第九章维生素类药物分析

1、具紫外吸收 2、易氧化变质 3、能与三氯化锑呈色 4、水中不溶。
第一节 维生素A的分析
二、鉴别试验
1. 三氯化锑反应
VA 蓝色 → 紫红色 CHCl
SbCl3
3
2. 紫外吸收光谱
VA的无水乙醇溶液在328nm有最大吸收。 3、TLC
第一节 维生素A的分析
例：VA和其标准品用环己烷溶解 展开剂：环己烷—乙醚（80：20） 板：硅胶G 显色：SbCl3T.S. Rf： VA 醇 0.08 VA 醋酸酯 0.41 VA棕榈酸酯 0.75
第一节 维生素A的分析
A300 A316 A328 A340 A360 ：0.354 ：0.561 ：0.628 ：0.523 ：0.216
A300 /A328 A316/A328 A328/A328 A340/A328 A360/A328
Ai A 328
：0.555 ：0.907 ：1.000 ：0.811 ：0.299
换算因数
IU / g （纯品）
1% E1cm （纯品）
1IU=0.344g全反式维生素A醋酸酯 1g的维生素A醋酸酯就相当于
1,000,000 2,907 ,000 IU 0.344
% 1530（环己烷、 维生素A醋酸酯 E1cm
328 ）
第一节 维生素A的分析
2907000 换算因子 1900 1530
H3C N N NH2 CH2 N+ S CH2CH2OH
. Cl-.HCl
CH3
1、水中溶解 2、具紫外吸收 3、碱性中可被氧化 4、两个杂环与生物碱沉淀试剂反应
第二节 维生素B的分析
二、鉴别试验： 1、硫色素反应：
维生素B1 铁氰化钾 硫色素
荧光消失 2、沉淀反应： 沉淀试剂：碘化汞钾、三硝基酚、碘溶液、硅钨酸 H+ 正丁醇 蓝色荧光
A325校正 6.815 A325 2.555 A310 4.260 A334
A325 （校正） A325 A325
100%
效价（IU / g） E1cm 换算因数 1%
第一节 维生素A的分析
制剂 —— VitA胶丸的含量计算
平均丸重 标示量% 效价（IU/g ） 100% 标示量
第一节 维生素A的分析
a. 操作方法
在波长300、310、325、334nm处测定吸收度， 找出λmax 。 d. 判断 max不在323~327nm或A300/A325大于0.73， 先纯化后再测定。
第一节 维生素A的分析
max在323~327nm之间且A300/A325小于或等于 0.73 ，则进行校正 c.校正公式
平均丸重 1% E1cm 换算因数 100% 标示量
A 平均丸重 换算因数 100% c 标示量
A 换算因数 平均丸重 100% W 稀释度 100 标示量
第一节 维生素A的分析
第一法 第二法
测定对象 维生素A醋酸酯
方法
维生素A醇
直接取样，测定 皂化提取，测定
CH3
CH3
CH3 CH3
VE
CH3
CH3
CH3 CH3
生育酚
1、水中不溶 2、紫外吸收 3、水解成游离生育酚
第四节 维生素E的分析
名 称 R1 CH3 CH3 H H R2 CH3 H CH3 H 生物活性 1.0 0.5 0.2 0.1
α-生育酚 β-生育酚 γ-生育酚 δ-生育酚
第四节 维生素E的分析
4、哪些描述适合VitA结构及性质 A、分子具有长二烯醇侧链，易被氧化
B、具有较长的全反式共轭多烯结构
C. 含酯键，经水解后产生苯并二氢吡喃衍生
物，易被氧化 很快转变为紫红色
E、样品用无水乙醇溶解后，加硝酸加热后，
D. 与三氯化锑的无醇氯仿液中呈不稳定兰色，
呈橙红色
5、中国药典（2000年版）规定维生素 A的测定采用紫外分光光度法（三点校
第一节 维生素A的分析
三、含量测定 紫外分光光度法（三点校正法） 本法是在三个波长处分别测定吸收度，根据校 正公式计算吸收度A校正值后，再计算含量，故本 法亦称“三点校正法”
（一）“三点校正法”测定原理 1、杂质的吸收在310～340nm波长范围内呈一条 直线，且随波长的增大而吸收度变小
第一节 维生素A的分析
第三节 维生素C的分析
一、结构及性质：
CH2OH 6 H C5 OH O
4 3 2 1
O OH
HO
1、水中溶，水液酸性 2、具糖的性质 3、二烯醇结构易氧化 4、四个光学异构体 5、紫外吸收
第三节 维生素C的分析
二、鉴别试验：
1、与硝酸银反应： AgNO3 VC Ag （黑色） 2、与2、6-二氯靛酚反应
（2）计算吸收度比及比值差 吸收度比值
Ai 吸收度的比值差 A 328
Ai 规定值 A328
（3）计算校正吸收度
A328校正 3.522 A328 A316 A340
A328 （校正） A328 A328
100%
第一节 维生素A的分析
（4）换算因数
% 定义：每一个E1cm 数值所相当的效价
第一节 维生素A的分析
a. 操作方法
环己烷 样品 配制成 9 ~ 15IU ml规定波长处 测A
溶解
规定波长：300、316、328、340和360 b. 计算方法 （1）最大吸收波长确认 max 在326~329nm，第一法测定。
max 不在326~329nm，第二法测定。
第一节 维生素A的分析
B、杂质在310～340nm波长范围内呈线性吸收
C、物质对光吸收具加和性
D、维生素A与三氯化锑的无水氯仿溶液作用，
产生不稳定蓝色
E、维生素A在碱性溶液中，可被铁氰化钾氧
化生成具有蓝色荧光的硫色素
8、能发生硫色素特征反应的药物
A、维生素A B、维生素B1
C、维生素C
D、维生素E
E、烟酸
9、既具有酸性又具有还原性的药物
2、物质对光的吸收具有加和性即样品各波长的吸收 度是维生素A与杂质吸收度的代数和 （二）测定方法 第一法 测定维生素A醋酸酯 等波长差法
等波长差法：两个波长分别在1两侧12nm处， 1=328nm; 2 =316nm; 3=340nm
A328校正 3.522 A328 A316 A340
A 328校正 1900 平均丸重 标示量% 100% C(g / 100ml ) 标示量 0.605 1900 0.08262 100% 2 1 10000 0.2399 100 250 20 99.0%
第二节 维生素B的分析
一、结构与性质： vb1(盐酸硫胺)：两个碱性基团，可与酸成盐。
正法），此法又称为
A、等波长差法 B、等吸收度法 C、6/7A法 D、差示分光光度法
E、双波长分光光度法
6、维生素A的鉴别试验为
A、三氯化铁反应 B、硫酸锑反应
C、2,6-二氯靛酚反应
D、三氯化锑反应
E、间二硝基苯的碱性乙醇液反应
7、用“三点校正法”测定维生素A含量的依据是 A、维生素A可见光区有最大吸收
第九章 维生素类药物分析
应用化学教研室 孟小华
按溶解性分类
脂溶性维生素： VA、VD、VE、VK等
水溶性维生素： B族（VB1、VB2等）、VC 、 烟酸、叶酸、泛酸等
第一节 维生素A的分析
维生素A在自然界中主要来自鱼肝油 一、结构及性质：
CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH2OR
R—H 维生素A醇 R—COCH3 维生素A醋酸酯
是 A、维生素A
B、咖啡因
C、苯巴比妥
D、氯丙嗪
E、维生素C
10、使用碘量法测定维生素C的含量，
已 知 维 生 素 C 的 分 子 量 为 176.13 ， 每 1ml碘滴定液(0.1mol/L)，相当于维生
求本品中维生素A的含量？
解： 吸收度比值
吸收度的比值差
Ai 规定值 A328
A300 /A328 A316/A328 A328/A328 A340/A328 A360/A328
：0.564 － ：0.893 － ：1.000 － ：0.833 － ：0.344 －
0.555 0.907 1.000 0.811 0.299
2,6 - 二氯吲哚酚 VC 无色（试液本身为红色） 3、与碱性酒石酸铜反应 碱性酒石酸酮 VC Cu2O 红色
第三节 维生素C的分析
4、糖类的反应
VC HCl 水解 -CO2 戊糖 -H2O 糠醛 吡咯 △ 蓝色
5. 荧光反应
[O] 邻苯二胺 VC 去氢抗坏血酸 蓝色荧光
Cl
CH2OH H C OH O OH O OH
OH
Cl
Cl
Cl
CH2OH
H
OH Cl Cl
N
+
N
H C OH O O O
O
+
NH
O
O
OH
氧化型（红色）
还原型（无色）
第四节 维生素E的分析
一、结构及性质：
CH3 R2 CH3 C O O R1
CH3 R2 OH R1 O CH3
O
CH3
溶剂ห้องสมุดไป่ตู้
max 测定波长
环己烷
328 nm 5个
异丙醇
325 nm 4个
换算因数
1900
1830
第一节 维生素A的分析
VitAD胶丸中VitA的含量测定 精密称取本品(规格10000VitAIU/丸)装量差 异项下（平均装量0.08262g/丸）的内容物 0.2399g 至250ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度， 摇匀；精密量取2.0ml，置另一20 ml量瓶中，用 环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测 定最大吸收波长为328nm，并在下列波长处测得 吸收度为
二、鉴别试验： 1、硝酸反应： △ 2、水解后氧化反应：
VitE 生育酚
KOH
VitE 生育酚 生育红
HNO3
[O ]
橙红色
Fe3+ 生育醌 + Fe2+ 联吡啶 血红色
第四节 维生素E的分析
三、含量测定 气相色谱法 内标物 固定相 检测器 ChP（2000）
1% 效价（IU / g） E1cm 换算因数
第一节 维生素A的分析
第二法 测定维生素A醇 等吸收度法（皂化法）
VA在这两个波长下的吸光度应该等于 1 下的吸光度的 6/7，即: 1=325nm;
6 A2 A3 A1 7
2 =310nm;
3=334nm
A325校正 6.815 A325 2.555 A310 4.260 A334
= + 0.01 = －0.01 = 0 = + 0.02 = + 0.04
A328校正 3.522 A328 A316 A340 0.605
3.522 0.628 0.561 0.523
f
A 328(校正) A 328 A 328
100%
3.7% ( 15% ~ 3%)
第三节 维生素C的分析
三、含量测定： 1.碘量法
VitC I 2 去氢抗坏血酸 2 I
A、新沸冷水 赶走水中O2 B、酸性环境 （稀醋酸）
H

减慢VitC被O2氧化速度 C、立即滴定 减少O2的干扰
第三节 维生素C的分析
2、 2,6-二氯吲哚酚滴定法 原理：在酸性下2,6-二氯吲哚酚氧化型是红色 的;还原型是无色的 OH
E、无法计算
3、计算维生素A吸收度的校正公式为 A328(校正后)=3.52(2A328-A316-A340)。如果校 正后的吸收度与未校正的吸收度之差对未 经校正吸收度的百分比为-3.2%，则应
A、用皂化法测定
B、用校正后的吸收度计算含量
C、用未校正的吸收度计算含量
D、改用另一校正公式计算
E、以上都不对
OH
OH-
第二节 维生素B的分析
与碘化汞钾产生淡黄色沉淀 与碘生成红色沉淀 与硅钨酸生成白色沉淀 与苦味酸生成扇形白色结晶
三、含量测定： 硅钨酸重量法、硫色素荧光法、非水溶液滴定法、 紫外分光光度法
非水溶液滴定法： 溶剂：冰醋酸（醋酸汞） 指示剂：喹哪定红- 亚甲蓝混合指示液 滴定剂：高氯酸 终点：天蓝色 T=16.86mg/ml
内标法加校正因子 正三十二烷 硅酮（OV—17） 氢火焰离子化检测器
1、维生素A含量用生物效价表
其效价单位是 A、IU
示，
B、g
C、ml
D、IU/g
E、IU/ml
2、已知每单位维生素A相当于维生素
1% A醋酸酯0.344g，其 E1cm = 1530，则 换算因数等于
A、1820 B、1830 C、1900 D、1920