仪器分析作业题外标法内标法

一、外标一点法

【含量测定】芍药苷照高效液相色谱法（附录W D）测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇

-0.05mol /L磷酸二氢钾溶液（40 : 65）为流动相；检测波长为230nm理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备取经五氧化二磷减压干燥器中干燥36小时的芍药苷对

照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品粗粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，浸泡4小时，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10卩l，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含芍药苷（C23H28O l）不得少于1.8 %。

解：设测得对照品溶液和供试品溶液峰面积为A对=550000 A样=7800已知对照品溶液浓度C对=0.5mg/ml

5A样小7800

（C 对）（0.5mg/ml）0.0071mg / ml A 对550000

m样

25ml 1000

C样V样0.0071 mg / ml 10 l 177.5mg y10 l y

供试品中芍药苷的含量

177 .5mg n/“ 一

X%= 100 % 35 .5%

0.5g 1000

药典规定药材含芍药苷（C23H8O1）不得少于1.8 %，供试品中芍药苷的含量为35.5%,故供试品药材合格。

、外标两点法

【含量测定】黄芪甲苷照高效液相色谱法（附录W D）测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（32：68）为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4000。

对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml 含0.5mg 的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品中粉约4g,精密称定，置索氏提取器中，加甲醇

40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1.5cm，柱高为

12cm），以水50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液10卩l、20卩l，供试品溶液20卩l，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。

本品按干燥品计算，含黄芪甲苷（。41臥04）不得少于0.040 %。

解：设测得对照品溶液色谱峰面积分别为A=259457 A=523039,测得供试品溶

液色谱峰面积A3=2983。

已知对照品浓度C对=0.5mg/ml，对照品进样量

m1 0.5mg/ml 10 l 0.005mg 5 g

m2 0.5mg/ml 20 l O.OImg 10 g

根据对照品峰面积和进样量可得如下图所示方程即y=2.6e+5x-4125 ,得

a=2.6e-4125，b=5

供试品溶液峰面积A=2983.带入方程，得到供试品溶液进样量

03=1420 卩g=0.00142g

供试品中黄芪甲苷含量为

药典中规定药材干燥品种含黄芪甲苷（C41H58O4）不得少于0.040 %,供试品中黄芪甲苷含量为8.875%。故供试品药材合格

二、内标法

【含量测定】照气相色谱法（附录W E）测定。

色谱条件与系统适用性试验聚乙二醇20000（PEG-20M毛细管柱（柱长为

30m内径为0.53mm膜厚度为1.0卩m）,柱温为160C。理论板数按樟脑峰计算应不低于20 000。

校正因子的测定取萘适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含4mg的溶液，作为内标溶液。另取樟脑对照品、薄荷脑对照品、冰片对照品各30mg

X%

0.00142g

5ml 1000

20 l

100% 8.875%

4g

10mg 20mg 精密称定，置同一 50ml 量瓶中，精密加入内标溶液 5ml ，加无水 乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取l 卩l ，注入气相色谱仪，计算校正因子。

测定法 精密量取本品1ml ，置50ml 量瓶中，精密加入内标溶 液5ml ，加 无水

乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取1卩l ，注入气相色谱仪，测定，冰片以龙脑峰、 异龙脑峰面积之和计算，即得。

本品每1ml 中含樟脑（C10H16O 应为25.5〜34.5mg ；含薄荷脑（C10H200应 为 8.5 〜11.5mg,含冰片（C10H18O 应为 17.0 〜23.0mg 。

解：（1）校正因子的测定 设测得萘及樟脑、薄荷脑、冰片对照品溶液的峰面 积分别为 A 萘=180000, A 樟脑=450000, A 薄荷脑=500000, A 冰片=520000。由题已知萘 及各对照品溶液浓度分别为 C 萘=4mg/ml, C 樟脑=0.6mg/ml,C 薄荷脑=0.2mg/ml

C 冰片=0.4mg/ml 。

据公式

180000 / 4mg / ml 520000 0.4mg / ml （2）含量测定 已知C 萘=4mg/J , f 樟脑=0.17 , f 薄荷脑 =0.45 , f 冰片 =0.22。设测得 各物质的峰面积及萘的峰面积分别为 A 萘=180000, A 樟脑=135980, A 薄荷脑 =20780, A 冰片=99870

f 樟脑 A 萘 /C 萘

A 樟脑C 樟脑 180000 4mg/ml ° 仃 450000 0.6mg / ml

f 薄荷脑

A 萘 /C 萘 薄荷脑薄荷脑 C 180000 /4mg / ml 500000 0.2mg/ml 0.45 0.22

f 冰

片