吴茱萸碱诱导人胃癌细胞SGC-7901细胞凋亡
吴茱萸碱不同加药时序对胃癌SGC7901细胞放射敏感性的影响
吴茱萸碱不同加药时序对胃癌SGC7901细胞放射敏感性的影响汉媛媛;张凯亮;高雪翔;李洁;郭琪;Juraev Firdavs;王静【摘要】在前期实验证实吴茱萸碱(Evodiamine,EVO)对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞有放射增敏的作用,为进一步研究EVO作为放射增敏剂应用的可能性,并探讨不同加药时序对放射增敏作用的影响是否有差异,采用EVO联合射线作用于胃癌SGC7901细胞探讨EVO对其放射敏感性的影响.采用MTT法检测不同时间点、浓度EVO对SGC7901细胞增殖的抑制率,并检测低浓度EVO不同加药顺序联合射线后对SGC7901细胞增殖的抑制率;克隆形成实验分析联合作用对SGC7901细胞克隆形成能力的影响,拟合存活曲线并计算各组细胞放射增敏比;流式细胞术分析EVO联合放射线作用后细胞周期分布变化;Westem blot检测凋亡相关蛋白caspase3的表达水平.通过上述实验方法得到EVO对SGC7901细胞的生长抑制作用呈时间、剂量依赖,并且不同加药顺序对细胞增殖的抑制效果不同(P＜0.05).克隆形成实验中求得联合作用组各放射剂量下的存活分数、放射生物学敏感参数均低于单独放射组,且联合作用组中先加药组的增敏效果优于后加药组(P＜0.05).流式细胞术检测EVO联合不同放射剂量使细胞周期阻滞在G2/M期的比率明显高于单独放射组及单独加药组(P＜0.05).Western blot结果提示联合作用组中凋亡蛋白caspase3的表达高于单独放射组及单独加药组(P＜0.05).综上所述,EVO对SGC7901细胞有放射增敏作用,并且不同加药顺序对放射增敏作用的影响不同,联合作用中先加药后放射的效果优于先放射后加药组,其增敏效果的作用机制可能与联合作用导致细胞G2/M期阻滞、凋亡蛋白caspase3表达增加有关.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2015(027)010【总页数】5页(P1723-1727)【关键词】吴茱萸碱;放射增敏;胃癌;细胞周期;caspase3【作者】汉媛媛;张凯亮;高雪翔;李洁;郭琪;Juraev Firdavs;王静【作者单位】兰州大学口腔医学院,兰州730000;甘肃省妇幼保健院,兰州730050;兰州大学口腔医学院,兰州730000;兰州大学口腔医学院,兰州730000;兰州大学口腔医学院,兰州730000;天津高等医学专科学校,天津300222;兰州大学口腔医学院,兰州730000;兰州大学口腔医学院,兰州730000;兰州大学口腔医学院,兰州730000【正文语种】中文【中图分类】R73胃癌是我国常见肿瘤之一，恶性程度较高，生长快，浸润性强，转移率高，预后较差［1］。
吴茱萸碱与紫杉醇协同抑制胃癌细胞的研究
Abstract： In vitro，the inhibitory effects of evodiamine，paclitaxel either alone or in combination on SGC － 7901 cells were measured by MTT assay． The effects of evodiamine / paclitaxel combination on cell cycle distribution and apoptosis of SGC － 7901 were determined by FACS can cytometer． MTT assay showed that evodiamine / paclitaxel combination could synergistically inhibit the proliferation of SGC － 7901 cells in a dose-dependent manner． Furthermore，the combination of evodiamine / paclitaxel could decrease the action concentration and result in an increase in G1 cell cycle arrest． Finally，the combination of evodiamine and paclitaxel activated the procaspase 3 /8 /9 and induced the apoptosis in SGC － 7901 cells． Key words： evodiamine； paclitaxel； synergism； gastric cancer
浅谈吴茱萸中生物碱类成分的研究进展
浅谈吴茱萸中生物碱类成分的研究进展1.吴茱萸,始载于《神农本草经》：主温中下气,止痛,咳逆寒热,除湿,血痹,逐风邪,开腠理,为芸香科植物吴茱萸Evodiarutaecarine、吴茱萸次碱rutaecarine、雷特西宁rhetsinine、二氢吴茱萸次碱dihydrorutaecaryldihydrorutaecarine、N,N-二甲基-5-甲氧基色胺N,N-dimethy-5-methoytryine、吴茱萸酰胺甲goshuyuamide-I、吴茱萸酰胺evodiamide、去甲吴茱萸酰胺NN-2-methylaminobenoyl-tryine、-carbolinehe1,2,3,4-tetrahydrol-oo--carboline。
1.2喹诺酮类生物碱吴茱萸中另一种喹诺酮类生物碱目前已知的共有16个,包括吴茱萸卡品碱evocarethy-2-undecyl-4-1H-quinolone、1-methy-2-ethyl-2-41H-quinolone、1-methyl-2-[Z-10-ethyl-2-[Z-6-ethyl-2-[6Z,9Z-6,9-ethyl-2--41H-quinolone、3-dimethylally-4-methoy-2-quinolone、1-mefilul-2-dode-cvl-4-1H-quinolone、1-methyl-2-Z-5-undecenyl-4-1H-qumolone、1-methyl-2--7-tridecenyl-4-1H-quinolone、1-methyl-2--9-ed-ecenyl-4-quinolone、2-tridecyl-4-1H-quinolone、1-methyl-2-nonul-4-1H-quinolone。
1.3其他生物碱吴茱萸中除了2.2抗肿瘤作用吴茱萸中生物碱可以诱导多种肿瘤细胞凋亡,如S,进而诱导发生阻滞的细胞凋亡而表现其抑制肿瘤作用;对HeLa细胞株则通过cas期,进而诱发细胞凋亡;对人黑色素瘤A375-S2细胞则为作用24h前启动CasP系统无关,可能涉及钙的作用,对人的肛肠括约肌作用更明显,具有一定的临床意义;此外,吴茱萸中喹诺酮类生物碱可以选择性的抑制幽门螺杆菌,作用于阿莫西林相似,有抗蠕虫作用。
吴茱萸碱诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制研究进展
吴茱萸碱诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制研究进展
刘利琼;任伟;谢丽;胡静;杨觅;钱晓萍;刘宝瑞
【期刊名称】《现代肿瘤医学》
【年(卷),期】2015(023)010
【摘要】吴茱萸碱(evodiamine,Evo)是中药吴茱萸重要的生物碱成分之一,具有良好的抗肿瘤活性.目前的研究表明,吴茱萸碱抗肿瘤作用主要通过诱导肿瘤细胞发生凋亡.本文就近几年吴茱萸碱在诱导肿瘤细胞凋亡分子机制方面的最新研究进展进行简要综述.
【总页数】4页(P1471-1474)
【作者】刘利琼;任伟;谢丽;胡静;杨觅;钱晓萍;刘宝瑞
【作者单位】南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院,江苏南京210008;南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心,江苏南京210008;南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心,江苏南京210008;南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心,江苏南京210008;南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心,江苏南京210008;南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心,江苏南京210008;南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心,江苏南京210008
【正文语种】中文
【中图分类】R73-3
【相关文献】
1.三氧化二砷诱导肿瘤细胞凋亡分子机制的研究进展 [J], 程龙强
2.中药体外诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制研究进展 [J], 陈武兵;蔡志毅
3.三羟异黄酮诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制研究进展 [J], 魏思忱;白文元
4.黄酮类化合物诱导肿瘤细胞凋亡分子机制研究进展 [J], 周晨;谢宛玉
5.小檗碱诱导肿瘤细胞凋亡分子机制研究进展 [J], 牟凤林;郝坡;肖忠华
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吴茱萸碱作用mTOR信号通路引起胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究
ｅ ｖ ｏ ｄ ｉ ａ ｍｉ ｎ ｅ ｉ ｎ ｉ ｎ ｄ ｕ ｃ ｉ ｎ ｇ ａ ｐ ｏ ｐ ｔ ｏ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｇ ａ ｓ ｔ ｉ ｒ ｃ ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ Ｓ Ｇ Ｃ 一 ７ ９ ０ １ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｔ ｈ ｒ ｏ ｕ ｇ ｈ ｍ ａ ｍ ｍａ ｌ ｉ ａ ｎ ｔ ａ ｒ ｇ ｅ ｔ ｏ ｆ ｒ ａ ｐ ａ ｍ ｙ ｃ ｉ ｎ（ ｍ Ｔ Ｏ Ｒ ）ｓ ｉ ｇ ｎ ａ ｌ ｐ ａ ｔ ｈ ｗ ａ ｙ ， ｉ ｎ
用 。吴 茱 萸 碱 及 联 合 ｚ — Ｖ Ａ Ｄ — ｆ ｍ ｋ分 别 作 用 后 ， 细胞 变 圆 ， 漂浮 于 培养 基 中 ； 与对 照 组 比较 ， ２种 处 理 方 法 均 能 抑 制 ｍＴ Ｏ Ｒ，
ｐ ７ ０ Ｓ ６ Ｋ和 ４ Ｅ Ｂ Ｐ １基 因表达 ， 存在显 著性差 异 ， 且 与吴茱 萸碱单 独作 用 比较 ， 联合 ｚ — Ｖ Ａ Ｄ － ｆ ｍ ｋ作 用对 基 因表 达抑 制率 加 强 ；
２ ．Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｅｎ ｍ ｔ ｏ ｆ Ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ Ｂ ｉ ｏ ｃ ｈ ｅ ｍ ￣ ｔ ｒ ｙ ， Ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ ｏ ｆ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ ａｂ Ｌ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｃｅ ｎ ｓ ，Ｇ ｕ ｉ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｇ ｕ ｉ ｙ ａ ｎ ｇ ５ ５ ０ ０ ４ ，Ｃ ０ ｈ ｉ ｎ ａ ）
黄连、吴茱萸诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的配比研究
黄连、吴茱萸诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的配比研究彭求贤;杨大坚;史珏;蔡红兵;莫志贤【摘要】Objective To investigate the effect of water extracts of Coptidis Rhizoma and Evodiae Fructus (CREF) on the proliferation and apoptosis of human gastric carcinoma cells (SGC-7901) and determine the optimal proportion of Coptidis rhizoma to Evodiae fructus. Methods The growth inhibition of SGC-7901 cells treated with the water extracts of CREF of varying proportions was tested with MTT assay. The cell apoptotic rate and mitochondrial membrane potential were analyzed with flow cytometry. Results The water extract of CREF with Coptidis Rhizoma: Evodiae Fructus proportions at 1:6, 2:5, 3:4, 4:3, 5:2, and 6:1 all significantly inhioited the growth of SGC-7901 cells after a 24-h or 48-h treatment (P0.05). The growth inhibition and cell death ratio both exhibited a dose-dependent pattern of Coptidis Rhizoma. Flow cytometry analysis showed that, after treatment of the cells with CREF at the proportions of 1: 6, 2:5, 3:4, 4:3, 5:2, and 6:1, the apoptotic rate w ere (8.50±1.59)%, (9.90+1.01)%,(17.15±1.68)%, (21.55±1.97)%, (34.10± 1.06)% and (34.40±1.02)%, respectively, all significantly higher than that in the control group [(1.69+1.91)%, P<0.05]. JC-1 Kit staining showed that mitochondrial membrane potential of SGC-7901 cells was decreased and the ratio of green to red fluorescence increased significantly after incubation with CREF. Conclusion CREF can inhibit the growth and induce apoptosis of SGC-7901 cells, and the strongest effect is achieved at the optimalproportion of Coptidis Rhizoma and Evodiae Fructus at 6:1.%目的探讨黄连、吴茱萸不同配比的水提物(CREF)对人胃癌细胞(SGC-7901)生长和凋亡的影响,找出两药的最佳配比.方法采用MTT比色法观察不同配比的CREF对SGC-7901细胞生长的影响.应用流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞线粒体膜电位的变化.结果 1mg/ml不同配比的CREF作用SGC-7901细胞24 h和48 h后,对细胞生长有明显抑制作用(P＜0.05),且细胞的抑制率与黄连的剂量呈正比.流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析结果显示,以1 mg/mL不同配比的CREF 1∶6、2∶5、3∶4、4∶3、5∶2、6∶1(黄连:吴茱萸)作用于SGC-7901细胞48 h后,细胞凋亡率分别为(8.50±1.59)%、(9.90±1.01)%、(17.15±1.68)%、(21.55±1.97)%、(34.10±1.06)%和(34.40±1.02)%,与对照组(1.69±1.91)%比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).JC-1染色检测结果显示,不同配比的CREF作用于SGC-7901细胞6h后,绿/红荧光比值显著降低,细胞线粒体膜电位下降.结论 CREF能明显抑制SGC-7901细胞生长并可诱导其凋亡,黄连:吴茱萸最佳配比为6∶1.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2011(031)002【总页数】4页(P226-229)【关键词】黄连;吴茱萸;配伍比率;细胞凋亡;线粒体膜电位【作者】彭求贤;杨大坚;史珏;蔡红兵;莫志贤【作者单位】南方医科大学中医药学院,广东,广州,510515;深圳市中药药学与分子药理学研究重点实验室,广东,深圳,518057;香港浸会大学系统生物学中心,香港,九龙塘;南方医科大学中医药学院,广东,广州,510515;南方医科大学中医药学院,广东,广州,510515【正文语种】中文【中图分类】R285.5黄连(Coptidis Rhizoma)和吴茱萸(Evodiae Fructus)是中医临床的常用中药,有抗溃疡、抑菌、抗炎、镇痛等药理作用，其经典配伍方剂左金丸(6∶1)和反左金丸(1∶6)具有抗胃溃疡、促进胃黏膜修复作用[1-2]，其不同配伍后疗效和临床作用也不同[3-4]。
吴茱萸碱诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制研究进展
吴茱萸碱诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制研究进展
吴茱萸碱是一种具有强烈抗肿瘤活性的天然药物，已被广泛用于临床治疗各种恶性肿瘤。
近年来，科学家们对其抗肿瘤作用的分子机制进行了深入研究，发现吴茱萸碱可以诱导肿瘤细胞凋亡，通过影响多个信号通路实现其抗肿瘤作用。
吴茱萸碱可以通过多种方式诱导肿瘤细胞凋亡，其中最常见的是通过调节细胞内的信号通路。
吴茱萸碱可以抑制蛋白激酶B （AKT）信号通路，这一通路常常被激活在多种癌症中，从而抑制癌细胞生长和增殖。
吴茱萸碱还可以通过调节线粒体信号通路，促进线粒体膜电位下降、释放细胞色素C等促进肿瘤细胞凋亡的作用。
此外，吴茱萸碱还可以通过调节细胞周期蛋白和凋亡抑制蛋白的表达，实现对肿瘤细胞的生长和增殖的抑制。
吴茱萸碱可以抑制细胞周期蛋白D1的表达，从而导致肿瘤细胞停滞在
G0/G1期，限制肿瘤细胞的复制。
此外，吴茱萸碱还可以抑制B细胞淋巴瘤/白血病-2（BCL-2）的表达，从而促进肿瘤细胞的凋亡。
吴茱萸碱的抗肿瘤作用还和细胞增殖信号通路（MAPK）的抑制有关。
吴茱萸碱可以抑制表皮生长因子受体（EGFR）信号通路、血小板衍生生长因子受体（PDGFR）信号通路等细胞增殖信号通路，从而实现对肿瘤细胞增殖的抑制。
总之，吴茱萸碱作为一种天然药物，具有较强的抗肿瘤活性。
其分子机制包括通过抑制AKT信号通路、调节线粒体信号通
路、抑制细胞周期蛋白和凋亡抑制蛋白的表达、抑制MAPK
信号通路等多个方面来诱导肿瘤细胞凋亡和抑制其生长和增殖。
未来的研究有望深化对吴茱萸碱抗肿瘤作用机制的理解，为其在临床治疗中的应用提供更加可靠的理论依据。
吴茱萸碱对SGC-7901细胞周期和细胞凋亡的影响
Ｖ０ ｌ ＿ ３ ２ Ｎｏ ． ５
长 春师 范学 院 学报 （ 自然科 学版 ）
Ｊ ｏ ｕ ｎａ ｒ ｌ ｏ ｆ Ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｃ ｈ ｕ ｎ Ｎ ｏ ｒ ｍａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ （ Ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ）
Ｐ Ｉ 凋 亡检 测试 剂 盒 ， Ｂ Ｄ公 司 。 Ｉ ． ２ 细胞 培养 人 胃癌细 胞 系 Ｓ Ｇ Ｃ一７ ９ ０ １细 胞 购 自中 国科 学 院细 胞 库 。Ｓ Ｇ Ｃ一７ ９ ０ １细 胞 用 含 １ ０ ％ 的新 生 牛 血 清 的
Ｄ ＭＥ Ｍ 培养 基 ， ５ ％ Ｃ Ｏ 、 ３ ７ ℃、 饱 和湿 度 的恒 温孵 育箱 培养 。
具有新作用机制的抗肿瘤药物的研究迫在眉睫。本研究探讨 了吴茱萸碱诱导 胃癌细胞 Ｓ Ｇ Ｃ一 ７ ９ ０ １ 的凋亡作
用 及 其机 制 。
１ 材 料 与方 法 １ ． １ 主要 试剂
吴茱萸碱 （ Ｅ ｖ ｏ ｄ ｉ ａ ｍ ｉ ｎ ｅ ） 购自Ｓ Ｉ Ｇ Ｍ Ａ公司。Ａ ｎ ｔ ｉ —Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ ３ 、 Ｂ— ａ ｃ ｔ ｉ ｎ抗体 、 辣根过氧化物酶标记 山羊抗 兔Ｉ ｇ Ｇ抗体 、 辣根过氧化物酶标记山羊抗小 鼠 Ｉ ｇ Ｇ抗体均购 自 Ｓ ａ ｎ ｔ ａ Ｃ ｒ ｕ ｚ 公司； 新生牛血清 、 Ｄ Ｍ Ｅ Ｍ培养基购 自Ｇ ｉ ｂ ｃ ｏ公 司 ； Ｐ Ｖ Ｄ Ｆ膜 （ ０ ． ２ ２ ｍ） ， Ｍｉ ｌ ｌ ｉ ｐ ｏ ｒ ｅ公 司 ； 预 染蛋 白 Ｍａ ｒ ｋ ｅ ｒ ， 购 自Ｆ ｅ ｒ ｍ ｅ ｎ ｔ ａ ｓ 公 司 。Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ—Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ ／
［ 中图分类号 ］Ｑ ７ ３ ２ ［ 文 献标识码 】Ａ ［ 文章编号 ］１ ０ ０ ８—１ ７ ８ Ｘ（ ２ ０ １ ３ ） ０ ５—石虎及梳毛吴茱 萸成熟 的果实¨ 。吴茱萸碱 （ Ｅ ｖ ｏ ｄ ｉ ａ ｍ ｉ ｎ ｅ ， Ｅ ｖ ｏ ） 是从吴茱 萸 中提取出的主要活性生物碱之一 ， 其分子式为 ｃ Ｈ Ｎ ， Ｏ 。近年来的研究表明吴茱萸碱对多种肿瘤细胞 ，
2024中考生物三模试卷(陕西卷)
2024年中考第三次模拟考试（陕西卷）生物（考试时间：60分钟试卷满分：60分）注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。
2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。
如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。
写在本试卷上无效。
3．回答第Ⅰ卷时，将答案写在答题卡上。
写在本试卷上无效。
4．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
第Ⅰ卷（选择题共25分）一、本题共25小题，每小题1分，共25分。
在每小题的四个选项中，选出最符合题目要求的一项。
1．古诗词或谚语是优秀中华文化，其中蕴含着一定的科学道理。
以下是某同学对诗词谚语中科学道理的解读，表述正确的是（）A．“近水楼台先得月，向阳花木早逢春”体现的是生物因素对生物的影响B．“碧玉妆成一树高，万千垂下绿丝绦”描述植物能繁殖C．“野火烧不尽，春风吹又生”体现了生态系统具有自我调节能力D．“螳螂捕蝉，黄雀在后”中蕴含的食物链是：蝉→螳螂→黄雀2．某科研团队进行如下实验：将某种蛙放到明亮处，体色变亮，再将它放到暗处，体色变暗。
在明亮处，若给该蛙注射褪黑色素，体色逐渐变暗，但不久后又慢慢恢复亮色。
若将此蛙的眼睛蒙住，无论放在明处还是暗处，体色均为暗色。
切除垂体后，蛙无论放在明处还是暗处，体色都保持亮色。
根据上述实验现象得出的结论不正确的是（）A．光是影响蛙体色变化的外界因素B．褪黑色素的分泌与垂体有关C．蛙体色的变化受神经系统和激素的调节D．褪黑色素使蛙体色变暗，又可使蛙体色变亮3．吴茱萸是一种中药，其主要成分为吴茱萸碱。
为研究不同浓度的吴茱萸碱对人胃癌细胞分裂活性的抑制作用效果，科研人员通过实验得到如图数据，下列分析错误的是（）A．癌细胞的细胞分裂活性高，分裂次数多而且速度快B．实验的前24小时吴茱萸碱的抑制作用效果显著增加C．72小时内随着时间的延长，吴茱萸碱的抑制作用越来越差D．72小时内随着浓度的增加，吴茱萸碱的抑制作用越来越强4．下列四组实验的相关描述正确的是（）A．该装置可用来探究温度对鼠妇分布的影响B．向两支试管中分别滴加碘液，②中液体变蓝C．试管中收集到的气体能使带火星的木条复燃D．观察动物细胞时应在载玻片的中央滴加清水来维持细胞正常形态，便于观察5．新疆棉是棉纺织品生产的重要原材料来源。
吴茱萸碱类衍生物的生物活性研究进展
和吴茱 萸 次碱 （ ｒ ｕ ｔ ａ ｅ ｃ ａ ｒ ｐ ｉ ｎ ｅ ， ２ ） （ 结构 式见 图 １ ） ， 其 具有扩张血管 、 收缩子宫 、 调节体温 、 抗 肥胖 、 抗 炎
等【 ３ 】 作用 。 近年 来 ， 吴 茱 萸 碱 因其 较 低 的 细胞 毒 性 ， 广 泛 的生 物 活 性 和 优 良的 理化 性 质 而受 到广 泛 关 注 本 文对 吴 茱 萸 碱 的生 物 活性 、 作 用 机 制 以及 抗
ｐ ｏ ｉ ｎ ｔ ｓ ） ，如 Ｄ Ｎ Ａ损 伤检 查 点 、 Ｄ Ｎ Ａ复 制检查 点 等 ，
１ 抗 肿 瘤 活 性
近 年来 ． 对 吴茱 萸碱 抗 肿瘤 方 面 的研 究 已取 得
基金项 目 国家 自然科 学基 金 （ ８ １ ３ ７ ３ ２ ８ 期 进 程 中出现 了诸 如 Ｄ Ｎ Ａ 损伤 、 外 界 刺激 信号 、 Ｄ Ｎ Ａ 复制 缺陷 等异 常 因素 时 ， 能 及 时 中断 细胞 周 期 ， 待 异 常 因 素被 清 除 后 ． 再 恢
１ ２ 陨滞 细 胞 周 期 和 抑 制 蜀 胞 增 珀
潞 妫
吴茱萸碱 （ ｅ ｖ ｏ ｄ ｉ ａ ｍｉ ｎ ｅ ， １ ） 吴茱萸次碱 （ ｍｔ ａ ｅ ｃ ａ ｒ ｐ ｉ ｎ ｅ ， ２ ）
图 １ 吴茱萸碱和 吴茱萸次碱的结构式
正 常 的 细 胞 周 期 中存 在 许 多 检 查 点 （ ｃ ｈ ｅ ｃ ｋ ．
毒 剂［ ９ １ 。 然而 ， Ｐ ａ ｎ Ｘ等㈣研究 发 现 ， 在 高浓 度吴 茱萸
碱（ １ ０ ０ ｐ ￣ ｍ ｏ ｌ ・ Ｌ ） 处 理下 ， 细胞 中依 然检测不 到 Ｄ Ｎ Ａ
吴茱萸次碱对SGC-7901细胞周期和凋亡的影响
吴茱萸次碱对SGC-7901细胞周期和凋亡的影响张元新;葛雅琨【摘要】研究吴茱萸次碱对胃癌细胞SGC-7901凋亡的影响.用不同浓度的吴茱萸次碱处理SGC-7901细胞,采用MTT法评价吴茱萸次碱对SGC-7901细胞增殖的影响;用流式细胞术检测吴茱萸次碱对SGC-7901细胞周期和细胞凋亡的影响;Western-blot检测其对caspase-3的表达影响.结果表明吴茱萸次碱激活了caspase-3,引起明显的SGC-7901细胞G2/M期阻滞和凋亡.【期刊名称】《吉林师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2013(034)004【总页数】4页(P110-113)【关键词】吴茱萸次碱;细胞周期;细胞凋亡;胃癌【作者】张元新;葛雅琨【作者单位】吉林化工学院环境与生物工程学院,吉林吉林132022;吉林化工学院环境与生物工程学院,吉林吉林132022【正文语种】中文【中图分类】Q28吴茱萸次碱(rutaecarpine，Rut)是从芸香科植物吴茱萸(Evodia rutaecarpa)中提取的有效活性成分[1].在中医中一直被用作治疗胃肠紊乱、头痛、闭经、产后出血等疾病[2-3].近年来的研究表明吴茱萸次碱具有诱人的生物活性，如抗血栓形成、抗炎、抗癌、止痛、减肥、温度调节、舒张血管等作用[4].Caspase是一组存在于胞浆中的结构相关的半胱氨酸蛋白酶，是细胞凋亡的重要调控因子[5].其中caspase-3是caspase家族的重要成员，是细胞凋亡信号通路中的关键执行因子[6].本实验中我们用不同浓度的吴茱萸次碱处理胃癌细胞SGC-7901，检测其对细胞周期和凋亡的影响，并初步探讨其诱导凋亡的机制.1 材料与方法1.1 主要试剂Rutaecarpin购自Sigma 公司；Anti-Caspase 3 抗体、β-actin抗体、Anti-Caspase 8、Anti-Caspase 9、辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG抗体均购自Santa Cruz公司；新生牛血清、DMEM培养基购自Gibco 公司；PVDF 膜(0.22 μm)，Millipore 公司；预染蛋白Marker、dNTP(10 mM)购自Fermentas公司；Annexin V-FITC/PI 凋亡检测试剂盒，BD 公司.1.2 细胞培养人胃癌细胞系SGC-7901细胞购自中国科学院细胞库.SGC-7901细胞用含10%的新生牛血清的DMEM培养基，5% CO2、37℃、饱和湿度的恒温孵育箱培养.1.3 细胞增殖实验将对数生长期的细胞SGC-7901以5×103个/孔浓度接种于96孔板中培养过夜.用吴茱萸次碱(0.000001～100 μM)处理SGC-7901细胞48 h.每个浓度3个复孔，并设空白对照和阴性对照孔.细胞加药处理后的时间点，分别加入5 mg/ml的MTT 20 μL，37℃继续孵育4 h.轻轻吸去孔内的培养基，每孔加入150 μl的二甲基亚砜(DMSO).在酶标仪中震板10 min，测定490 nm 的光吸收值.计算存活率和抑制率，公式如下：存活率=实验组OD平均值/对照组OD平均值×100%抑制率=(对照组OD平均值-实验组OD平均值)/对照组OD平均值×100%1.4 细胞凋亡与细胞周期将对数生长的细胞以每孔4×105 个接种于六孔板中，贴壁培养过夜后，按照设计的不同药物浓度(0.01～100 μM)处理细胞.在药物的作用时间点，把细胞培养液吸出至一个合适的离心管内，PBS 洗涤贴壁细胞一次，加入适量的胰酶消化细胞，37℃孵育2 min，用含血清的培养基终止消化，轻轻吹打细胞，合并在同一离心管中，但避免胰酶的过度消化.1500 rpm，离心3 min，弃上清，收集细胞，用PBS 轻轻重悬细胞并计数.1 500 rpm，离心3 min，弃上清，用1×Loading Buffer将细胞配成浓度为106 的细胞悬液.取100 μl细胞悬液分别依次加入5 μl Annexin Ⅴ-FITC和5 μl PI，轻轻混匀后置于室温下避光染色15 min.向每个染色样品中加入400 μl 1×Loading Buffer，用200目筛网过滤后即可进行凋亡测定.同时另一份样品加入预冷的1 ml 的70% 乙醇在4 ℃固定12 h以上.1500 rpm，离心3 min，弃上清，并用预冷的PBS 清洗一次，将液体尽量除尽，加入200 μl 染液(25 mg/ml RNase A 4 μl，PI 20 μl，PBS 186 μl)，37 oC孵育30 min，筛网过滤后即可用于细胞周期测定.1.5 Western-blot细胞加药处理后，用预冷的PBS洗2～3遍、计数，按2×106细胞加入含蛋白酶抑制剂的裂解液100 μl，在冰上裂解30 min，12 000 rpm,4 ℃,离心10 min，收集上清，进行蛋白定量.含50 μg总蛋白的样品溶液作为上样量，加入5×SDS Loading Buffer，然后放在金属浴中100℃煮沸10 min 使蛋白变性.经SDS-PAGE电泳、转膜后，移入用TBST 配制的含5% 脱脂奶粉的封闭液中，室温封闭1 h.加入相应的一抗、二抗孵育，用ECL发光法检测不同蛋白的表达情况.1.6 统计学分析所有实验重复3次，应用SPSS 11.0软件进行统计分析，实验结果以表示，以P<0.05具有统计学意义.2 结果与讨论2.1 吴茱萸次碱对SGC-7901细胞增殖的影响用吴茱萸次碱作用SGC-7901细胞后，其增值受到明显的抑制作用.随着浓度的增加抑制作用逐渐增强，具有明显的浓度依赖性(见图1).图1 吴茱萸次碱对SGC-7901细胞增殖的影响2.2 吴茱萸次碱对SGC-7901细胞周期的影响细胞增殖的抑制作用与细胞周期调控具有密切的关系.用流式细胞术对吴茱萸次碱作用SGC-7901细胞48 h后的细胞周期分布进行检测.结果表明，产生了具有明显浓度依赖性的G2/M期阻滞现象.当吴茱萸次碱的浓度为1 μM时，G2/M期细胞的比例为59.43±2.97%；当吴茱萸次碱的浓度为10 μM时，G2/M期细胞的比例为69.5±3.48%；当吴茱萸次碱的浓度达到100 μM时，G2/M期细胞的比例为88.89±4.44%(见图2).这种G2/M期细胞的增加也同时伴随着G1、S期细胞的不断减少.2.3 吴茱萸次碱对SGC-7901细胞周期的影响图3结果表明，吴茱萸次碱对SGC-7901细胞的抑制作用及G2/M期阻滞，直接导致了其细胞凋亡.10 μΜ的吴茱萸次碱作用48 h后，其凋亡比例为46.76±2.34%.western-blot检验结果表明，procaspase 3的表达量随着吴茱萸次碱的作用浓度的增加而逐渐下降，进而激活了caspase 3而诱导SGC-7901细胞凋亡.图2 吴茱萸次碱对SGC-7901细胞周期的作用图3 吴茱萸次碱诱导SGC-7901细胞凋亡3 结论吴茱萸次碱是一类重要的吲哚噻唑啉类生物碱，其多样的生物学活性备受科研工作者的关注和研究.近年来，吴茱萸次碱的天然资源[4]、衍生物[7-9]、合成[10-11]、代谢[12-13]及生物活性[14]研究都有稳定的发展.本文用吴茱萸次碱处理胃癌细胞SGC-7901，结果显示其具有明显的增值抑制和G2/M期阻滞作用；并激活了caspase 3，诱导细胞凋亡.本文将对吴茱萸次碱的生物活性研究和临床实验提供有效的实验数据.参考文献【相关文献】[1]JH Chu.Constituents of the Chinese Drug Wu-Chu-Yu,Evodia rutaecarpa[J].Science Record,(China) 1951,(4):279～284.[2]AL Chen,KK Chen.The constituents of Wuchuyin (Evodia rutaecarpa)[J].J.Am.Pharm.Assoc.,1933,22:716～719.[3]JF Liao,CF Chen,SY Chow.Pharmacological studies of chinese herbs (9).pharmacological effects of Evodia fructus [J].J.Formosan Med.Assoc.,1981,79:30～38.[4]Seungho Lee,Jong-Keun Son,Byeong Seon Jeong,et al.Progress in the studies on Rutaecarpine [J].Molecule,2008,13:272～300.[5]Alnemri ES,Livingston DJ,Nicholson DW,et al.Human ICE/CED-3 protease nomenclature [J].Cell,1996，87(2):171.[6]yllie AH.Apoptosis:an overview [J].Br.Med.Bull.,1997,53(3):451～465.[7]Sheen WS,Tsai IL,Teng CM et al.Indolopyridoquinazoline Alkaloids with Antiplatelet Aggregation activity from Zanthoxylum integrifoliolum [J].Planta.Medica.,1996,62:175～176.[8]Chen IS,Chen TL,Chang YL et al.Chemical Constituents and Biological Activities of the Fruit of Zanthoxylum integrifoliolum [J].J.Nat.Prod.,1999,62:833～837.[9]Li XC,Dunbar DC,ElSohly HN,et al.Indolopyridoquinazoline Alkaloid from Leptothyrsa sprucei [J].Phytochemistry,2001,58:627～629.[10]Asahina Y,Irie T,Ohta T.Synthesis of Rutaecarpine.II [J].J.Chem.Soc.,1927,543:51～52.[11]Asahina Y,Ohta T.Synthesis of Rutecarpine.III [J].J.Chem.Soc.1928,48:313～317.[12]Lee SK,Kim NH,Lee J,et al.Induction of Cytochrome P450s by Rutaecarpine and Metabolism of Rutaecarpine by Cytochrome P450s [J].Planta Medica.,2004,70:753～757.[13]Lee SK,Lee J,Lee ES,et al.Characterization of in vitro Metabolites of Rutaecarpine in Rat Liver Microsomes using Liquid Chromatography/Tandem Mass Spectrometry[J].MassSpectrom.,2004,18:1073～1080.[14]Sheu JR.Pharmacological Effects of Rutaecarpine,an Alkaloid Isolated from Evodia rutaecarpa [J].Cardiovasc.Drug Rev.,1999,17:237～245.。
吴茱萸碱抑制胃癌SGC-7901细胞生长及诱导凋亡作用的研究
吴茱萸碱抑制胃癌SGC-7901细胞生长及诱导凋亡作用的研究黄海;张筠源;刘鑫;黄韻祝;毕瑩;刘丽荣【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2010(025)012【摘要】目的观察吴茱萸碱对胃癌SGC-7901细胞凋亡的生长抑制作用,并探讨可能的分子机制.方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞,分别用0.5、1.0、1.5μmol/L吴茱萸碱及吴茱萸碱+20 μmol/L胱天蛋白酶抑制剂(Z-VAD-FMK)作用于SGC-7901细胞12、24和36 h.四唑盐(MTT)比色法观察吴茱萸碱对SGC-7901细胞增殖活性的影响.采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染细胞,流式细胞仪检测SGC-7901细胞凋亡的情况.结果吴茱萸碱能抑制SGC-7901细胞增殖,MTT结果显示具有时间和剂量的依赖性;流式细胞仪结果显示吴茱萸碱可诱导SGC-7901细胞凋亡,且随剂量和时间的增加作用增强;Z-VAD-FMK可部分抑制吴茱萸碱诱导该细胞的凋亡作用.结论吴茱萸碱能抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖并诱导其凋亡,且在加入Z-VAD-FMK后吴茱萸碱仍可诱导其凋亡,但作用减弱.该研究结果提示吴茱萸碱诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡除胱天蛋白酶途径外,还存在其他的诱导凋亡途径.【总页数】4页(P952-955)【作者】黄海;张筠源;刘鑫;黄韻祝;毕瑩;刘丽荣【作者单位】贵阳医学院医学检验系临床生化教研室,贵州,贵阳,550004;贵阳医学院医学检验系临床生化教研室,贵州,贵阳,550004;贵阳医学院医学检验系临床生化教研室,贵州,贵阳,550004;贵阳医学院附属医院生化科,贵州,贵阳,550004;贵阳医学院医学检验系临床生化教研室,贵州,贵阳,550004;贵阳医学院医学检验系临床生化教研室,贵州,贵阳,550004【正文语种】中文【中图分类】R446.1【相关文献】1.姜黄素与5-FU联用对胃癌MGC-803细胞的生长抑制与凋亡诱导作用的研究＊[J], 刘骥;徐云丹;赵刚2.新藤黄酸对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制r和诱导凋亡作用的研究 [J], 苏婧婧;侯梅;李庆林;程卉3.人端粒酶反义寡脱氧核苷酸对胃癌细胞系SGC-7901的生长抑制和诱导凋亡的研究 [J], 叶静;吴云林;乔敏敏;郭立霞;谢弘4.新藤黄酸对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的研究 [J], 苏婧婧;侯梅;李庆林;程卉;5.芹菜素对人胃癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用的研究 [J], 苑林宏;夏薇;赵秀娟;张晓华;吴坤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
吴茱萸碱抗肿瘤机制的研究进展
吴茱萸碱抗肿瘤机制的研究进展徐俊杰;杨然;杨芳景;焦鑫;刘颖斌【摘要】吴茱萸碱是从中药吴茱萸中提取的天然生物碱.除具有较强的抗炎、镇痛等作用外,吴茱萸碱还能抑制肿瘤细胞活性与增殖、阻滞细胞周期、促进凋亡、促进自噬、抑制肿瘤微血管形成以及影响肿瘤表观遗传学修饰等.相关的通路如PI3K-Akt和JAK-STAT通路以及其对生存素、血管内皮生长因子和miRNA的作用也陆续被揭示.随着吴茱萸碱相关衍生物和中药制剂不断地被合成与改进,研究人员对其抗肿瘤活性的认识逐步深入,推测其在未来具有较大的临床和药用开发价值.%Evodiamine is the natural component extracted from Euodiae Fructus.Recently,growing evidence has proved that evodiamine has great effects on suppressing cell viability and proliferation,arresting cell cycle,inducing apoptosis,promoting autophagy,inhibiting the formation of microvascular angiogenesis as well as affecting epigenetic modification in cancer.Recent studies have continuously revealed related signal pathways involved in evodiamine such as PI3K-Akt and JAK-STAT pathways,as well as the impact of evodiamine on survivin,vascular endothelial growth factor and miRNAs.With the development and synthesis of evodiamine derivatives and related herbal formulations,the understanding of antitumor activity of evodiamine is gradually deepening.The important clinical significance and market value of evodiamine can be prospected.【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2018(038)005【总页数】6页(P578-583)【关键词】吴茱萸碱;抗肿瘤活性;作用机制;衍生物;联合用药【作者】徐俊杰;杨然;杨芳景;焦鑫;刘颖斌【作者单位】上海交通大学医学院,上海200025;上海交通大学医学院,上海200025;上海交通大学医学院,上海200025;上海交通大学医学院,上海200025;上海交通大学医学院附属新华医院普外科,上海200092【正文语种】中文【中图分类】Q78中药吴茱萸（Euodiae Fructus）为芸香科植物吴茱萸、石虎或疏毛吴茱萸的干燥近成熟果实，始载于《神农本草经》，味苦、性温热，有小毒，具有散寒止痛、降逆止吐、助阳止泻的功效。
吴茱萸碱在胃肠疾病中的研究进展
吴茱萸碱在胃肠疾病中的研究进展任海霞;罗和生;唐勤彩;严淋【摘要】吴茱萸碱作为一种天然存在的吲哚生物碱,具有多种生物学活性.其能通过多种信号通路抑制胃肠肿瘤细胞增殖,通过胱天蛋白酶(caspase)或非caspase依赖的途径诱导肿瘤细胞凋亡坏死;通过抗氧化和Rho/核因子κB信号通路发挥保护胃黏膜的作用,避免胃溃疡的发生;通过调节胃肠激素缩胆囊素及脑肠肽脑源性神经营养因子的释放,调节胃肠动力;通过激活辣椒素受体参与疼痛及内脏敏感性的调节.同时,吴茱萸碱在肥胖、疼痛、炎症、心血管疾病、阿尔茨海默病、感染性疾病等方面均有不同的功效.目前,其抗肿瘤作用已较明确,未来深入探讨其在调节胃肠动力及内脏敏感性中的作用机制,将对功能性胃肠病新药的研发具有重要价值.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2018(024)016【总页数】6页(P3253-3258)【关键词】胃肠疾病;吴茱萸碱;药理;抗肿瘤【作者】任海霞;罗和生;唐勤彩;严淋【作者单位】武汉大学人民医院消化内科,武汉 430060;武汉大学人民医院消化内科,武汉 430060;武汉大学人民医院消化内科,武汉 430060;武汉大学人民医院消化内科,武汉 430060【正文语种】中文【中图分类】R573;R574吴茱萸碱是芸香科植物吴茱萸、石虎和疏毛吴茱萸的干燥近成熟果实中的主要生物碱成分，其最突出的药理学作用为抗肿瘤。
有研究证明，吴茱萸碱在呼吸系统肿瘤[1-2]、循环系统肿瘤[3]、泌尿系统肿瘤[4-5]及消化系统肿瘤[6-11]中均表现出明显的抗肿瘤作用。
在其他慢性疾病中，吴茱萸碱能通过表皮生长因子受体-蛋白激酶C-α-细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)途径抑制脂肪细胞分化，从而达到降低体质量、控制血糖的目的[12-13]；能在翻译水平通过介导蛋白激酶B(protein kinase B，PKB/Akt)和p70核糖体蛋白S6激酶的磷酸化抑制缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α)产生，下调环加氧酶2水平，从而拮抗缺氧诱发的炎症[14]；能抑制雄性大鼠束网状带细胞类固醇激素的产生[15]，具有增强正性肌力的作用[16]。
小檗碱诱导人胃癌细胞凋亡与调控基因表达的实验研究
小檗碱诱导人胃癌细胞凋亡与调控基因表达的实验研究姚保泰;吴敏;王博【期刊名称】《成都中医药大学学报》【年(卷),期】2005(28)1【摘要】目的探讨黄连的主要有效成分小檗碱诱导人胃癌细胞凋亡与调控基因表达水平。
方法以人胃腺癌细胞株SGC - 790 1为实验模型,用盐酸小檗碱大(8μg/mL)、小(4μg/mL) 2个剂量组进行干预,采用光镜、扫描电镜、流式细胞仪对凋亡细胞进行定性与定量检测,逆转录多聚酶链式反应(RT -PCR)检测胃癌细胞中P53和Bcl- 2的mRNA表达水平。
结果小檗碱8μg/mL作用72h ,电镜下出现凋亡小体;4 μg/mL、8μg/mL作用72h ,流式细胞仪DNA直方图出现典型的亚二倍体峰;4 μg/mL作用72h ,Bcl- 2基因表达水平降低,野生型P53基因表达水平升高;8μg/mL作用72h ,Bcl - 2基因不表达,野生型P53基因表达水平显著升高。
结论小檗碱能诱导胃癌细胞凋亡,其机理主要为下调Bcl - 2基因的表达,上调野生型P53基因表达。
【总页数】3页(P39-41)【关键词】小檗碱;野生型P53基因;人胃癌细胞;诱导;凋亡;Bcl-2基因;表达水平;定性与定量;下调;作用【作者】姚保泰;吴敏;王博【作者单位】山东中医药大学附属医院;山东中医药大学【正文语种】中文【中图分类】R735.2;R743【相关文献】1.盐酸小檗碱对人胃癌细胞凋亡与P53、Bcl-2基因表达水平的影响 [J], 姚保泰;吴敏;王博;王世军;陈宪海;王伟明;刘冬梅2.非甾体抗炎药对胃癌细胞凋亡的诱导及相关基因表达的调控 [J], 吴叔明;张燕捷;朱红音;沈冠凤;李恩灵;罗鸿予;萧树东3.端粒酶逆转录酶基因启动子调控FADD表达载体诱导人结肠细胞凋亡的研究 [J], 张险峰;江应安;印安宁;罗和生;王卫星4.化疗药物诱导人胃癌细胞凋亡及Bcl-2、Bax基因蛋白表达变化的研究 [J], 李勇;潘立峰;赵群;刘冀红;范立桥;刘品一;马志学;于跃明5.盐酸小檗碱对实验性大鼠胃癌前病变细胞凋亡及生存素基因表达的影响 [J], 姚保泰;吴敏;刘敏;王博因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
矿产
矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。
如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。
㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。
(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。
如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。
对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。
二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。
2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。
㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。
2、矿产品价格稳定性及变化趋势。
三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。
2、矿区矿产资源概况。
3、该设计与矿区总体开发的关系。
㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。
2、矿床开采技术条件及水文地质条件。
吴茱萸碱诱导不同起源的白血病细胞凋亡的研究
吴茱萸碱诱导不同起源的白血病细胞凋亡的研究董瑞红;陆志刚【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2011(27)10【摘要】Objective To explore the roles of evodiamine in leukemia cell lines K562, Raji, and Jurkat.Methods CCK-8 was used to detect the inhibition rate of the cell lines. We detected cell apoptosis, level of ROS,and cell cycle by flow cytometry. Results Evodiamine effectively inhibited the proliferation of K562, Raji, and Jurkat cells in a dose- and time-dependent manner. The concentration to induce 50％ inhibition of cell number (IC50)a t 48 h was 17.84 μ mol/L for K562,27.49 μmol/L for Raji an 18.89 μmol/L for Jurkat cells. After being treated by evodiamine, All the cells were arrested in G2/M phase; intraellular reactive oxygen species (ROS) levels and the rates of apoptosis and death increased in a dose-dependent manner. Conclusions Evodiamine inhibites the proliferation of leukemia cells from different origins.%目的:探讨吴茱萸碱对白血病细胞株K562、Raji、Jurkat的作用.方法:采用CCK8试剂盒检测药物对细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率、死亡率及胞内ROS水平.结果:昊茱萸碱对K562、Raji、Jurkat细胞均有抑制作用,并呈时效量效关系.作用48 h的IC50值分别为K562细胞17.84μmol/L,Raji细胞27.49μmol/L,Jurkat细胞18.89μmol/L.吴茱萸碱作用后三种细胞阻滞在G2/M期,凋亡率、死亡率及胞内ROS水平随着药物浓度增加而增加.结论:吴茱萸碱对不同起源的白血病细胞均有抑制增殖的作用.【总页数】3页(P1722-1724)【作者】董瑞红;陆志刚【作者单位】510282,广州市,南方医科大学珠江医院血液科;510282,广州市,南方医科大学珠江医院血液科【正文语种】中文【相关文献】1.吴茱萸碱诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡及机制研究 [J], 张弦;金晓滢2.吴茱萸碱诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡机制的实验研究 [J], 张辉;吕家驹;丁森泰;张捷;赵跃然3.吴茱萸碱诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制研究进展 [J], 刘利琼;任伟;谢丽;胡静;杨觅;钱晓萍;刘宝瑞4.吴茱萸碱抑制Wnt通路诱导人胰腺癌细胞凋亡和自噬的作用研究 [J], 王强;王志敏5.吴茱萸碱抑制NOD1通路诱导肝癌HepG2和SMMC-7721细胞凋亡 [J], 郭星娴;李晓朋;吕晓婷;陈益;周鹏;吕艳伟;李静;陈地龙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
吴茱萸碱对人胃癌SGC7901细胞增殖、侵袭的影响及机制探讨
吴 茱 萸 碱 对 人 胃癌 Ｓ Ｃ ９ １细胞 增 殖 、 Ｇ ７０ 侵 袭 的影 响及 机 制探 讨
祁 卫 东 ， 永静 。 周 范 钰’
（ 江苏大学附属人民医院， 江苏镇 江 ２ ２０ ） １０２
摘要 ： 目的
观察吴茱萸碱对 胃癌细胞增 殖、 侵袭的影响 ， 并探讨其机 ｆｅ ｏ ｉ ｍ ｉｅ ｏ ｎ ａ ｉ ｎ ａ ｄ ｐ ｏ ｉ ｒ ｔ ｎ ｉ ｕ ｆ ｃ ｓ ｏ ｖ ｄ ａ ｎ ｎ ｉｖ ｓｏ ｎ ｒ ｌｅ ａ ｉ ｎ ｈ ｍａ ａ ｔ ｃ ｃ ｎ ｅ ｅ Ｉ ｆ ｏ ｎ ｇ ｓ ｒ ａ ｃ ｒｃ ｌ ｉ
Ｗｅ一 ｉ ，ＺＨ ＯＵ ０ ｇ ｎ ， ｙｎ ｇ ＦＡＮ ｕ Ｙ
Ｓ Ｃ９ １ Ｇ ７０ 经吴
理人 胃癌 细胞 Ｓ Ｃ ９ １用软琼脂集落培养试 验检测癌细胞增殖情况 ，ｏｄｎ小室检测癌细胞 侵袭 能力 ； Ｇ ７０ ， Ｂ ｙｅ 分别采用 荧光 实时定量 Ｒ —Ｃ ＴＰ Ｒ法和 Ｗｅｔ ｌ 法检测癌 细胞 中的中期 因子 （ ｓ ｒ ｂｏ ｅ ｎ ｔ ＭＫ） Ｎ ｍＲ Ａ及其蛋 白。结果 ＭＫ ｍ ＮＡ及蛋 白表达均 明显下调 ， Ｒ 且呈时 间、 浓度依赖性 （ Ｐ均 ＜ ． １ 。结论 ００ ） 增殖及侵袭能力 ， 其机制可能与下调 ＭＫ基 因表达有关 。 关键词 ： 胃肿瘤 ； 吴茱萸碱 ； 侵袭 ； 中期 因子
ａ ｓｙ ｒｓ ｅ ｔ ｅｙ ｓ ａ ， ｅ ｐ ｃｉ ｌ ．Ｒｅ ｕ ｔ Ｅｖ ｄ ａ ｎ ｏ ｌ ｉｎ ｆ ａ ｔ ｎ ｉｉ ｂ ｔ ｉｖ ｉ ｎ ｂ ｉ ｔ ｎ ａ ｃ ｏ ａ ｅ ｉ ｄ ｐ ｎ ｅ ｃ ｖ ｓ ｌｓ ｏ ｉｍｉ ｅ ｃ ｕ ｄ ｓｇ ｉ ｃ ｎ ｌ ｉ ｈ ｂ ｔ ｏｈ ｎ ａ ｏ ａ ｌ ｙ ａ ｄ ｎ ｈ ｒ ｎ ｅ ｉ ｙ ｓ ｉ ｇ ｅ ｄｎｅ
矿产
矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。
如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。
㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。
(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。
如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。
对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。
二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。
2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。
㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。
2、矿产品价格稳定性及变化趋势。
三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。
2、矿区矿产资源概况。
3、该设计与矿区总体开发的关系。
㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。
2、矿床开采技术条件及水文地质条件。
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活率 ； 光镜 观 察 细胞 形 态学 改 变 ； 式 细 胞 术 测 细胞 凋 亡 ； 式 细胞 仪 检 测 线 粒 体 膜 电 位 ． 果 显 示 ， 流 流 结 吴 茱 萸碱 能 抑 制 胃癌 细胞 Ｓ Ｃ一 ９ １的 生 长． Ｉ法 测得 吴 茱 萸 碱 的 Ｉ 为 ３ １ ｇ ｍ ． 光 镜 下 Ｇ ７０ Ｍｒ ＇ Ｉ Ｔ ｃ ．５ ／ Ｌ 在 观 察 药 物 作 用 ２ 细 胞 生 长 密度 逐 渐 变疏 ， 胞 变 小 ， 面起 皱 ， ４ｈ的 细 表 高质 量 浓 度 组 大 部 分 细 胞 破 碎 ． 流 式 细 胞 仪检 测 ， ２ 、０ ５ ２ ５ １２ 用 ０ １ 、 、． 、． ５ ｍＬ质 量 浓度 的 吴 茱 萸碱 作 用 ４ ８ｈ均 出现 亚 二 倍 体 凋 亡 ｍ Ｌ的 吴 茱 萸碱 作 用 ４ 后 线粒 体 膜 电位 显 著提 高 ． ８ｈ 提
第２卷ห้องสมุดไป่ตู้第５ ６ 期
２１ 年 １ 月 ００ ０
哈 尔 滨 商 业 大 学 学 报 （自然科 学版 ）
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆＨａｂｎＵ ｉｅｓ ｙｏ ｏ ｏ ｒ ａ ｏ ｒ ｉ ｎｖ ｒｉ ｆＣ ｍｍｅｃ Ｎａｕ ａ ｃｅ ｃｓ ｄｔ ｎ ｔ ｒｅ（ ｔｒｌ ｉ ｅ ｉｏ ） Ｓ ｎ Ｅ ｉ
阴性对 照组 ， 每组 均 设 ６个 平行 孔 ． 同培 养 ７ 共 ２ｈ
并分离的生物碱达 ２ ０多种 ， 其中吴茱萸碱、 去氢吴 茱 萸碱和 吴茱 萸次 碱 被认 为是 总 生物 碱 的主 要 药 效 成分 ， 均属 同一 类 生物 娥 吴 茱 萸碱 经 药 理 活性
实 验研究 表明具 有 明显细胞 损伤 作用 ， 强心 ， 镇痛 ， 降 压 ， 菌和收 缩子 宫 的作 用． 国学 者 发现 吴茱 抗 韩 萸 提取物 有抗胆碱 醋酶 活 洼 ， 日本 学者 用吴茱 萸碱 作 用于 Ｂ ６一ＦＯ肿瘤 细胞 株 ， １ Ｉ 发现 其 有 明显抗 侵
Ｒｅ ｅ ｒ ｈ Ｃｅ ｔｒ，Ｈａｂｉ ５０ ７６，Ｃｈｉａ；２． Ｍ ＯＥ ｇｎ ｅｉ ｓ ａ ｃ ｎｅ ｆＮａｕｒ ｌＡｎ ｉａ ｃ ｒ ｓ ａｃ ｎｅ ｒ ｎ１ ０ ｎ Ｅｎ ｉｅ ｒｎｇ Ｒｅ ｅ ｒ ｈ Ｃｅ ｔｒｏ ｔ ａ ｔｃ ｎ ｅ
Ｄ ｕｓ ａ ｉ Ｕ ｉ ｒｔ ｏ Ｃ ｍｍ ｒｅ ａ ｉ １０７ ， ｈｎ ） ｒｇ，Ｈ ｒ ｎ ｎｖ ｓｙ ｆ ｏ ｅ ，Ｈ ｂｎ ５０ ６ Ｃ ｉａ ｂ ｅ ｉ ｃ ｒ
ｄ ｓ ｒ ｓ ｄ ｔ ｒ ｕ ｈ ｔｅ ｌｇ ｃ ｏ ｃ ｐ ｅ ｏ ｉｍｉ ｅ ｈ ｐ ｄ ｐ ｏｄ ａ ｐ ａ ｅ ｆｅ ｒ ａ— ｏ ｅ ｃ ｕ ｈｅ ｈ ｏ ｇ ｈ ｉｈｔｍｉｒ ｓ ｏ ｅ， ｖ ｄ ａ ｎ ｙ ｏ ｉ ｌｉ ｐ ｅ ｒｄ ａｔｒ４８ ｈ ｔｅ ｔ
ｌ ｗ ｙｏ ｔｙ． ｅ ｒ ｓ ｌｓｓ ｏ ｔ ａ ｖ ｄａ ｎ ａ ｎｈｂ ｔｔ ｒ ｗｔ ｆｇ ｓｒ ａ ｃ ｒｃ ｌ ｆｏ ｅ ｔ ｍｅｒ Ｔｈ ｅ ｕ ｔ ｈ ｗ ｈ ｔｅ ｏ ｉｍｉ ｅ ｃ ｎ ｉ ｉｉ ｈｅ ｇｏ ｈ ｏ ａ ｔ ｃ ｃ ｎ ｅ ｅｌ ｉ
示吴 菜 萸碱 通 过 诱 导 胃癌 细 胞 Ｓ Ｃ一 ９ １的 凋 亡 ， 达 到抗 肿 瘤作 用 ． Ｇ ７０ 而
关键 词 ： 茱 萸碱 ； 胞 凋 亡 ； 粒 体 膜 电 位 ； 吴 细 线 胃癌
中 图 分类 号 ：２ ５ Ｒ ８
文 献 标 识 码 ： Ａ
文 章 编 号 ：６２— ９６ ２ １ ）５— ５ ４— ４ １７ ０ ４ （０ ０ ０ ０ ２ ０
（ ．Ｐ ｓ ｏ ｔ ａ Ｐ ｏ ｍ ｆ ｎ ｔｕ ｆ ｔ ｉ Ｍｅ ｉ ，Ｌ ｅＳ ｉ ｃｓａ ｄ Ｅ ｖ ｏ ｍｅ ｔ ｃ ｎ ｅ １ ｏｔ ｃ ｒｌ ｒ￣ａ ｍｅｏ Ｉｓ ｔｔ ｏ ｅ ａ ｄ ａ ｉ ｃｅ ｅ ｎ ｎ ｉ ｎ ｎ ｌ ｉ ｃ ｓ ｄ ｏ ｉ ｅ Ｍａ ｒ ｃ ｆ ｎ ｒ ａＳｅ
２ ２ Ｍ Ｔ测细胞 生 长 ． Ｔ
取对数生长期的细胞 ， 消化 ， ００ｒ ｍ ｎ １ ０ ｉ 离心 ／ ５ｍｉ， １×１。爪／ Ｌ接 种 于 ９ ｎ以 ０ ｍ ６孔 培 养 板 中 ，
１０ Ｌ 孔 ， 养 ２ ０ ／ 培 ４ｈ后 ， 入 不 同 质量 浓 度 的 吴 加 茱萸碱 （ Ｖ ； Ｅ Ｏ） 同时设 阳性 对照 组 （ 羟基 喜树 碱 ） ，
ａｅ ２ ２ ％ ， ２ ２ ６％ ， ２ ５ ｒ ７． ７３ ４． ０ ０． ７５％ ， １ ５ ０％ ， １ ３ ％ ９． ２ ８． ６１
ｍ ｅ ｂ ａ ｏｅ ｔ ｌａ ｅ ２ ２％ ，３１ ３ ，４ ４％ ，５ ７％ ，６ ３％ ｒ ｓ ｅ ｔｖ ｌ ｔｒ４ ｍ ｒｎｅ ｐ ｔ ｎ ｉ ｒ ３． ａ ．％ ２． ０． ９． ｅ ｐ ｃｉｅ ｙ ａ ｅ ８ ｈ ｆ
Ａｂ ｔ ａ ｔ： ｎ ｅ ｔ ａｅ ｔ ｅ ｇｏ ｈ ｎ ｉ ｉｉ ｇ ａ ｄ ａ ｏ ｔ ｓｓ ｅｆｃ ｆ ｅ ｏ ｉ ｍｉ ｅ ｏ ａ ｔ ｃ ｓｒ ｃ Ｔｏ ｉ ｖ ｓｉ ｔ ｈ ｒ ｗｔ ｉｈ ｂ ｔｎ ｎ ｐ ｐ ｏ ｉ ｆｅ ｔｏ ｖ ｄ ａ ｎ ｎ ｇ ｓｒ ｇ ｉ ｃ ｎ ｅ ｅｌＳ ａ ｃ ｒ ｃ ｌ ＧＣ一７ ０１ Ｔ ｅ ｓ ｒ ｉａ ａｅ ｉ ａ ｕ ｅ ｙ ＭＴＹ；ｍｏ ｐ ｏ ｏ ｉ ｈ ｎ ｅ ｒ ｂ ９ ． ｈ ｕ ｖｖ ｌｒ ｔ ｓｍｅ ｓ ｒ ｄ ｂ ｒ ｈ ｌｇ ｃ ｃ ａ ｇ ｓａ ｅｏ — ｓ ｒ ｅ ｙ ｌｇ ｔｍｉｒ ｓ ｏ ｙ；ａ ｏ ｔ ｓｓａ ｄ ｍｉ ｃ ｏ ｄ ｉｌｍｅ ｒ ｎ ｏ ｅ ｔａ ｒ ｅｅ ｔ ｄ ｂ ｅ ｄ ｂ ｉｈ ｃｏ ｃ ｐ ｖ ｐ ｐ ｏ ｉ ｎ ｔ ｈ ｎ ｒａ ｍｂ ａ ｅ ｐ ｔｎ ｉｌａ ｅ ｄ ｔ ｃｅ ｙ ｏ
Ｒｅ ｅ ｒ ｈ ｏ ａ ｔｉ ａ ｅ ｅ ｌＳＧＣ —７ ０１ ｓ ａ ｃ ｎ ｇ ｓｒ ｃ ｃ ｎｃ ｒ ｃ ｌ －９
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３［３ ＬＮＣａ ４ ３ Ｐ＿Ｊ
，
人急性 白血病 Ｃ Ｒ Ｃ Ｍ ５ Ｃ Ｆ— Ｅ 和鼠 纤维 肉瘤 Ｌ２ ＿ ， 胃癌 ＭＧ ０ ］ 人 耐 药 乳 ９９６ 人 Ｊ Ｃ８３７及 Ｅ
腺癌 Ｎ ＩＡ Ｒ—Ｒ Ｓ ８等 细胞 系 的 生 长 ． 未 见 Ｃ／ Ｄ Ｅｌ 但 对人 胃癌 Ｓ Ｃ一 ９ １细 胞 影 响 的报 道 ， 研 究 主 Ｇ ７０ 本
Ｓ ＧＣ 一７ ０１． ｅ Ｉ ｏｏ ｖ ｄ ａ ｎ ｓ３． ５ ９ Ｔｈ Ｃ５ ｆｅ ｏ ｉｍｉ ｅ ｉ １
ｍＬ ｂ ｙ ＭＴｒ． ｔｅ ４ ｈ ｏ ｒ ａｍｅ ｔ ｇ ｏ ｈ Ａｆ ｒ２ ｆｔｅ ｔ ｎ ， ｒ ｗｔ
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死亡率， 求取半数抑制质量浓度 （ ． Ｉ。 Ｃ）
２ ３ 光镜 观察 细胞 形态 学改变 ．
有报道吴茱萸碱体外能明显抑制人黑色素瘤 ＨＬ ＿、 ｅａ 人前列腺癌 ｐ ２ Ｊ ｃ一
、
取对 数生 长 期 的人 胃癌 Ｓ Ｃ一７０ Ｇ ９ １细 胞 ， 调 整 细胞 浓 度 为 １Ｘ１。个／ ０ ｍＬ接 种 于 培 养 瓶 中 ，
峰 ， 亡率 分 别 为 ２ ．７ ％ 、４ ２６ 、０ ５５ 、９ ５ ０ 、８ ３ １ ． 式 细 胞 仪 测 线 粒 体 膜 电位 。 凋 ７２ ３ ２ ．０ ％ ２ ．７ ％ １ ．２ ％ １． ６ ％ 流
用质 量 浓 度 ２ ５ １２ 、．２ 、． １ 、．５ ． 、．５ ０ ６５ ０ ３３ ０ １２
收稿 日期 ：０ ０—０ ２１ ８—１ ． ９
作者简介 ： 张
鑫（ ９５一 ， ， １ ８ ） 女 硕士 ， 研究方 向： 药理学 肿瘤
第 ５期
张
鑫， ： 等 吴茱萸碱诱导人 胃癌细胞 Ｓ Ｃ一 ９ １ Ｇ ７ ０ 细胞 凋亡
・２ ５５・
吴茱萸 始 载 于 《 农 本 草 经 》， 苦 ， 寒 ， 神 味 性 具 有散寒 止痛 ， 降逆 止呕 ， 助阳 止泄之功 ． 主要 活性 其 成 分为 吴茱萸 总生物 碱 ， 文献报 道从 吴茱萸 中提取
ｔ ａｍｅ ｔ ｆｅ ｏ ｉｍｉ ｅ ｗ ｔ ． １ ２ ０ ６ ５， ． １ ０ １ ２ ｐ ／ ｙ ｆ ｗ ｃ ｔｍｅ ｒ ． ｒ ｔ ｎ ｖ ｄ ａ ｎ ｉ ２ ５， ． ５， ． ２ ０ ３ ３， ． ５ ． ｍＬ ｂ ｏ ｙ ｏ ｔ ｅ ｏ ｈ ｇ ｌ ｙ
Ｇａ ｔ ｃ ｃ ｎ ｅ ｅｌＳ ｓｒ ａ ｃ ｒｃ ｌ ＧＣ —７９ ａ ｏ ｔ ｓｓｉ ｎ ｕ ｅ ｙ ｅ ｏ ｉｍｉ ｅ ａ ｄ ｔｅ ｍｅ ｈ ｎ ｓ ｏ ｎ－ ｉ — ０１ ｐ ｐ ｏ ｉ ｓｉ ｄ ｃ ｄ ｂ ｖ ｄａ ｎ ｎ ｈ ｃ ａ ｉｍ ｆａ — ｔｔ ｉ ｕｍｏ ｒ ｍａ ｂ ｎ ｕ ｔ ｎ ｏ ｕｍｏ ｅｌａ ｏ ｔｓｓ ｕ ｙ ｅ ｉ ｄ ｃｉ ｆｔ ｏ ｒｃ ｌ ｐ ｐ ｏ ｉ． Ｋｅ ｒ ｙ ｗｏ ｄｓ： ｖ ｄａ ｎ ；ａ ｏ ｔ ｓｓ；ｍｉｏ ｈ ｎ ｒａ ｍｂ ａ ｅ ｐ ｔ ｎ ｉｌ ａ ｔｉ ａ ｃ ｒ ｅ ｏ ｉｍｉ ｅ ｐ ｐｏｉ ｔｃ ｏ ｄ ｉｌｍｅ ｒ ｎ ｏｅ ｔ ；ｇ ｓｒｃ ｃ ｎ ｅ ａ
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