细胞膜脂肪酸成分检测

细胞膜脂肪酸成分检测

细胞膜脂肪酸提取：

取对数生长期的发酵液，4°C，8000 r/min离心10 min后，去除上清，而后烘箱烘干，研磨成粉末状后分装成每管0.1 g, 加入2.5 mL的1.0 mol / L的NaOH-甲醇的溶液并在70°C孵育2 h。在室温下冷却10min后，加入2.5 mL 25％的三氟化硼- 甲醇溶液中并在65°C温育2小,在室温下10分钟冷却后，加入2 mL 正己烷溶液涡旋混合1分钟。然后加入2mL饱和的NaCl溶液静置1分钟。将离心管在3800 r/min离心1分钟。加入无水硫酸钠，收集上清。而后将上清样品打气相，来分析检测细胞膜的脂肪酸成分。

细胞膜脂肪酸成分检测：

Agilent6850 气相色谱仪，氢火焰离子化检测器（FID），25 m Ultra-2 色谱柱，二级程序升温：起始温度170°C，每分钟升高5°C至260°C，在以每分钟升高40°C升至310°C，维持1.5 min。进样口温度250°C，载气为氢气，流速0.4 mL/ min，柱压9.00 psi分流进样模式，分流比1︰100，进样量2 μl。检测器温度300°C，氢气流速30 mL/ min，空气流速400 mL/ min,尾吹气（氮气）流速30 mL/ min。