华科考博分子生物学历年真题汇总(葵花宝典2016)s

华中科技大学同济医学院考博分子生物学（专业基础）简答题历年试题汇总

1.顺式作用元件有哪些，并加以解释。2015，2012考

2.人类基因组计划的4张图，各自的意义是什么？

3.癌基因激活的主要途径？

问答：1.什么是基因治疗，基因治疗的主要策略是什么？基因治疗的技术及主要内容，2015，2014，2013考

问答2.蛋白质组学的主要技术有哪些并解释？2015，2012考

2014简问答题

1.PCR原理，步骤，写出6种PCR衍生技术2013，2014，2009考

2.何谓基因克隆？简述其基本过程。09年

3.重组DNA技术，问答题20分，14年考

4.举例说明基因表达的调控机制。题目太大，原核调控，真核调控？13年

问答5.人类基因定位的常用方法及原理。12年，09年考

简问6.简述反式作用因子的结构特点及作用方式09年

简问7.简述逆转录病毒的结构特点09年考

问答：真核细胞中基因表达的特异性转录调控因子是指什么？根据他们的结构特征可以分为哪些类型？它们和DNA相互识别的原理是什么？2013年考

问答：试述大肠杆菌中表达蛋白质产物的步骤。2013年考

试比较克隆载体、原核载体和真核载体的特点2012年考

2016年真题

英译中名词解释（20分）

反义RNA；操纵子；限制性核酸内切酶；选择性剪切；抑癌基因；基因诊断； RNA干扰；质粒； gene maping；管家基因

简答题。

真核基因组的结构和功能特点20分

人类基因组的结构特征15分

原癌基因的特点15分

蛋白质组研究常用技术有那些，简介其作用。15分

当前基因治疗技术面临的技术问题有哪些？15分

以下为2001-2004年试题及网上答案

基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作，又叫分子克隆，DNA 重组技术。

1. 在GENBANK中检索IL-2的mRNA序列；在genecard里检索IL-2高表达的组织；同时检索一下有关文献；

2. 如果考虑使用原核表达系统（通常是大肠杆菌表达系统），将IL-2的成熟肽的基因序列找出（呵呵，我没有检索，不清楚是否有信号肽）进行分析；

3. 根据表达载体，设计含有合适酶切位点的、对应成熟肽编码区的引物；

4. 提取IL-2高表达的组织的mRNA，RT-PCR，T载体克隆或直接酶切克隆至表达载体中、测序。

Trans-acting factor是一类细胞核内的蛋白质因子，能够与顺式作用元件和RNA-pol相互作用，调节基因转录活性。一般含有DNA结合结构域和转录活化结构域。

DNA结合结构域：（1）Helix-turn-helix 含有3个helix，其中helix3与DNA识别结合，helix1和helix2与其它蛋白质结合。（2）Zenic finger锌指结构：由相对保守的一段氨基酸序列和锌离子结合，形成相对独立的功能域，像一根手指插入DNA的大沟。两种类型的DNA 结合蛋白有这样的模序，一是锌指蛋白，另一个是甾体受体。（3）Leucine Zipper：亮氨酸拉链，两个蛋白质之间相互作用，共同建立一个转录复合体。是一种富含亮氨酸的蛋白质形成的二聚体motif。这种motif可以识别特殊的DNA序列。两个亮氨酸拉链区的反式作用因子依靠疏水力量相互结合，N-端有碱性氨基酸构成的a-helix能够与DNA结合。Eg: AP1与SV40增强子的结合（4）helix-loop-helix: 兼性a-helix具有疏水面和亲水面，两个具有这种的motif 反式因子可以形成dimer。仅靠helix的N-端有一段富含碱性氨基酸的序列可以与DNA结合。HLH以同二聚体或者异二聚体作用于顺式作用元件。（5）同源异形结构域homeodomain,同源异性盒是一种编码60aa的序列，长180bp，几乎存在于所有真核生物中。

转录激活域：与其他转录因子相互作用的结构成分。常见的转录激活结构域有富含谷氨酰胺结构域，富含脯氨酸结构域及酸性α螺旋结构域。

Ⅱ型酶相对来说最简单，它们识别回文对称序列，在回文序列内部或附近切割DNA ，产生带3'- 羟基和5'- 磷酸基团的DNA 产物，需Mg2+ 的存在才能发挥活性，相应的修饰酶只需SAM 。识别序列主要为4-6bp ，或更长且呈二重对称的特殊序列，但有少数酶识别更长的序列或简并序列，切割位置因酶而异，有些是隔开的。

①有特异识别和切割的序列部位

②DNA分子上两个单链断裂的部位通常不是直接相对的

③断裂所形成的DNA片段常具有碱基互补的单链尾巴（粘性末端）

④内切酶的切割和修饰功能由两个不同的酶催化所完成，即内切酶活性和甲基化作用活性是分开的

原核基因表达调控与真核存在很多共同之处，但因原核生物没有细胞核和亚细胞结构，其基因组结构要比真核生物简单，基因表达的调控因此而比较简单。虽然原核基因的表达也受转录起始、转录终止、翻译调控及RNA、蛋白质的稳定性等多级调控，但其表达开、关的关键机制主要发生在转录起始。其特点包括以下3方面：（1）σ因子决定RNA聚合酶的识别特异性：原核生物只有一种RNA聚合酶，核心酶催化转录的延长，亚基识别特异启动序列，即不同的因子协助启动不同基因的转录。（2）操纵子模型的普遍性：除个别基因外，原核生物绝大数基因按功能相关性成簇地连续排列在染色体上，共同组成一个转录单位即操纵子，如乳糖操纵子等。一个操纵子含一个启动序列及数个编码基因。在同一个启动序列控制下，转录出多顺反子mRNA。（3）阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性：在很多原核操纵子系统，特异的阻遏蛋白是控制启动序列活性的重要因素。当阻遏蛋白与操纵基因结合或解离时，结构基因的转录被阻遏或去阻遏。原核生物在细胞质内转录，转录和翻译同时进行。

（1）病毒内的核酸结构相对简单，其遗传物质可以是DNA或者RNA，也有阮粒病毒以蛋白质作为遗传物质，成熟的病毒内只有一种遗传物质，要么是DNA，要么是RNA。（2）病毒基因可以连续也可以中断，很少有重复序列。病毒基因组大部分是用来编码蛋白质的，其编码区大于90%。非编码区较少。非编码区通常是基因表达的调控区（3）有重叠基因存在，使得较小的基因片段可以携带较多的遗传信息。（4）病毒基因组是单倍体，功能相关的蛋白质基因常常丛集于基因组的一个或者多个特定部位，形成一个功能单元或者转录单元。