分光光度计实验报告
实验六 分光光度法测溴酚蓝的电离平衡常数
王思雨 PB12207007
中国科学技术大学生命科学院
摘要 本实验中我们通过使用722型分光光度计测量出了溴酚蓝
(Bromphenalblue)的最大吸收波长，并了解了溶液浓度对λmax 的影响
以及酸度对B.P.B 的影响和用缓冲溶液调节溶液酸度的方法。
关键词 分光光度计 溴酚蓝 电离平衡常数
1．前言
本实验用分光光度法测定弱电解质溴酚蓝的电离平衡常数。溴酚
蓝是一种酸碱指示剂，本身带有颜色且在有机溶剂中电离度很小，所
以用一般的化学分析法或其他物理化学方法很难测定其电离平衡常
数。而分光光度法可以利用不同波长对其组分的不同吸收来确定体系
中组分的含量，从而求算溴酚蓝的电离平衡常数。
溴酚蓝在有机溶剂中存在着以下的电离平衡：
HA H ++A －
其平衡常数为： K a =+-[H A HA ][][]
(6－2) 溶液的颜色是由显色物质HA 与A －引起的，其变色范围PH 在
3.1～
4.6之间，当PH ≤3.1时，溶液的颜色主要由HA 引起的，呈黄
色；在PH ≥4.6时，溶液的颜色主要由A －引起，呈蓝色。实验证明，对蓝色产生最大吸收的单色光的波长对黄色不产生吸收，在其最大吸
收波长时黄色消光为0或很小。用对A －产生最大吸收波长的单色光
测定电离后的混合溶液的消光，可求出A －的浓度。令A －在显色物质
中所占的分数为X ，则HA 所占的摩尔分数为1－X ，所以 K X X
a =
--1[]A (6－3) 或者写成： lg PH lg 1a X K X =+- (6－4) 根据上式可知，只要测定溶液的PH 值及溶液中的[HA]和[A －]，
就可以计算出电离平衡常数Ka 。
在极酸条件下，HA 未电离，此时体系的颜色完全由HA 引起，溶
液呈黄色。设此时体系的消光度为D 1；在极碱条件下，HA 完全电离，
此时体系的颜色完全由A －引起，此时的消光度为D 2，D 为两种极端条
件之间的诸溶液的消光度，它随着溶液的PH 而变化，则有：
D=(1－X)D 1+XD 2
推出： 12D D X D D
-=
- 代入（4）式中得： lg
D D D D PK a --=-12PH (6－5)
在测定D 1、D 2后，再测一系列PH 下的溶液的光密度，以lg D D D D --12对PH 作图应为一直线，由其在横轴上的截距可求出PKa ，从而可得
该物质的电离平衡常数。
2.实验部分
(一) 仪器与试剂
药品：
5×10-5mol ·dm -3的溴酚蓝溶液 0.1483mol ·dm -3的HCl 溶液
1 mol ·dm -3的HCl 溶液 0.1 mol ·dm -3NaOH 溶液
0.2 mol ·dm -3NaOH 溶液 0.1 mol ·dm -3邻苯二甲酸氢钾溶液 仪器：
722型分光光度计(上海第三分析仪器厂) 1台
银河CS501恒温槽（中国重庆银河试验仪器有限公司） 1台
inoLab 740 PH 计（WTW ） 1台
10mL 移液管 3支
25移液管 1支
50mL 移液管 1支
100mL 容量瓶 7个
(二) 实验过程
1、打开超级恒温水浴使之恒温在25℃，打开分光光度计，预热
仪器，同时掀开样品室盖。
2、确定溶液的最大吸收波长。
（1）用10mL 移液管准确移取5×10-5 mol ·dm -3的B.P .B 溶液
20mL ，置于一个洗干净的100mL 的容量瓶中，并用50ml 的移液管
准确加入50mL0.1 mol ·dm -3的邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液，加H 2O 稀
释到刻度，得1.0×10-5 mol·dm-3的B.P.B溶液。
（2）取１cm厚度的比色皿两只，分别用H2O，1.0×10-5 mol·dm-3的B.P.B溶液洗净，再分别装入2/3体积的H2O，1.0×10-5 mol·dm-3的B.P.B溶液，把比色皿两光面擦干，正确插入光度计恒温比色槽中，用蒸馏水作空白溶液，用以校正仪器。放在靠内的一个槽内便于测量。
（3）开启仪器，测出最大的吸收光波长。
3、各个不同酸度的溴酚蓝溶液配置。
取7只100mL的干净容量瓶，分别加入20mL 5×10-5 mol·dm-3的B.P.B溶液，再分别加入50mlL0.1 mol·dm-3邻苯二甲酸氢钾溶液。加入的HCl和NaOH的量以书中表为准（注意在不同浓度下对酸碱体积的转换），再加稀释至刻度。可分别得到不同PH值下的B.P.B溶液。
4、将上述七种不同酸度的溴酚蓝溶液用酸度计测量相应的pH值。
5、不同酸度下，溴酚蓝溶液吸光度D的测定。
（1）将波长固定在λmax处，把已经恒温的溶液逐一以蒸馏水作参比，测量其吸光度，可得一系列的D值。
（2）取两只100mL容量瓶，分别加入20mL5×10-5mol·dm-3的B.P.B溶液。在另一支容量瓶中加入50mL0.2 mol·dm-3
的NaOH溶液稀释到刻度，得B.P.B的极碱溶液，在另一
支容量瓶中加入1 mol·dm-3的HCl溶液10mL，稀释至刻
度，得B.P.B的极酸溶液。
（3）在分光光度计上迅速测量极酸溶液、极碱溶液的吸光度D1和D2。
3．结果与讨论
实验结果：
PKa =4.055，Ka =8.825
10-
?,相对误差为1.10%
实验是应从浓度低的开始测量，我在测量中先测了4号，然后依次为3,2,1号。之后是5号，然后依次6,7号。
结果分析：
本次实验的误差较大，这是实验的严密性以及仪器的精密性所决定的，误差有如下主要来源：
1、在测量溶液吸光度时，读数会有较小的波动（一般不大于
0.001），这是仪器的精确度所限制的，因为仪器所发出的单色光会随电源电流的波动而有微小变化。PH计使用时并不在恒温槽内，与分光仪的温度有一定差别，但是因为当天的气温较高，使得恒温槽内温度与室温相同，故造成的误差应当比较小。
2、人为误差主要体现在移取溶液，清洗润洗各种仪器上，这些可以通过熟能生巧和认真对待实验操作等方法减小误差。
3、因为pH计的测定时间较长，使得药剂不能做到现配现用，造成一定误差，不过对实验的影响应该不大。
4、pH计校准时精度不够，也会带来一定（较大）的误差。
5、在使用PH计时发现PH计上读数是不断变化的，我认为这是由于PH计极其灵敏（PH值后精确到第三位），而测量的体系并不是密闭的，因此由于酸的挥发以及碱与空气中二氧化碳相互作用引起PH的持续变化。而且书中在极酸极碱的PH值测定时也强调指出应迅速测量，也可证明这个观点。所以测量时应该在PH计读数刚开始发生反复时进行。
参考文献
[1]崔献英柯燕雄单绍纯物理化学实验中国科学技术大学出版社 2000
[2]武汉大学编分析化学（第五版）高等教育出版社
Spectrophotometric Determination of BPB ionization equilibrium constants
Wang Siyu PB12207007
Department of life science, University of Science &
Technology of China
Abstract In this experiment we measured the maximum absorption wavelength of BPB (Bromphenalblue) by the use of
722-spectrophotometer We studied the effect on the maximum absorption wavelength made by the solution concentration and the impact on the B.P.B by the acidity and also get the knowledge of the way to use buffer solution to regulate the acid.
Key words Spectrophotometer Bromphenalblue Ionization equilibrium constants
实验处理附件
（一）数据记录
恒温槽温度初温：27.41℃；末温：27.39℃；
极酸和极碱情况下溶液的吸光度 D1：-0.0185； D2：0.685；
最大吸收波长 max：592.10nm；
不同PH值时B.P.B溶液的吸光度：
以lg D D D D
--12对PH 作图， X 轴的截距为PKa ，读数、计算Ka 值：（在Origin 中处理数据的过程在本文件夹的OPJ 文件里）
BPB 溶液的lg D D D D
--12--PH 图象
从图中可以读得X 轴的截距为4.645，由lg D D D D
PK a --=-12PH 知这个值就是PKa ，故PKa =4.645，Ka =2.3 510-?。查资料得到BPB 电离平衡常数标准值为PKa=4.10，所以误差为（4.645-4.10）/4.10=13.3%
可见分光光度计操作规程
722N可见分光光度计操作规程 （IATF16949-2016/ISO9001-2015） 一、使用步骤 1、连接仪器电源线，确保仪器供电电源有良好的接地性能； 2、接通电源，使仪器预热20分钟。（不包括仪器自检时间）； 3、用
2、仪器使用完毕应盖好防尘罩。可在样品室及光源室内放置硅胶袋防潮，但开机时一定要取出； 3、长期不用仪器时，尤其要注意环境的温度、湿度，定期更换硅胶。 4、工作条件：环境温度：5~35℃；相对湿度：不大于85%RH； 三、期间核查 1、波长范围检查：主机正常开机并预热30分钟，模式为“透射比”档， 转动波长旋钮至波长范围两端按100%T健,应能正常调节100%T,开样品室盖时按0%T应能正常调节0%T。 2、透射比重复性检查：将主机波长设定至550nm，仪器调0%T，调100%T。 置入透射比为40%T左右并在附近平坦吸收的样品(例如:中性滤光片)连测三次检查显示值,其最大差值应在±0.3%T内。 3、定点噪声检查：设定波长在550nm，仪器调0%T，调100%T，设定标尺至“吸光度”，观察显示窗内数字跳动在0.002A范围内。 4、波长重复性检查：设置标尺为“透射比”，采用分光光度计通用的镨钕滤光片作样品。以空气为空白，仪器调0%T，调100%T，将样品置入光路，读出在520~540nm波长范围内与样品标准峰值相对应的波长值。重复三次,波长读数误差不应大于±1nm。 5、核查周期：半年一次 四、设备维护 1、为确保仪器稳定工作，电压波动较大的地方，建议用户配备220V稳压器； 2、仪器接地要良好； 3、干燥剂应保持其干燥性，发现变色立即更换或活化后再用；
722N可见分光光度计使用维护操作规程
标准操作规程-SOP 722N可见分光光度计使用维护操作规程 1.0目的 本操作规程为正确使用及维护722N可见分光光度计提供指南。 2.0 范围 适用于化验室的722N可见分光光度计和使用操作人员。 3.0 职责 确保化验室每个使用人员都能正确使用和维护722N可见分光光度计。 4.0 规程指引 4.1 使用限制条件 4.1.1 仪器应放在干燥的房间内，使用温度为5℃~35℃，相对湿度不超过85%。 4.1.2 使用时放置在坚固平稳的工作台上，避免强烈的震动，避免阳光直射及直接吹风，远 离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备，以免影响仪器的正常使用。 4.2 安全注意事项（无） 4.3 使用步骤与操作方法 4.3.1 插上电源，打开开关，打开试样室盖，按“A（吸光度）/T（透射比）/C（浓度）/F （斜率）”键，选择“T%”状态，选择测量所需波长，预热30分钟。 4.3.2 用参比液润洗比色皿（装样品的比色皿要用样品液润洗），装样到比色皿的3/4处（以 确保光路通过被测样品中心），用吸水纸吸干比色皿外部所沾的液体，将比色皿的光面对准光路放入比色皿架，用同样的方法将所测样品装到其余的比色皿中并放入比色皿架中。 4.3.3保持在“T%”状态，将装有参比液的比色皿拉入光路，当关上试样室盖时，屏幕应显 示“100.0”，如否，按“OA/100%”键；打开试样室盖，屏幕应显示“000.0”，如否，按“0%”键，重复2－3次。 4.3.4 关上试样室盖，按“A/T/C/F”键，调到“Abs”状态，屏幕应显示“0.000”，如否， 按“OA/100%”键，打开试样室盖，再关上试样室盖，屏幕应继续保持显示“0.000”，重复2－3次。 4.3.5 拉动拉杆，将其余测试样品一一拉入光路，记下测量数值。 4.3.6测量完毕后，将比色皿清洗干净，擦干，放回盒子，关上开关，拔下电源，罩上防尘 罩。 4.4 使用注意事项 4.4.1 开关试样室盖及拉动拉杆时动作要轻缓。 4.4.2 使用比色皿时手指应拿磨砂玻璃面。 4.4.3 不要在仪器上方倾倒测试样品，以免样品污染仪器表面，损坏仪器。 4.4.4 一定要将比色皿外部所沾样品擦干净，才能放进比色皿架进行测定。 4.4.5 每次调整波长后，应重新调零，调百。 4.4.6 仪器工作数月或搬动后，要检查波长准确度，以确保仪器的使用和测定精度。 4.5 日常维护与保养 4.5.1 为确保仪器稳定工作，电源电压一定要稳定。 4.5.2 为了避免仪器积灰和沾污，在停止工作的时间里，用防尘罩罩住仪器，同时在罩子内 放置数袋防潮剂，以免灯室受潮、反射镜镜面发霉或沾污，影响仪器日后的工作。4.5.3 每次测定结束后都要用蒸馏水将比色皿清洗干净。
722N分光光度计使用方法
722N可见分光光度计使用说明书 目次 1仪器的主要用途--------------------------------------------------1 2仪器的工作环境--------------------------------------------------1 3仪器的主要技术指标及规格----------------------------------------1 4仪器的工作原理--------------------------------------------------2 5仪器的光学原理--------------------------------------------------2 6仪器的安装、使用与维护------------------------------------------3 7 仪器的调校和故障分析--------------------------------------------5 8 仪器的成套性----------------------------------------------------6 9 仪器的保管及免费修理期限----------------------------------------7 制造计量器具许可证编号： 产品执行标准的编号：Q/YXLZ50-2004
1仪器的主要用途 722N可见分光光度计能在近紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定 量的分析。该仪器可广泛地应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制等部门，是理化实验室常用的分析仪器之一。 2仪器的工作环境 仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5℃～35℃，相对湿度不超过 85%。 使用时放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈的震动或持续的震动。 室内照明不宜太强，且避免直射日光的照射。 电扇不宜直接向仪器吹风，以免影响仪器的正常使用。 尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 供给仪器的电源电压为AC220V22V，频率为50Hz1Hz，并必须装有良好的接地线。 推荐使用交流稳压电源，以加强仪器的抗干扰性能。使用功率为1000W以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器。 2.7避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀气体的场所使用。 3仪器的主要技术指标及规格 仪器类别：2类 光学系统：单光束、衍射光栅。 波长范围：330nm～800nm。 光源：钨卤素灯12V30W。 接收元件：光电池。 波长准确度：2nm。 波长重复性：≤1nm。 光谱带宽： 5nm。 杂光：≤%（在360nm处）。 透射比测量范围：%～%。 吸光度测量范围：～。 浓度直读范围：0000～1999。 透射比准确度：%。 透射比重复性：≤%。 噪声：100%噪声≤%，0%噪声≤%。 稳定性：亮电流≤%/3min， 暗电流≤%/3min。 电源：AC220V22V， 50Hz1Hz。
分光光度计
分光光度计 2011-03-01 11:06标签：blank 光度计 color style 光学 下面分别叙述这几个部分的光学系统的特性。 1光源系统 分光光度计的光源系统由光源和照明系统组成。 1.1光源 分光光度计中对光源有一定要求，理想的辐射光源应具备以下一些特性： (1)在所使用的被长范围内提供连续辐射，即光源应发射连 (2)辐射能量随波长的变化尽可能小，且有足够的强度。 (3)使用寿命较长。 (4)要有良好的稳定性，特别是对单光束仪器。 在190一360nm波长范围紫外波段，常用的光源是氢弧灯和氘弧灯，氘灯的紫外光发射强度比氢灯强。在360一2500nm波长范围可见和进红外波段，常用白炽钨灯作为光源。图2为氢灯、钨灯的光谱能量分布图。 在2—50µm波长的中远红外波段内，常用的光源是能斯脱和硅碳棒，其光谱能量分布如图3所示。另外，对于要求较低的仪器，灼热的金属丝(如镍铬丝)可以作为红外光源；而在远红外区高压汞灯也是一种常用的光源。 图2 光源能量分布图3 红外辐射光源 A－氢灯，B一钨灯，C一不同温度T的黑体辐射A－能斯脱，B－硅碳棒 1.2照明系统 光源系统的照明系统一般有两中：单光束照明系统和双光束照明系统。光源系统中的反射镜的作用是把光源发出的光线集中在单色 器的入缝上，使整个狭缝照明均匀并充满单色器的孔径。 在照明系统为单光束的仪器，只要求光源反射镜引入一个高通量的光束即可，对光源的成像质量要求不高。图4为一种单光束照明系统光路图。 在双光束照明系统的分光光度计中，光源系统并不直接照明单色仪的狭缝，如图5所示。光度系统处于单色器和光源之间，而在光度系统中，有一个梳形减光楔，光源必须首先成像在减光楔上。减光楔通过光度系统要求清晰地成像在单色器的入缝上。 图4单光束照明系统图5双光束照明系统 2单色器系统 单色器是分光光度计的核心部分，仪器的主要光学特性和工作特性基本上由单色器决定。它的作用是将光源发出的白光色散成各种波长的单色光，从出射狭缝中导出，照于样品上。分光光度计中的单色器是一个完整的色散系统，除了色散元件——棱镜或光栅外，还有入射和出射狭缝以及一组反射镜。根据工作光谱范围、色散率、分辨串等性能指标的要求，可分别选用棱镜或光栅分光的单色器，双联单色器，也可采用滤色片分光的单色器等。 2.1虑光片 滤光片是最简单、最廉价的单色装置。由于它的单色性不好，使测定精度大大受到限制。它的特性可以用最大透光波长(或称中心波长)和谱带半宽度(有效带宽)来表征。最大透光波长是指在此波长光源的辐射最强。有效带宽是指最大透光度值的一半处的谱带宽度。在分光光度计中，滤光片一般用来消除单色器的杂散光。滤光片可分为五种：中性滤光片，截止滤光片，通带滤光片，干涉滤光片以及校正滤光片(标准滤光
752紫外可见分光光度计使用方法解析
752紫外可见分光光度计 一、仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理—一比耳定律。 τ=I/Io log I/Io=KCL A= KCL 从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时．透过的光是根据溶液的浓度而变化的，752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。 二、仪器的安装、使用、安装 1 仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查，电源电压是否正常，接地线是否牢固可靠，在得到确认后方和接通电源使用。 2 仪器经过运输和搬运等原因，会影响波长准确度，应进行仪器调校后使用。 使用：仪器使用前需开机预热30min。 本仪器键盘共有4个键，分别为； 1 A /τ/C/F 1SD 2 ▽／0％ 3?／100％ 4 A /τ/C/F键：每按此键来切换A、τ 、C、F之间的值。 A——吸光度（Absorbance） T——透射比（Trans） C——浓度（conc） F——斜率（Factor） (2)F值通过按键输入（后面介绍如何设置） 5SD键：该键具有2个功能 a)用于RS232串行口和计算机传输数据（单向传输数据，仪器发向计算机）。 b)当处于F状态时，具有确认的功能，即确认当前的F值，并自动转到C，计算当前的C 值（C=F*A）。 6 ▽／0％键：该键具有2个功能 a）调零；只有在τ状态时有效，打开样品室盖，按键后应显示0.000。 b）下降键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动减1，如果按住本键不放，目动减1会加快速度；如果F值为0后，再按键它会自动变为1999。而按键开始自动减1。 7 ?／100％键；该键具有2个功能 a）只有在A、τ状态时有效，关闭样品室盖，按键后应显示0.000、100.0。 b）上升键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动加1，如果按住本键不放，自动加1会加快速度，如果F值为1999后，再按键它会自动变为0，再往键开始自动加l。 例如：设置斜率为1500。 方法一 T）按A／τ／C／F键切换到F状态。 b）如果当前F值为1000，则按?／100%键，直到F值为1500。 C）再按SD键，表示当前的F值为1500，然后自动回到C状态，假如所测的A值为0．234，则此时显示C值为0351。
分光光度计的检验和维护
分光光度计的检验和维护 （一）分光光度计的检验 为保证测试结果的准确可靠，新制造、使用中和修理后的分光光度计都应该定期进行检定。国家技术监督局批准颁布了各类紫外、可见及近红外分光光度计的坚定规程。我们在验收仪器时应按照仪器说明书及检验合同进行验收。检定规程规定，检定周期为半年，两次检定合格的仪器检定周期可延长至一年。下面简单介绍分光光度计的检验方法。 1．波长的准确度 波长准确度是指单色光最大强度的波长值与波长指示值之差。可以用汞灯较强光谱线253.65、296.73、313.16、365.02、404.66、435.83、546.07nm或氢灯（486.13）、氘灯486.00nm 的谱线来检验。 稀土玻璃如镨钕玻璃、钬玻璃在相当宽的波长范围内有特征吸收峰。由仪器生产厂作为附件提供。镨钕滤光片的吸收峰为528.7nm和807.7 nm 。 如果经检验仪器的波长准确度不合格，应按照仪器说明书进行调整。 2．稳定度 在光电管不受光的条件下，用零点调节器将仪器调至零点，观察3min，读取透射比（透过率）的变化，即为零点稳定度。 在光谱范围两端向中间靠10nm处，例如721型仪器的370nm和790nm处，调整零点后，打开光门，使光电管受光，调节透过率为95％（数显仪器调至100％）处，观察3min读取透过率的变化，即为光电流稳定度。 3.投射比正确度 投射比的校正的方法中有中性玻璃滤光片法（可见光区）和标准溶液法。 经常使用的使标准溶液法，具体操作为：配置质量分数0.06000/1000（即1000g溶液中含K2Cr2O70.06000g）的K2Cr2O7的0.001mol/LHClO4的标准溶液。以0.001mol/LHClO4为参比，以1cm的石英吸收池分别在235、257、313、350nm波长处测定透射比，与表13－4所列标准溶液的标准值比较，根据仪器级别其差值应在0.8％－2.5％之内。 溶液的透射比 表13－4质量分数0.06000/1000 K 4.杂散光 不属于单色器给定波长，由于反射或散射等射到检测器的光称为杂散光。杂散光的检验是在较短波长下，测定某透过溶液的投射比。根据仪器的级别不同，有的T>0.001%，有的到 T<0.6%。 光栅式仪器用1cm配套合格的吸收池，在380nm处，以蒸馏水为参比，测定50.0g/L的亚硝酸钠标准溶液的透射比（透射信号和入射信号之比），即为仪器在相应波长处的杂散光。 5.吸收池的配套性 在定量工作中，尤其是在紫外光波长测定时，需要对吸收池作校准及配对工作，以消除吸收池的误差。 配套性检验方法是：石英吸收池在220nm处，装蒸馏水；在350nm处，装K2Cr2O7的0.001mol/L HClO4溶液。玻璃吸收池在600nm处，装蒸馏水；在400nm处，装K2Cr2O7溶液（配法同上）；以一个吸收池为参比，调节T为100.0％测定其它各池的透射比。透射比之差小于0.5％的池可配对成一套。
721可见分光光度计使用方法
721可见分光光度计使用方法 一、开机预热 仪器在使用前应预热30分钟。 二、波长调整 转动波长旋钮，并观察波长显示窗，调整至需要的测试波长。 注意事项：转动测试波长调100%T/0A后，以稳定5分钟后进行测试为好(符合行业标准及质监局检定规程要求)。 三、设置测试模式 按动“功能键”，便可切换测试模式。相应的测试模式循环如下：*开机默认的测试方式为吸光度方式 四、结果打印(721型无此功能) 在得到测试结果后按动“打印”键便可打印结果(需外接标准串行打印机)。 五、光源切换(适用于752、754、755B型) 因为仪器在紫外区和可见区使用不同的光源，所以需要波动光源切换杆来手动的切换光源。建议的光源切换波长为340nm，即200nm-339nm适应氘灯，340nm-1000nm使用卤素灯。 注意事项：如果光源选择不正确，或光源切换杆不到位，将直接影响仪器的稳定性。特殊测试要求除外。 六、比色皿配对性 仪器所附的比色皿是经过配对测试的，未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度。适应比色皿一套两只，供紫外光谱区使用，置入样品架时，两只石英比色皿上标记Q或箭头方向要一致。玻璃比色皿一套四只，供可见光谱区使用。 石英比色皿和玻璃比色皿不能混用，更不能和其他不经配对的比色皿混用。用手拿比色皿应握比色皿的磨砂表面，不应该接触比色皿的头光面，即透光面上不能有手印或溶液痕迹，待测溶液中不能有气泡、悬浮物，否则也将影响样品的测试精度。比色皿在使用完毕后应立即清洗干净。 七、调T零(0%T) 1.在T模式时，将遮光体置入样品架(如图七所示)，合上样品室盖，并拉动样品架拉杆使其进入光路。然后按动“调0%T”键，显示器上显示“00.0”或“-00.0”，便完成调T零，完成调T零后，取出遮光体。 注意事项：1.测试模式应在透射比(T)模式； 2.如果未置入遮光体合上样品室盖，并使其进入光路便无法完成调T零；
可见分光光度计常见故障的维修技巧
723可见分光光度计常见故障的维修技巧 723型可见分光光度计是采用单片微机控制的普及型智能化仪器。仪器能在近紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定量分析，仪器波长精度高，读数稳定，具有自动调整“100”、调整“0”、四孔校正、自动扫描、自动绘图、打印及浓度计算等功能，广泛用于医学临床、无机分析、酶分析、药品检验、三废检测、环境保护、金属分析等等。 笔者是一名从事仪器维修的工程师，通过近十年来对723可见分光光度计的操作应用和实际维修，了解和总结了一些该型仪器的常见故障和维修技巧，在此列举一二。 故障一：仪器开机显示波长为320.0后，不进行波长扫描，而是显示Errl 原因分析：仪器显示Errl表示仪器在能量检测过程中检测到的能量过低或能量检测不到。可能的原因有： 1. 试样槽位置没有准确定位，挡住了部分或全部单色光； 2. 反射镜灰尘太多或发生霉变，导致反射光光强太弱； 3. 钨卤灯不亮或亮度不足； 4. 单色器能量低或光电管端部能量低，灵敏度差，输出信号小； 5. 前置放大电源正负15伏电压或前置放大电路本身故障。 故障解决程序:对于1、2两种情况,一般凭视觉即可看出,重新对试样槽定位、清扫反射镜即可排除故障。而对于其它三种可能，则本着先易后难的原则，逐步排除： 1. 检查滤光片和光路，一般情况下不应该有什么问题； 2. 检查灯电源是否在10.5至11.0伏之间,不正常调整到正常值,如果钨卤灯不亮则更换钨卤灯； 3. 检查前置放大电源正负15伏电压是否正常, 不正常则予以维修 (一般情况下3DD15容易损坏)。 4. 在开机显示320.0时检查前置放大CA3140的输出信号,若信号大于25毫伏则表明前置放大电路故障,维修或更换; 若信号小于25毫伏则表明: (1) 单色器能量低,重新调整。 （2）光电管端部能量低，更换光电管。 注意事项:在更换钨卤灯时： 1． 必须在关掉电源待整机冷却后进行；
分光光度计简易操作步骤
分光光度计简易操作步骤 1操作步骤 连接仪器电源线，确保仪器供电电源有良好的接地性能。 接通电源，开机使仪器预热20分钟。至仪器自动校正后，显示器显示“ 0.000A” 仪器自检完毕,即可进行测试。 用<方式>键设置测试方式，根据您的需要选择，透过率（T），吸光度（A）浓度（C） 选择分析的波长，按键6（设定键）屏幕上显示“WL=×××.×nm”字样，按键1或键2输入所要分析的波长,之后按键7(确认键)、显示器第一列右侧显示“×××.×nm BLANKING ”，仪器正在变换到所设置的波长及自动调出0ABS/100%T请稍等。待仪器显示出需要的波长，并且已经把参比调成0.000A时，即可测试。 将参比样品溶液和被测样品溶液分别倒入比色皿中，打开样品室盖，将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中，盖上样品室盖。一般情况下，参比样品放在第一个槽位中。仪器所附的比色皿，其透过率是经过配对测试的，未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度。比色皿透光部分表面不能有指印、溶液痕迹，被测溶液中不能有气泡、悬浮物，否则也将影响样品测试的精度。将参比样品推（拉）入光路中，按<0ABS/100%T>键调“0ABS/100%T”。此时显示器显示的“BLANKING”，直至显示“100.0”%T或“0.000A”为止。 当仪器显示器显示“%T”或“0.000A”后，将被测样品推（或拉）入光路,这时，便可以从显示器上得到被测样品的测试参数。 2注意事项 使用前注意预热20分钟。 空白溶液与供试品溶液必须澄清，不得有浑浊。如有浑浊，应预先过滤，并弃去初滤液。 室内无强电磁干扰源及有害气味。 仪器放置应避开有化学腐蚀气体的地方，如硫化氢、氨气等，仪器应避免阳光直射。 取洁净的吸收池时，应拿毛玻璃两面，切忌用手拿捏透光面，以免粘上油污。使用完后及时用测定溶剂冲净，再用纯化水冲净，用干净绸布或擦镜纸擦干，晾干后，放入吸收池盒中，防尘保存。在测定时或改测其它样品时，应用待测溶液冲洗吸收池（即比色皿）3～4次，用干净擦镜纸擦净吸收池的透光面至不留斑痕（切忌把透光面磨损）。 使用完毕后，及时关闭仪器，填写仪器使用记录。如发现故障请与仪器维修人员联系。
(完整版)紫外可见分光光度计--原理及使用
应用 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。我们实验室主要是用来测物质的光度以求得物质的浓度或者酶活。 基本原理 分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息，可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。 朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即 A= kcl 式中比例常数k与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度，l为透光液层厚度。 组成 各种型号的紫外－可见分光光度计，就其基本结构来说，都是由五个基本部分组成，即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。 1.光源 在紫外可见分光光度计中，常用的光源有两类：热辐射光源和气体放电光源。热辐射光源用于可见光区，如钨灯和卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯。 2．单色器 单色器的主要组成：入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。 单色器质量的优劣，主要决定于色散元件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。 3.吸收池 吸收池又称比色皿或比色杯，按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。吸收池的种类很多，其光径可在0.1~10cm之间，其中以1cm光径吸收池最为常用。 4、检测器 检测器的作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。 5、信号显示系统 常用的信号显示装置有直读检流计，电位调节指零装置，以及自动记录和数字显示装置等。
紫外可见分光光度计使用、维护保养标准操作规程
紫外可见分光光度计使用、维护保养标准操作规程 1 范围 适用于UV1000型紫外可见分光光度计使用、维护保养。 2 引用标准 《紫外可见分光光度计操作手册》 3 职责 QC使用人：负责按本规程进行操作。 4 内容 4.1 接通电源 打开仪器电源开关，仪器显示屏将进入初始化前的任务选项界面。仪器上电后，进入下图所示的界面。
等流程。仪器的设置界面如下图所示。 一般情况下，仪器上电后应首先进行仪器的基本参数设置，然后仪器按当前的设置进行自检。若测试条件不变，一般情况下可直接点击“自检”键，进入自检过程。但若用户更改了样池类型设置、语言设置，则必须在设置完成后按“C”键退出，然后切断仪器电源、重新上电启动、自检。自检过程大约需要6分钟。 若自检过程中出现“氘灯波长定位错误”，可按“C”键退出错误提示，将钬玻璃标准块插入2号样池，然后进行仪器波长校正。若样池设置为单样池，在校正过程中根据屏幕提示将钬玻璃标准块插入单样池。 自检通过后，仪器进入测试状态，主菜单如下图所示。点击菜单序列号对应的数码键，或使用键盘上的▲▼光标控制键使光标移动到相应的功能选项上,然后按ENTER键即可进入所选的功能;按C键可返回上一级目录.
主菜单中功能选项共有六项： ◎光度测量：在此功能下,可进行吸光度或透过率的测量。 ◎定量测量：包括单标样分析法、工作曲线法。 ◎光谱扫描：可进行光谱扫描，并具备相当强的的谱图分析功能。 ◎动力学测量：可进行时间扫描，并具备一定的谱图分析功能。 ◎附加功能：包含一些常用的特殊检测流程，比如DNA的检测、水质总氮的测定。 ◎历史数据库：在此功能下，可查阅或打印仪器内部存储的以往分析数据或谱图。 ◎参数设置：在此功能下，重新设置仪器参数,包括带宽、换灯点、日期时间、样池类型、界面语言等。 若用户需要重新进行仪器参数设置、自检、校正等操作，可点击主菜单左下角的“返回”功能键，进入开始界面。 4.2 定量测量 在主菜单界面上点击1号键、或使用键盘上的▲▼光标控制键将光标移动到定量测量功能选项上,随后按ENTER键便可进入如下图所示的定量测量主菜单。
紫外-可见分光光度计操作规程
紫外-可见分光光度计操作规程 (TU1810) 1．目的：制订本标准的目的是为规范检验人员在质量检验过程中的操作，保证检验结果的正确性。 2．适用范围：本标准适用于二厂检验员对产品质量的检验。 3．职责：QC检验员对本标准的实施负责。 4．程序： 4.1 简述 紫外-可见分光光度法是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射的吸收来进行分析的一种仪器分析方法。这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁，它广泛用于无机和有机物质的定性和定量分析。 朗伯—比耳定律（Lambert—Beer）是光吸收的基本定律，俗称光吸收定律，是分光光度法定量分析的依据和基础。当入射光波长一定时，溶液的吸光度是吸光物质的浓度及吸收介质厚度（吸收光程）的函数。其常用表达式为，式中为系数： A=ε·ι·C 式中A为吸光度； ε为吸收系数； C为溶液浓度； ι为光路长度。 如溶液的浓度（C）为1%（g/ml），光路长度（L）为1cm，相应的吸光度即为吸收系数以E cm%11表示。如溶液的浓度（C）的摩尔浓度（mol/L），光路长度为1cm时，
则相应有吸收系数为摩尔吸收系数，以ε表示。 4.2 仪器 紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法的原理工作的常规分析仪器。根据光路设计的不同，紫外可见分光光度计可以分为单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。 4.2.1 仪器测量条件选择 1.测量波长的选择 通常都是选择最强吸收带的最大吸收波长λmax作为测量波长，称为最大吸收原则，以获得最高的分析灵敏度。而且在λmax附近，吸光度随波长的变化一般较小，波长的稍许偏移引起吸光度的测量偏差较小，可得到较好的测定精密度。但在测量高浓度组分时，宁可选用灵敏度低一些的吸收峰波长（ε较小）作为测量波长，以保证校正曲线有足够的线性范围。如果λmax所处吸收峰太尖锐，则在满足分析灵敏度前提下，可选用灵敏度低一些的波长进行测量，以减少比耳定律的偏差。 2.适宜吸光度范围的选择 任何光度计都有一定的测量误差，这是由于测量过程中光源的不稳定、读数的不准确或实验条件的偶然变动等因素造成的。由于吸收定律中透射比T与浓度C是负对数的关系，从负对数的关系曲线可以看出，相同的透射比读数误差在不同的浓度范围中，所引起的浓度相对误差不同，当浓度较大或浓度较小时，相对误差都比较大。因此，要选择适宜的吸光度范围进行测量，以降低测定结果的相对误差。 在实际工作中，可通过调节待测溶液的浓度或选用适当厚度的吸收池的方法，使测得的吸光度落在所要求的范围内。 3.仪器狭缝宽度的选择 狭缝的宽度会直接影响到测定的灵敏度和校准曲线的线性范围。狭缝宽度过大时，入射光的单色光降低，校准曲线偏离比耳定律，灵敏度降低；狭缝宽度过窄时，光强变弱，势必要提高仪器的增益，随之而来的是仪器噪声增大，于测量不利。选择狭缝宽度的方法是：测量吸光度随狭缝宽度的变化。狭缝的宽度在一个范围内，吸光度是不变的，当狭缝宽度大到某一程度时，吸光度开始减小。因此，在不减小吸光度时的最大狭缝宽度，即是所欲选取的合适的狭缝宽度。
(完整版)紫外可见分光光度计操作规程
紫外可见分光光度计操作规程 1、目的 规范设备管理，正确使用、维护设备，防止设备事故发生，确保检测工作顺利开展。 2、适用范围 适用于TU-1810S紫外可见分光光度计的操作。 3、基本要求 3.1准备工作 3.1.1确认环境温度、相对湿度是否满足要求（要求温度为15℃～35℃、相对湿度不大于80%）； 3.1.2开机前打开仪器样品室盖，观察确认样品室无挡光物后再打开电源。 3.2启动 3.2.1打开电源，仪器显示初始化工作界面，仪器将进行自检并初始化，若初始化正常结束，系统将进入仪器操作主界面； 3.2.2仪器需进行预热使光源达到稳定后开始测量，预热时间一般为15～30分钟。 3.3运行 3.3.1选择数字键“3”→按“F1”→按“1”键选择工作模式为“标样法”→按“2”键用数字键将波长值输入，输入完成按“ENTER”键→按“3”键选择需要的浓度单位。 3.3.2继续按“F1”键进入标样法工作曲线参数设置界面→按“1”键输入标样数，输入完成按“ENTER”键→按“2”键，按照系统提示用数字键输入标样浓度，输入完成按“ENTER”键→再按“2”键，在一号池位置放置空白溶液，按“A/Z”键进行自动校零，校零结束将要测量的标样放入对应的比色池位置，按“START/STOP”键对当前测试的标样进行测量→测量结束系统提示输入下一号标样的浓度值，重复以上操作，直至标准曲线测试完成。
3.3.3按“3”键可看到标准曲线、曲线方程及相关系数，将线性方程及相关系数记录在原始记录本上，按“RETURN”键返回定量测量参数设置界面。 3.3.4按“F3”键进入试样池设置→再按“1”键选择试样池为5联池→按“2”键可利用数字键对样品池数进行设置，输入完成后按“ENTER”键→继续按“3”键选择一号池空白校正为“否”→按“4”键对移动试样池数进行设置，按“RETURN”键返回到定量测量画面→在一号池位置放入空白溶液，按“A/Z”键对当前工作波长进行零吸光度校正，将测量的样品依次放入设定的使用样品池中，按“START/STOP”键测量样品的浓度值。 3.4结束 测量结束将比色皿用去离子水冲洗干净倒置晾干，清理台面，关闭电源开关，并及时填写相关记录。 4、维护方法 4.1每次使用后应检查样品室是否积存有溢出溶液，经常擦拭样品室，以防废液对部件或光路系统腐蚀。 4.2仪器使用完毕应盖好防尘罩，可在样品室及光源室内放置硅胶袋防潮，但开机时必须取出。 4.3仪器液晶显示器及键盘日常使用时应注意防止划伤，并注意防水、防尘、防腐蚀等。 4.4定期进行性能指标检测，发现问题及时上报。 4.5长期不使用仪器时，应定期更换硅胶，每隔两星期开机运行一小时，确保仪器的正常使用。 5、安全操作注意事项 5.1操作设备时应确保环境的温度及相对湿度满足要求（温度为15℃～35℃、相对湿度不大于80%）。 5.2操作时不允许碰伤光学镜面，且不可以擦拭其镜面。 5.3仪器周围无有害气体及强腐蚀性气体，且不应该有强震动源。 5.4设备使用电源为220±10%，开机前应确认电源是否符合设备要求。 6、紧急应对措施
分光光度计说明
722可见分光光度计使用说明书 1．仪器的主要用途 722可见分光光度计能在近紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定量的的分析。仪器可广泛地应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制等部门，是理化实验室常用的分析仪器之一 2．仪器的工作环境 2．1仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5℃~35℃，相对湿度不超过85%。 2．2使用时放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈的震动或持续的震动。 2．3 室内照明不宜太强，且避免直射日光的照射。 2．4 电扇不宜直接向仪器吹向，以免影响仪器的正常使用。 2．5 尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 2．6供给仪器的电源电压为AC220V±22V，频率为50Hz±1Hz，并必须装有良好的接地线。推荐使用交流稳压电源，以加强仪器的抗干扰性能。使用功率为1000W以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器。 2．7 避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀气体的场所使7 避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐 蚀气体的场所使用。 3 仪器的主要技术指标及规格 3．1 光学系统：单束光、衍射光栅。 3．2 波长范围：330nm~800nm。 3．3 光源：钨卤素灯12V30W。 3．4 接收元件：光电池。 3．5 波长准确度：≤±2nm。
3．6 波长重复性：1nm。 3．7 光谱带宽：＜6nm。 3．8 杂散光：0.7%τ（在360nm处）。 3．9 透射比测量范围：0.0%τ~100.0%τ。 3．10 吸光度测量范围：0.000A~1.999A。 3．11 浓度直读范围：0000~1999。 3．12 透射比准确度：±1.0%τ。 3．13 透射比重复性：0.5%τ。 3．14 噪声：≤0.3%τ。 3．15 稳定性：亮电流≤0.5%τ/3min， 暗电流≤0.2%τ/3min。 3．16 电源：AC220V±22V，50Hz±1Hz。 3．17 外型尺寸：570mm×400mm×260mm。 3．18 净杂散光测量范围：18 净重：22kg。 4．仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物 质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理--比耳定律。 τ=I/I0 logI0/I=KCL A=KCL
分光光度计期间核查方法、记录表,用于实验室资质审核
分光光度计期间核查方案 1.目的： 保证检测设备量值的准确性、正确性，从而确保检测结果的稳定性、可靠性。 2.适用范围： 适用于本实验室分光光度计在使用中或修理后的期间核查。 3.职责： 检验室负责期间核查的组织实施； 办公室负责协助期间核查工作的实施。 4.内容： 4.1 通用技术要求 4.1.1 开机前，要检查电源插座是否按规定“L”接火线，“N”接零线（接大地）；使用时应避免强光照射。 4.1.2 铭牌标志清晰完整、内容翔实，各紧固件紧固良好、旋钮等开关不见工作正常、电缆线接插件能紧密配合，可调节部件无卡滞跳凸等现象。 4.2 预热仪器 按操作规程对设备通电预热20分钟后，使仪器处于正常运行状态。 4.3 进行波长示值误差与重复性 分别于313nm、412nm处以空气作空白，调整仪器透射比为100％，遮挡光后调整透射比为0％，如此数次之后即
可置入标准物质），读取吸光度测量值，重复上述步骤在波长检定点附近单向逐点测出标准物质的透射比谷值或吸光度峰值（同时记录透射比值）。连续测量3次，三次透射比谷值或吸光度峰值平均值与波长标准值之差即为波长示值误差，波长最大值与波长最小值之差即为波长重复性；三次透射比平均值与透射比标准值之差即为透射比示值误差，透射比最大值与透射比最小值之差即为透射比重复性； 五.结果评定： 以核查结果中最低级别注明仪器级别，同时参考当期检定合格证书指标，有一项指标不符合要求即判为不合格。 六.期间核查周期： 期间核查周期为一年，时间安排在分光光度计年度检定周期中间进行（一般为5月份）。 七.期间核查结果处理： 对以上检查结果，应填写“仪器设备期间核查记录”，于年底统一归档。在期间核查过程中若发现仪器工作不正常或评定指标未能达到规定要求，应及时通知设备管理员，由设备管理员组织有关人员确定，并组织维修或送检，维修后的仪器经检定或核查达到技术性能要求后方能投入使用。
紫外分光光度计的使用方法
UV2600型紫外分光光度计操作规程 一、开机 1.打开仪器电源。 2.打开电脑，点击UV Analyst 进入光谱分析软件。 3.软件将自动搜索仪器端口，点击“联机”，软件与仪器联机成功。 二、选择测试模式 根据实验需求选择测试模式。仪器提供的测试模式有“波长扫描”“时间扫描”“定点测量”“定量测量”“核酸测量”和“蛋白质测量” 【波长扫描】主要用以检测样品对一定范围波长光的吸收情况，以便对样品进行定性测量。 1.点击左侧主功能栏中的“波长扫描”即可进入波长扫描界面。 2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。 3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“基线测量”以扣除空白的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。 注意：在“基线测量”中所选择的基线必须与参数设置中基线一致！ 【时间扫描】是检测样品在特定波长范围内吸光度（或透过率）随时间的推移而发生变化情况。主要用以检测样品的稳定性或进行化学动力学研究。 1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。 2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。 3 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“基线测量”以后扣除样品空白的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。 【定点测量】是检测样品在特定波长中的吸光度（或透过率）。 1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。 2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。 3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“自动校零”，以扣除该波长中空白溶液的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“测量”，以完成样品的吸光度（或透过率）的测量。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存测量结果。 【定量测量】可通过检测标准样品或输入特定的系数建立标准曲线后测量样品的浓度值。
紫外可见分光光度计操作步骤及注意事项简介
紫外可见分光光度计操作步骤及注意事项简介操作步骤 操作之前 1.1开启电源进行初始化开启主机电源，分光光度计将按屏幕所显示的项目进行自检和初始化，如下图所示。所有项目检测完毕，初始化结束，整个过程大约需要4min（若使用多池检测需5min）。每个项目进行初始化操作时将被加亮显示，当初始化完成后，该项右边的星标也将加亮显示。但是，如果检测到任何异常，初始化过程将立即中止，星标也不会加亮显示。 1.2屏幕显示和触摸键盘UV-1700的触摸键盘图可用数字键0~9和功能键F1~F4选择不同屏幕中的模式和设置。选择时，按下相应的数字键或功能键即可，无需按ENTER键确认。此外，输入数值时，如 波长设置或显示模式等，必须按ENTER键确认输入值。 下面介绍每个键的基本功能，在不同屏幕下有一些键可能被赋予特殊的功能。 ①START/STOP键一旦参数设置完成，可用该键开始和停止测量过程。 ②AUTO ZERO键按该键，当前波长的吸光度自动调整为0（100%T）。测量前，必须确保在样品侧和参比侧中都放有盛有空白的比色池。 ③GOTOWL键该键可用来改变当前的波长。 ④ENTER键输入数值后，按该键确认。 ⑤Cursor光标键（＜（-），＞）这组键可控制液晶显示屏幕中光标的左右移动。输入数值时，左光标键还可以用来输入负值（-）。 ⑥Function功能键（F1~F4）这组键的功能与液晶显示屏幕下方所显示的功能相对应。 ⑦RETURN键按下该键可返回当前屏幕的前一屏。 ⑧MODE键用该键可从每种测量模式的参数设置屏返回到主模式屏。 ⑨Print打印键用该键可输出当前屏幕显示的硬拷贝。 ⑩Numeric数字键用该键可输入数值？CE键用该键可清除数值输入错误。按该键，已输入的数值将被清除，可重新输入正确的数值。模式选择和共享操作初始化完成后即显示模式选择屏幕
分光光度计使用方法
一、一、721型分光光度计使用方法 1．调整 （1）（1）未接电源之前，应先检查“0”和“100%”调节旋钮是否处在起始位置，如不是，则应分别按逆时针方向轻轻旋转至不能再动。电表指针 是否指“0”，如不指“0”，则应调节电表上的调整螺丝使指针指“0”。灵 敏度选择旋钮处于“1”挡（最低挡）。然后旋转波长调节旋钮，调至所需 波长。 （2）（2）开启电源开关。打开吸收池暗箱盖，此时光门关闭，调节调零旋钮，使电表指针指透过率“0”刻度，盖上吸收池暗箱盖，光门打开，调 节“100%”旋钮，使指针指透过率“100%”刻度处。然后打开吸收池暗 箱盖，仪器预热20min。 2．校正 （3）（3）将盛有空白溶液的吸收池放人暗箱中吸收池架（又叫比色皿架）的第一格内，盛待测溶液的吸收池放入其他格内。 （4）（4）盖上暗箱盖，光门打开，空白溶液正好在光路上，旋转“100%” 旋钮，使指针指透过率“100%”处，如指针达不到“100%”处，应旋转 灵敏度旋钮，使灵敏度提高一挡。再打开暗箱盖，检查指针是否指透过率 “0”刻度处。反复调节“0”和“100%”，待指针稳定，即可测定。 3．测定 （5）（5）拉出吸收池架，使待测溶液进入光路即可从电表上读出溶液吸光度值。必要时，可把吸收池架推回去，再把空白溶液置于光路上，调节“0” 和“100%”，然后再拉出吸收池架，依次测定待测溶液吸光度值。 （6）（6）换另外3份待测溶液时，空白溶液不可倒掉，应再用空白溶液调节“0”和“100%”，直到所有的待测溶液测定完为止，才可倒掉空白溶液。 4．结束 测量完毕，关闭电源，将各调节旋钮恢复至初始位置。取出吸收池洗净，晾干，存于专用盒内。 二、二、722型光栅分光光度计使用方法 1．调整 （1）（1）在接通电源前，应对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固，接地线通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源。 （2）（2）将灵敏度旋钮调至“1”档（放大倍率最小）。调波长调节器至所需波长。 （3）（3）开启电源开关，指示灯亮，选择开关置于“T”，调节透光率[100%T]旋钮使数字显示[100.0]左右，预热20min . 根据溶液浓度大小，选择液层厚度合适的吸收池。 2．校正 （！）打开吸收池暗室盖（光门自动关闭），调节[0% T]旋钮，使数字显示为“00.0”，盖上吸收池盖，将参比溶液置于光路，使光电管受光，调节透光率[100% T] 旋钮，使数学显示为“100.0”。 （2）如果显示不到“100”，则可适当增加电流放大器灵敏度档数，但应尽可能使用低档数，这样仪器将有更高的稳定性。当改变灵敏度后必须重新校正“0”和“100”。 （3）按（1）连续几次调整“00.0”和“100.0”后，如将选择开关置于“A”，调节吸光度调零旋钮，使数字显示为“.000”，即可进行下面吸光度A的测量；如将选择开关置于“C”，将标准溶液推入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示值为已知标准溶液浓度数值，即可进行下面浓度c的测量。 3．测定 （１）（１）吸光度Ａ的测量。将要测Ａ的试样溶液推入光路，显示值即为待测样品的吸光度值Ａ。 （２）（２）浓度c的测量。将要测c试样溶液推入光路，即可读出待测样品的浓度值c。