常见食用菌形态观察和组织分离法制备母种.ppt
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食用菌菌种的分离 PPT(共10张PPT)
第6页，共10页。
2、种菇消毒
将选好的种菇剪去过长的菌柄， 放入接种箱内进行消毒种菇均用75% 的酒精擦洗菌盖、菌柄。然后再用升 汞擦洗消毒。
第7页，共10页。
3、组织分离接种
用无菌解剖刀从菌柄中部纵向切开， 或把种菇撕开，在菌盖与菌柄交界处或 菌盖带菌褶部分挑取一小块组织，移接
到试管PDA培养基上T
第1页，共10页。
一、目的和要求
掌握了解食用菌组织分离的方法 和实际操作技术，明确食用菌组织 分离在食用菌生产中的重要性。
第2页，共10页。
二、材料和用具
试管斜面PDA培养基、平菇较 成熟的子实体、酒精灯、接种针、 75%酒精，升汞、火柴以及恒温培 养箱、无菌操作台、解剖刀等。
第8页，共10页。
4、菌种培养及保存
置28℃左右温度下培养3～5天就可 看到组织上产生白色绒毛状菌丝，并 向培养基上生长。菌丝长满斜面后， 管口用塑料薄膜或防潮纸包扎，即可 放入5℃电冰箱中保藏。
第9页，共10页。
六、作 业
根据观察结果比较同一菌种不同部 位组织分离后菌丝生长情况，评价何种 部位更适宜该菌种的组织分离繁殖，并 对操作的各个环节提出改进建议。
平菇选朵大肉厚的作种菇。 因 食此用食菌用 菌菌 种组 的织 分分 离离PP是T食用菌生产中的重要环节之一。
食将用选菌 好菌的种的菇分剪离去过PP长T的菌柄，放入接种箱内进行消毒种菇均用75%的酒精擦洗菌盖、菌柄。 以掌班握为 了单解位食，用每菌个组同织学分接离种的方2支法试和管实母际种操(平作菇技)术。，明确食用菌组织分离在食用菌生产中的重要性。 试将管选斜 好面的P种D菇A剪培去养过基长、的平菌菇柄较，成放熟入的接子种实箱体内、进酒行精消灯毒、种接菇种均针用、75%的酒酒精精，擦升洗汞菌、盖火、柴菌以柄及。恒温培养箱、无菌操作台、解剖刀等。 试采管用斜 菌面盖P与D菌A柄培交养界基处、组平织菇进较行成分熟离的和子菌实盖体带、菌酒褶精部灯分、进接行种组针织、分75离%。酒精，升汞、火柴以及恒温培养箱、无菌操作台、解剖刀等。 菌用丝无长 菌满解斜剖面刀后从，菌管柄口中用部塑纵料向薄切膜开或，防或潮把纸种包菇扎撕，开即，可在放菌入盖与5℃菌电柄冰交箱界中处保或藏菌。盖带菌褶部分挑取一小块组织，移接到试管PDA培养基上。 这掌直握接 了关解系食到用所菌繁组菌织种分的离优的劣方。法和实际操作技术，明确食用菌组织分离在食用菌生产中的重要性。 采将用选菌 好盖的与种菌菇柄剪交去界过处长组的织菌进柄行，分放离入和接菌种盖箱带内菌进褶行部消分毒进种行菇组均织用分75离%。的酒精擦洗菌盖、菌柄。 平采菇用选 菌朵盖大与肉菌厚柄的交作界种处菇组。织进行分离和菌盖带菌褶部分进行组织分离。 采平用菇菌 选盖朵与大菌肉柄厚交的界作处种组菇织。进行分离和菌盖带菌褶部分进行组织分离。 掌试握管了 斜解面食PD用A菌培组养织基分、离平的菇方较法成和熟实的际子操实作体技、术酒，精明灯确、食接用种菌针组、织75分%离酒在精食，用升菌汞生、产火中柴的以重及要恒性温。培养箱、无菌操作台、解剖刀等。 食用菌菌种的分离 PPT
2、种菇消毒
将选好的种菇剪去过长的菌柄， 放入接种箱内进行消毒种菇均用75% 的酒精擦洗菌盖、菌柄。然后再用升 汞擦洗消毒。
第7页，共10页。
3、组织分离接种
用无菌解剖刀从菌柄中部纵向切开， 或把种菇撕开，在菌盖与菌柄交界处或 菌盖带菌褶部分挑取一小块组织，移接
到试管PDA培养基上T
第1页，共10页。
一、目的和要求
掌握了解食用菌组织分离的方法 和实际操作技术，明确食用菌组织 分离在食用菌生产中的重要性。
第2页，共10页。
二、材料和用具
试管斜面PDA培养基、平菇较 成熟的子实体、酒精灯、接种针、 75%酒精，升汞、火柴以及恒温培 养箱、无菌操作台、解剖刀等。
第8页，共10页。
4、菌种培养及保存
置28℃左右温度下培养3～5天就可 看到组织上产生白色绒毛状菌丝，并 向培养基上生长。菌丝长满斜面后， 管口用塑料薄膜或防潮纸包扎，即可 放入5℃电冰箱中保藏。
第9页，共10页。
六、作 业
根据观察结果比较同一菌种不同部 位组织分离后菌丝生长情况，评价何种 部位更适宜该菌种的组织分离繁殖，并 对操作的各个环节提出改进建议。
平菇选朵大肉厚的作种菇。 因 食此用食菌用 菌菌 种组 的织 分分 离离PP是T食用菌生产中的重要环节之一。
食将用选菌 好菌的种的菇分剪离去过PP长T的菌柄，放入接种箱内进行消毒种菇均用75%的酒精擦洗菌盖、菌柄。 以掌班握为 了单解位食，用每菌个组同织学分接离种的方2支法试和管实母际种操(平作菇技)术。，明确食用菌组织分离在食用菌生产中的重要性。 试将管选斜 好面的P种D菇A剪培去养过基长、的平菌菇柄较，成放熟入的接子种实箱体内、进酒行精消灯毒、种接菇种均针用、75%的酒酒精精，擦升洗汞菌、盖火、柴菌以柄及。恒温培养箱、无菌操作台、解剖刀等。 试采管用斜 菌面盖P与D菌A柄培交养界基处、组平织菇进较行成分熟离的和子菌实盖体带、菌酒褶精部灯分、进接行种组针织、分75离%。酒精，升汞、火柴以及恒温培养箱、无菌操作台、解剖刀等。 菌用丝无长 菌满解斜剖面刀后从，菌管柄口中用部塑纵料向薄切膜开或，防或潮把纸种包菇扎撕，开即，可在放菌入盖与5℃菌电柄冰交箱界中处保或藏菌。盖带菌褶部分挑取一小块组织，移接到试管PDA培养基上。 这掌直握接 了关解系食到用所菌繁组菌织种分的离优的劣方。法和实际操作技术，明确食用菌组织分离在食用菌生产中的重要性。 采将用选菌 好盖的与种菌菇柄剪交去界过处长组的织菌进柄行，分放离入和接菌种盖箱带内菌进褶行部消分毒进种行菇组均织用分75离%。的酒精擦洗菌盖、菌柄。 平采菇用选 菌朵盖大与肉菌厚柄的交作界种处菇组。织进行分离和菌盖带菌褶部分进行组织分离。 采平用菇菌 选盖朵与大菌肉柄厚交的界作处种组菇织。进行分离和菌盖带菌褶部分进行组织分离。 掌试握管了 斜解面食PD用A菌培组养织基分、离平的菇方较法成和熟实的际子操实作体技、术酒，精明灯确、食接用种菌针组、织75分%离酒在精食，用升菌汞生、产火中柴的以重及要恒性温。培养箱、无菌操作台、解剖刀等。 食用菌菌种的分离 PPT
实验四食用菌原种,栽培种的制备PPT课件
各种食用菌需要的pH值不同，配制培养料时， 应选用NaOH、石灰、盐酸或过磷酸钙等物质调 节pH值。霉菌比食用菌喜欢更低的pH值，生产 上有时为了控制这类杂菌的发生，往往将pH值 适当调高0.5~1。
2020/10/13
10
谢谢您的指导
THANK YOU FOR YOUR GUIDANCE.
感谢阅读！为了方便学习和使用，本文档的内容可以在下载后随意修改，调整和打印。欢迎下载！
汇报人：XXXX 日期：20XX年XX月XX日
11
2020/10/13
2
食用菌的制种程序
种菇
孢子分离 组织分离
接种→母种（一级） 接种→培→养原种（二级）
接种→培→养栽培种（三级）
经过这样三级培养，食用菌菌丝数量大大增加。
一般1支试管菌种可繁殖4~6瓶原种，每瓶原种又 可扩大繁殖60~100瓶栽培种。
2020/10/13
3
原种和栽培种的生产，无论是培养基成分， 配稻草切成2cm长→发酵→＋蔗糖＋麸皮＋
过磷酸钙
2020/10/13
6
一、常用培养料的配方和配制方法
⑶木屑米糠培养基（香菇、木耳、猴头、平菇等）
木屑78%、麸皮或米糠20%、石膏1%、蔗糖1%、 水适量。
⑷木屑、麸皮、黄豆粉培养基（银耳）
木屑50kg、麸皮15kg、黄豆粉1kg、蔗糖0.75kg、 MgSO4 0.25kg、水适量。
料
类，如：蘑菇、草菇；
棉籽壳——米糠培养料：多种菇类。
2020/10/13
5
一、常用培养料的配方和配制方法
⑴粪草培养基（适用于蘑菇）
稻草或麦杆20kg、粪肥（干）30kg、石膏500g、 水适量。
《食用菌菌种生产》课件
食品安全与质量
食用菌是人们日常饮食中的重要食材，菌种生产过程中对安全和质量的要求非 常高，以确保最终产品的安全和健康。
食用菌菌种生产的流程
菌种分离
从自然界或已有的菌种中分离 出纯菌丝的过程，是菌种生产
的首要步骤。
纯化与保藏
在分离出纯菌丝后，需要进行 纯化及保藏，以确保菌种的纯 度和活性。
扩繁与培养
母种培养
在适宜的温度和湿度条件 下进行培养，并观察菌种 的生长情况，记录生长速 度和菌落特征。
食用菌原种的制作
原种培养基的制备
选择适宜的原种培养基配方，按 照比例混合各种成分，并进行灭
菌处理。
原种接种
将母种接入原种培养基中，在无菌 操作下进行接种。
原种培养
将接种后的原种培养基放置在恒温 培养箱中培养，保持适宜的温度和 湿度条件，观察菌种的生长情况。
食用菌病虫害的综合防治
综合防治方法：
04
提高食用菌栽培技术和管理 水平，增强抗病能力。
01 03
加强食用菌生长环境的监测 ，及时发现病虫害。
02
采用多种防治方法相结合， 如物理、生物、化学防治等 。
05
食用菌产业发展现状与前景
我国食用菌产业发展现状
产业规模
我国食用菌产业规模持续扩大，已经成为全球最大的食用菌生产 国和出口国。
菌种纯度鉴定
通过观察菌种的生长情况、菌落 特征、孢子颜色和形态等指标，
确定菌种的纯度。
菌种活力鉴定
通过观察菌种的生长速度、菌丝 颜色和密度等指标，确定菌种的
活力。
菌种抗逆性鉴定
通过观察菌种在不同环境条件下 的生长情况，确定菌种的抗逆性
。
03
食用菌栽培技术
食用菌是人们日常饮食中的重要食材，菌种生产过程中对安全和质量的要求非 常高，以确保最终产品的安全和健康。
食用菌菌种生产的流程
菌种分离
从自然界或已有的菌种中分离 出纯菌丝的过程，是菌种生产
的首要步骤。
纯化与保藏
在分离出纯菌丝后，需要进行 纯化及保藏，以确保菌种的纯 度和活性。
扩繁与培养
母种培养
在适宜的温度和湿度条件 下进行培养，并观察菌种 的生长情况，记录生长速 度和菌落特征。
食用菌原种的制作
原种培养基的制备
选择适宜的原种培养基配方，按 照比例混合各种成分，并进行灭
菌处理。
原种接种
将母种接入原种培养基中，在无菌 操作下进行接种。
原种培养
将接种后的原种培养基放置在恒温 培养箱中培养，保持适宜的温度和 湿度条件，观察菌种的生长情况。
食用菌病虫害的综合防治
综合防治方法：
04
提高食用菌栽培技术和管理 水平，增强抗病能力。
01 03
加强食用菌生长环境的监测 ，及时发现病虫害。
02
采用多种防治方法相结合， 如物理、生物、化学防治等 。
05
食用菌产业发展现状与前景
我国食用菌产业发展现状
产业规模
我国食用菌产业规模持续扩大，已经成为全球最大的食用菌生产 国和出口国。
菌种纯度鉴定
通过观察菌种的生长情况、菌落 特征、孢子颜色和形态等指标，
确定菌种的纯度。
菌种活力鉴定
通过观察菌种的生长速度、菌丝 颜色和密度等指标，确定菌种的
活力。
菌种抗逆性鉴定
通过观察菌种在不同环境条件下 的生长情况，确定菌种的抗逆性
。
03
食用菌栽培技术
食用菌制种—母种培养基制作(食用菌生产课件)
• 2.原种（二级种） 原种是由母种扩大培养而成的菌种。这一级菌种是 为了加快食用菌繁殖速度，满足大面积栽培时生 产栽培种的需要而设置。 原种使用基质通常与栽培基质相同或相似，原种繁 殖培养过程也是生理驯化过程。
• 在培养时应当认真检查菌丝的纯培养程度和菌 丝的长势，保持纯种培养。原种制作所用容器 要求使用透明度好的玻璃瓶。
接种
母种的扩 大培养
培养与检验
常压 高压
蒸汽灭菌
原种 接种
培养与检验
菌种生产工艺流程
确定生产出 发菌株
摇瓶培养基 灭菌
菌株保藏
液体菌种3基
装发酵罐3基
栽培种
灭菌 发酵罐培养
灭菌 液体菌种
（四）培养基的制作技术 1.母种培养基的制作技术 • 母种培养基常用马铃薯葡萄糖琼脂培养基，配方
为马铃薯（去皮）200～250g，葡萄糖20～ 25g，琼脂18～20g，水1000ml。马铃薯要求 新鲜、无霉烂，去皮、去芽点。
1）配制步骤
试管培养基 配制步骤
（1）按配方要求称取各种营养物质。 （2）将去皮的马铃薯切块加水，用文火煮沸30分钟
，过滤取滤液。 （3）加入葡萄糖，并补足水量。 （4）搅拌均匀，自然pH值或调节至适宜的酸碱度
。
（5）加入琼脂，用文火加热使之熔化，并趁热分装 试管或三角瓶中，分装量为试管长度的1/5～ 1/4（保藏用多些，生产用少些）。
3.栽培种（三级种） 这是指直接用于生产栽培的菌种，多由原种扩
大培养而成，常以菌瓶或菌袋作为容器。
（三）菌种生产的流程Байду номын сангаас食用菌的固体菌种生产与液体菌种生产的设
备选型和场所要求是大不相同的。固体菌种生产 也因各级菌种生产所使用基质不同而操作过程的 条件和步骤也有所差异，但作为一种生产工艺流 程来说是大致相同的。
实验2菌种分离-PPT课件
接种孢子
用接种环 蘸孢子液或孢子粉 涂布于平板上
七、菌种质量的鉴定 鉴定 项目 形态特征、生理特性、 栽培性状、经济效益等
一般从菌种的纯度、长势、颜色、菌龄、 均匀度和出菇快慢等6个方面进行鉴定。
、
好母种
退化母种
出菇试验
栽培
出菇快 产量高 品质好 抗逆性强
菌种种类 品种名称 菌种级别 代 时 生产厂家 接种日期
6、组织分离： 解剖刀经火焰灭菌，在蘑菇柄中纵切一刀，用 手掰开再用刀片在菇盖与菇柄交界处切黄豆大 小的小方块，放入培养皿中。 7、左手拿试管，用左手的大拇指和其他四指并 排握住，斜面向上，并使试管位于水平位置。 8、右手拿镊子，在火焰上将凡在接种过程中可 能进入试管的部分全部用火烧过。
9、用右手小指和无名指及手掌拔掉胶塞。用 火焰灼烧试管口，灼烧时应不断转动管口。 将烧过的镊子，稍微停留片刻，使之冷却， 然后夹取小块迅速移接到斜面培养基中央， 并塞好塞子。 10、贴标签 写明菌种编号，接种日期，姓名，随后放入培 养箱中，置适宜温度下培养，待组织块长出 菌丝无污染即为纯种。 培养3~5天，就可以看到组织上产生白色绒毛 状菌丝，转管扩大即得到菌种。
3、孢子分离 孢子分离主要是指利用子实体上产生的成熟有 性孢子分离培养获得纯菌种的方法。分为多孢 分离与单孢分离两种。
孢子 特点
菌龄小 生命力强 变异率高
（1）种菇 消毒
菌柄去2/3 苞被
有：75%酒精棉球擦 无 0.25%新洁尔灭浸2~3min 无菌纱布吸干表面水分
（2）采收孢子 整菇 插种法 种菇插在孢子收集器中 使孢子散落于培养皿内的方法
四、制种程序
五、菌种生产常用的设备和方法
1、接种工具 环
枪 匙 钩 接种 镊 针 耙
食用菌组织分离制母种52页PPT
26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
▪
27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
▪
28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。——孔子
▪
29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。——达·芬奇
▪
30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华
食用菌组织分离制母种
11、不为五斗米折腰。 12、芳菊开林耀，青松冠岩列。怀此 贞秀姿 ，卓为 霜下杰 。
13、归去来兮，田蜀将芜胡不归。 14、酒能祛百虑，菊为制颓龄。 15、春蚕收长丝，秋熟靡王税。
▪
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
谢谢！
52
食用菌原种生产Microsoft ffice PowerPoint 97-2003 幻灯片
称取200g＋1000mL H2O→煮沸15-20min →双层纱布
过滤→取滤液并补足1000mL＋琼脂→熔化＋其它营
养物质→分装试管→塞上棉塞→捆扎→灭菌（高压蒸
气灭菌15-30min）→制成斜面→检查灭菌效果（即 28~30℃培养2~3d）
作业
（1）什么叫食用菌菌种？它又有哪些类型？
（2）写出食用菌的制种程序。 （3）母种培养基的种类有哪些？
国培试讲课件
种植班:许静
第二节 食用菌菌种的来源与培育
一、母种的分离与培育(2学时) 二、原种和栽培种的培育(2学时)
一、食用菌菌种种类
人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。
1 ）母种（一级菌种）：用孢子分离或组织分 离等培育的菌丝体称为母种。
2 ）原种（二级菌种）：把母种扩大到木屑、 棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。 3 ）栽培种（三级菌种）：由原种扩大培养成 为生产上使用的菌种称为栽培种。 菌种：实质上就是经过人工培养并进一步繁 殖的食用菌的纯菌丝体。
1. 组织分离法
（1）选种菇：菇型正常、发育健壮、中等 成熟的平菇子实体， （2）种菇消毒：用75%酒精棉球擦拭表面， 在接菌箱内掰开。 （3）取组织：用接种针在菌盖和菌柄交界 部位中间挑取一小块组织放在试管的斜面 培养基中部，在25℃的恒温箱中培养，即 可萌发形成菌丝，再经提纯移接于新的斜 面培养基上扩大培养即成母种。
灼烧接种针
剖菇体
取组织
接种后
（2）孢子分离法
此法为直接挑取担孢子培养或者通过孢子
收集器收集孢子，然后在培养基上培养，获得 母种。
利用孢子收集器分离孢子流程图
1
2
3
4
5
孢子印法分离孢子流程图
《食用菌制种技术》PPT课件
粪草菌种
培养基的主料
谷粒菌种 木块菌种
木屑菌种
可编辑课件
5
一 、菌种的制作
1、菌种类型及制种程序 （1）菌种类型
菌种按生产程序
一级种 (母种）
二级种（原种）
三级种(栽培种）
可编辑课件
6
一 、菌种的制作
1、菌种类型及制种程序
（1）菌种类型
①一级种
一级种又称母种、试管种。
将经孢子分离法或组织分离法得到的纯培养物，移 接到试管斜面培养基上培养而得到的纯种。
二级种又称原种，这是由母种转接到装有麦粒等固体培 养基质的专有菌种瓶中经过培养后形成。原种可采用750mL 菌种瓶或500mL罐头瓶作为培养容器。一般一支母种可扩大 繁殖6-8瓶原种。
若原种直接用于生产，则成本太高，因此，原种还必 须进一步扩大繁殖成三级种，使菌种数量增多，才能用于 栽培。由于原种的培养基质接近栽培所用的基质，因此原 种也可用于小规模的栽培。
可编辑课件
21
一 、菌种的制作
2、菌种生产的主要设备 （3）接种设备 为了在使用之后能排湿、通风，应在室内顶部设
置小型排风扇，在室内的侧面底部设置玻 璃纤维过 滤进气口。
无菌室(包括缓冲间)除照明用光源外，还应安 装紫外线杀菌灯，吊装在接种操作台的正上 方。
可编辑课件
22
一 、菌种的制作
2、菌种生产的主要设备 （3）接种设备
可编辑课件
9
一 、菌种的制作 1、菌种类型及制种程序
（2）制种程序
菌种生产是
指通过无菌操 作，大量培养 繁殖菌种的过 程。
可编辑课件
10
一 、菌种的制作 2、菌种生产的主要设备 （l）配料设备
切片机是将 木材切成规格 木片的专用机 械，是食用菌 培养基质粉碎 处理的预前工 序设备。
组织分离制食用菌母种PPT课件
75%酒精及酒精棉球等 培养箱等。
复习上一节 母种培养基的配制步骤
• 1.按配方称量：见下面的配方 • 2.煮制 • 3.分装 • 4.灭菌 • 5.排斜面
母种培养基配方：
1.土豆200g、糖20g、琼脂20g、水1000ml
2.去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、 水1000ml、PH值自然，另外添加：麸皮20g、 玉米面5g或黄豆粉5g、磷酸二氢钾2g，硫酸 镁2g，VB11片（10mg）。 此配方适用于大多数菌种，金针菇、黑木耳、 灵芝生长尤其茁壮。 可作黑木耳、香菇的复壮培养基，效果显著。
2.记录你制作的母种的生长状态; 3.是否有杂菌污染,如有分析其原因.
再见!
写在最后
成功的基础在于好的学习习惯
The foundation of success lies in good habits
37
谢谢聆听
·学习就是为了达到一定目的而努力去干, 是为一个目标去 战胜各种困难的过程,这个过程会充满压力、痛苦和挫折
人操作； 第二大组可在无菌室内操作；
第一大组采用菌盖与菌柄交界处组织进 行分离，第二大组采用菌盖带菌褶部分 进行组织分离，作对比观察。
分组辅导
注意同学们的操作； 及时纠正不规范动作。 接种操作完毕，收集试管进行培养。
数显式恒温培养训第三大部分
结果观察
培养基的高压灭菌
使用高压蒸汽灭菌锅应注意的事项？ （提问同学） (1)锅内装物品不应过紧； (2)注意排出冷气，否则不能保证灭菌效果； (3)加热排冷气后，使温度达到121.3℃，压
力在0.1－0.15 MPa之间维持30 min； (4)不耐高热高压之物品，不能用此法灭菌。
（四）组织分离操作的主要步骤：
复习上一节 母种培养基的配制步骤
• 1.按配方称量：见下面的配方 • 2.煮制 • 3.分装 • 4.灭菌 • 5.排斜面
母种培养基配方：
1.土豆200g、糖20g、琼脂20g、水1000ml
2.去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、 水1000ml、PH值自然，另外添加：麸皮20g、 玉米面5g或黄豆粉5g、磷酸二氢钾2g，硫酸 镁2g，VB11片（10mg）。 此配方适用于大多数菌种，金针菇、黑木耳、 灵芝生长尤其茁壮。 可作黑木耳、香菇的复壮培养基，效果显著。
2.记录你制作的母种的生长状态; 3.是否有杂菌污染,如有分析其原因.
再见!
写在最后
成功的基础在于好的学习习惯
The foundation of success lies in good habits
37
谢谢聆听
·学习就是为了达到一定目的而努力去干, 是为一个目标去 战胜各种困难的过程,这个过程会充满压力、痛苦和挫折
人操作； 第二大组可在无菌室内操作；
第一大组采用菌盖与菌柄交界处组织进 行分离，第二大组采用菌盖带菌褶部分 进行组织分离，作对比观察。
分组辅导
注意同学们的操作； 及时纠正不规范动作。 接种操作完毕，收集试管进行培养。
数显式恒温培养训第三大部分
结果观察
培养基的高压灭菌
使用高压蒸汽灭菌锅应注意的事项？ （提问同学） (1)锅内装物品不应过紧； (2)注意排出冷气，否则不能保证灭菌效果； (3)加热排冷气后，使温度达到121.3℃，压
力在0.1－0.15 MPa之间维持30 min； (4)不耐高热高压之物品，不能用此法灭菌。
（四）组织分离操作的主要步骤：
菌种繁育—母种制作(食用菌生产技术课件)
母种分离选育
目录
一、 采集种源 二、 培养基配制琼脂培养基 三、 分离与适温培养 四、 一级种转接 五、 注意事项
母种主要采用人工选择、诱 变育种、杂交育种和原生质 融合等手段获得。作为一般 制种专业户，可以采用人工 选择方式分离培育母种。
菌种
野生 担孢子或子囊孢子或组织体 栽培 扩大繁殖后的纯次生菌丝体
①选择种菇：前已述及。 ②种菇消毒：在种菇中部取最大的3-4张菇片，
用70%的酒精轻擦表面后置于接种箱内消毒；
③菇肉接种：将菇片纵向撕开，在每个裂面靠近菇片边缘处取一 米粒大小的菇肉组织接于PDA培养基上。每张菇片共撕10个裂面 ，接10支试管，一次分离共接30～40支试管；
④培养：将试管置于15～30℃下培养； ⑤纯化 ： 培养期间每天都要检查发菌情况，从中选择菌丝浓白粗
孢子的特点：菌龄小、生命力强、变异率高。
孢子 分离法
单孢分离 多孢分离
难度较大 较简易
单孢分离
多孢分离
概念 步骤
使许多孢子在同一培养基上， 萌发后自由交配成次生菌丝的方法
种菇消毒 采收孢子 接种孢子 出菇试验
整菇插种法 钩悬法 孢子印法
（1） 种菇消毒
菌柄去2/3
苞被
有：75%酒精棉球擦试
➢ 一般操作流程
野生菌驯化 原菌株改良 生物技术创新
优良 菌株
扩大 繁殖Leabharlann 实行纯培养基要 本求
不含任何杂菌
用于 生产
一、采集种源
从野生或人工栽培群体中，选择有代表性的优良菇体作为种源 。在菇床、菌墙中选择出菇早、无杂菌侵染、株型紧凑、圆整 肉厚、色泽美观、七八成熟的第一潮菇的肥壮菇体作种菇(茯苓 类选择菌核或菌索)；
目录
一、 采集种源 二、 培养基配制琼脂培养基 三、 分离与适温培养 四、 一级种转接 五、 注意事项
母种主要采用人工选择、诱 变育种、杂交育种和原生质 融合等手段获得。作为一般 制种专业户，可以采用人工 选择方式分离培育母种。
菌种
野生 担孢子或子囊孢子或组织体 栽培 扩大繁殖后的纯次生菌丝体
①选择种菇：前已述及。 ②种菇消毒：在种菇中部取最大的3-4张菇片，
用70%的酒精轻擦表面后置于接种箱内消毒；
③菇肉接种：将菇片纵向撕开，在每个裂面靠近菇片边缘处取一 米粒大小的菇肉组织接于PDA培养基上。每张菇片共撕10个裂面 ，接10支试管，一次分离共接30～40支试管；
④培养：将试管置于15～30℃下培养； ⑤纯化 ： 培养期间每天都要检查发菌情况，从中选择菌丝浓白粗
孢子的特点：菌龄小、生命力强、变异率高。
孢子 分离法
单孢分离 多孢分离
难度较大 较简易
单孢分离
多孢分离
概念 步骤
使许多孢子在同一培养基上， 萌发后自由交配成次生菌丝的方法
种菇消毒 采收孢子 接种孢子 出菇试验
整菇插种法 钩悬法 孢子印法
（1） 种菇消毒
菌柄去2/3
苞被
有：75%酒精棉球擦试
➢ 一般操作流程
野生菌驯化 原菌株改良 生物技术创新
优良 菌株
扩大 繁殖Leabharlann 实行纯培养基要 本求
不含任何杂菌
用于 生产
一、采集种源
从野生或人工栽培群体中，选择有代表性的优良菇体作为种源 。在菇床、菌墙中选择出菇早、无杂菌侵染、株型紧凑、圆整 肉厚、色泽美观、七八成熟的第一潮菇的肥壮菇体作种菇(茯苓 类选择菌核或菌索)；
菌种的来源—组织分离技术(食用菌生产技术课件)
作物生产技术
食用菌生产技术
项目二 菌种的来源
任务四 组织分离技术
1
作物生产技术
以黑木耳为例： 黑木耳组织分离的应用
黑木耳组织分离
野生种驯化 选育菌种 生产栽培
食用菌生产技术
2
作物生产技术 黑木耳的形态特征
干木耳 耳状 鲜木耳 叶状
食用菌生产技术
3
作物生产技术 黑木耳的形态特征
食用菌生产技术
胶质体，是由许多 具有横隔和分枝的
食用菌生产技术
1.超净工作台 2. 7号手术刀柄 3. 15号手术刀片 4.酒精灯 5. 75%酒精棉球 6. PDA斜面培养基 7.工具支架 8.平皿及滤纸 9.95%酒精
7
作物生产技术 组织分离前的准备
接种室要提前2天采用烟雾 消毒剂进行熏蒸消毒处理。
将浸泡好的黑木耳及斜面培 养基放置于超净工作台上，手术 刀柄与刀片组合在一起，并准备 好其它用具。提前30分钟开启 超净工作台及紫外线灯照射，严 格遵循无菌操作规程。
食用菌生产技术
恒温培养2d，胶 质体周边生长出菌丝。
25℃恒温培养5d， 菌丝生长情况。
9
作物生产技术 纯化与出耳试验
转管纯化
食用菌生产技术
扩大繁殖
25℃恒温箱中避 光培养5～6 天。
挑取新生长出的 菌丝转管进行纯 化培养。
试管菌种移接培养 成原种、栽培种， 进行出耳试验。
管状菌丝组成。
两个中间层位置 分开形成背、腹
两片。
4
作物生产技术 分离材料的准备
食用菌生产技术
吊袋黑木耳
地摆黑木耳
清水浸泡2小时备用
5
作物生产技术 分离材料的准备
1.选取干木耳 4.放置超净工作台上备用
食用菌生产技术
项目二 菌种的来源
任务四 组织分离技术
1
作物生产技术
以黑木耳为例： 黑木耳组织分离的应用
黑木耳组织分离
野生种驯化 选育菌种 生产栽培
食用菌生产技术
2
作物生产技术 黑木耳的形态特征
干木耳 耳状 鲜木耳 叶状
食用菌生产技术
3
作物生产技术 黑木耳的形态特征
食用菌生产技术
胶质体，是由许多 具有横隔和分枝的
食用菌生产技术
1.超净工作台 2. 7号手术刀柄 3. 15号手术刀片 4.酒精灯 5. 75%酒精棉球 6. PDA斜面培养基 7.工具支架 8.平皿及滤纸 9.95%酒精
7
作物生产技术 组织分离前的准备
接种室要提前2天采用烟雾 消毒剂进行熏蒸消毒处理。
将浸泡好的黑木耳及斜面培 养基放置于超净工作台上，手术 刀柄与刀片组合在一起，并准备 好其它用具。提前30分钟开启 超净工作台及紫外线灯照射，严 格遵循无菌操作规程。
食用菌生产技术
恒温培养2d，胶 质体周边生长出菌丝。
25℃恒温培养5d， 菌丝生长情况。
9
作物生产技术 纯化与出耳试验
转管纯化
食用菌生产技术
扩大繁殖
25℃恒温箱中避 光培养5～6 天。
挑取新生长出的 菌丝转管进行纯 化培养。
试管菌种移接培养 成原种、栽培种， 进行出耳试验。
管状菌丝组成。
两个中间层位置 分开形成背、腹
两片。
4
作物生产技术 分离材料的准备
食用菌生产技术
吊袋黑木耳
地摆黑木耳
清水浸泡2小时备用
5
作物生产技术 分离材料的准备
1.选取干木耳 4.放置超净工作台上备用
常见食用菌形态观察和组织分离法制备母种.ppt
如冬虫夏草1分类地位一食用菌的概念双孢蘑菇白蘑菇盐渍双孢蘑菇二常见食用菌形态观察二常见食用菌形态观察香菇二常见食用菌形态观察二常见食用菌形态观察白金针菇黄金针菇二常见食用菌形态观察灵芝二常见食用菌形态观察猴头菇二常见食用菌形态观察二常见食用菌形态观察黑木耳草菇麻菇二常见食用菌形态观察长裙竹荪二常见食用菌形态观察二常见食用菌形态观察agrocybeaegeritaagrocybeaegeritacoprinuscomatus虎掌菌
冬虫夏草
冬虫夏草的蛹
冬虫夏草的蛹、成虫、虫卵
冬虫夏草的虫卵
三、组织分离法
1、方法
参见P45-46
选 择 种 菇 → 表 面 消 毒 （ 75% 酒 精 或 0.1%升汞）→撕成两半→取菌柄菌盖交 界处→小块菌肉→移入PDA→培养→观 察→转管→纯种
上述分离物在25℃下，经3d~5d可看到分离 物表面长出白色绒毛状丝，每隔1d~2d检查1 次，随时淘汰霉菌、细菌污染的培养物，培养 10d~15d，再作1次转管即得到纯种。
榆黄蘑：Pleurotus citrinipileatus
白灵菇：Pleurotus eryngii
白灵菇：Pleurotus eryngii
红菇：Russula lepida
二、常见食用菌形态观察 子囊菌纲食用菌
羊肚菌
羊肚菌
Morchella esculenta
子囊菌纲食用菌
冬虫夏草
实验二
常见食用菌形态观察和组织分离法制备母种
一、食用菌的概念
担子菌纲（多）：如蘑菇、香菇、
1、分类地位
平菇、金针菇等
子囊菌纲（少）：如冬虫夏草、 羊肚菌等
2、营养体：分枝状菌丝体。不含叶绿素， 不能光合作用；
冬虫夏草
冬虫夏草的蛹
冬虫夏草的蛹、成虫、虫卵
冬虫夏草的虫卵
三、组织分离法
1、方法
参见P45-46
选 择 种 菇 → 表 面 消 毒 （ 75% 酒 精 或 0.1%升汞）→撕成两半→取菌柄菌盖交 界处→小块菌肉→移入PDA→培养→观 察→转管→纯种
上述分离物在25℃下，经3d~5d可看到分离 物表面长出白色绒毛状丝，每隔1d~2d检查1 次，随时淘汰霉菌、细菌污染的培养物，培养 10d~15d，再作1次转管即得到纯种。
榆黄蘑：Pleurotus citrinipileatus
白灵菇：Pleurotus eryngii
白灵菇：Pleurotus eryngii
红菇：Russula lepida
二、常见食用菌形态观察 子囊菌纲食用菌
羊肚菌
羊肚菌
Morchella esculenta
子囊菌纲食用菌
冬虫夏草
实验二
常见食用菌形态观察和组织分离法制备母种
一、食用菌的概念
担子菌纲（多）：如蘑菇、香菇、
1、分类地位
平菇、金针菇等
子囊菌纲（少）：如冬虫夏草、 羊肚菌等
2、营养体：分枝状菌丝体。不含叶绿素， 不能光合作用；
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双孢蘑菇(白蘑菇) 盐渍双孢蘑菇
二、常见食用菌形态观察
担子菌纲食用菌
平菇
二、常见食用菌形态观察 担子菌纲食用菌
香菇
二、常见食用菌形态观察
担子菌纲食用菌
银耳（白木耳）
二、常见食用菌形态观察
担子菌纲食用菌
白金针菇
黄金针菇
灵芝
二、常见食用菌形态观察
担子菌纲食用菌
灵芝
二、常见食用菌形态观察
担子菌纲食用菌
实验二
常见食用菌形态观察和组织分离法制备母种
一、食用菌的概念
担子菌纲（多）：如蘑菇、香菇、
1、分类地位
平菇、金针菇等
子囊菌纲（少）：如冬虫夏草、 羊肚菌等
2、营养体：分枝状菌丝体。不含叶绿素， 不能光合作用；
3、繁殖体：形成大型子实体；
4、生活方式：以寄生或腐生方式生活。
二、常见食用菌形态观察
担子菌纲食用菌
鸡腿菇
鸡腿菇 Coprinus comatus
担子菌纲食用菌
真姬菇
担子菌纲食用菌
虎掌菌：Sarcodon imbricatus
猪苓菌：Grifola umbellata
别名：猪苓花、猪灵芝。
特征：子实体丛生，肉质，味道鲜美，地下部分的菌核即是中药材的 猪苓，菌核不规则、块状，棕黑色至黑色。
2、注意事项
⑴ 取组织块不要贪大，因组织块小易定植; ⑶不同的食用菌切取部位和消毒方法不同。
母种
3、作业
（1）每人分离5支试管菌种。 （2）食用菌菌种分离方法有哪些？ （3）食用菌菌种质量如何检验？
榆黄蘑：Pleurotus citrinipileatus
白灵菇：Pleurotus eryngii
白灵菇：Pleurotus eryngii
红菇：Russula lepida
二、常见食用菌形态观察 子囊菌纲食用菌
羊肚菌
羊肚菌
Morchella esculenta
子囊菌纲食用菌
冬虫夏草
药用功效：猪苓及猪苓多糖对肝炎、肺癌、食管癌、白血病、乳腺癌 及淋巴肉瘤有显著的治疗效果。
杏鲍菇：Pleurotu seryngii
别名：刺芹侧耳、雪茸。
杏鲍菇是一种营养十分丰富、味道鲜嫩的新型品 种，菌肉肥厚，质地脆嫩，具有杏仁香味。
杏鲍菇：Pleurotu seryngii
榆黄蘑：Pleurotus citrinipileatus
猴头菇
二、常见食用菌形态观察
姬松茸
担子菌纲食用菌 黑木耳
二、常见食用菌形态观察
草菇(麻菇, 杆菇)
担子菌纲食用菌 长裙竹荪
二、常见食用菌形态观察
担子菌纲食用菌
灰树花
担子菌纲食用菌
长根菇
牛肝菌
二、常见食用菌形态观察
担子菌纲食用菌
茶新菇
茶树菇
茶树菇 Agrocybe aegerita
茶树菇 Agrocybe aegerit、成虫、虫卵
冬虫夏草的虫卵
三、组织分离法
1、方法
参见P45-46
选 择 种 菇 → 表 面 消 毒 （ 75% 酒 精 或 0.1%升汞）→撕成两半→取菌柄菌盖交 界处→小块菌肉→移入PDA→培养→观 察→转管→纯种
上述分离物在25℃下，经3d~5d可看到分离 物表面长出白色绒毛状丝，每隔1d~2d检查1 次，随时淘汰霉菌、细菌污染的培养物，培养 10d~15d，再作1次转管即得到纯种。