孕妇血清中人类巨细胞病毒DNA

Conclusion Fetal exposure to high level of maternal HCMV DNA is one of the important determinant of intrauterine infection and bad pregnancy outcome. 【Key words】 HCMV DNA load Disease transmission, vertical DNA, virus Bad pregnancy outcome
二 方法
1.血清学检测：孕妇血清HCMV DNA指标检测，脐带血HCMV DHA 检测，采集孕妇静脉血、胎儿 脐动脉血2ml，收集于无菌离心 管中，室温放置30min，凝固后 离心，4000rpm，10min。吸取 血清40C保存备检。（勿吸入红 细胞）转入另一无菌离心管中 即可用于测试
2、取每例尸检婴儿脑、肝、肾 脏、肺的病理标本。胚胎停育 用绒毛为标本。处理方法：取 1g组织或绒毛入1.5ml试管中， 用0.9％NS洗涤后离心， 4000rpm，10min。弃上清，再 加100ul 0.9％NS研碎后离心， 10000rpm,10min,吸上部匀浆备 检。
当孕妇血清中HCMV DNA含量达4 级≥1.000.000/ml时，其宫内感 染的发生率高达53.33%，风险 率达（62.39）。由此推论，因 血清HCMV含量高，而传染性 强，而孕妇传染性强是宫内感 染的重要原因。
5、统计学方法 等级资料采用线性趋势分析。 数据EPI(5.0版)软件处理。
结 果
一、宫内感染的发生情况 186例 HCMV DNA阳性孕妇的胚胎、绒毛、 胎儿组织、羊水或血清经检测，有 34例为阳性，阳性率为18.27%。而 对照组51例中，无一例发生HCMV DNA先天性感染。母儿感染情况的 配对检测结果相关，说明HCMV宫内 垂直传播确实存在。
Βιβλιοθήκη Baidu
The Relationship of Serum HCMV DNA Load in the Human Cytomegalovirus Infection Pregnant Women to the Intrauterine Infection of Newborns FU Jinhua et al. Weifang People’s hospital, Shandong weifang 261041, China
因此产前诊断宫内HCMV感染极 为重要。本研究应用PCR方法结 合荧光探针的体外扩增检测技 术。对孕妇和胎儿血清、胚胎、 胎儿器官进行产前HCMV DNA定 量诊断。
研究表明，随着孕妇血清HCMV DNA含量的增加，胎儿发生宫内 传染的危险性也增高，血清 HCMV DNA含量标志着HCMV 传染 性的强弱。
二、孕妇血清HCMV DNA含量与 胎儿宫内感染
胎儿宫内感染率，随着孕妇血 清HCMV DNA含量的增加而呈增 高趋势（x2=13.49,P<0.001）。 因0级宫内感染为0例，故将0级 与1级合并，再计算各层OR值， OR值从5.72升至62.39，也呈增 高的趋势。见表1。
表1 孕妇血清HCMV DNA分级与胎儿宫内感染的关系表 宫内感染 DNA分级 总例数 例数 百分数(%) OR值 0级 28 0 0.00 … 1级 64 3 3.26 5.72 2级 35 6 17.14 23.42 3级 29 9 31.03 40.21 4级 30 16 53.33 62.39
据报道：HCMV宫内感染胎儿中， 10.0％为症状性感染，死亡率 [2,3],幸存者几乎均 高达30.0％ 有神经系统损害(智力发育迟缓、 脉络膜视网膜炎)[4]。
本研究调查186例HCMV感染孕妇 的胎儿、新生儿、绒毛、器官 及脐血，HCMV感染率为18.27%， 而感染儿中出现妊娠不良结局 的发生率为55.88％。
巨细胞病毒感染 (cylomegalovirus infection)是由 巨细胞病毒（cylomegalovirus CMV）引起的人类感染性疾病， 近年已列为性传播性疾病。本 症特征性病变为感染细胞增大， 细胞核及细胞质内分别出现嗜 酸性及嗜碱性包涵体。
CMV具有潜伏期活动的生物学 牲，多为潜伏感染，CMV容易 发生垂直传播，对胎儿厉害极 大，是引起新生儿先天性缺陷 和智力发育不全的最主要的病 源体之一。
讨
论
1 孕妇HCMV活动性感染的情况 HCMV感染在全世界流行广泛， 各地孕妇感染率与地理环境、 经济和卫生条件、人群构成及 检测手段有关。HCMV具有隐匿 感染的特点，多数免疫功能正 常的成年人HCMV感染为亚临床 型。
本研究调查发现，胎儿宫内感 染的孕妇85.29％孕期曾有临床 症状、8例畸形儿，包括早产儿 患儿的母亲孕期均反复出现发 热、类似“感冒”症状。
1例智力发育迟缓(2.3%)。 先天性 感染儿生后体格、智力发育异常率 显著高于非先天感染儿(P<0.05)。 有学者认为这可能与HCMV宫内感染 导致婴幼儿受累器官的慢性感染和 持续损害[7]以及细胞免疫功能受 抑制，使患儿易合并其它感染性疾 [8]有关。 病
4先天性HCMV感染的产前诊断及 优生处理 HCMV先天感染是致畸和导致智 力低下的主要原因之一，目前 尚无特效安全的治疗方法，而 孕妇HCMV感染只有小部分传播 给胎儿造成危害，仅凭母血的 HCMV-IgM和HCMV DNA阳性并不 足以作为终止妊娠的指征。
【Abstract】 Objective To study the relationship of serum Human Cytomegalovirus (HCMV ) DNA load in the Human Cytomegalovirus Infection Pregnant Women to intrauterine of their newborn . Methods HCMV DNA load in serum in 186 Human Cytomegalovirus Active Infection Pregnant Women and fetus or newborn and embryo , fetal organs or chorionic villi were determined by human cytomegalovirus(CMV)PCR fruorogence diagnostic kit .
有条件的医院应对孕妇进行 HCMV DNA常规的筛查，阳性者， 特别对DNA拷贝值较高的孕妇应 反复进行产前诊断。
3 先天性HCMV感染对胎婴儿的影响 胎儿免疫系统不成熟，不能充分识 别抗原成分，HCMV侵入后得以在胎 儿体内复制，侵袭和损害中枢神经 系统，心血管系统、肺、肝、肾等 器官而造成死胎、流产、畸胎、新 生儿严重疾病甚至死亡。
结果提示上述症状可能是孕妇 HCMV活动性并且病毒感染量较 重的表现，并可能有较高宫内 传播危险性，应重点监测母儿 HCMV感染的病毒数量。
2孕妇HCMV的宫内传播 目前普遍认为从脐血或产后早 期新生儿器官、绒毛及胚胎中 检出HCMV-IgM或HCMV DNA即可 诊断为先天性HCMV感染。
本研究中调查186例HCMV感染的 孕妇的胎儿、新生儿，HCMV宫 内感染34例，感染率为18.27％， 而51例非感染孕妇中的胎婴儿 无一例发生HCMV先天性感染。 母儿感染情况的配对检测结果 相关，说明HCMV宫内垂直传播 确实存在。
表中可见，随着孕妇血清HCMVDNA含量增加，宫内感染的发生 率呈增加趋势，宫内感染的危 险性也逐渐升高。当拷贝值达4 级以上水平时，其宫内感染的 风险率比达62.39。
三、症状性感染与宫内感染 186例感染性孕妇中，有39例出现 症状性感染，其中有宫内感染的 34例中29例(85.29%),有发热（低 热居多）,疲倦无力，头痛，咽痛， 肌肉酸痛，白带增多，颈部淋巴 结肿大，多发性神经炎，单核细 胞增多等不同的症状。而8例畸形 儿的母亲，孕期均出现症状性感 染。
人类巨细胞病毒是引起宫内感染 的最主要的病原体，能导致死胎、 畸形、胎儿生长受限(FGR)、智力 发育落后等严重后果[1]。但也有 许多孕妇感染HCMV，而未见胎儿 及新生儿有异常，由此我们推想 孕妇血清中HCMV DNA的含量---拷 贝值可能与胎儿及新生儿的感染 及不良妊娠结局有关。
本研究我们用PCR方法结合荧光 探针的体外扩增和检测技术检 测孕妇血清中的HCMV DNA含量， 探讨孕妇血清HCMV DNA含量与 胎儿宫内感染及妊娠不良结局 的关系。
而在此34例先天感染儿中有8例 生后即表现先天畸形，占23.52 ％，与非HCMV感染孕妇的畸胎 发生率1例（1.8％）差异显著 （P<0.001）；异常妊娠结局 （流产、早产、畸形、死胎等） 19例， 55.88％（19/34）。
其中流产与死胎10例,早产3例, 畸形8例,对照组51例中，足月 分娩43例，异常妊娠结局（流 产、早产、死胎等）8例 （15.68％）,与研究组相比较， 有显著差异。
资料与方法
一.研究对象 1995年-2002年在我院产前门诊 筛选人类巨细胞病毒DNA(HCMV DNA)阳性的孕妇186为研究对象。 51例HCMV DNA阴性的孕妇为对照 组。
于孕妇流产、早产、刮宫或分 娩前采集静脉血，胚胎期查绒 毛，中孕胎儿外观无异常并且 要求保留胎儿者抽取脐带血或 羊水，死胎者取器官组织，足 孕分娩取脐血，与孕妇血清同 时查HCMV DNA的拷贝值。
3.检测方法：采用深圳匹基公 司生产的HCMV DNA荧光定量试 剂盒，操作步骤按说明书进行。
4.HVMV DNA定量方法：根据测 得的HVMV DNA拷贝值将其分为5 个等级，0级≤1000/m1，1级 ≤10,000/ml， 2级≤100,000/ml， 3级≤1,000,000/ml, 4级＞ 1,000,000/ml
结果 胎儿发生宫内感染及妊娠不 良结局与其母亲血清HCMV DNA含量 （拷贝值）有关，随着孕妇血清中 HCMV DNA含量的增高，胎儿宫内感 染及不良妊娠结局的危险性也呈显 著增高趋势。结论 孕妇血清HCMV DNA含量升高是胎儿感染HCMV并发 生妊娠不良结局的重要因素之一。
【关键词】人类巨细胞病毒 胎儿宫内感染,垂直 DNA,病毒 妊娠不良结局
其中流产与死胎10例,早产3例, 畸形8例；51例无感染儿妊娠不 良结局率为15.68%，畸形一例。 差异显著。这些都说明先天性 HCMV感染与胎儿不良结局有非 常密切的关系，可能因为病毒 直接杀伤组织细胞或造成脉管 炎，干扰器官的正常发育[5]；
也有学者提出病毒可能通过干 扰遗传物质的稳定性和遗传信 息的表达而产生致畸效应 [6] 。 故感染胎儿中出现妊娠不良结 局的风险显著增高。
随访2年内，研究组出现感觉神经 性耳聋1例，癫痫1例,精神和智力 异常2例,体格发育迟缓后遗症2例, 总共6例，占17.64％。43例无感 染儿随访，智力发育迟缓1例，余 无发育均正常，占2.3%。故先天 性HCMV感染与儿童的生长发育亦 有显著的相关性,两组差异亦有极 显著性（P<0.001）。
孕妇血清中人类巨细胞病毒DNA含 量与胎儿宫内感染的关系
【摘要】目的 探讨孕妇血清中人 类巨细胞病毒DNA（HCMV DNA） 含量与胎儿宫内感染发生率的关 系。方法：用PCR方法结合荧光 探针的体外扩增和检测技术，检 测186例HCMV感染孕妇血清、胎 儿或新生儿血清；胚胎、绒毛中 HCMV DNA拷贝数。
据报道，90%以上幸存者的有症 状先天感染儿和10%无症状感染 儿可在1年后出现感染神经性耳 聋、癫痫、精神或体格发痛迟 缓等后遗症。本研究随访HCMV 感染孕妇所生婴、幼儿34例， 月龄2-48个月。
存活的11例先天感染儿中，2年 内出现感觉神经性耳聋1例，癫 痫1例,精神和智力异常2例,体 格发育迟缓后遗症2例,共6例， 占54.54％；随访43例非先天感 染儿42例身体指标和智力与同 龄儿正常标准比较未见明显异 常。