071 药物对离体蛙心的影响

药物对离体蛙心的影响

[适用对象]药学、中药学、药物制剂专业

[实验学时] 3学时

一、实验目的

学习离体蛙心灌流方法，观察药物对离体蛙心的作用。

二、实验原理

由于蛙类心脏具有自动节律性收缩活动的特点，故当其离体后，通过蛙心套管向其提供灌流液，可以保持心脏的机能活动。通过改变灌流液中各种离子的浓度或加入不同的药物，可以直观观察到各种离子、神经递质或药物等因素对心脏活动的影响。

三、仪器设备

动物：蟾蜍

器材：探针、眼科剪、眼科镊、蛙板、斯氏蛙心插管、蛙心夹、结扎线、支架等；记录仪为BL一420生物机能实验系统(成都泰盟科技有限公司研制)、肌肉张力换能器

试剂：任氏液，药物溶液等

四、相关知识点

本课程知识点：心肌收缩的影响因素、强心苷的作用特点及其机制

多课程知识点：生理溶液的组成、冠状动脉的组成及其循环、生物信号采集系统操作

五、实验步骤

1、离体蛙心制备取蟾蜍，破坏脑和脊髓，开胸暴露心脏，

穿线结扎右主动脉。在左主动脉上方系一松结用于固定蛙心插管。在左右主动脉下穿一条线，用玻璃分针将心尖翻向头端，尽量在远离静脉窦的远心端处用线将前后腔静脉全部结扎。用眼科剪在左主动脉根部距动脉圆锥2～3 mm处剪一向心方向的斜口，将盛有少量任氏液(按l 000：2的比例加入肝素) 的蛙心插管由开口处插入动脉圆锥，然后将插管稍向后退并转向心室中央方向，在心室收缩期插入心室腔内。此时，可见插管内任氏液液面随心室的活动而上下波动，将备好的松结扎紧。提起蛙心插管，在结扎线以外，剪断所有动、静脉，注意勿损伤静脉窦。用新鲜任氏液反复灌洗蛙心插管直至无血液为止。

2、仪器连接取2个铁架台，分别用于固定蛙心插管与换能器。培养皿中加入80～90 mL任氏液，蛙心夹穿上丝线，绕过滑轮与张力换能器的弹性悬臂相连，滑轮固定于铁架台下端，滑轮的一半浸入培养皿的任氏液面以下。于蛙心的舒张期，用蛙心夹夹住心尖部，浸入任氏液中，并将蛙心插管与任氏液面间以<45°固定于铁架台下部。调整换能器的位置，拉紧连接蛙心夹的丝线(不可过紧)。确定蛙心插管内液面随蛙心搏动而上下起伏。l通道输入端与张力传感器连接。2通道输入端连接生物电信号引导电极。将引导电极另一端3个不同颜色的鳄鱼夹分别夹在培养皿侧壁上，黑色夹在蛙心心尖所指的部位，顺时针依次是红色、黄色夹，将培养皿侧壁分成3等分。注意鳄鱼夹要与任氏液相接触。此时如果改变灌流液中的离子组成，通过容积导体和张力换能器即可同时记录蛙心电活动及机械活动的变化。

3、药物对心脏活动的影响将一定浓度的药物溶液滴入灌流液观察其对心脏收缩性、节律性、传导性、兴奋性的影响。①先选择“输入信号”菜单中的“l通道”项，在子菜单中选择“张力”项。然后选择“2通道”项，在子菜单中选择“心电”菜单项。单击工具条上的“开始”钮。

②描计正常心脏收缩活动。③在蛙心插管内滴加一定浓度的药物溶液数滴，记录心脏收缩活动。

六、实验报告要求

实验报告内容应包括：【实验目的】、【实验原理】、【器材】、【药品与试剂】、【动物】、【实验方法】、【结果】及【讨论】等部分。

【结果】要对所得实验数据进行统计分析；【讨论】要对实验中遇到的问题进行描述并分析原因。

七、思考题

影响心肌电生理特性的离子因素有哪些？它们是如何影响心肌的收缩性、节律性、传导性、兴奋性？

根据实验结果，分析药物对离体蛙心影响的可能机制是什么？

八、实验成绩评定办法

原理描述 : 20分

调试过程 : 10分

数据记录 : 10分

解决问题的能力 : 20分

资料搜集 : 10分

实验结果 : 10分

实验效果 : 10分