第六章 检疫性植物有害生物

2.免疫吸附分离法
原理：结合血清学与平板分离技术，利用
与抗原高度亲和性的抗体，来捕获目标细 菌，样本中其他细菌均被冲洗掉，再将目 标细菌转移或释放到培养基上生长。 方法：平皿免疫吸附评价测定法和免疫吸 附稀释培养法 平皿免疫吸附评价测定法简略流程如下：
常用溶入丙酮的硝酸纤 维素或指甲油作包被
1.直接检验
适用范围：具明显症状的植物材料
主要工具：放大镜或解剖镜，主要是利用
肉眼现场快速初检
2.染色检验法
原理：染病的组织，或病原菌本身，经特
殊的化学药品处理后，可带有特殊的颜色
例如：马铃薯癌肿病薯块上癌瘤不明显时，
可做徒手切片，加1滴1％的“藏花红”染 色液，健康组织细胞壁呈亮红色，感病组 织细胞壁呈暗红色。
可长出病菌。
分子生物学——实时定量PCR 常见真菌病
小麦矮腥黑穗病 小麦印度腥黑穗病 大豆疫病 烟草霜霉病 马铃薯癌肿病
小麦矮腥黑穗病
分布：是麦类黑穗病中危害最大、防治最 难的一种病害，它于1847年及1860年先后 发现于捷克和美国，在全世界范围内传播 和蔓延，目前已在欧洲、北美、南美、澳 洲、亚洲、非洲等40多个国家发生。 寄主：禾本科5个族，18个属，65个种。 主要栽培植物有小麦、大麦、黑麦，冰草 属为天然发病的主要禾草寄主。

《中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名 录》共计435种（昆虫146种，软体动物6种， 真菌125种，原核生物58种，线虫20种，病 毒及类病毒39种，杂草41种）
危险性植物病原生物
1、植物病原真菌
2、植物病原细菌
3、植物病毒 4、植物病原线虫
一、植物病原真菌检疫
（一）植物检疫性真菌常见检疫检验技术 直接检验 染色检验 洗涤检验 保湿萌芽检验 分子生物学——实时定量PCR 血清学方法
主要损害中枢神经 对皮肤、粘膜、肾、肝、肺均有损伤。
磷化铝：磷化铝原药为浅黄色或灰绿色松散固体， 吸潮后缓慢地释放出磷化氢。应用于谷物、油料、 饲料、种子、药材、坚果、干果、茶叶、面粉、 香料、糖果、可可豆、咖啡豆、麻袋等熏蒸。能 和所有金属反应 ，当温度超过60℃时会立即在 空气中自燃。 硫酰氟：
蒸汽热处理的主要设备：热饱和蒸汽发生装置、
蒸汽分配管、气体循环风扇、温度监测系统。
3. 热水处理
用于处理植物种子和无性繁殖材料，杀死病原真
菌、细菌、线虫和某些昆虫。
热水浸泡处理巴西豆象：50℃，处理1h或52℃处
理0.5h。
4.微波加热处理
适于携带物检疫与邮
寄物检疫中处理量较小 的非种用材料。
防治措施
① 进口小麦和原粮必须进行检疫，病麦需除害处 理 ② 带菌小麦原粮必须集中在几个规定有条件的口 岸加工灭菌处理。采用高温灭菌法， 130℃30min或120 ℃1h。 ③ 病区用40％五氯硝基苯，种子重量0.5％的药量 拌种，并在播种沟内施药处理。或单用1％的药 量拌种 ④ 重病地应轮作倒茬或改种春小麦。冬小麦晚播 可减轻发病。 ⑤ 种植抗病品种。
检疫处理一般由检疫机关通知货主或其代理人实施， 检疫机关对处理过程实施监督，以确保处理的有 效性
一、
化学处理法
化学处理法指利用化学药剂对有害生物进 行除害处理的方法。 化学处理的方法有熏蒸、喷雾、涂抹、浸 泡等等。植物检疫中，最常用的是熏蒸处理， 其次是喷雾法与浸泡法。
（一）熏蒸处理
指利用熏蒸剂产生的有毒气体在密闭设施 或容器中杀死有害生物。 1.适用范围
二、植物病原细菌检疫
（一）植物病原细菌检疫检验技术 直接检测：直观检验和生长检验 间接检测 活菌检测 免疫吸附分离法 噬菌体检验 血清学检测 分子生物学方法
1、活菌检测
分离培养法：营养培养基、选择培养基或鉴
别培养基分离纯化得到的细菌 浓缩接种及离体叶检测：提取液浓缩接种感 病植物，观测发病情况。
适于运输工具、贮藏所、加工厂等的消毒。
适于处理粮食种子、植物无性繁殖材料、
水果、蔬菜、其它动植物产品、生长期植 株、工业品、土壤等。
2.熏蒸方式

常压熏蒸：常用于帐幕、仓库、车厢、船舱、筒
仓等可密闭的容器内

真空熏蒸：真空熏蒸是在减压条件下应用熏蒸剂 的过程。它包括将物品放于熏蒸室内，抽掉大部 分空气，并用一小部分含有毒气的空气取代等过 程。真空熏蒸有利于熏蒸剂蒸气分子迅速的扩散， 渗透到熏蒸物体内，因而，可大大减少熏蒸杀虫 灭菌的时间
士、意大利、前南斯拉夫、罗马尼亚、希
腊、、哥斯达黎加、波多黎各、圭亚那、
秘鲁、巴西
寄主植物
主要是甜玉米，也侵染马齿玉米、粉质玉
米、硬粒玉米和爆裂玉米。
症状：整个生育期都可危害，以开花期症
状最明显。早期症状表现为植株矮化，萎 蔫，雄穗退色早枯，叶片边缘产生波纹状 不规则病斑，叶片产生许多小病斑，结合 成大块，火烧状干枯死亡。
第六章 检疫性植物有害生物
掌握危险性植物有害生物的检疫处理 了解危险性植物病原生物检疫 了解危险性大的植物害虫检疫 了解危险性杂草检疫
第一节 植物有害生物的检疫处理
检疫处理(QuarantineTreatment)是指采用物理或
化学的方法杀灭植物、植物产品及其他检疫物中
有害生物的法定程序。
柑橘黄龙病 椰子致死黄花病
梨火疫病
梨火疫病是第一个被确定的植物细菌病害，
由梨火疫病菌引起的，主要分布于北美洲
于西北欧，中欧、地中海、东南欧及大洋
州和亚洲也有分布。大约40多个国家。
梨火疫病的地理分布
寄主：
梨火疫病菌寄主范围很广，能为害梨、苹 果、山楂、李等40多个属220多种植物， 大部分属蔷薇科。
疫总局下属的出入境检验检疫机构承担
全国农业植物检疫工作农业部下属植物检
疫（植保植检）机构责管理和实施
全国的森林植物检疫工作由国家林业局下
属的森林植物检疫机构负责实施
检疫性有害生物
检疫性病原生物：真菌、原核生物、病毒及 类病毒、线虫等 检疫性害虫：昆虫、螨虫、软体动物等 检疫性杂草：假高粱、毒麦、兔丝子、列当 等
3.洗涤检验法
原理：种子表面常附着真菌孢子，将一定
量的样品放入容器内，加一定量的无菌水，
充分振荡，可使病菌孢子洗涤下来，而后
离心后，可沉淀，镜检沉淀物可确定其种
类和数量。
4.保湿萌芽检验
原理：种子携带的真菌，无论外表黏附的
还是潜伏种子内的，在种子萌发阶段即可
开始侵染，甚至有些在种子还未萌发时就
参观真空熏蒸循环设备
影响熏蒸效果的主要因素
温度
湿度
密闭程度
货物的类别和堆放形式
药剂的物理性能
昆虫的虫态和营养生理状况
3.熏蒸剂
常用熏蒸剂有
溴甲烷：在常温下是无色无味的气体 ，化 学性质比较稳定，不易被酸碱物质所分 解 ，在常压或真空减压下广泛应用于各 种植物、植物材料和植物产品、仓库、面 粉厂、船只、车辆等运输工具以及包装材 料、木材、建筑物、衣服、文史档案资料 等熏蒸
检疫和防治
1.严格检疫，禁止从疫区引入蔷薇科仁
果类果树树苗。 2.剪除病梢病枝。 3.药剂防治：120mg/kg链霉素喷雾， 或花期用波尔多液喷雾防治，效果很好。 4.种植抗病品种：
玉米细菌性枯萎病
分布：1889年纽约首先报道，现已20多个
国家。分布于美国、加拿大、墨西哥、越
南、泰国、马来西亚、前苏联、波兰、瑞
巴西豆象：55 松墨天牛：60
℃处理1h，或60 ℃处理0.5h。 ℃处理12h。
局限性：不能用于生活的植物材料。
2.蒸汽热处理 采用蒸汽热处理炉。
用以处理水果和蔬菜，也用于种子、苗木消毒。
主要用于处里实蝇。
水果热蒸汽处理设施包括三部分：
①处理前的分级、清洁、整理车间； ②蒸汽热处理室； ③处理后的降温、去湿、包装车间。
危害性：
仁果类果树的一种毁灭性病害。一棵多年 生的梨和苹果树发病后可在几星期内死亡
田间检疫要点

花:侵染后变深褐色，枯萎。 叶片:从叶缘沿叶脉扩展，先呈水浸状， 后黑褐色。

果实：病部褐色凹陷，扩展到全果，潮 湿时病部生粘稠的细菌溢，初乳白色， 后红褐色。
病枝:叶片凋萎，幼果僵化，但病叶病果 不脱落，远望似火烧状，故称火疫病。
优点：升温快，介质内 部温度往往高于外部， 处理快速、安全，效果
可靠，费用低。
5.高频感应加热
广泛用于处理粮食、种子、干果、竹木制
品、中草药、贵重食品等多种农副产品。 受热均匀。不宜用于含水量高于害虫含水
量的物品，如鲜果、蔬菜等。
（二）低温处理
1.速冻 在－17℃或更低的温度下急速冰冻被处理的农产品。 常用于加工用水果和蔬菜，杀灭害虫。 处理过程：处理时先迅速降温到－17℃以下，并保
（三）辐射：原理
射线直接作用于大分子物质例如DNA，通过电离
和激发使其受到损伤
射线与细胞中其他原子或分子特别是水分子的作
用，产生自由基使生物活性受到损伤
（四）气调处理：原理：给微生物以不适
应的生长环境。充氮气、CO2、惰性气体
等
小
结
检疫处理的与措施有多种，除害处理最为常见。除
害处理方法主要分化学处理与物理处理法。
危害性：1962年美国减产68.7％，1972年 西部7州，平均减产17％，损失1. 2亿Kg。 菌瘿可存活10年以上。
田间检疫要点
系统侵染性，表现为：病株特矮（1/3～
1/2），病粒特硬，菌孢子因含有毒物质
三甲胺，有鱼腥臭味。
实验室检疫要点
① ②
③ ④
⑤
直接检查：放大镜（菌瘿） 洗涤检查：50g＋100ml无菌水，振荡 5min，10～15ml离心3min，定容，制片 观察。 冬孢子自发荧光实验：TCK孢子于荧光 显微镜下有自发荧光现象。 冬孢子萌发试验：5 ℃、17 ℃下，光照。 矮腥孢子5 ℃下21d开始萌发， 17 ℃不萌 发。 PCR技术：

实验室检疫要点


分离培养 可采用选择性培养基和鉴别性培养基 进行 致病性实验 梨火疫病菌致病性试验可用梨片或 梨嫩枝测定，亦可用烟草过敏反映检查。将细菌 悬液，注入烟草叶片或接种于1cm厚梨片，28℃ 下培养，一般10~12小时后，烟草注射区出现白 色坏死斑。1~3天后，梨片或枝条上出现白色菌 脓，则可确诊 血清学检验：免疫荧光、ELISA、凝集实验 分子生物学方法：核酸探针和PCR技术
化学处理以熏蒸法最常用。目前主要的熏蒸剂包括
溴甲烷和磷化铝。熏蒸方法有常压熏蒸、真空熏蒸
物理处理一般对环境安全、无污染，主要利用温度
进行除害。分为高温处理与低温处理。
每种方法都有其优点与局限性，因此，适用的
范围有所不同，检疫处理中需要科学选用。
第二节 危险性植物病原生物检疫
植物检疫机构
对外植物检疫工作由国家质量监督检验检
高温处理即热处理，包括干热处理、热水处
理、蒸汽热处理、微波加热处理与高频加热处
理。
其原理为：利用植物材料与有害生物耐热
性的差异，选择适宜的高温和处理时间以杀死
有害生物而不损害植物材料。
1.干热处理
主要用于处理蔬菜种子，对多种种传病毒、细菌
和真菌有除害效果，但处理不当可能降低种子萌 发率。也用于处理原粮、饲料、面粉、包装袋、 干花、草制品、泥炭藓和土壤等。
3.噬菌体检验
原理：噬菌体侵染细菌，裂解寄主细胞，
在液体培养时，会使浑浊的细菌悬浮液变
清，在固体平板上培养，则出现许多边缘
整齐、透明光亮的噬菌斑。噬菌体具有专
化性，利用此特点，可鉴别细菌的种类。
4、血清学检验
血清学检验 分子生物学方法
见动物检疫技术
（二）常见细菌病
梨火疫病
玉米细菌性枯萎病
持一定时间，处理期间温度不得高于－6℃。
2. 冷处理
指应用持续的不低于冰点的低温控制害虫。多用于 处理携带实蝇的热带水果。处理的时间常取决于冷藏 的温度与害虫的种类。如：实蝇类在0 ℃或0 ℃以下 处理10～13d即可死亡；梅象在0 ℃下需处理14d。
冷处理通常是在冷藏库内（包括陆地冷藏库和船舱 冷藏库）进行。处理的要求包括严格控制处理的温度 和时间。 低温处理前或处理后配合使用溴甲烷熏蒸可缩短处 理时间，并保证除害效果。
氯化苦
环氧乙烷
4.优点与局限性
优点：快速、高效，费用低，残毒问题相对 较轻。 局限性：须在可密闭场所或容器内进行，毒 性较高。
（二）喷雾
主要用于运输工具、贮运场所的消毒：消
毒药和农药
依法对国际航班消毒
（三）浸泡
主要用于种子、苗木或其它繁殖材料（接穗、球 根、块茎等）：农药
二、物理处理法 （一）高温处理