高效液相色谱仪操作注意事项

高效液相色谱仪操作注意事项
高效液相色谱仪操作注意事项

高效液相色谱仪操作注意事项

流动相:

1、流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及缓冲液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和有机系膜的使用范围,并进行超声除气处理。

2、水相流动相需经常更换(一般不超过2天),防止长菌变质。

样品:

1、采用过滤或离心方法处理样品,确保样品中不含固体颗粒;

2、用流动相或比流动相弱(若为反相柱,则极性比流动相大;若为正相柱,则极性比流动相小)的溶剂制备样品溶液,尽量用流动相制备样品液;

泵:

1、泵在使用过程中不能把气泡泵进入仪器。

2、泵自清洗液体应该应经常更换(一般为一周)。

3、仪器在长期不使用时应把泵、流动相过滤器及管路保存在有机相溶剂条件下。

进样阀:

1、使用手动进样器进样时,在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针针,洗针液一般选择与样品液一

致的溶剂,进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上,并排除针筒中的气泡;

2、手动进样时,进样量尽量小,使用定量管定量时,进样体积应为定量管的2倍以上;

色谱柱:

1、使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书,注意适用范围,如pH值范围、流动相类型等;

2、使用符合要求的流动相;

3、使用保护柱;

4、如所用流动相为含盐流动相,必须先用水与有机相相同比例流动相冲洗20分钟以上再换上含盐流动相反相色谱柱使用后,使用后,先用水与有机相相同比例的流动相冲洗,再用纯有机相冲洗。

5、色谱柱在不使用时,应用有机相冲洗,取下后紧密封闭两端保存;

6、不要高压冲洗柱子;

7、不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱;

8、使用过程中注意轻拿轻放。

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作 1. 目的:明确安捷伦高效液相色谱仪的规范操作,确保数据的准确性。 2. 范围:适用于安捷伦高效液相色谱仪。 3. 职责:检验人员对此负责。 4.操作规程: 系统组成 本系统由1个溶剂二元输送泵(分主/A泵和副/B泵)、手动进样阀、柱温箱、检测器、化学工作站和电脑等组成。 准备 4.2.1使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相,用合适的μm滤膜过滤,超声脱气20min。 4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱(柱进出口位置应与流动相流向一致)和定量环。 4.2.3 配制样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),用合适的μm滤膜过滤。 4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常 将待测样品按要求前处理,准备HPLC 所需流动相,检查线路是否连接完好,废液瓶是否够用等。 开机: 4.3.1 打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序。4.3.2 打开1200 LC 各模块电源。 4.3.3 待各模块自检完成后,双击[Instrument 1 Online]图标,化学工作站自动与1200LC 通讯,进入的工作站画面如下所示。 4.3.4 从[视图]菜单中选择[方法和运行控制]画面, 点击[视图]菜单中的[显示顶部工具栏],[ 显示状态工具栏],[系统视图],[样品视图],使其命令前有[√]标志,来调用所需的界面。 4.3.5 把流动相放入溶剂瓶中。

4.3.6 打开冲洗阀。 4.3.7 点击[泵]图标,点击[设置泵…]选项,进入泵编辑画面。 4.3.8 设流速:5ml/min,点击[确定]。 4.3.9 点击[泵] 图标,点击[控制…]选项,选中[启动],点击[确定] ,则系统开始冲洗,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道继续冲洗,直到所有要用通道无气泡为止。 4.3.10 点击[泵] 图标,点击[控制…]选项,选中[关闭],点击[确定]关泵,关闭冲洗阀。 4.3.11 点击[泵]图标,点击[设置泵…选项],设流速:min。 4.3.12 点击泵下面的瓶图标,如下图所示(以单元泵为例),输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积,点击[确定]。 数据采集方法编辑 4.4.1开始编辑完整方法:从[方法]菜单中选择[编辑完整方法…] 项,如下图所示选中除[数据分析]外的三项,点击[确定],进入下一画面。 4.4.2方法信息 4.4.2.1在[方法注释]中加入方法的信息(如:测试方法)。 4.4.2.2 点击[确定],进入下一画面。 4.4.3 泵参数设定 4.4.3.1 在[流速]处输入流量,如1ml/min,在[溶剂B]处输入,(A=100-B) ,也可[插入]一行[时间表] ,编辑梯度。在[压力限]处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。 4.4.3.2 点击[确定],进入下一画面。 4.4.4 柱温箱参数设定 4.4.4.1 在[温度]下面的空白方框内输入所需温度,如:40度。并选中它,点击[更多>>] 键,如图所示,选中[与左侧相同],使柱温箱的温度左右一致。 4.4.4.2 点击[确定],进入下一画面。 4.4.5 检测器参数设定:检测波长:一般选择最大吸收处的波长。样品带宽:一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长:一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区 域。参比带宽:至少要与样品信号的带宽相等,许多情况下用100nm作为缺省

光谱仪操作规程

光谱仪操作规程 一、实验室条件: 1、实验室要求温度控制在16--30摄氏度之间;开启设备 之前应首先将实验室温度升起。 2、实验室相对湿度要求控制在30—70%。 3、实验室应保持清洁,无灰尘、震动。 4、试样要求厚度超过1mm,覆盖面积控制在15-50mm,测 试面必须光滑。用40-80目砂轮或铣床制作,制作后不能用手或水清理,可以用钢丝刷进行清理。 二、开关机、操作注意事项:(操作必须顺序进行) 1、先检查各部位是否正常: (1)、检查循环水位是否正常,控制在总高度的1/3处,最高不超过总高度4/5. (2)、检查真空泵油位是否正常。 (3)、检查氩气是否充足。 2、开机: (1)、打开稳压器电源开关 (2)、打开光谱仪主电源开关即MAINS 16A.(1#) (3)、打开真空泵电源开关即VACUUMPUMP(2) (4)、打开水泵电源开关即 WATERPUMP(3) (5)、打开电子板电源开关即ELECTRONICS(4) (6)、打开负高压电源开关即HVPS(5)

(7)、打开电脑,用户名输入ARL回车进入,选择程序进入即可,再点登陆用户名输入U(一般操作)或M(管理员,可以更改程序)回车进入;查看设备状态,看数据是否控制在范围内。(所有数据必须没有大于或小于号)一般开机后4至5小时后才能使用。 (8)、打开氩气,压力表控制在0.35MPA,如果氩气净化机需再生时将压力表调至0.5MPA。(现在的表指针+0.35)先用净化机的II塔(按净化机的指示旋转手柄到指定位置) 3、关机: (1)、正常关机按开机的反顺序操作,必须按步骤关机。(2)、遇到突然停电时应先关闭光谱仪主电源开关,防止突然来电损坏设备。(禁忌设备用电急停急送) 4、程序操作: (1)、每天第一次应先做标准样测试:先登录程序OX SAS,选择管理员用户名进入界面。点‘测量类型标准样’点‘任务’再点‘TS’,点‘方法’再点‘FELAST’,‘类型标准’点方法中以创建的方法,再创建名称即可。将标准样放于‘激发台’开始打样,连续打三点点击完成。(如45#、35#类型标准样)看测试的数据相对数据小于5%即可。 (2)、点‘定量分析’开始对工作中试样进行打样,打样后点击完成。 三、维护与保养:

多功能酶标仪SpectraMaxi3的操作规程

多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程Standard Operation of SpectraMax i3 部门Department 签名/日期Signature/Date 起草人:Prepared by 樊小川,Xiaochuan Fan QC 审核人:Reviewed by 黄思佳,Sijia Huang QC 审核人:Reviewed by 褚夫兰,Fulan Chu QA 批准人:Approved by 张伯彦,Boyan Zhang 质量负责人 1 目的 建立多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作程序,规范SpectraMax i3 多功能酶标仪检测时的操作。 2 适用范围

本规程适用于所有对多功能酶标仪SpectraMax i3的操作 3 术语或定义 多功能酶标仪:指功能较强、精度较高的单体台式酶标仪,可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FL)、时间分辨荧光(TRF)、化学发光(Lum)等。 4 责任 4.1 仪器负责人负责多功能酶标仪的日常及定期维护,出现故障时负责联系厂家维修,保 证运行正常。 4.2 实验操作人员需严格按照本规程执行,保证仪器正常使用,每次用完后填写仪器使用 记录,且使用后及时清理台面,保持仪器洁净。 5 EHS要求 N/A 6 程序 6.1 仪器安装 仪器与电脑连接完毕并连接电源以后,按仪器背面的按钮可以直接启动仪器,经过几分钟后的仪器自检后就可以开始用于检测。在连有电源的情况下,保持24小时开机,不要罩防尘罩以保持透气,隔1-2月关机重启一次。 6.2 SoftMax Pro软件操作基本步骤 6.2.1 打开软件 点击“SoftMax Pro 6.3”图标,打开SoftMax Pro 软件,出现"Plate Setup Helper"对话框。若无则点击图标。 6.2.2 连接仪器 点击‘Choose a diffecient instrument’,打开‘Instrument Connection’对话框,在“Availible Instruments”菜单中选择仪器连接线与电脑所接的串口号(COM)。 选择所购买的酶标仪型号SpectraMax i3或添加模块卡盒型号。最后点击“OK”键连接。 6.2.3 仪器检测参数设定 点击图标后出现“Settings”对话框,对话框最上方出现Read Mode(读板模式)和Read Type(读板类型)两个选项,读板模式有ABS(光吸收)、FL(荧光强度)、LUM(化学发光)和TRF(时间分辨荧光),读板类型有终点检测(Endpoint)、动力学(Kinetic)、单孔扫描(Well Scan)和光谱扫描(Spectrum)四种。使用者根据实验

高效液相色谱仪使用注意事项[1]全解

岛津液相色谱仪使用注意事项 1.流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。 2.流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。 3.不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。 4.使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。 5.长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如甲醇等),因为纯水易长霉。 6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。 7.C18柱绝对不能进蛋白样品,血样、生物样品。 8.堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。清洗方法;①以异丙醇作溶剂冲洗:②放在异丙醇中间用超声波清洗;⑧用10%稀硝酸清洗。 9.气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。 10.如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液:通常在输液前要进行流动相的清洗。 11.要注意柱子的pH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。 12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗,然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。 液相色谱柱使用经验谈 色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。 1、样品的前处理: a、最好使用流动相溶解样品。 b、使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。 c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。 流动相的配制 液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点: a、流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。 b、流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。

DXR拉曼光谱仪操作规程

DXR拉曼光谱仪操作规程 一、开机 1.消除操作人员身上静电。 2.依次打开稳压电源,样品台驱动,显微镜照明,DXR主机,计算机及显示器电源。 3.双击OMINIC快捷键图标,打开OMINIC窗口,出现Rest scepper Motors 等待至system status 转为绿色。 4.Atlus>Atlus show window 出现Mplan窗口。便于观察平台调节。 二、准直与仪器校正 三、样品测定操作 1.样品放置: a.手动放下平台,样品置于平台,通常换用50*LWD物镜。手动聚焦可在Atlus>Atlus show window观察微调至图像清晰。 2.条件设置: b.点击采集> 实验设置,出现实验设置对话框,在采集及光学台键点击后打开的窗口中设置合适的采样参数,注意应确认激光打开;Aperture一般选择狭缝,只有Confocus时才选用小孔; c.参数设定完成后,在光学台窗口中观察Max为最大值。(50*镜头与载玻片距离约1cm).,点“确认”关闭实验设置窗口。 三、采集单张光谱: d.点采集> 样品采集,在出现的小窗口内填入谱图名称(日期—学生—样品编号)。点“确定”出现采集单张谱图,在弹出的对话框中

点击“是”,弹出“新窗口”对话框,点“确定”,窗口中出现谱图。 e.点击文件>保存,放入光盘,刻录测试数据。 四、关机 1.取出样品,关闭OMINIC软件; 2.依次关闭显微镜照明、激光、DXR主机、样品台驱动,计算机及显示器电源。 注意事项 1.必须先开拉曼主机,再开启电脑,否则仪器与软件不能连接上。 2.仪器的准直与校正每周一次,由管理员完成 3.对于易燃或低熔点的材料激光功率依次增大(最大为10w) 4.连续12小时不关机,仪器自动做Smart Background 。 5.关机后不能立即拔下稳压电源插头,必须让主机风扇降温30分钟

Waters_2695_型高效液相色谱仪操作方法

Waters 2695 型高效液相色谱仪操作方法 1 仪器组成及开机 1.1 仪器组成本仪器由Waters 2695 分离单元、2996型二极管阵列检测器、2420蒸发光散射检测器、色谱管理工作站和打印机组成。 2695 分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统,四通道在线真空脱气机(或氦气脱气机),可容纳120 个样品瓶的自动进样系统,柱温箱,内置的柱塞杆密封垫清洗系统,溶剂瓶托盘,液晶显示器,键盘用户界面及软盘驱动器。 1.2 开机依次接通2695 分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。接通2695 分离单元后,约20s 仪器开始自检,约1min 后,显示主屏幕,此时继续各部件的初始化,待主屏幕上方标题区出现“Idle ”时,仪器进入待命状态。 2 溶剂管理系统的准备 2.1 流动相脱气确认所有溶剂管路都充满溶剂,按【Menu/Status 】,进入“Status (1 )”屏幕,光标选“Degasser ”,按【Enter 】,显示选项屏幕,光标下移选“Continuous ”,按【Enter 】。 2.2 启动溶剂管理系统 2.2.1 干启动,当溶剂的管路是干的或是需要更换溶剂时,在“Status (1 )”屏幕下,按【Direct Function 】,光标选“Dry Prime ”,按【Enter 】,显示“Dry Prime ”屏幕,按欲启动的溶剂管路的屏幕键,如【OpenA 】,光标选“Duration ”,按数字键输入5min ,按【Continue 】,待限定时间结束后,重复操作,使实验所需的各溶剂管路均启动、排气并充满流动相。 2.2.2 湿启动在“Status (1 )”屏幕下,光标选“Compomtion ”中欲使用的流动相,输入10 0%,按【Direct Function 】,光标选“Wet Prime ”,按【Enter 】,显示“Wet Prime ”屏幕,输入7.5Ml/min 和6min ,按【OK 】,待限定时间结束后,对每种流动相重复操作。 2.2.3 平衡真空脱气机在“Status (1 )”屏幕下,光标选“Composition ”,输入流动相的组成,按【Enter 】再用光标选“Degasser ”中的“Normal ”,按【Enter 】,按【Direct Function 】,光标选“Wet Prime ”,输入0.000mL/min 和10min. ,按【OK 】。待限定时间结束后,按【Abort Prime 】。 3 样品管理系统的准备 3.1 冲洗自动进样器在“Status (1 )”屏幕下,光标选“Composition ”,输入流动相的组成。按【Direct Function 】,光标选“PurgeInjector ”,按【Enter 】,显示“Purge Injector ”屏幕,输入“Sample Loop Volumes 6.0 ”,光标下移“Compression Check ”,按任意数字键,按【OK 】。 3.2 冲洗进样针在主屏幕下,按【Diag 】,显示“Diagnositcs ”屏幕,按【Prime Ndl Wash 】,显示“Prime Needle Wash ”屏幕,按【Start 】,30s 内应见溶剂从废液排放口流出。按【Close】、【Exit 】。 3.3 冲洗柱塞杆密封垫在主屏幕下,按【Diag 】,显示“Diagnosities ”屏幕,按Prime Seal Wash ,显示“Prime Seal Wash ”屏幕,按【Start 】,待排放口有水流出,按【Halt 】、【Close】、【Exit 】。 3.4 装入样品与转盘将样品瓶插到样品盘合适的位置,打开样品仓门,显示“Door is Open ”屏幕,装入样品盘,按【Next 】,直至所有样品盘装毕,关仓门。 4 编辑分析方法及执行样品分析表 在主屏幕下,按【Develop Methods 】,显示“Methods ”屏幕。 4.1 编辑分析方法 4.1.1 建立新的分离方法在“Method ”屏幕下,按【New 】、【Separation Methods 】,输入方法名,按【Enter 】,显示分离方法屏幕,该屏幕共有6 页,通过按【Next 】或【Prev 】切换。如需设定梯度,在第( 1 )页按【Gradient 】,输入后按【Exit 】;如需设定色谱柱的温度,在第( 4 )页输入后按【Exit 】;在第(6 )页设定检测器的种类,光标选“Absorbance Detector ”,按【Enter 】,光标选“48 6﹨2487 ”,按Abs (1 )图标,设定检测波长,按【OK 】、【Exit 】、【Save 】。 4.1.2 编辑已建立的分离方法在“Methods ”屏幕下,光标选欲编辑﹨修改的分离方法的图标,按【Edit 】,编辑\ 改各种分析参数,按【Exit 】、【Save 】。 4.2 编辑执行样品分析表 4.2.1 建立新的样品组在“Methods ”屏幕下,按【New 】、【Sample Set 】,输入样品组名,按【Enter 】,显示方法组屏幕,在样品组表中输入待分析样品的信息。在“Vial ”中输入样品放置的位

实验室酶标仪操作规程

实验室酶标仪操作规程 一.目的 对检验室的酶标仪和分光光度计的使用过程进行规范管理。二.适用范围 适用于本公司检验室的检验人员对酶标仪和分光光度计的使用。 三.检测仪器操作步骤 3.1酶标仪的操作步骤和注意事项 3.1.1酶标仪的操作流程 将一定数量处理好的样品放入微孔中插入框架,记录标准液和样品的位置,加入50ul氯霉素酶标记物至微孔,加入50ul6个稀释10倍的氯霉素标准液和样液到各自微孔,在加入50ul氯霉素抗体到各自微孔,轻拍混匀,20-25℃黑暗避光培养2h。倒掉微孔中的液体,用蒸馏水洗板3次。加50ul底物和50ul发色剂至每个微孔中,轻拍混均,20℃--25℃黑暗避光处孵育30min。加100ul反应终止液至每个微孔中,轻拍混均后,在10 min内以空气为空白调零,测量并记录每个微孔溶液450nm波长的吸光度值。实验结束后,关闭电源盖好防尘罩。 3.1.2酶标仪操作的注意事项 3.1.2.1使用移液器加液,移液枪头不能混用。 3.1.2.2洗板要干净,避免交叉污染。 3.1.2.3严格按照试剂盒的说明书操作,反应时间准确。

3.1.2.4请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成注意做好清洁工作。 3.1.2.5不要在测量过程中关闭电源。 3.1.2.6使用后盖好防尘罩。 3.2 分光光度计的操作和注意事项 3.2.1分光光度计的操作流程 打开分光光度计开关,打开样品室盖,放入参比样品和待测样品,调节波长到所需值,关闭样品室盖,以参比样调0和100%,方法为:按“功能键”切换到“透射比”调100%,按“功能键”切换到“吸光度”。推拉拉杆,读出待测样品的吸光值。实验结束,将比色皿拿出,盖好样品室盖,关闭电源。 3.2.2分光光度计的操作注意事项 3.2.2.1.每次使用后应立即检查是否存有溢出溶液,经常擦拭样品室以防废液对不见火光路的腐蚀。 3.2.2.2仪器使用完毕应盖好防尘罩,可在样品室放置干燥剂,开机时取出。 3.2.2.3仪器液晶显示器和键盘日常使用和保存使用时注意防划伤,防水,防尘,防腐蚀。 3.2.2.4定期进行性能指示检测。 3.2.2.5注意使用比色皿时手不能接触石英光滑面。

高效液相色谱仪HPCL使用中常见故障及解决方法

高效液相色谱仪HPCL使用中常见故障及解决方法 1 高效液相色谱仪系统 液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。 2 常见问题及解决方法 高效液相作为一种高精密仪器,如果在使用过程中不按照正确操作的话,就容易导致一些问题。其中最常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。 2.1 柱压问题柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI( 3.3 Bar)之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。压力过高、过低都属于柱压问题。 2.1.1 压力过高这是高效液相在使用中最常见的问题,指的是压力突然升高,一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时,我们应该分段进行检查。 (1).首先断开真空泵的入口处,此时PEEK管里充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。处理方法:用30%的硝酸浸泡半个小时,在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下,溶剂过滤头正常,在检查;

(2).打开Purge阀,使流动相不经过柱子,如果压力没有明显下降,则是过滤白头堵塞。处理方法:将过滤白头取出,用10%的异丙醇超声半个小时。如果压力降至100PSI (6.7 Bar)以下,过滤白头正常,在检查; (3).把色谱柱出口端取下,如果压力不下降,则是柱子堵塞。处理方法:如果是缓冲盐堵塞,则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞,则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降,则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上,用流动相冲洗柱子。这时,如果柱压仍不下降,只有换柱子入口筛板,但一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以尽量少用。 2.1.1 压力过低压力过低的现象一般是由于系统泄漏,处理方法:寻找各个接口处,特别是色谱柱两端的接口,把泄漏的地方旋紧即可。当然还有一个原因就是泵里进了空气,但此时表现的往往是压力不稳,忽高忽低,更严重一点会导致泵无法吸上液体。处理方法:打开Purge阀,用3~5ml/min的流速冲洗,如果不行,则要用专用针筒在排空阀处借住外力将气泡吸出。 2.2.漂移问题主要包括基线漂移和保留时间漂移。 2.2.1基线漂移一般说来,机器刚起动时,基线容易漂移,大概要半个小时的平衡时间,如果你用了缓冲溶液或缓冲盐,还有就是在低波长下(220nm)平衡时间相对会比较长,但如果你在实验过程中发现基线漂移,则你要考虑下面的原因:

光谱仪的操作规程(通用版)

光谱仪的操作规程(通用版) The safety operation procedure is a very detailed operation description of the work content in the form of work flow, and each action is described in words. ( 安全管理 ) 单位:______________________ 姓名:______________________ 日期:______________________ 编号:AQ-SN-0916

光谱仪的操作规程(通用版) 1准备 1.1检查实验间的工作环境是否满足要求,温度:22士 2.8℃,湿度≤60%; 1.2气的纯度是否小于99.996%,检查氩气的流量是否小于 30psi; 1.3样品的制备:保证样品表面清洁无油污,无氧化皮,表面均匀没有沙眼。 2操作 2.1在电压稳定的情况下,打开系统电源,打开真空泵开关,要求真空泵空转五分钟后,打开真空阀,稳定一段时间要求真空度达到1μ之内; 2.2在真空度达到要求的情况下,打开高压和低压电源,检查氩

气流量达到要求后,打开激发电源; 2.3打开微机,进入BAIRD操作系统; 2.4汞灯的校准:打开汞灯开关,调节旋转数字指示器的旋钮,按照计算机屏幕指令操作,并在仪器运转记录本上记录俩个半峰值的读数,将指示器最终调至计算机求出的答案为止,锁紧旋钮; 2.5清洗循环系统:取一空样在试样台上,激发数次,待各数值达到稳定。注意在装夹试样的时候,要将弹簧负载紧固轴轻轻的压到样品表面,不要突然松手,以免压碎台板,并注意氮化硼原盘固定在原来的位置; 2.6标准化:放好样品后,进行全体元素的标准化。依照电脑中的提示,依次对各块标钢进行激发,得到一组数据,通过和标钢原有数据的对比,计算机自动得到一个修正系数。修正系数不小于 3.0时,可以进行试样分析,否则,要对不满足要求的元素进行元素的标准化,使该元素的修正系数达到规定要求; 2.7在进行了标准化后,进行试样的分析。一个样品测量多次,计算机自动给出平均值。通过打印机得到试验数据。试验数据记录

高效液相色谱仪操作三要点

高效液相色谱仪操作三要点 高效液相色谱仪(HPLC)现已成为有机化学分析的重要手段之一。同样,在食品分析中,无论是残留分析还是成分分析,HPLC 也已成为不可或缺的分析仪器。和其它分析仪器一样,你若想让HPLC 很好地为你工作、得到可靠的数据,首先你要保养好它,使它处于一个良好的待机状态,这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获得理想的结果。而且良好规范的操作习惯可以延长仪器使用寿命。大家在学校或接受仪器公司培训的时候,老师或工程师会提出很多的操作注意事项。但要是总结归纳一下,最重要的有三点:脱气、过滤和冲洗。本文围绕这三点进行讨论,给新从事HPLC 分析的工作者一点操作建议,希望能对正确的操作仪器有一点帮助。更欢迎有经验的专家介绍使用经验,提出好建议。 一、脱气 流动相脱气对于避免HPLC 系统出问题,顺利得到一个理想的数据是一个很有效的措施。HPLC 系统内是不希望有气泡存在的。HPLC 泵在输送液体时要产生很大的力量,由于气体的压缩比与液体相比大的多,因而当气泡存在时,你将观察到瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大,液相泵将不能输送任何溶剂,而且如果压力低于预先设定的压力低限,泵将停止工作。有些泵设计可以很好地排除气泡,而也有一些泵设计当气泡存在时将停止运转。当一个气泡通过输液泵时,由于系统压力大,气泡通常会溶解在流动相溶液中,随流动相通过柱子。但是到达检测器流通池时系统压力又恢复到了大气压,因而气泡可能在检测器流通池中又显现,在色谱图上会出现不规律的毛刺。为解决这个问题,有些仪器公司设计一个反压控制器,这样可以在检测器出口提供足够的压力保持气泡始终溶解在流动相中直到它们流出检测器。当然,这个压力不能超过流通池所能承受的压力极限,否则可能损坏检测器。紫外/可见光(UV/VIS)检测器的液相色谱图中的噪音毛刺通常是气泡进入并通过流通池的征兆。有些检测器对空气的存在也非常敏感,但表现出的征兆与UV/VIS 不同,例如有报导说,当使用荧光(FL)检测器时,流动相中溶解氧的存在可能会使一些化合物失去荧光性。此外,对于利用待测物质在电极表面发生氧化还原反应引起电流变化而进行检测的电化学(EC)检测器,对流动相中的溶解氧的存在也非常灵敏。此外,气泡的存在有时还会导致保留时间不重现。所以,必须注意消除流动相中的空气,并且还应避免空气由管路(如PTFE 管)渗透进 流动相中。如果适当地关注在使用之前脱去流动相中溶解进的空气,上述这些问题均能避免,或把影响降至最低。常用的脱气方法有如下几种: 1. 吹氦脱气法。 利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性,在0.1MPa 压力下,以约60 mL/min 流速通入流动相储液容器中10~15min,可以很有效地从流动相中排除溶解的空气,能排除接近80%的氧气。采用一个高效分布式喷射流装置,一体积的氦气可从流动相中将等体积的几乎全部气体排除。这意味着1L 氦气通过1L 流动相就可完成排气这个工作。这种脱气方法虽然好,但我们国内氦气价格较高,很少有实验室采用此方法。 2. 加热回流法。 此法的脱气效果较好。在操作时要注意冷凝塔的冷却效率,否则溶剂会丢失,混合流动相的比例会有变化。 3. 抽真空脱气法。 此法可使用真空泵,降压至0.05~0.07MPa 即可除去溶解的气体。但是由于真空脱气会使混合溶剂组成发生变化,从而影响到实验的重现性,因此多用于单溶剂体系的简单分析。4. 超声波脱气法。

spark10M光吸收酶标仪操作流程

SPARK 10M酶标仪操作流程和使用注意 操作流程 1、先打开电脑电源,再打开仪器的电源(在仪器的后方黑色开关); 2、打开电脑桌面的SPARKCONTROL软件(软件会自动寻找机器联机); 3、按仪器上方右下角按钮弹出板架,将酶标板放在板架上,点击“plate in”图标将酶标板入机内; 4、在软件控制接面依次选择使用的酶标板型号,要测量的酶标孔,然后选择光吸收的具体波长(可 在230-1000 nm 之间选择),选择读数的次数(flashes, 一般选择5次),最后点击软件左上角start 键开始测量。(见下图) 5、在测量时软件会自动弹出Excel表格,测量完毕点击“SAVE”保存测量结果; 6、将板取出,关闭仪器电源。 操作环境要求 温度:15℃-30℃ 湿度:<90%(无冷凝) 通风:仪器后侧至少有10cm的通风空间 避光:避免直射阳光 酶标板注意事项 不推荐使用小于1/3最大体积的样品体积来测量(96孔100微升,384孔50微升) 确保酶标板平稳地放在酶标板架上(孔A1在左上角的位置) 不要强行将酶标板架推入到仪器中

结束测量后,先取出酶标板,再退出软件和关闭仪器 确保酶标板架不会被身体或物品碰撞 清洁 定期护养:每周用温和的去污剂清洁机身和酶标板托架 液体溅出时的处理:立刻用吸水布擦去溅出的液体, 用温和的去污剂清洁仪器表面(对于有生物毒性的污染,将5-10%的漂白粉溶于去离子水中,擦拭仪器) 消毒处理 仪器移出实验室或接受维修前必须进行彻底的消毒。 选择消毒液:70%乙醇溶液 消毒步骤:使用浸过消毒液的棉布擦拭仪器外表面和酶标板托架,清洁任何附件。

光谱仪操作注意事项

光谱操作注意事项 一些问题 Raw intensity(绝对光强) →Intensity Ratio(光强度比) →Standardized intensity ratio(标准化强度比) →Interference Corre.intensity ratio(内部干扰校后的标准强度比) →Concentration Ratio(含量比) →Matrix Corrected Concen. (通道含量) →Concentration(光谱实测含量) →Typical Corrected Concentration(类型标准化后含量) ① I.R.=(R.I/FeR.I)×Typical intensity Fe factor=(H N-L N)/(H A-L A) H N是高点希望值,L N是低点希望值, H A是高点实测值,L A是低点实测值 ②标准化(F7)S.I.R=factor×I.R.+offset ③内部干扰校正 ④曲线 ⑤含量(通道)=参比含量×通道含量比 ⑥通道含量范围(在Element parameter中的“Line switch”中) ⑦类型标准化(F8)T.C.C.=factor×Concen.+offset factor=化学值/实测值,offset=化学值-实测值 SATEUS=SAFT TEST of Usefulness(用于prespark) SETEME=Security Test of Measurement(用于积分阶段) SEREPS=Self Regulated Prespark time(用于prespark)

一、注意事项 1.当样品有砂眼或裂纹,没有分析位置时,不允许激发; 2.当Ar气不好或点不好时,不允许出分析结果; 3.清理火花台时,要关光源,压样品夹子要垂直; 4.如果遇到激发时声音很大,应该按“F3”停止,不允许直接抬 样品夹,否则烧EK9008板,不允许样品在激发中跑掉。 5.如果遇到突然断电时,应先关总电源,再将其它电源关闭,等 到来电后,先开总电源,再开stand by,再开source(光源)后,开计算机。 6.必须注意绝对不能做错标准化样品,否则,后果十分严重; 7.样品表面不能粘污,不能有水、油等。 8.由于Ar气中水含量较高,在做标准化样品或控样时,一定要 激发三点以上再平均。 9.如果仪器有两小时没有分析样品,在开始分析之前,应用 CTRL+F进行Ar预冲洗,此时不能激发。 二、常见错误信息 1.“No dongle available!”硬件加密码无效,一般是由于EPSON打印机正在打印,激发工作,由于加密狗与打印信号线连在一起而无法接通。 2.“clamp up”夹子抬起,一般是由于样品上表面不导电(比如:有漆有锈)清理干净即可。 3.“Door open”前面板门打开,一般由于火花台罩没有接触良好。

waters 2695 高效液相色谱仪操作规程

Waters Alliance 高效液相色谱仪操作规程 一、概述 1.设备使用范围:主要用于样品中食品添加剂、农药残留、兽药残留、毒素、污染物、非法添加物测定。 2.设备主要技术/性能指标: 四元溶剂混合支持等度和梯度应用,具有11个独特的梯度曲线。自动混合持术能够以任何比例混合四种溶剂。先进的溶剂分配功能。串联流路具有无脉冲溶剂分配,无需使用湿润器。在线溶剂脱气和溶剂自动压缩实现准确的流路。集成的密封清洗实现稳定操作,并且所有溶剂类型均符合规格。 检测器包括光电二极管阵列、示差折光检测器。 二、使用要求 1.存放环境温度10~30℃,湿度≤80%,电压220V。 2.流动相和纯水应用微孔滤膜过滤(纯有机相或含一定比例有机相的用有机系的滤膜,水相或缓冲盐的用水系滤膜)。一次制得的纯水或缓冲盐流动相应在连续24小时内使用完,如未使用完也应弃去不用,并重新配制新鲜的流动相。如需使用,应重新过滤。流动相的pH值应在色谱柱填料允许的范围内。该泵带有真空脱气机,可不超声,但要在泵电源开启后,等脱气机停止工作后(约需5分钟)再进行泵的其它操作。 3.流动相禁止使用氯仿、三氯(代)苯、亚甲基氯、四氢呋喃、甲苯等;慎重使用四氯化碳、乙醚、异丙醚、酮、甲基环己胺等,以免造成对柱塞密封圈的腐蚀。 三、操作程序 A:开机步骤 1.打开计算机,进入Windows界面。 2.打开仪器电源,待仪器各部分自检完成。 3.将2695泵密封垫清洗管路、洗针管路以及ABCD管路分别放入适当的溶剂。

4.Prime seal wash:按2695面板Diag键,选择Prime SealWash,清洗泵头,直至 出口管有液滴流出,按Halt,停止Prime,再按close关闭界面。。 5.Prime needle wash:再选择Prime NdlWash,清洗进样针1-2次,直至黄管有液体喷出。Close并Exit,退出Diag界面。 6.Dry Prime:按2695面板Menu/Status键,再按Direct Function键做Dry Prime (注: 此操作仅在管路中没有液体时执行,否则直接进入步骤6)。 7.Wet Prime:按2695面板Menu/Status键,再按Direct Function键做Wet Prime,5mL/min分别冲洗当天实验需要使用的管路各2分钟。 8.Purge Injector:按2695面板Menu/Status键,再按Direct Function键做Purge Injector,灌注注射器一次。 B:新建方法 1.运行Empower3软件,用户名:system,密码:manager。 2.点击“Run Samples”选择存放数据文件的项目“project”和仪器系统,进入样 品采集界面,确认仪器通讯正常。 3.按“edit method set ”按钮,建立方法组,设置仪器方法。 4.在右下方仪器方法下拉菜单中,选取设置好的仪器方法,按“monitor”按钮,观 察基线,待基线平稳,按停止按钮,可准备进样。 C:样品分析 1.将样品放入2695样品盘中,记录每一个样品对应的位置号。 2.Empower软件中,先单进样一次,若条件合适,确定运行时间。 3.在“samples”状态编辑样品表,开始自动进样。 D:数据处理及打印 1.在Empower3软件中运行“Browse Project ”,在“Channel”表中打开数据,建 立处理方法。 2.用建立好的处理方法处理数据。 3.在“Results”表中选择要打印的结果,选择“Report method ”,打印数据。

酶标仪的检测原理

酶标仪的检测原理 光是电磁波,波长100nm~400nm称为紫外光,400nm~780nm之间的光可被人眼观察到,大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩,是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。 检测单位: 光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。 检测单位用OD值表示,OD是optical delnsity(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度,OD=1og(1/trans),其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer 法则,OD值与光强度成下述关系: E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度,Ι0 为在检测物之前的光强度,Ι为从被检测物出来的光强度。 OD值由下述公式计算: E=OD=C×D×E C为检测物的浓度 D为检测物的厚度 E为摩尔因子 在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段,就会造成检测结果的不准确。因此,在测定检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波长。 但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收,为了消除这种非特异性吸收,我们再选取一个参照波长,以消除这个不准确性。在参照波长下,检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。 Anthos 酶标仪检测值计算 仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量,转换成二进位数字信号,最大为4095。仪器定义没有光源下的透光值为0%,没有检测物的透光值为100%。则实际检测中,检测物的透光值均在0%一100%之间。透光值 的计算如下: T=(Meas—Min)/(Max—Min) 其中T为透光值,Meas为检测的二进位数值,Min为在0%的情况下检测的二进位数值,Max为在100%的情况下检测的二进位数值,举例如下: MaX=3600 Mn=20 Meas=30 T=(30-20)/3600-20)=0.0028 OD=1og(1/T)=1og(1/0.0028)=2.552 Anthos 酶标仪的中心定位 仪器会自动对酶标孔进行中心定位,中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时,仪器其实要进行35个点的测量,选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。 光源的参照通道 参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。 酶标仪的用途和其它提示 用于ELISA试剂的测定,广泛用于各种实验室,包括临床实验室。

红外光谱仪操作规程及注意事项

发表日期:2007年6月3日【编辑录入:admin】 1.保持室内干燥,空调和除湿机必须全天开机(保持环境条件25±10℃左右,湿度≤70%); 2.保持实验室安静和整洁,不得在实验室内进行样品化学处理,实验完毕即取出样品室内的样品。 3.经常检查干燥剂颜色,如果兰色变浅,立即更换。 4.根据样品特性以及状态,制定相应的制样方法并制样。5.测试红外光谱图时,扫描空光路背景信号和样品文件信号,经傅立叶变换得到样品红外光谱图。根据需要,打印或者保存 红外光谱图。 6.实验完毕后在记录本上记录使用情况。 7.设备停止使用时,样品室内应放置盛满干燥剂的培养皿。8.干燥剂再生:将干燥剂在烘箱内105℃烘干至兰色(约3小时)即可。 9.将压片模具、KBr晶体、液体池及其窗片放在干燥器内备用。10.液体池使用NaCl、CaF2、BaF2等晶体很脆易碎,应小心保存。11.液体池使用的KRS-5晶体剧毒,使用时避免直接接触(戴手套),打磨KRS-5晶体时避免接触或吸入KRS-5粉末,打磨的 废弃物必须妥善处理。

2010-01-12 17:11:38 来源:实验室设备信息网浏览:342次 红外光谱仪操作规程及注意事项 一、操作步骤 1.开机前准备 开机前检查实验室电源、温度和湿度等环境条件,当电压稳定,室温为21±5℃左右,湿度≤65%才能开机。 2.开机 开机时,首先打开仪器电源,稳定半小时,使得仪器能量达到最佳状态。开启电脑,并打开仪器操作平台OMNIC软件,运行Diagnostic菜单,检查仪器稳定性。 3.制样 根据样品特性以及状态,制定相应的制样方法并制样。 4.扫描和输出红外光谱图 测试红外光谱图时,先扫描空光路背景信号(Collect→Background),再扫描样品文件信号(Collect→Sample),经傅立叶变换得到样品红外光谱图。 5.关机 (1)关机时,先关闭OMNIC软件,再关闭仪器电源,最后关闭计算机并盖上仪器防尘罩。(2)在记录本记录使用情况。 二、注意事项1.测定时实验室的温度应在15~30℃,所用的电源应配备有稳压装置。2.为防止仪器受潮而影响使用寿命,红外实验室应保持干燥(相对湿度应在65%以下)。3.样品的研磨要在红外灯下进行,防止样品吸水。 4.压片用的模具用后应立即把各部分擦干净,必要时用水清洗干净并擦干,置干燥器中保存,以免锈蚀。 5.OMNI采样器使用过程中必须注意以下几点: (1)样品与Ge晶体间必须紧密接触,不留缝隙。否则红外光射到空气层就发生衰减全反

U3000高效液相色谱仪操纵制度及封面

安徽省产品质量监督检验检验研究院仪器设备 操作规程 (cg———2016) 设备编号() 仪器名称U3000 液相色谱仪操作规程 编制 审核 批准 2016 年月日

U3000高效液相色谱仪操作规程 一基本原理 U3000高效液相色谱系统由:①输液泵②自动进样器、③色谱柱温箱、④检测器、⑤数据处理系统组成。 使用高效液相色谱时,液体待检测物由流动相带入色谱柱,通过压力在色谱柱中移动,由于试样中各组分在色谱柱内固定相与流动相间分配或吸附特性的差异,不同的物质组分顺序离开色谱柱,经检测器检测得到不同的色谱峰信号,依据组分的保留时间和响应值(峰面积或峰高)进行定性和定量分析。

二操作前准备 1.1流动相的配制: 1.1.1根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相。 1.1.2根据流动相的性质确定采用有机膜(0.45um)还是水相膜(0.45um)对流动相进行过滤。 1.1.3将过滤后的流动相进行超声脱气10~15分钟。1.2对照品供试品处理: 1.2.1称取或量取适量的对照品或供试品,用适当的溶剂(最好采用流动相或流动相的主成分)进行充分溶解(也可借助超声波进行超声溶解),使其浓度为 0.1~1mg/mL(根据检测结果再适当调节溶液的浓度)。 1.2.2根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤膜(0.45um)还是水相针头滤膜(0.45um)进行过滤。 1.3色谱柱的选择:根据样品的性质选择适当的色谱柱。 三操作顺序 1.开机

2.1打开UPS(不间断电源)电源,打开仪器接线板电源开关; 2.2打开电脑显示器电源,打开电脑主机电源(POWER),启动电脑; 2.3依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源; 2.4双击屏幕右下角“服务管理器”快捷图标,出现对话界面后点击“启动仪器控制器”启动,等显示“本地仪器控制器运行空闲”,可以关闭界面。 2.5双击在桌面上的Chromeleon 7图标(工作站主程序)。 2.6在左下方点击仪器,则在右边会自动显示该仪器控制面板。 2.7旋开泵上的排液阀(两圈以上);设置A通道为100%,点击“冲洗”,然后再出现的对话框中点击“忽略并执行”;(默认冲洗5分钟);然后分别“冲洗”流路中其他通道气泡;排完气泡后关闭排液阀; 2.8设置流动相的比例及流速后,点击“马达”。此时泵自动会以设置的流速进行运行。

相关文档
最新文档