【医学ppt课件】去壁低渗法制备植物染色体标本
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去壁低渗法制备 植物染色体标本
实验目的
掌握植物染色体标本制备的去壁低渗方法 了解中期染色体的形态结构
实验原理
植物细胞有很坚实的细胞壁，染色体 很难像动物染色体那样平整地贴在载玻 片上，可通过纤维素酶和果胶酶处理去 掉细胞壁；用低渗溶液处理可以提高染 色体的分散程度。陈瑞阳等（1979， 1982）提出了植物染色体标本制备的酶 解去壁低渗法，并在多种植物上得到广 泛应用，成为当前植物染色体研究中的 重要方法。
实验液：倒去双蒸水，用镊子立即将材料夹碎形成细胞 悬液
（2）固定：向细胞中加入新配制的甲醇：冰醋酸（3：1）固定液12ml，使成细胞悬液
（3）去沉淀：静置片刻使大块组织沉淀，然后取上层细胞悬液于另 一个小瓶中。
（4）去上清夜：将上层细胞悬液静置30分钟左右，即可见细胞沉淀， 用吸管轻轻吸去上清夜，留约0.5ml左右细胞悬液置备标本
(5)标本制备:在一张经过充分洗净脱脂,并预先在蒸馏水中冷冻的 清洁载玻片上,用吸管滴2-3滴细胞悬液,立即将载玻片一端抬起, 并轻轻吹气，使细胞迅速分散，然后在酒精灯火焰上微微加热 烤干。
5、经干燥的玻片标本，用Giemsa染色液染色30分钟，然后用自来水 细流冲洗，甩干水珠空气干燥。
6、在显微镜下寻找典型的中期染色体，注意观察中期染色体的长臂、 短臂和着丝粒位置，并尽可能找到具随体染色体。
作业
中期染色体具有哪些形态特征？
绘制一完整细胞并带有随体的中期染色 体图
实验目的
掌握植物染色体标本制备的去壁低渗方法 了解中期染色体的形态结构
实验原理
植物细胞有很坚实的细胞壁，染色体 很难像动物染色体那样平整地贴在载玻 片上，可通过纤维素酶和果胶酶处理去 掉细胞壁；用低渗溶液处理可以提高染 色体的分散程度。陈瑞阳等（1979， 1982）提出了植物染色体标本制备的酶 解去壁低渗法，并在多种植物上得到广 泛应用，成为当前植物染色体研究中的 重要方法。
实验液：倒去双蒸水，用镊子立即将材料夹碎形成细胞 悬液
（2）固定：向细胞中加入新配制的甲醇：冰醋酸（3：1）固定液12ml，使成细胞悬液
（3）去沉淀：静置片刻使大块组织沉淀，然后取上层细胞悬液于另 一个小瓶中。
（4）去上清夜：将上层细胞悬液静置30分钟左右，即可见细胞沉淀， 用吸管轻轻吸去上清夜，留约0.5ml左右细胞悬液置备标本
(5)标本制备:在一张经过充分洗净脱脂,并预先在蒸馏水中冷冻的 清洁载玻片上,用吸管滴2-3滴细胞悬液,立即将载玻片一端抬起, 并轻轻吹气，使细胞迅速分散，然后在酒精灯火焰上微微加热 烤干。
5、经干燥的玻片标本，用Giemsa染色液染色30分钟，然后用自来水 细流冲洗，甩干水珠空气干燥。
6、在显微镜下寻找典型的中期染色体，注意观察中期染色体的长臂、 短臂和着丝粒位置，并尽可能找到具随体染色体。
作业
中期染色体具有哪些形态特征？
绘制一完整细胞并带有随体的中期染色 体图