1.1dna重组技术的基本工具课件PPT

1 . 1 d na重组 技术的 基本工 具课件 PPT
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专题1 基因工程
探究 2 DNA 连接酶的作用 E·coli DNA 连接酶和 T4DNA 连接酶均可把黏性末端之间的缝隙 “缝合”起来，相当于把梯子两边的扶手的断口连接起来。即：
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专题1 基因工程
限制酶有特性，“特定”突显专一性。
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专题1 基因工程
2．DNA 连接酶——“分子缝合针”
E连·c接ol酶i DNA来特源点_黏_：：_性___只末__大__能端__肠__“__杆_的缝_菌_双合_链”D具N有A_片互__段补__的___
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专题1 基因工程
三、重组 DNA 分子的模拟操作(阅读教材 P6～P7)
1．材料用具：剪刀代表_E__c_o_R__Ⅰ__，透明胶条代表_D__N_A__连__接__酶__。
2．切割位点
(1)分别从两块硬纸板上的一条 DNA 链上找出
专题1 基因工程
1．1 DNA 重组技术的基本工具
专题1 基因工程
1．了解基因工程的概念、诞生及发展。 2.掌握限制酶及 DNA 连接酶的作用。(重、难点) 3．理解载体需具备的条件。(重 点)
专题1 基因工程
一、基因工程(阅读专题 1 前言部分)
基因技__术___
__G_—__A__—__A_—__T__—__T_—__C____序列，并选__G__—__A__之间作切口进行
“切割”。
(2)再从另一条链上_互__补__的__碱__基___之间寻找 EcoRⅠ相应的切口
剪开。
3．操作结果：若操作正确，不同颜色的黏性末端应能_互__补__配__对__；
否则，说明操作有误。
操作环境
生物体外
操作对象 操作水平
结果
_基__因___ __D__N_A__分__子__水__平___ 新的_生__物___类__型__和生物产品
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专题1 基因工程
二、基因工程的基本工具(阅读教材 P4～P6) 1．限制性核酸内切酶——“分子手术刀” (1)来源：主要来自于_原__核__生__物___。 (2)特点：具有专一性。 ①识别双链 DNA 分子的某种__特__定__核__苷__酸__序__列__。 ②切割特定核苷酸序列中的__特__定__位__点__。 (3) 作 用 ： 断 开 每 一 条 链 中 特 定 部 位 的 两 个 核 苷 酸 之 间 的 _磷__酸__二__酯__键___。 (4)结果：产生__黏__性__末__端__和__平__末__端__。
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专题1 基因工程
基因工程的工具酶
探究 1 限制酶的切割方式 (1)上下交错切割：限制酶在 DNA 双链的不同位置切割 DNA(即 在识别序列的中轴线两侧切割)，产生的 DNA 片段末端不是平 齐的，即黏性末端，如下图：
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专题1 基因工程
3．基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” (1)作用：将__外__源__基__因___送入细胞中。 (2)种类：_质__粒____、λ 噬菌体的衍生物和动植物病毒等。
(3)
自我复制
限制酶切割位点
标记基因
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(1)种类
来源：_T_4_噬__菌__体___
T4DNA连接酶特点片：段既互可补以的“__黏缝__性合__末_”_端_双_又链可DN以A
“缝合”双链DNA片段的 _平__末__端___
(2)作用：形成_磷__酸__二__酯__键_____。
(3)结果：形成重组 DNA 分子。
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专题1 基因工程
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专题1 基因工程
判一判 (1)通过基因工程产生的变异是不定向的。( × ) 分析：该变异类型按人们的意愿进行，是定向的。 (2)通过基因工程改造成的生物为新物种。( × ) 分析：通过基因工程改造成的生物，使该生物产生新的性状， 不属于新物种。
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专题1 基因工程
该 EcoRⅠ限制酶的识别序列为__—__G__A_A_T__T_C__—___，切点是在 _G__和__A_之__间__。
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专题1 基因工程
(2)上下对称切割：限制酶在 DNA 双链的相同位置切割 DNA 分
子(即沿着识别序列的中轴线切割)，这样产生的 DNA 片段末端
是平齐的，即平末端，如下图：
该 SmaⅠ限制酶的识别序列为__—__C_C__C_G__G_G__—___，切点是在 _C__和__G_之__间__。
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专题1 基因工程
(3)限制酶和 DNA 解旋酶的作用部位相同。( × )
分析：限制酶作用于磷酸二酯键，DNA 解旋酶作用于氢键。 (4)(2018·洛阳高二期末)DNA 连接酶起作用时不需要模板。 (√) (5)载体(如质粒)和细胞膜中的载体蛋白的成分相同。( × ) 分析：前者为 DNA，后者为蛋白质。 (6)(2018·大连二十四中高二检测)作为载体，必须要有标记基因。 ( √)