医学实验动物学论文综述

正文

前言

糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损，或两者兼有引起。糖尿病时长期存在的高血糖，导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。由于遗传因素和环境因素的多重影响，糖尿病的发病趋势愈加严峻。患者严重高血糖时出现典型的“三多一少”症状，多见于1型糖尿病。发生酮症或酮症酸中毒时“三多一少”症状更为明显。2型糖尿病发病前常有肥胖，若得不到及时诊断，体重会逐渐下降。现在尚无根治糖尿病的方法，但通过多种治疗手段可以控制好糖尿病。主要包括5个方面：糖尿病患者的教育，自我监测血糖，饮食治疗，运动治疗和药物治疗。目前，中国已取代印度，成为全球糖尿病第一大国。“可以说，糖尿病在中国已成燃眉之急，希望中国人在关注经济发展的同时，关心自己的健康。”7月21日，国际糖尿病联盟主席吉恩·克劳德·穆班亚教授指出，中国糖尿病发病率6.7%，已高过世界平均水平6.4%。而且，中国糖尿病高危人群也在扩大，约有1.5亿。中国糖尿病的发病率不能走其他国家的老路。防治要从三方面着手。首先是1型糖尿病，它主要是胰岛素分泌出现障碍，因此患者必须依赖外源性胰岛素，不然会危及生命。但1型糖尿病人的病情发展是可以减缓的。比如正确用药、在营养方面加以注意等。另外，像3C研究等，也可为1型患者的管理提供更多的支持。其次，对于2型糖尿病人来说，这是一种生活方式疾病，像饮食结构、锻炼与否以及年龄，都会影响2型糖尿病的发展。穆班亚教授说：“20年前我来中国，中国没有麦当劳、肯德基，而且车也比较少，大家锻炼机会比较多，当时2型糖尿病不是大问题。但现在中国遍地都是麦当劳、肯德基，到处都是车，大家的锻炼机会少多了，因此2型糖尿病在中国已经成为燃眉之急。回归健康生活方式，就是减少发病最好的方法。”第三种是妊娠糖尿病，它不但影响母亲健康，还会促使孩子逐渐发展成糖尿病。因此，降糖类药物的研究一直都是医学领域的重点、热点和难点，设计降糖类药物的实验方案在很多方面都有着极其重要的意义。

关键字；造模、血糖值、对照组

实验动物：小鼠；

实验仪器：分光光度计、台式离心机、恒温水浴锅、天平；

实验材料：链脲佐菌素、葡萄糖氧化酶、柠檬酸、柠檬酸钠、葡萄糖、试管、生理盐水、胰岛素、蒸馏水、注射器；

测定血糖前小鼠禁食12h，断尾取血，3000rpm离心10min。精密吸取20μl血浆，加

入葡萄糖氧化酶混合试剂3.0ml，混合后置37℃水浴15min，用分光光度计在505nm处比色。同时，取蒸馏水和标准葡萄糖溶液（5.55mmol/L）各20μl作对照，与样品平行试验，用空白管调零，分别读取各管吸光度值。样品管吸光度与葡萄糖标准溶液吸光度比较，计算样品中葡萄糖含量（mmol/L）。计算公式如下

血糖（mmol/L）=（样品管吸光度/标准管吸光度）*5.55（mmol/L）

100mg/dl=5.55（mmol/L）

实验步骤

糖尿病小鼠的造模

1、选取大小形态相似的健康小鼠50只，适应性喂养一周后禁食12h，于注射试剂

前测量血糖，记录；

2、将链脲佐菌素溶于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1mol，pH4.5），并将溶液配置成

1%的注射液，避光、冰浴保存1h；

3、注射前禁食不禁水，一次性小鼠腹腔注射0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液链脲

佐菌素造模，注射剂量150mg/kg；

4、分别于造模后第3天，第7天给予模型组小鼠禁食12h，称重，断尾取血；测

量小鼠空腹血糖值，空腹血糖值高于11.1mmol/L确定为造模成功，清除模型组

中造模不成功的小鼠，对小鼠重新编号；

胰岛素对高血糖小鼠降糖效果实验

1、从模型组中随机选取小鼠20只，随机分为对照组和实验组2组，所有小鼠禁食12h，

断尾取血测量血糖含量，并记录；

2、向实验组注射一定剂量的胰岛素，向对照组注射同等剂量的生理盐水；分别于

0.5h、1.0h、2.0h时断尾取血，分别测量所有小鼠的血糖含量，并记录；

胰岛素对正常小鼠降血糖效果实验

1、选取大小形态相似的健康小鼠20只，随机分为对照组和实验组2组，所有小鼠禁

食12h，断尾取血测量血糖含量，并记录；

2、向实验组注射一定剂量的胰岛素，向对照组注射同等剂量的生理盐水；分别于

0.5h、1.0h、2.0h时断尾取血，分别测量所有小鼠的血糖含量，并记录；

胰岛素对正常小鼠的耐糖性实验

1、选取大小形态相似的健康小鼠20只，随机分为对照组和实验组2组，所有小鼠禁

食12h，断尾取血测量血糖含量，并记录；

2、向实验组注射一定剂量的胰岛素，向对照组注射同等剂量的生理盐水；给药1.5h

后，向所有小鼠腹腔内注射葡萄糖；给药后0.5h、1.0h、2.0h时断尾取血，分别测

定所有小鼠的血糖含量，并记录；

胰岛素对高血糖小鼠的耐糖性实验

1、从模型组中随机选取小鼠20只，随机分为对照组和实验组2组，所有小鼠禁食12h，

断尾取血测量血糖含量，并记录；

2、向实验组注射一定剂量的胰岛素，向对照组注射同等剂量的生理盐水；给药1.5h

后，向所有小鼠腹腔内注射葡萄糖；给药后0.5h、1.0h、2.0h时断尾取血，分别测

定所有小鼠的血糖含量，并记录；

对于胰岛素依赖型糖尿病，由于患者体内的胰岛素量不足，所以只有补充相应数量的外源性胰岛素才能使病情得以控制，医学上称为“替代疗法”。这种类型的糖尿病以越早使用胰岛素越好，不可久拖不决。此外，对于非胰岛素依赖性糖尿病人，如果体格明显瘦弱或有感染、发热及酮症酸中毒的症侯，或病人需进行手术治疗的疾病，或妊娠妇女等情况，也可使用胰岛素治疗。口服降血糖药目前有四大类，即磺脲类、双胍类、α─葡萄糖苷酶抑制剂以及胰岛素增敏剂。磺脲类主要是促进胰岛β细胞释放胰岛素，以发挥降血糖的作用。•最早使用的这类药物是Ｄ860（甲苯磺丁脲）——为第一代磺脲类，它在体内发挥作用的时间短；第二代有优降糖，其降血糖作用虽然强，但容易发生低血糖；以后还相继发现了达美康、美吡达、克糖利、糖适平等。后两者的降血糖作用都比Ｄ860强，口服后90％由肾脏排出。而糖适平95％通过肝脏经胆道从粪便排出，仅5％从尿排出，故此类药有胃肠道反应及肝功能损害等副作用。双胍类主要是抑制肠道对葡萄糖的吸收，增加组织对葡萄糖的利用，从而起到降低血糖的作用。这类药包括苯乙双胍（降糖灵）和二甲双胍，但可引起食欲减退、恶心、腹胀、剂量大还可引起乳酸酸中毒。α-葡萄糖苷酶抑制剂是目前应用广泛的降糖药，有拜糖平，它主要抑制小肠内淀粉酶、麦芽糖酶，使食物在小肠内消化和葡萄糖的吸收减缓，从而起到降血糖作用。目前市场上降糖西药大致分为口服降糖药物和注射降糖药物。其中目前国内常用的口服降糖药物以非胰岛素类药物为主，分为非胰岛素类促胰岛素分泌剂类、双胍类、α-糖苷酶抑制剂类、胰岛素增敏剂类。其中促胰岛素分泌剂类又分为磺脲类和非磺脲类（格列奈类）。注射降糖药物主要以胰岛素及其类似药物为主。而现代药理研究证明，很多单味中药具有降糖作用。但中医药治疗糖尿病，与治疗其他疾病一样，其特点是重视患者的个体差异性和复方的使用。中医药治疗糖尿病不仅在于降低血糖，更重要的是注重防治糖尿病并发症，起到提高生活质量和延长寿命的作用。