实验动物学实验报告

实验动物学课程

实验报告

实验内容：

1. 小鼠的基本实验操作

2. 小鼠皮肤移植试验、睾丸（或卵巢）摘除术

3. 豚鼠和兔的一般操作技术

4. 大鼠实验的基本操作

5. 大鼠性周期观察和大鼠急性肺水肿模型建立

6. 小鼠无菌取胎术

7. Beagle犬的一般操作和沙鼠、金黄地鼠、裸小鼠的特性

实验一小鼠的基本实验操作

一、实验目的:通过实际操作，掌握小鼠的一般操作方法，包括小鼠的抓取和固定、性别鉴定、编号、去毛、给药、采血、麻醉、处死，尤其是染色法编号、灌胃、眼球摘除法采血、腹腔注射、脊椎脱臼法处死。

二、实验动物：昆明小鼠4只（2雌2雄）

三、实验步骤

1、抓取和固定

2、性别鉴定

3、编号（染色法）

4、去毛（脱毛剂法）

5、给药：消化道、腹腔注射、尾静脉注射

6、采血：眼眶后静脉丛、尾静脉、眼球摘除法、断头法

7、麻醉：氯胺酮腹腔麻醉

8、处死：脊椎脱臼法、过量麻醉

9、解剖：

9.1 生殖系统：

9.1.1雄性：睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺（在膀胱下方，胶质状，透明）

9.1.2雌性：双角子宫、卵巢

9.2 肾上腺、胰腺、胆囊、甲状腺

四、实验结果

1、抓取和固定：

抓取：抓小鼠的尾根部

固定：抓住小鼠的尾根部，让小鼠在粗糙平面上爬行，后拉尾跟部，右手的拇指和食指抓住小鼠两耳及其间的颈部皮肤，小指和无名指将尾巴固定在手掌面。

2、性别鉴定：

观察肛门与生殖器间的距离和二者之间的毛发。雄性：距离长，毛发密（和其

他部位一样）；雌性：距离短，毛发稀疏。

3、编号：

3.1染色法：

3.1.1用苦味酸（黄色）在小鼠背面染色

3.1.2逆毛发生长方向染色，自毛根开始

3.1.3可编1-10号（10号为不编号）

3.2去毛：脱毛剂：8% Na2S，自毛发根部涂抹

3.3 给药：

3.3.1 灌胃法：左手抓取小鼠固定后，右手持特制灌胃针，沿一侧口角进针，

紧贴咽后壁，头后仰以便伸直消化道，进针2/3后灌生理盐水0.5ml

3.3.2 注射给药：

3.3.2.1腹腔注射：

3.3.2.1.1从下腹部的两侧进针

3.3.2.1.2进针时针与腹部成45°。进针后稍微晃动针，如无粘滞感则可

注射药物

3.3.2.2尾静脉注射：一人固定小鼠，另一人用左手中指和拇指将尾拉直，食

指托住尾部，消毒后右手持带4号针头的注射器在图示A（背面，实为动脉）

位置进针注射0.5ml生理盐水。注射完毕拔出针头，用无菌棉球压迫止血。尾

动脉细小，且贴近皮肤，未注射成功。

小鼠尾静脉切面图

3.4 采血

3.4.1 ：从眼角内侧0.5cm处

进针。（右图）

3.4.2 眼球摘除法：左手抓取

用固定小鼠，右手持弯头镊在

眼球根部将眼球摘除，头朝下，

眼眶内血迅速流出。

3.5 麻醉：

0.5%氯胺酮腹腔麻醉：本小鼠重25g，按100mg/kg的药量给药，8分钟麻醉成

功

3.6 处死：

3.6.1 脊椎脱臼法：按住头部，将尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死

3.6.2 过量麻醉：追加0.5%氯胺酮过量（5ml）腹腔麻醉

3.7 解剖：

3.7.1生殖系统：

3.7.1.1 雄性：寻

找到睾丸、附睾、

输精管、鼠蹊腺

3.7.1.2 雌性：双

角子宫、卵巢

3.7.2 肾上腺：米粒大

小

3.7.3 胰腺：位于胃下方，类似于脂肪组织，浑浊状

3.7.4 胆囊：芝麻大小，浅绿色，半透明

3.7.5 甲状腺：紧贴环状软骨

五、实验讨论

1、小鼠抓取的感受：

小鼠性情较温顺，一般不会咬人，比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中，如进行尾静脉注射时，可使用特殊的固定装置进行固定，如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作，如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。

2、小鼠尾静脉注射感受：

首先，注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟，有利于注射；其次，先远后尽，不要一开始就从尾根部，那样失败了不好办；再次，进血管后注意保持稳定，针尖很容易刺穿血管的。

尾静脉就在尾巴的正左右两边，先用酒精用力擦，可以去掉部分角质，然后按住近心端让充血，就很容易看到了。进针大概1～2厘米是最合适的。

尾静脉注射时，可用45~50度的温水浸润半分钟或用酒精擦拭，可使血管扩张，同时也可软化表皮角质。以左手拇指和食指夹住鼠尾，使静脉充盈，中指帮助无名指和小指捏住鼠尾末梢，右手持注射器（连5号细针头），针头与静脉夹角一般小于30度，从距尾尖2 - 3厘米处进针，此处皮薄易进入，先抽回血，见到血后再缓慢注入少量药液，如无阻力，表示针头已进入静脉，可继续注入。一般推注速度为0.05 - 0.10ml/秒，一次注入量为0.05 -

0.25ml/10g体重。如反复注入，应尽可能从尾末端开始，以后向尾根部方向移动注射。

实验二小鼠皮肤移植试验、睾丸（或卵巢）摘除术

一、实验目的

1.掌握近交系小鼠常用的皮肤移植试验（尾～背植皮法，尾～尾植皮法）。

2.掌握小鼠卵巢摘除术和大鼠睾丸摘除术

二、实验步骤

1、近交系小鼠常用的皮肤移植试验

1.1 尾～背植皮法

1.2尾～尾植皮法

2、小鼠卵巢摘除术

2.1 固定体位、麻醉

2.2 卵巢摘除

三、实验结果

1、近交系小鼠常用的皮肤移植试验

1.1尾～背植皮法：

1.1.1 将近交系小鼠（受体）固定后（已

麻醉），背部剪毛（约1.5cm×1.5cm大小），

75%酒精常规消毒。用眼科剪在此部位剪

开一个0.3cm×0.3cm大小的方形洞备用。

1.1.2将近交系小鼠（供体）固定后（已

麻醉），75%酒精常规消毒鼠尾。用眼科剪

沿尾静脉剪开一条缝，用止血钳将皮肤剥

下，剪成0.5cm×0.5cm大小，刮掉皮片

上的结缔组织。

1.1.3将供体皮片（0.5cm×0.5cm大小）覆盖在受体背部的方形洞（0.3cm×0.3cm

大小）内，铺平，用棉球吸去渗出的血液，使植皮紧贴受体的创面，并与宿主的

边缘密切吻合。

1.1.4无菌纱布覆盖植皮区，胶布包扎（此步骤本实验中省略）。

1.1.5 1～3周后观察结果