甘蔗糖蜜酒精废液产腐殖酸的菌株筛选与鉴定

和 生长 发育 ， 增强 微生 物 的活性 ］ 。腐殖 酸类 物质 在土 壤改 良、 促 进作 物生 长和 水体 修复 等 方面 作用 非 常 显 著 。 ］ 。 目前腐 殖酸 的应 用 已经渗 透到 工业 ［ ５ ＿ 、 农业ｌ ＿ ＿ ＿ 、 医学 ［ ９ ］ 、 环 境保护 等各 个方 面 ［ １ 。 。 。 腐 殖酸 作为 一 类可 以开发 利用 的潜 在有 机 资源 ， 引起 了国 内外 科技工 作者 的重 视 。 目前 国 内主要 以泥 炭 、 褐煤 、 风 化煤 等 为材 料 ， 采用 酸碱 反应 提 取矿 物腐 殖 酸 ， 其 活性 组分 提 取率 低 ， 且 不含 有益 菌 。近年 来 ， 出现 了采用 微 生物 发 酵生 产腐 殖酸 的方 法 ， 产 品 中除含 有活 性腐 殖 酸外 ， 还 含 有 益微 生物 ］ 。糖 蜜酒 精废 液是 糖 蜜经 发酵 、 蒸馏 后排 出 的高浓 度有机 废 水 ， 含有 １ Ｏ ～２ Ｏ 的 固形 物 ， 其 固形物 中 ７ Ｏ 为 有机 质 （ 酵 母菌 体 、 蛋 白质 、 糖分、 氨基 酸 、 维 生素 、 有机 酸等 ） ， 其余 ３ Ｏ ％为灰 份 （ 氮、 磷、 钾、 钙、 镁 等 无机 盐 ） ， 可作 为微 生物 的培养 基 。本课 题试 图筛 选 出利用 甘蔗 糖厂 糖蜜酒 精废 液 为原 料发酵 生产 殖 酸 的菌 株 ， 为 生物 腐殖酸 的生产 打下 基础 。
Ｖｏ １ ．３１ Ｎ ｏ．２
２ ０ １ ３年 ６月
Ｊ ｕ ｎ ． ２ ０ １ ３
甘蔗糖 蜜酒精废液 产腐殖酸 的菌株筛选与鉴定
李 楠 ， 邓 智年 。 ， 奉 灵波 。 ， 周瑞 芳。 ， 魏源文 。 ， 曹辉 庆 。 ， 李杨 瑞 。
（ １ ． 广西农业科学院 ， 广西 南宁 ５ ３ ０ ０ ０ ７ ； ２ ． 广西大学 生命科学与技术 学院， 广西 南宁 ５ ３ ０ ０ ０ ４
腐 殖 酸 类物 质 （ ｈ ｕ ｍｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｓ ｓ ｕ ｂ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ｓ ， 简 写 ＨＡＳ ） 是 自然 界 生物 动植 物 、 微 生 物 残体 经 过微 生 物 的
一
系列 分解 和合 成而形 成 的一 类有 机高分 子 化合 物［ １ ］ 。腐殖 酸类 物质 中含 有羧 基 、 羟基 、 醇 羟基 、 烯 醇基 、
磺 酸基 、 氨基 、 醌基、 羰基 、 甲氧基等 多种 活性 基 团 ， 具 有弱酸性 、 胶 体 吸 附、 离子交 换 、 络合 、 螯合、 表 面活性 与 化学 反应 等性 能 ， 并能 给微 生物 提供 足够 的碳 、 氮元 素 ， 改 善微 生物 的 生活环 境 ， 促进微 生物 的代 谢活 动
第 ３ １卷
第 ２期
广 西师 范大 学学 报 ： 自然科 学版
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｘ ｉ Ｎｏ ｒ ｍａ ｌ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ： Ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｅ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ
株鉴定 ， 并利用红外 光谱 测试分析发酵产物腐殖酸 的结构 。实验 结果表明 ： 初 步鉴定菌株 ＡＳ ０ １ ９为芽孢杆菌
属 的 巨大 芽 孢 杆 菌 Ｂ ａ ｃ ｉ ｌ ｌ ｕ ｓ ｍｅ ｇ ａ ｔ ｅ ｒ ｉ ｕ ｍ， 发酵前后腐殖酸 含量分别为 ６ ． ６ ０和 ２ ５ ． ３ ３ ｇ ／ Ｌ。 发 酵 产 品腐 殖 酸 含
１ 材 料 与 方 wk.baidu.com
１ ． １ 材 料 １ ． １ ． １ 培养基
细菌 初筛 培 养基 ： 牛 肉膏 ５ ． ０ ｇ ， 蛋 白胨 １ ０ ． ０ ｇ ， Ｎａ Ｃ １ ５ ． ０ ｇ ， 水 １ ０ ０ ０ ｍＬ， 琼脂 ２ ０ ． ０ ｇ ， ｐ Ｈ７ ． ０ 。 放线 菌初 筛 培养基 ： 可 溶性 淀粉 ２ Ｏ ． ０ ｇ ， ＫＮＯ３ １ ． ０ ｇ ， Ｋ２ ＨＰ Ｏ ０ ． ５ ｇ， Ｍｇ Ｓ Ｏ ・ ７ Ｈ２ Ｏ ０ ． ５ ｇ ， Ｎａ Ｃ １ ０ ． ５ ｇ， Ｆ ｅ Ｓ Ｏ４ ・ ７ Ｈ２ Ｏ ０ ． ０ １ ｇ ， 琼脂 ２ Ｏ ． ０ ｇ ， ＫＮＯ ３ １ ． ０ ｇ ， 水１ ０ ０ ０ ｍＬ， ｐ Ｈ７ ． ２ ～７ ． ４ 。 真菌 初筛 培养 基 ： 葡 萄糖 １ ０ ． ０ ｇ ， 蛋 白胨 ５ ． ０ ｇ ， Ｋ２ ＨＰ Ｏ １ ． ０ ｇ ， Ｍｇ Ｓ Ｏ ４・ ７ Ｈ２ Ｏ ０ ． ５ ｇ ， １ ／ ３ ０ ０ 孟 加 拉红
有多种活性 官能团 。可见 ， 甘 蔗糖蜜酒精废液 可以作为微生 物培 养基发酵生产 出高附加值腐殖酸 ， 解决 了糖
厂酒 精 废 液 处 理 问 题 ， 对甘 蔗 酒 精 废 液 的 开 发 利 用 、 环 境 保 护和 蔗糖 业循 环 经 济 发 展 等 具 有 重 要 意 义 。 关键 词 ： 酒精废液 ； 腐殖酸 ； 菌 株分 离 鉴 定 ； 生理生化特 征； 红 外 光 谱 中图分类号 ： Ｑ９ ３ — ３ ３ ； Ｔ Ｓ ２ ４ ９ ． ３ 文献 标 识 码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ １ — ６ ６ ０ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ２ — ０ ０ ８ ７ — ０ ６
３ ． 广西 作 物遗 传改 良 生物 技 术 重 点 开 放 实 验 室 ， 广西 南宁 ５ ３ ０ ０ ０ ７ ）
摘
要： 以甘蔗糖蜜酒精 废液作为筛选培 养基 ， 从 土 壤 中 筛 选 出一 株 能 利 用 酒 精 废 液 为原 料 发 酵 生 产 腐 殖 酸
的 细 菌 ＡＳ ０ １ ９ ， 通过形 态特征 、 培 养及生理特征及 生理生化特征研 究， 结合 １ ６ Ｓ ｒ Ｄ ＮＡ 序 列 分 析 比对 ， 进 行 菌