生名词解释

名词解释：
B
必需基因：一些基因在突变时会引起致死表型，这些基因被称为必需基因。

表达载体：是指一类用来在受体细胞中表达外源基因的载体。

C
操纵子:指启动基因、操纵基因和一系列紧密连锁的结构基因的总称,转录的功能单位。

沉默子：与增强子作用相反，能抑制上游或下游基因转录DNA序列称为沉默子。

cDNA文库：以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。

重复序列：真核生物染色体基因组中重复出现的核苷酸序列,这些序列一般不编码多肽,在基因组内可成簇排布,也可散布于基因组。

巢式PCR:一种变异聚合酶链反应,使用两对（而非一对）PCR引物扩增完整的片段。

D
第一信使：细胞间通讯的信号分子主要有激素、神经递质、生长因子和细胞因子等，这些都是细胞分泌的化学信号分子，又称第一信使。

第二信使：主要分布于胞浆内的信号分子有环腺苷酸、环鸟苷酸、钙离子、肌醇三磷酸和二酰甘油等，这些胞内信号分子相对应其第一信使而言，又称为第二信使。

断裂基因：真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因.
蛋白质组学：是在基因组学的基础上，从整体水平研究细胞内蛋白质的组成、功能及其活动规律的科学。

蛋白质芯片：是一种高通量的蛋白功能分析技术，可用于蛋白质表达谱分析，研究蛋白质与蛋白质的相互作用，甚至DNA－蛋白质、RNA－蛋白质的相互作用，筛选药物作用的蛋白靶点等。

蛋白质免疫共沉淀：是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。

代谢组学:通过考察生物体系受刺激或扰动后其代谢产物的变化或其随时间的变化,研究生物体系的代谢途径的一种学科。

多重PCR：是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应。

多克隆位点：DNA载体序列上人工合成的一段序列，含有多个限制内切酶识别位点。

能为外源DNA提供多种可插入的位置或插入方案。

定量PCR：引入荧光标记分子，通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测，计算PCR产物量，从而实现对起始模板的定量分析。

DNA重组技术:指将一种生物的基因与载体分子在体外进行拼接重组,转入另一生物体细胞内,使之扩增并且表达出新性状。

F
反式作用因子：凡直接或间接与顺式元件相互作用并影响基因表达的蛋白质，统称为反式作用因子。

反义寡核苷酸技术：是应用反义寡糖核苷酸类药物通过Waston-Crick碱基配对与细胞内核酸特异结合形成杂交分子，从而在转录和翻译水平抑制特定基因表达的基因治疗技术，是一种新的药物开发方法。

分子杂交：利用不同来源但互补配对的核酸单链之间能够特异性地结合形成杂合双链的特性，从而对目的核酸分子进行定性和定量分析的技术。

分子克隆:是指将一种生物的基因与载体分子在体外进行拼接重组,转入另一生物体细胞内,使之扩增并且表达出新的性状。

G
隔离子：真核基因组内能限定独立转录活性结构域的DNA元件称为隔离子。

干扰小RNA：在Dicer酶的作用下，双链RNA被裂解成21~23个核苷酸的小分子片段，称为干扰小RNA。

感受态细胞：经过适当处理后容易接受外来DNA进入的细胞。

H
后基因组学：利用结构基因组学提供的信息和产物，发展和应用新的实验手段，在基因组或系统水平上全面地分析基因组中所
有基因功能的学科。

J
基因：是原核生物、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位。

基因表达：主要涉及转录和翻译过程，其产物包括转录体、多肽和蛋白质。

基因表达调控:从DNA到蛋白质的过程叫基因表达,对这个过程的调节即为基因表达调控。

基因组：细胞或生物体中一套完整单倍体的遗传物质总和，包括所有的基因和基因间区域。

基因组学：指对所有基因进行基因作图、核苷酸序列分析、基因定位和基因功能分析的一门科学。

基因组文库：把某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌克隆子群体中，这个群体即为这种生物的基因组文库。

基因芯片：DNA芯片又叫做基因微阵列，寡核酸芯片，或DNA微阵列，它是通过微阵列技术将高密度DNA片段阵列以一定的排列方式使其附着在玻璃、尼龙等材料上面。

由于常用计算机硅芯片作为固相支持物，所以称为DNA芯片。

基因靶向技术：是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平上设计实验，将该基因去除，或用其他相近基因取代，然后从整体上观察实验动物，推测相应基因的功能。

基因治疗：是以基因转移为基础，将某种遗传物质导入患者细胞内，使其在体内表达并发挥作用，从而达到治疗疾病目的的一种方法。

基因诊断：就是利用分子生物学和分子遗传学的技术，从DNA/RNA水平检测分析基因的存在和结构、变异和表达状态，从而对疾病做出诊断的方法。

基因工程:是指将一种生物的基因与载体分子在体外进行拼接重组,转入另一生物体细胞内,使之扩增并且表达出新的性状。

酵母双杂交技术:是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用，对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能通过报告基因的表达产物敏感地检测得到。

K
克隆：指通过无性生殖而产生的遗传上均一的生物群，即具有完全相同的遗传组成的一群细胞或者生物的个体。

克隆载体：通常是在天然的质粒、噬菌体、病毒的基础上经过人工构建而成的。

M
免疫组学：研究免疫相关的全套分子、它们的作用靶分子及其功能。

N
粘性末端:当限制性内切酶在一特异性的碱基序列处切断DNA时,就可在切口处留下几个未配对的核苷酸片段，这些片断可以通过重叠的5‘末端形成的氢键相连,或者通过分子内反应环化,叫做粘性末端。

P
PCR：是一种利用DNA变性和复性原理在体外进行特定DNA片段高效扩增的化学反应。

平末端：当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。

Q
启动子:位于基因编码区上游并为RNA聚合酶识别、结合和启动转录的DNA序列，称为启动子。

R
人类基因组计划：是描述人类基因组和其他模式生物体基因组特征，在整体上破译遗传信息，发展基因组新技术，并阐明与此相关的伦理、法律和社会影响的一个国际性研究项目。

人类基因组多态性:在长期进化的过程中,基因组的DNA序列不断地发生变异,这些变异可能是有害的、有益的或中性的,它们其中的一些被保存下来,导致了不同种族、群体和个体间基因组的差异或多态性。

RT-PCR：一种将RNA逆转录合成cDNA与PCR技术结合起来、分析基因表达的一种快速灵敏的方法。

RNA干扰：生物体内一些小的dsDNA分子能够高效、特异性地诱导同源的mRNA降解，从而关闭基因表达或使其沉默，这个过程称为RNA干扰。

S
顺式作用元件:参与RNAP识别、结合、转录的启动和速率调节的因素繁多,这些调节转录的DNA片段称为顺式作用元件
受体：是细胞膜或细胞内的一些天然分子，能够识别和结合有生物活性的化学信号物质，从而启动一系列信号转导，最后产生
相应的生物学效应。

生物芯片：是以微电子系统技术和生物技术为依托，在固性基质表面构建微型生物化学分析系统，将生命科学研究中的许多不连续过程。

T
糖组学：是对糖链组成及其功能研究的一门学科，是基因组学的后续和延伸。

X
细胞信号转导:细胞对环境信号的应答,启动细胞内信号转导通路，最终调节基因表达和代谢生理反应，称为细胞信号转导。

限制性片段长度多态性：利用该限制性内切酶消化此DNA时，便会产生与正常不同的限制性片段，在同种生物的不同个体中会出现不同长度的限制性片段类型，即限制性片段多态性。

限制性核酸内切酶：是一类能够识别双链DNA分子内部的特异序列，并在识别位点或其周围产生切割作用的核酸水解酶。

Y
原位PCR：将PCR技术的高效扩增与原位杂交的细胞定位结合起来，从而在组织细胞原位检测单拷贝或低拷贝的特定的DNA或RNA序列。

原位杂交：是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。

印迹技术：将核酸或蛋白质等生物大分子通过一定方式转移并固定到支持膜上以便于进一步分析的方法。

Z
终止子：基因编码区下游能促使RNAP识别并终止RNA合成的DNA序列，称为转录终止子。

增强子：能加强其上游或下游基因转录的DNA序列称为增强子。

转录组学：是指一种生物基因组表达的全部转录产物的总称，包括某一环境条件、某一生命阶段、某一生理或病理状态下，生命体的细胞或组织所表达的基因种类和水平。

转基因技术：就是将外源性基因转移到细胞内的方法，以研究该基因在转移后的表达和功能发挥情况。

转导：由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。

转化：通过自动获取或人为地供给外源DNA，使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型，这就是转化作用。

质粒：是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子。

简答题：
比较原核细胞与真核细胞的组织结构
(1)组织结构的异同:①原核细胞有细胞膜,无核膜,染色体是由一个环状DNA分子构成的单个染色体,无核仁,缺少细胞器,核糖体为70s,含有叶绿素a的膜层结构,细菌具有菌色素,细菌具有裸露的质粒DNA,细胞壁的主要成分是氨基糖与壁酸,无细胞骨架,以无丝分裂为增殖方式②真核细胞有细胞膜,有核膜,染色体有两个以上,由线状DNA与蛋白质组成,有核仁,有多种细胞器,核糖体为80s,具有叶绿素a与b,核外DNA为线粒体DNA和叶绿素DNA,动物细胞无细胞壁,植物细胞有细胞壁,有细胞骨架,以有丝分裂为主要增殖方式(2)基因表达调控的异同:①原核细胞DNA简洁而有效,无多余序列.当基因表达时,转录形成的mRNA直接与核糖体结合开始翻译蛋白质②真核细胞DNA含量远远大于原核细胞,充分的遗传物质使它形成一些特殊的基因结构,如重复序列、内含子、假基因等.真核细胞的基因在表达过程中,出现转录后对mRNA进行加工的过程,真核细胞的DNA存在于细胞核中,而翻译所需的核糖体在细胞质中,形成mRNA从细胞核中出来进入到细胞质中与核糖体结合翻译出相应的蛋白质。

分子杂交与印迹技术有何应用？
基因组作图，测定基因的拷贝数，RNA的相对分子质量、丰度和基因表达，特异蛋白质检测与半定量分析，蛋白质分子间的相互作用研究。

何谓蛋白质组学？其研究内容包括有
蛋白质组学是在基因组学的基础上，从整体水平研究细胞内蛋白质的组成、功能及其活动规律的科学，是建立在cDNA阵列mRNA 表达谱的基因功能分析，基因组范围的酵母双杂交，蛋白质与蛋白质相互作用分析到蛋白质表达、测定和结构分析等诸多不同试验方法相互融合基础上的科学。

研究内容包括①对蛋白质表达模式的研究②对蛋白质功能模式的研究。

何谓质粒？请描述其结构、功能特点？
质粒是一类存在细菌细胞中独立于染色体DNA而自主复制的双链环状结构的DNA分子,小的为2~3kb,大的可达数百kb.大部分的质粒虽然都是环状构形,然而目前也发现有少数的质粒属于线性构形.天然质粒的DNA长度从数千碱基对至数十万碱基对都有.质粒天然存在于这些生物里面,有时候一个细胞里面可以同时有一种乃至于数种的质粒同时存在.质粒的套数在细胞里从单一到数千都有可能.有时有些质粒含有某种抗药基因.有一些质粒携带的基因则可以赋予细胞额外的生理代谢能力,乃至于在一些细菌
中提高它的致病力.一般来说,质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性的作用.它是基因工程最常见的运载体.
简述基因治疗的总体策略？
①基因替代和基因矫正治疗②代偿性基因治疗③基因补偿治疗④基因失活性治疗⑤调控性基因治疗⑥应用“自杀基因”的基因治疗⑦免疫修饰性基因治疗⑧化疗保护性基因治疗⑨特异性细胞杀伤性基因治疗⑩生殖细胞基因治疗。

简述基因诊断的应用？
①遗传性疾病的基因诊断②恶性肿瘤的基因诊断③感染性疾病的基因诊断④基因诊断在法医学鉴定中的应用⑤疾病易感性的基因诊断⑥基因诊断在器官移植组织配型中的应用。

简述基因诊断的概念和特点？
概念：就是利用分子生物学和分子遗传学的技术，从DNA/RNA水平检测分析基因的存在和结构、变异和表达状态，从而对疾病做出诊断的方法。

特点：①特异性高②灵敏度高③稳定性高④诊断范围广⑤临床应用前景好。

简述基因诊断的内容及基本策略？
内容：①检测正常基因②检测与致病有关的突变基因③进行基因连锁分析④检测基因中酶切点的改变⑤检测基因转录产物mRNA。

基本策略：①检测已知的能产生某种特定功能蛋白的基因②检测与某种遗传标志连锁的致病基因③检测表型克隆基因。

简述重组体有哪些筛选和鉴定的方法？
(1)遗传学方法:①抗生素抗性筛选②遗传标志补救筛选③噬菌斑筛选(2)免疫学方法(3)分子生物学方法:①限制性内切酶酶切
图谱分析②核酸探针杂交检测法③聚合酶链反应④核苷酸序列测定.
简述G蛋白偶联型受体介导的信号
激素配体与G蛋白偶联受体结合后导致受体构象改变,其上与Gs结合位点暴露,受体与Gs在膜上扩散导致两者结合,形成受体-Gs 复合体后,Gsα亚基构象改变,排斥GDP,结合了GTP而活化,α亚基从而与βγ亚基解离,同时暴露出与环化酶结合位点;α亚基与环化酶结合而使后者活化,利用ATP生成cAMP.cAMP产生后,与依赖cAMP的蛋白激酶（PKA）的调节亚基结合,并使PKA的调节亚基和催化亚基分离,活化催化亚基,催化亚基将代谢途径中的一些靶蛋白中的丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化,将其激活或钝化.信号传导的终止是依赖于cAMP信号的减少完成的.在G蛋白活化一段时间后,α亚基上的GTP酶活性使结合的GTP水解为GDP,亚基恢复最初构象,从而与环化酶分离,环化酶活化终止,α亚基从新与βγ亚基复合体结合.这样减少了cAMP的产生,同时cAMP的磷酸二酯酶（PDE）的催化下降解生成5'-AMP.当cAMP信号终止后,靶蛋白的活性则在蛋白质脱磷酸化作用下恢复原状。

简述细胞内Ca2+信号调控的机制？
当细胞受胞外信号刺激时,Ca2+分别通过质膜和内质网上的Ca2+通道由胞外和内质网进入胞浆中,使胞浆中Ca2+迅速由静息态浓度升到激活态浓度,使细胞内Ca2+信号产生.在胞外刺激信号消失时,依靠质膜和内质网上钙泵和质膜上Na+-Ca2+交换体,使胞浆Ca2+排出胞外和转移到内质网中,使胞内Ca2+信号消失.
简述核受体的结构与功能？
结构:由约800个氨基酸残基组成,含有2个锌指结构,各种受体的C端氨基酸长度相似,有相当的保守性;而N端各种受体长度不同,保守性差.功能:有三个功能区,即C端为激素结合区,N端为受体调节区,中部为DNA结合区①在非活性受体上的C端和中部结合一种抑制蛋白热休克蛋白90,它妨碍了受体与DNA的结合②激素与C端结合,改变了构象,使抑制蛋白解离下来,从而使受体DNA 结合区暴露而活化③激素-受体复合物与DNA上的激素反应元件结合并调节基因转录.
简述人类基因组计划的意义？
①鉴定人类的全部基因,推动生物技术的进一步发展②将把人类带入基因医学的新时代③推动了模式生物基因组的研究④促进
学科交叉与重组.
简述基因组学的研究内容？
制作高分辨率的人类基因的遗传图和物理图，最终完成人类和其他重要模式生物全部基因组DNA序列的测定。

遗传图又称连锁图，通过计算连锁的遗传标志之间的重组频率，确定它们的相对距离；物理图是通过测定遗传标志的排列顺序与位置而绘制成的，即以一段已知核苷酸的DNA片段为“位标”，以DNA实际长度为“图距”的基因图谱；转录图又称cDNA图或表达序列图，
是一种以表达序列标记为位标绘制的分子遗传图谱；序列图及人类基因组核苷酸序列图，是人类基因组在分子水平上最高层次、最详尽的物理图。

简述描述PCR技术的基本原理？
原理：该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。

DNA聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA来启动合成，通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合，形成部分双链。

在适宜的温度和环境下，DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3′-OH末端，并以此为起始点，沿模板5′→3′方向延伸，合成一条新的DNA互补链。

简述印迹技术的基本原理？
是将要分离的目标分子作为模板分子，将它与交联剂在聚合物单体溶液中进行聚合制备得到单体一模板分子复合物，然后通过物理或化学手段出去模板分子，便得到“印迹”下目标分子的空间结构的分子印迹聚合物，在这种聚合物中形成了与模板分子在空间和结合位点上相匹配的具有多重作用位点的空穴，这样的空穴对模板分子具有选择性。

简述分子克隆中常用的工具酶及其
①限制性核酸内切酶:限制外源DNA、保护自身DNA②DNA连接酶：借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的3'羟基基团与5'磷酸基团生成磷酸二酯键③DNA聚合酶I:合成双链cDNA的第二条链;修复DNA片段的3'末端;标记探针的3'末端;DNA序列分析④末端转移酶:将脱氧核苷酸加到双链DNA分子的3'-OH上,标记探针或者构建人工黏性末端⑤碱性磷酸酶:有效防止载体自身环化,保持线性结构,从而提高重组效率.
基因病的主要分为哪几类？
①单基因病，它是由于单个基因突变所引起的一类疾病，如血友病、地中海贫血等②多基因病，它是由多个基因突变综合作用所引起的疾病，这类疾病虽不如单基因病种类多，但有不少属常见病，如恶性肿瘤、高血压病、动脉粥样硬化、糖尿病及某些先天畸形等③获得性基因病，指外源性基因侵入机体，在体内通过其本身或其编码产物，引起机体产生疾病，一旦将其清除便可获得痊愈。

基因芯片技术在医学领域有哪些应用？
不仅可以对大量的生物样品进行平行、快速、敏感、高效的基因分析,如大规模筛查由基因突变所引起的疾病,而且在DNA序列分析、基因表达分析，基因诊断、基因组分析和后基因组研究以及高通量药物筛选、新药发现等方面也得到广泛应用。

目的基因和载体连接的主要方法有
①用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段②用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来，或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly（dA）-poly（dT）尾巴之后，再用DNA连接酶将它们连接起来③先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头，使之形成粘性末端之后，再用DNA连接酶将它们连接起来.
PCR反应的体系有哪些必需成分组成？
①DNA模板②引物③TaqDNA聚合酶④反应缓冲液⑤dNTP⑥Mg2+。

Q
请描述基因诊断的常用技术方法有
①核酸分子杂交技术②限制性内切酶酶谱分析法③DNA限制性片段长度多态性分析④PCR技术⑤DNA芯片⑥基因测序。

请说明双抗生素筛选的原理？
大多数治理载体带有抗生素抗性标记的特征，当带有完整抗性基因的载体转化无抗性细菌后，被转化的阳性菌落获得抗生素抗性基因而存活，未转化菌不能存活。

请说明蓝白斑筛选的原理？
单独存在的α及ω片段均无β-半乳糖苷酶活性,只有宿主细胞与克隆载体同时共表达这两个片段时,宿主细胞内才有β-半乳糖苷酶活性,在诱导剂存在时使特异性底物转变为蓝色化合物,菌落呈现蓝色,这就是所谓的α-互补.重组时外源DNA片段插入lacZ’基因并使其失落后，则不能表达α片段，结果转化菌呈现白色菌落，即为蓝白斑筛选。

请简述人类基因组的基本概貌？
是描述人类基因组和其他模式生物体基因组特征，在整体上破译遗传信息，发展基因组新技术，并阐明与此相关的伦理、法律和社会影响的一个国际行研究项目。

作为人类生命科学史上的里程碑，人类基因组计划第一次全面系统地解读和研究了人类的遗传物质DNA，它不仅具有重大的理论意义，而且对国计民生，特别是生物医学的发展具有重大的现实意义和深远的历史意义。

请描述实时定量PCR技术的基本原理？
引入荧光标记分子，通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测，计算PCR产物量，从而实现对起始模板的定量分析。

请描述基因芯片技术的应用前景？
①药物筛选和新药开发:用芯片作大规模的筛选研究可以缩短临床药物筛选所用时间,提高效率,降低风险②疾病诊断:高度的灵敏性和准确性;快速简便;可同时检测多种疾病③环境保护:可以快速检测污染微生物或有机化合物对环境、人体、动植物的污染和危害,也能够通过大规模的筛选寻找保护基因,制备防治危害的基因工程药品、或能够治理污染源的基因产品④司法:未来可以建立全国甚至全世界的DNA指纹库以尽快、准确的破案⑤现代农业:基因芯片技术可以用来筛选农作物的基因突变,并寻找高产量、抗病虫、抗干旱、抗冷冻的相关基因,也可以用于基因扫描及基因文库作图、商品检验检疫等领域⑥研究领域:包括基因表达检测、寻找新基因、杂交测序、基因突变和多态性分析以及基因文库作图以及等方面。

请描述RNA干扰的机制？
①在细胞质中,内源性或外源性长dsDNA与Dicer酶的dsDNA结合去结合形成Dicer-dsDNA复合物,在Dicer酶的RNA酶活性作用下将长dsDNA剪切成siRNA,从而启动RNAi反应②siRNA结合一个核酶复合物形成RNA诱导的沉默复合物③在RISC复合物中,以siRNA的单链作为引物,以mRNA为模板,在细胞内一种RNA指导的RNA聚合酶的作用下,可合成出mRNA的互补链,使mRNA也形成了dsRNA.
请描述RNA干扰技术的应用？
①应用于功能基因组学研究②用于抗病毒治疗③用于基因治疗④有望作为研究信号传导通路的新途径.
如何进行重组体的筛选和鉴定？
①筛选出带有载体的克隆②接着筛选出带有重组体的克隆③最后筛选出带有特异目的基因的克隆.
什么是基因治疗？分为哪几类？
基因治疗是以基因转移为基础，将某种遗传物质导入患者细胞内，使其在体内表达并发挥作用，从而达到治疗疾病目的的一种方法。

分类：①根据靶细胞分类，可分为生殖细胞基因治疗与体细胞基因治疗②根据基因治疗实施路线分类，可分为间接体内基因治疗与直接体内基因治疗③根据转移基因在靶细胞染色体上整合特点分类，可分为同源重组与随机整合法。

什么是基因工程？有哪些应用？
基因工程从狭义上讲,是指将一种生物的基因与载体分子在体外进行拼接重组,转入另一生物体细胞内,使之扩增并且表达出新
的性状.应用:①对人类遗传信息的认识②基因工程药物与疫苗③转基因动物和植物④基因诊断和基因治疗.
什么是限制性核酸内切酶？请描述II类
限制性核酸内切酶是一类能够识别双链DNA分子内部的特异序列，并在识别位点或其周围产生切割作用的核酸水解酶。

作用模式：大部分II类限制性核酸内切酶识别序列为4~6个碱基对、具有回文结构的DNA片段，水解DNA分子的磷酸二酯键均产生含5’磷酸基团和3’羟基基团的末端.有两种切割方式:错位切割和垂直切割，分别产生黏性末端和平末端。

细胞间和细胞内通讯的信号分子有哪
①细胞间通讯的信号分子有激素、神经递质、生长因子和细胞因子等②细胞内通讯的信号分子有环腺苷酸、环鸟苷酸、钙离子、肌醇三磷酸和二酰甘油等③细胞分泌化学信号的作用方式有内分泌、旁分泌、自分泌、突触传递四种。

作为克隆载体的质粒应具备哪些特点？
①分子量小、多拷贝、松弛控制型②具有多种常用的限制性内切酶的单切点③能插入较大的外源DNA片段④具有两个以上的遗传标记物,便于鉴定和筛选⑤对宿主细胞无害。

常用的质粒载体大小一般在1kb至10kb之间，如PBR322、PUC系列、PGEM系列和pBluescript等。

质粒载体应具备什么特征？其主要用途
①是染色质外的双链共价闭合环形DNA②能自主复制，是能独立复制的复制子③质粒对宿主生存并不是必需的.用途:这些用途包括通过组织化学方法肉眼鉴定重组克隆、产生用于序列测定的单链DNA、体外转录外源DNA序列、鉴定片段的插入方向、外源基因的大量表达等。

在乳糖培养介质中大肠杆菌乳糖操纵子
包括启动子和操纵基因阻遏子，以及结构基因、编码通透酶和编码硫代半乳糖苷转乙酰基酶。

转录时RNA聚合酶首先与启动子结合，通过操纵区向右转录，转录从O区中间开始，按Z→Y→A方向进行，每次转录出来的一条mRNA上都带有这3个基因，转。