. The results show that SOD，CAT and GST activities in 10 μg · L － 1 treatment group increased significantly，and SOD and GST activities decreased notably in 1 000 μg · L － 1 treatment group on 2 nd day. SOD and GST activities were induced at different degrees in every treatment group on 4 th day. CAT and SOD activities were suppressed in lowerconcentration groups （ 0. 1 μg · L － 1 and 1 μg · L － 1 ） on 6 th day and in higherconcentration groups （ 100 μg · L － 1 and 1 000 μg · L － 1 ） on 6 th day，respectively（ P ＜ 0. 05 ） . CAT activity was induced at different degrees in all groups except 1 000 μg · L － 1 group （ P ＞ 0. 05） ； GST activity was suppressed in 10 μg · L － 1 group； SOD activity was also suppressed in 17βestradiol treatment groups on 8 th day. It is indicated that SOD， CAT and GST activities in P. aibuhitensis were induced by exogenous 17 βestradiol，and the extent was related with the exposure concentration and time. Key words： Perinereis aibuhitensis； 17 βestradiol； SOD； CAT； GST
Effect of 17 βestradiol on activities of SOD， CAT and GST in larvae of Perinereis aibuhitensis
2 DONG Xuexing1， ，L Linlan1 ，L Fu1 ，ZHAO Weihong1 ，YU Yebing1
粪便、喷洒漂移以及挥发等方式进入自然水体 。17 β雌二 醇也普遍存在于自然水生态系统中 雌激素效应，不仅具有遗传毒性 ， 由于其具有较强的
［5 ］ ［4 ］
， 而且还能通过诱导水 ， 并影响水生
［6 ］
生动物合成卵黄蛋白原等途径干扰其繁殖 动物免疫系统，使得溶酶体膜不稳定 极大的威胁。
1. 4
数据处理
［7 － 9 ］
。 许多内源性或外源性化学物质在水
［10 ］
2
2. 1
结果
17 β雌二醇和暴露时间对抗氧化酶影响双因
双因素分析结果表明，17 β雌二醇和暴露时间对双齿
生生物机体代谢过氢酶 （ CAT ） 、 谷胱甘肽硫转移酶 （ GST ） 是存在于生物体内的重要抗氧化酶 ， 其中 GST 是生物体内 重要的第二阶段代谢酶系之一 ， 具有消除体内自由基和解 毒的双重功能。 SOD、 CAT 和 GST 在机体受到氧化胁迫的 早期非常 敏 感， 常 被 用 于 评 价 化 合 物 对 生 物 的 自 由 基 胁 迫
（ 1. Key Lab. for Aquaculture and Ecology of Coastal Pool of Jiangsu Province，Department of Ocean Technology， Yancheng Institute of Technology，Yancheng 224051 ，China； 2. College of Fisheries and Life Science， Shanghai Ocean University，Shanghai 201306 ，China）
84
南 方 水 产 科 学 研究证实，一些自然或人工合成的化合物对人和野生
第 10 卷
1. 3
测定方法
将样品取出后，加入 10 倍体质量的 0. 9% 生理盐水匀
动物的内分泌系统具有干扰作用 ， 影响野生动物的生长和 繁殖
［1 － 2 ］
。这些外源性物质随土壤淋溶 、 地表径流、 家畜
［3 ］
· min － 1 条件下离心 15 min，取上 浆， 匀浆液于 4 ħ 、3 000 r 清液备用。CAT、SOD、GST 及蛋白质含量测定采用南京建 成生物技术公司试剂盒 ， 试验操作步骤按照试剂盒说明书 进行。
1， 2 1 董学兴 ，吕林兰 ，吕 1 1 1 富 ，赵卫红 ，於叶兵
（ 1. 盐城工学院海洋技术系 ，江苏省沿海池塘养殖生态重点实验室 ，江苏 盐城 224051 ； 2. 上海海洋大学水产与生命学院 ，上海 201306 ） · L － 1 、1 μg · L － 1 、10 μg · 摘要： 将双齿围沙蚕（ Perinereis aibuhitensis） 幼虫暴露于不同质量浓度的 17β雌二醇（ 0. 1 μg L － 1 、100 μg · L － 1 ） 中，于第 2、第 4、第 6 和第 8 天取样，分别测定抗氧化酶［ · L － 1 和 1 000 μg 超氧化物歧化酶（ SOD） 、 · L － 1 浓度组显著诱导双齿围沙蚕 CAT、 过氧化氢酶（ CAT） 和谷胱甘肽硫转移酶（ GST） ］ 活性。结果表明，第 2 天时 10 μg SOD 和 GST 活性，1 000 μg · L － 1 浓度组显著抑制其 SOD 和 GST 活性。第 4 天时各浓度组 SOD 和 GST 活性均被不同程度 · L － 1 和 1 μg · L － 1 ） 显著抑制双齿围沙蚕 CAT 活性，高浓度组（ 100 μg · · L － 1 和 1 000 μg 诱导。第 6 天时低浓度组（ 0. 1 μg L － 1 ） 则抑制其 SOD 活性。第 8 天时，除 1 000 μg · L － 1 浓度组外，其余各组 CAT 活性均被不同程度诱导（ P ＞ 0. 05） ，而 SOD 活性则受到抑制，10 μg · L － 1 浓度组显著抑制其 GST 活性。试验结果显示，外源性 17β雌二醇对双齿围沙蚕幼虫产 生氧化胁迫，沙蚕幼虫 SOD、CAT、GST 对 17β雌二醇的响应与其暴露浓度及时间有关。 关键词： 双齿围沙蚕； 17 β雌二醇； 超氧化物歧化酶； 过氧化氢酶； 谷胱甘肽硫转移酶 中图分类号： X 174 文献标志码： A 文章编号： 2095 － 0780 － （ 2014 ） 06 － 0083 － 05