第九章维生素类药物分析
9第九章 维生素类药物的分析new(药物分析)
淡黄色棱形结晶 57℃~58℃ (棕榈酸酯) 无定型或结晶 28℃～29℃
天然维生素A主要是全反式维生素A
尚有多种其它(多烯顺反)异构体
名 称 维生素A 新维生素Aa 新维生素Ab 新维生素Ac 异维生素Aa 异维生素Ab 形 式 醇 醋酸酯 醇 醋酸酯 醇 醋酸酯 醇 醋酸酯 醇 醋酸酯 醇 醋酸酯 λmax（nm） 325 325.5 328 328 319 320.5 311 310.5 323 323 324 324
CH3
CH3
CH3
CH3
9
8
7
5
6 4
3
CH2OR
1
CH3
2
对酸不稳定，遇Lewis或无水氯化氢乙醇液，可发生脱水反应，生成 脱水维生素A：
酯较稳定。 密封在凉暗处保存外，还需充氮气或加入合适的抗氧剂。
紫外吸收特性 共轭多烯醇的侧链结构，λmax(nm): 325nm～328nm， 可鉴别和含量测定。 与三氯化锑呈色 在无水无醇氯仿中与三氯化锑试剂作用， 生成不稳定的碳正离子，显蓝色，渐变成紫红色。 鉴别、比色法含量测定。
Thiamine Hydrochloride 盐酸硫胺
氯化4-甲基-3[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-羟基乙基)噻唑鎓盐酸盐
硫色素反应 噻唑环在碱性介质中可开环，再与嘧啶环上的氨 基环合，经铁氰化钾等氧化剂氧化成具有荧光的硫色素，后 者溶于正丁醇中呈蓝色荧光。
CH3 N N NH2 CH2 N ClS CH2CH2OH HCl CH3
Vit A及异构体：
E
1% 1cm
紫外吸收（乙醇）
相对生物 效价 （%）
100 75 24 15 21 24
维生素
第九章 维生素类药物分析练习思考题1.将维生素A溶于无水乙醇-盐酸溶液中，测定紫外吸收光谱，在326nm波长处有一吸收峰，而将此液置水浴上加热，冷却后，在300-400nm范围内出现3个吸收峰，这是为什么？2.用紫外分光光度法测定维生素A含量时，采用三点校正法的目的是什么？3.药典规定以什么表示维生素A的质量，它与重量关系如何？4.维生素A用紫外法测定含量时，要应用校正公式，此校正公式的推导有哪两种方法？分别说说每一种方法中λ2、λ3是怎样选择的？5.按照中国药典维生素A测定法测定时，什么情况下需应用校正公式？什么情况下需用第二法测定？6.紫外分光光度法测定维生素A中的换算因数1900的含义是什么？含量计算公式中的E1%cm与通常意义的E1%cm有何不同？7.维生素E具有怎样的结构特点和性质？8.维生素E中游离生育酚的检查原理是什么？9.中国药典、美国药典、日本药局方分别采用什么方法测定维生素E的含量？10.维生素B1具有怎样的性质？可用哪些方法进行鉴别？11.盐酸硫胺的特殊反应是什么？说明其原理。
12.重量法测定维生素B1时，为什么要加盐酸？硅钨酸量对含量测定有何影响？13.硅钨酸重量法测定维生素B1时，其重量换算因数0.1939是如何求得的？14.硅钨酸重量法测定维生素B1中，生成的沉淀为什么要依次用煮沸的盐酸溶液、水和丙酮洗涤？15.维生素B1除用硅钨酸重量法、非水碱量法测定含量外，还可采用什么方法测定含量？试举2～3例，并说明测定原理。
16.维生素C具有哪些鉴别反应？17.药典采用什么方法测定维生素C含量？该法测定时应注意什么问题？18.用2，6-二氯吲哚酚测定维生素C含量时，如何判断滴定终点？19.维生素D的含量测定中国药典采用HPLC法，该法所用的色谱柱和流动相与一般反相色谱法有何区别？药典收载了几种测定方法，分别用于什么情况下维生素D的含量测定？选择题一、最佳选择题1. 维生素A具有易被紫外光裂解、易被空气中氧或氧化剂氧化等性质，是由于分子中含有（ ）A、环已烯基B、2,6,6-三甲基环已烯基C、伯醇基D、乙醇基E、共轭多烯醇侧链2. 维生素C能与硝酸银试液反应生成去氢抗坏血酸和金属银黑色沉淀，是因为分子中含有（ ）A、环已烯基B、伯醇基C、仲醇基D、二烯醇基E、环氧基3. 维生素C一般表现为一元酸，是由于分子中（ ）A、C2上的羟基B、C3上的羟基C、C6上的羟基D、二烯醇基E、环氧基4.中国药典测定维生素E含量的方法为（ ）A、气相色谱法B、高效液相色谱法C、碘量法D、荧光分光光度法E、紫外分光光度法5.下列药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是（ ）A、维生素AB、维生素B1C、维生素CD、维生素DE、维生素E6.紫外法测定维生素A含量时，测得λmax在330nm，A/A328比值中有一个比值超过了规定值±0.02，应采用什么方法测定（ ）A、多波长测定B、取A328值直接计算C、用皂化法（第二法）D、用校正值计算E、比较校正值与未校正值的差值后再决定7.用碘量法测定维生素C的含量，已知维生素C的分子量为176.13，每1mL碘滴定液（0.1mol/L）相当于维生素C的量为（ ）A、17.61mgB、8.806mgC、176.1mgD、88.06mgE、1.761mg3.需检查特殊杂质游离生育酚的药物是（ ）A、维生素AB、维生素B1C、维生素CD、维生素EE、维生素D9．重量法测定时，加入适量过量的沉淀剂，可使被测物沉淀更完全，这是利用（ ）A、盐效应B、酸效应C、络合效应D、溶剂化效应E、同离子效应10. 2.6－二氯靛酚法测定维生素C含量，终点时溶液（ ）A、由红色→无色B、由蓝色→无色C、由无色→红色D、由无色→蓝色E、由红色→蓝色11.硫色素荧光法测定维生素B1溶液，测得对照液荧光强度为45%（浓度2.0μg/mL），空白液荧光强度为5%；样品液荧光强度为55%，空白液荧光强度为5%。
《药物分析》维生素类药物的分析 ppt课件
Vit D2 骨化醇 Ergocalciferol
22
Vit D3 胆骨化醇 Cholecalciferol 胆钙化醇
CH2
10 7 HO 3 H 5 6 HO 4 H 9,10-开链胆甾-5,7,10(19)9,10-开链麦角甾三烯-3β-醇 5,7,10(19),22-四烯-3β-醇 胆甾醇，胆固醇 Δ4,6 Cholestadienol Cholesteral
ppt课件 29
校正因子测定 取正三十二烷适量，加正已烷溶解并稀释 成每1ml中含1.0g的溶液，摇匀，作为内标 溶液。另取Vit E对照品约20mg，精密称定， 置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液 10ml，密塞，振摇使溶解；取1~3µ l注入气 相色谱仪，计算校正因子 测定法 取本品约20mg，精密称定，置棕色具塞锥 形瓶中，精密加入内标溶液10ml，密塞， 振摇使溶解；取1~3µ l注入气相色谱仪，测 定，计算，即得
滤过 用热的稀HCl洗 洗涤* 干燥恒重*80℃
ppt课件 20
⊙第三节 维生素C( Vit C)
6
CH2OH O OH O
1 3
H
5
C
4
HO
2
OH
ppt课件
21
COONa(H) CH2OH H C O OH O -2H H CH2OH C O OH O OH-(H+) H C C O O OH H
ppt课件
328
340
360
13
A
0.330 0.508 0.570 0.477 0.190
⊙第二节 维生素B1( Vit B1)
CH3 N N NH2 CH2 N S CH2CH2OH Cl- HCl CH3
维生素类药物分析医学课件
维生素类药物分析医学课件维生素是人体必需的一类有机化合物，对于人体各种生理功能和健康保健都有不可或缺的作用。
维生素类药物是以维生素为主要成分的药物。
本文就维生素类药物进行分析，介绍其药理作用、适应症、副作用等相关知识。
一、维生素A类药物维生素A类药物主要成分是维生素A，具有多种生物学作用，如维持视网膜视力、保护上皮组织、维持正常成长及免疫功能等。
常用维生素A类药物包括维生素A软胶囊、维生素A注射液等。
维生素A类药物适应症包括夜盲症、角膜软化症等。
但长期大量摄入维生素A可引起中毒，表现为头痛、皮肤瘙痒、运动不便等症状。
因此，应注意维生素A类药物的正确用法。
维生素B类药物包括维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12等多种成分。
维生素B类药物在人体内起到辅酶的作用，参与糖、脂肪、蛋白质等物质代谢。
常用维生素B类药物包括维生素B1片、硫胺素注射液、维生素B6注射液、维生素B12注射液等。
维生素B类药物适应症包括神经炎、急慢性肝炎、贫血等。
与其他药物混合使用时，可能会发生过敏、头晕、恶心呕吐等不良反应。
维生素D类药物主要成分是维生素D3，具有增加钙吸收、促进骨骼成长等生物作用。
常用维生素D类药物包括维生素D3溶液、维生素D3软胶囊等。
维生素D类药物适应症包括佝偻病、骨质疏松等。
剂量过大时，可能引起高钙血症、软组织钙化等不良反应。
维生素类药物是一类广泛应用的药物，对于人体健康保健有着不可或缺的作用。
然而，使用维生素类药物时应注意药物的正确用法，避免过度、长期使用，避免不良反应的发生。
同时，不应将维生素类药物作为万能药，采取正确的饮食和生活方式才是维持健康的最佳方式。
维生素类药物分析(1)
医学ppt
24
含量测定
► 非水溶液滴定法 用于原料药测定 加醋酸汞消除盐酸干扰 1mol维生素B1与2mol高氯酸相当
► 紫外分光光度法 片剂、注射剂采用此法 以吸收系数法计算含量
► 硫色素荧光法 对照品对照法计算含量，方法专属，不受氧化产物 干扰
医学ppt
25
硅钨酸重量法
医学ppt
27
鉴别试验
►硝酸银反应——维生素C被氧化，银被还原成 黑色银沉淀
►使高锰酸钾、亚甲蓝褪色 ►与碱性酒石酸铜作用，产生红色氧化铜沉淀 ►二氯靛酚钠反应——二氯靛酚被还原成无色
医学ppt
28
糖类性质
►维生素C+HCl（三氯乙酸）→水解成戊糖→ 失水→糠醛+吡咯→蓝色
医学ppt
29
杂质检查
医学ppt
37
测定方法
►光照：使产生前维生素D3，反式维生素D3 ， 速甾醇D3 ，连同维生素D3 ，进行系统适用性 试验
►重复进样，维生素D3的峰值RSD≤2.0%
►分离度R>1.0
采用校正因子法计算维医生学ppt 素D总量
38
维生素E分析
►结构特征：具有苯并二氢吡喃结构，苯环上 有1个乙酰化的酚羟基，易被水解、氧化；为 脂溶性维生素。有四种异构体，其中α型活性 最强
► 澄清度与颜色——控制氧化变色产物，以测定一定 波长下吸光度控制有色杂质 原料——溶液应澄清无色，若有色，在420nm处测 定吸光度，不得过0.03 片剂——在440nm处测定吸光度，不得过0.07 注射剂——在420nm处测定吸光度，不得过0.06
► 铁、铜离子——采用原子吸收分光光度法测定
医学ppt
《药物分析》第九章维生素类药物的分析 ppt课件
在max（620nm）处，测 定吸光度，标准曲线法定量
（三）高效液相色谱法 RP—HPLC法同时测定人血清
中维生素A和维生素E的含量。
例1. 维生素A含量用生物效价表示， 其效价单位是
A. IU B. g C. ml D. IU/g E. IU/ml
A328
否 A328
皂化
-15%
-3% 0
3%
（2）第二法 等吸光度法 皂化法，适用于维生素A醇。 溶剂：异丙醇
乙醇、KOH
乙醚
S 皂化
300nm
异丙醇
310nm 325nm 334nm 测定吸光度，
Sol
（9~15单位）
并确定最大吸收波长
• 判断max是否在323～327nm之间
是
否
• 计算 A300 A325
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
分类：
脂溶性 VitA、D、 E、K 等
水溶性 VitC、VitB族（B1、
B2、B6）、烟酰胺、泛酸钙、 叶酸、烟酸等
第一节 维生素A的分析
一、结构与性质
（一）结构
1. 维生素A的结构为具有共轭多烯
醇侧链的环己烯
CH3
CH3
CH3 CH3
CH3 CH2OR值在±3％，则仍不用校正公式计
算吸光度，而直接用A328代入公式中
求出 E11c%m
A32（8校正 ） A32810% 0
若
A328
所得的
数值在-15％～-3％之间，则需用校正
公式计算吸收度，即用A328（校正）代入 公式中求出 E11c%m
A32（8校正 ） A32810% 0
第九章 维生素类药物的分析.ppt
VitA VitA
醛 酸
△或有金属离子存在时更易氧化
2019-8-11
感谢你的欣赏
8
3、与三氯化锑发生呈色反应
VitA SbCl 3蓝色 紫红
CHCl3
4、溶解性
不溶于水 易溶于有机溶剂和植物油等
2019-8-11
感谢你的欣赏
9
二、鉴别试验
1、三氯化锑反应
维生素A在饱和无水三氯化锑的无 醇氯仿溶液中呈现不稳定的蓝色，再变 为紫红色。
31
(一）结构与性质 1、溶解性 ① 易溶于水 ② 水溶液呈酸性
2019-8-11
感谢你的欣赏
32
2、酸性 一元酸
C3－OH的 pKa = 4.17
C2－OH的 pKa = 11.57
C6H2OH
H C OH 5 O
4
1O
32
HO
OH
2019-8-11
感谢你的欣赏
33
3、强还原性 二烯醇结构
CC OH OH
二烯醇结构
2019-8-11
O
CC
OO
二酮基结构
感谢你的欣赏
34
4、光学活性 手性C（C4、C5）
C6H2OH
H C OH
L(+)－抗坏血酸
*5 O
活性最强
*4
1O
2019-8-11
3
HO
感谢你的欣赏
2
OH
35
5、具糖的性质 结构与糖类相似
糖类的显色反应
பைடு நூலகம்
△H
脱水
糠
糠醛 醛衍生
2019-8-11
VitM
感谢你的欣赏
VitPP
第九章维生素类药物的分析
b
VitB1%
Ab Sd
W对 W样
稀释度 稀释度 100%
（3）特点 ①灵敏度高，线性范围宽 ②代谢产物不干扰，适用于体液分析
第三节 维生素C的分析
C6H2OH H C OH
5
O
4
1
O L－抗坏血酸
32
HO
OH
(一）结构与性质 1、溶解性 ① 易溶于水 ② 水溶液呈酸性
2、酸性 一元酸
H
还原型
3、与碱性酒石酸铜反应
USP
碱性酒石酸铜Vi tCCuO 红
4、与KMnO4反应
KMnO VitC Mn
5、糖类的反应
6、紫外分光光度法
（三）杂质检查（略） 1、溶液的澄清度与颜色检查 2、铁、铜离子的检查：原子吸收分光光度
（四）含量测定 1、碘量法
（1） 原理
CH2OH H C OH
O O
HO OH
[O]
CH2OH
H C OH O O
O
O
1、与AgNO3反应 (ChP2000)
AgNO VitC Ag 黑（银镜）
2、与2，6 - 二氯靛酚反应 (ChP2000)
2，6 二氯靛酚VitC 无色
氧化型
蓝色 OHHˉ
玫瑰红色
OH
5、具糖的性质 结构与糖类相似
糖类的显色反应
△H
脱水
糠
糠醛 醛衍生
物酚类
显
色
VitC H 脱 水糠醛5吡0 咯 ℃蓝色
6、UV特征
H max nm OH max nm
（二）鉴别试验
VitC [O]去氢抗坏血酸
(三)其他鉴别方法
第九章维生素类药物的分析ppt课件
A
A
2024/3/28
λ2 λ1 λ3 nm
λ2 λ1 λ3 nm
9
⊙第二节 维生素B1（ V B1）
• 广泛存在于米糠、麦麸和酵母中，也可人工合成。有片剂和注射液。 • 本品维持糖代谢及神经传导与消化的正常功能，主要用于治疗VB1缺 乏病、多发性神经炎和胃肠道疾病。
结构：由氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成的季铵类化合物。
2024/3/28
16
糖类反应
CH2OH H C OH
OO
HO OH
CH2OH
H C OH OO
CH2OH
CHOH (CHOH)2 C C OH
H2O
HO H O
OO
-CO2
H2O+ CH
O
蓝色
N 50℃
CH2OH -3H2O CH (CHOH)2 C H
O CHO
N H
N
糠醛
OH
O
戊糖
2024/3/28
2024/3/28
11
硫色素反应
鉴别试验
硫色素Thiochtome
2024/3/28
12
沉淀反应 ➢ 分子结构中含有杂环，易与生物碱沉淀剂 (碘化铋钾、碘化汞钾、苦味酸等)，硅钨酸， 雷氏盐等作用形成组成恒定的沉淀
➢ 维生素B1在碱性加热条件下反应放出H2S，与 Pb(Ac)2试液形成黑色PbS↓
➢ 薄层色谱法：喷三氯化锑，呈蓝色斑点。
2024/3/28
4
含量测定
VA含量表示
➢ I.U.(international Unit) 国际单位 ➢ 效价(I.U./g) ➢ 按WHO规定:
VA acetate VA alcohol 效价(I.U./g) 2.907×106 3.33×106 ➢ 1g pure VA acetate≈ 2.907×106I.U.
小单元九 维生素类药物的分析 - 卫考在线-卫生行业考试辅导
小单元九维生素类药物的分析细目1 维生素B1及其制剂的分析要点(1)维生素B1的鉴别方法、杂质检查项目和方法、含量测定方法(2)维生素B1片、维生素B1注射液的含量测定方法细目2 维生素C及其制剂的分析要点(1)维生素C的鉴别方法、杂质检查项目和方法、含量测定方法(2)维生素C片、维生素C注射液的鉴别、检查和含量测定方法细目3 维生素E的分析要点维生素E物理常数的测定、鉴别方法、杂质检查项目和方法、含量测定方法细目4 维生素K1及其制剂的分析要点(1)维生素K1物理常数的测定、鉴别方法、杂质检查项目和方法、含量测定方法(2)维生素K1注射液的含量测定方法内容精要一、维生素B1及其制剂的分析1.结构、性质与分析方法的关系维生素B1 (又称盐酸硫胺)是由氨基嘧啶环通过亚甲基连接而成的季铵化合物，在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚中不溶；噻唑环上季铵及嘧啶环上氨基为两个碱性基团，具有碱性，药物为其盐酸盐，可利用其碱性采用非水滴定法测定含量；含有共轭体系，具有紫外吸收，其盐酸溶液的最大吸收波长为246nm，可用于定性定量分析；含有氯离子，可发生氯化物的反应用于鉴别；在碱性溶液中，可被铁氰化钾等氧化剂氧化成硫色素，溶于正丁醇中呈蓝色荧光而用于鉴别。
结构如下：2.鉴别(1)硫色素反应硫色素反应属于维生素B1的专属鉴别试验。
鉴别试验名称、原理和方法。
(2)氯化物的鉴别维生素B1的氯化物的鉴别属于一般鉴别实验。
鉴别试验名称、原理和方法。
3.检查(1)硝酸盐特殊杂质名称、检查原理和方法。
(2)总氯量特殊杂质名称、检查原理和方法。
(3)其他酸度、溶液的澄清度与颜色、硫酸盐、干燥失重、炽灼残渣，铁盐和重金属等。
4.含量测定(1)维生素B1的含量测定采用非水溶液滴定法测定维生素B1含量的原理、方法、注意事项及计算。
采用非水溶液滴定法测定维生素B1含量(％)的计算公式如下：含量(%)=30()10100%(1%)V V T F W --⨯⨯⨯⨯-干燥失重式中，V 和V 0为样品测定和空白试验消耗滴定液的体积(ml)；T 为滴定度(mg/ml)；F 为浓度换算因数；W 为取样量(g)。
药物分析维生素类药物的分析
1g维生素Ａ醇相当于：
国际单位IU=0.344微克维生素Ａ醋酸酯； IU＝0.300微克维生素Ａ醇 换算：1g维生素Ａ醋酸酯相当于：
VA1: VA2:(去氢VA) VA3:(去水VA)
注意:在水中三氯化锑水解,必须在绝对无水中进行!
2、紫外吸收光谱 VA的无水乙醇溶液在326nm有最大吸收。
含量测定
测定波长
吸光度
吸光度比值
吸光度比值差
计算值
规定值
300
0.555
316
0.907
(326)
328
1.000
(329)
340
0.811
360
0.299
紫外UV（中国药典） VB1片：方法与片剂含量测定相同(246nm)
01
VB1注射液：与液剂相同。（246nm)
02
9.3 维生素C的分析 化学结构
D(-)-异抗坏血酸 L(+)-异抗坏血酸 L(+)-抗坏血酸 D(-)-抗坏血酸 具有4种光学异构体。其中生理活性最强的是 L（+）-抗坏血酸
四、含量测定
1、铈量法（中国药典）
原理：VE用硫酸加热回流，水解成生育酚，用硫酸铈定量地氧化为对一生育醌，过量的硫酸铈氧化二苯胺指示剂而指示滴定终点。 终点：亮黄→灰紫 ，需作空白试验。
3、高效液相色谱法
日本药局方（JP13）
气相色谱法：Chp2005
Hale Waihona Puke 测定数据如下表，求：维生素A的标示百分含量。
由此可知，应该用测得的328nm处的吸收度计算。
添加标题
01
02
03
04
药物分析
第9章维生素类药物分析一、练习思考题1. 将维生素A溶于无水乙醇-盐酸溶液中，测定紫外吸收光谱，在326nm波长处有一吸收峰，而将此液置水浴上加热，冷却后，在300nm～400nm范围内出现3个吸收峰，这是为什么？2. 维生素E具有怎样的结构特点和性质？3. 维生素B1具有怎样的性质？可用哪些方法进行鉴别？4. 维生素C具有哪些鉴别反应？二、选择题1．维生素A具有易被紫外光裂解，易被空气中氧或氧化剂氧化等性质，是由于分子中含有（）A. 环已烯基B. 2，6，6-三甲基环已烯基C. 伯醇基D. 乙醇基E.共轭多烯醇侧链2．维生素C一般表现为一元酸，是由于分子中（）A. C2上的羟基B. C3上的羟基C. C6上的羟基D. 二烯醇基E.环氧基3．中国药典测定维生素E含量的方法为（）A. 气相色谱法B. 高效液相色谱法C. 碘量法D. 荧光分光光度法E.紫外分光光度法4．下列药物的碱性溶液，加入铁菁化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是（）A. 维生素AB. 维生素B1C. 维生素CD. 维生素DE. 维生素E5．需检查特殊杂质游离生育酚的药物是（）A. 维生素AB.维生素B1C.维生素CD.维生素EE.维生素D参考答案：二、选择题1. E2. B3. A4. B5. D第10章甾体激素类药物分析一、练习思考题1．甾体激素类药物可分为哪几类？2．如何根据甾体激素类药物的结构特征进行鉴别确证？3．异烟肼比色法可用于哪些甾体激素类药物的含量测定？请说明测定原理、影响因素及主要应用范围？二、选择题1．四氮唑比色法可用于下列哪个药物的含量测定？（）A. 可的松B. 睾丸素C. 雌二醇D. 炔雌醇E. 黄体酮2．Kober反应用于定量测定的药物为（）A. 口服避孕药B. 雌激素C. 雄性激素D. 皮质激素E. 孕激素3．氢化可的松因保管不当，C17-α-醇酮基有部分被分解，欲测定未被分解的氢化可的松的含量应采用（）A. 三氯化铁比色法B. 紫外分光光度法C. 异烟肼比色法D. 四氮唑比色法E. 酸性染料比色法4．分别有可的松、黄体酮、地塞米松磷酸钠三种制剂，要进行含量测定，可采用（）A. 四氮唑法测定可的松、黄体酮、异烟肼法测定地塞米松磷酸钠B. 异烟肼法测定该三种药物C. 四氮唑法测定黄体酮、地塞米松磷酸钠，2，4-二硝基苯肼法测定可的松D. 铁酚试剂法测定地塞米松磷酸钠，四氮唑法测定可的松，异烟肼法测定黄体酮E. 芳香醛比色法测定黄体酮、可的松，HPLC测定地塞米松磷酸钠5. 四氮唑比色法测定皮质激素时，下列哪一个药物反应最快？（）A. 地塞米松磷酸钠B. 可的松C. 氢化可的松D. 醋酸氢化可的松E. 醋酸泼尼松龙6. 某药物与硫酸-乙醇共热产生黄色，冷却后加水或稀硫酸稀释，加热显桃红色，此药物是（）A. 睾丸素B. 黄体酮C. 雌二醇D. 炔诺酮E. 可的松7. 下列哪个药物具有盐酸苯肼反应？（）A. 黄体酮B. 苯甲酸雌二醇D. 甲睾酮E. 氢化可的松8. 下面哪一种说法不正确？（）A. Kober反应用于雌激素测定B. 紫外光谱法用于所有甾体激素测定C. 四氮唑法用于皮质激素测定D. 异烟肼法用于所有甾体激素测定E. 盐酸苯肼法用于皮质激素测定参考答案：二、选择题1. A2. B3. D4. B5. B6. C7. E8. D第11章抗生素类药物分析一、练习思考题1．抗生素类药物具有哪些特点？分析方法和含量表示方法与化学合成药有何不同？2．β-内酰胺类抗生素具有怎样的结构特征和性质？3．β-内酰胺类抗生素的含量可采用多种理化方法测定，这些方法分别利用了该类药物的什么性质？4．链霉素的麦芽酚反应、N-甲基葡萄糖胺反应、坂口反应分别利用了链霉素分子的哪部分结构？说明方法的原理与专属性。
药物分析第09章维生素类药物的分析
2020/3/21
（3）第二法（等吸收度法） [ 皂化法、6/7A法 ]
适用于维生素A醇
第一法无法消除杂质干扰时用此法
2020/3/21
脂溶性
S
KOH /乙醇
皂
化
液植Vit物A醋油酸
酯 VitA醇 甘油和脂肪
酸
盐
水溶性
乙醚提取除去植物油的干扰挥干乙醚 异丙醇
溶解 稀释至9～15IU/ ml 于300、310、325、
2020/3/21
第二法 A328校正
A328 第二法
－15%
－3% 0 3%
2020/3/21
VitAD胶丸中VitA的含量测定
精密称取本品(规格10000VitAIU/丸 )装量差异项下（平均装量0.08262g/丸 ）的内容物 0.2399g 至250ml量瓶中， 用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取 2.0ml，置另一20 ml量瓶中，用环己烷 稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白， 测定最大吸收波长为328nm，并在下列 波长处测得吸收度为
（三）UV法 0.01%无水乙醇中 λmax = 284nm λmin = 254nm E11c%m = 41.0～45.5
2020/3/21
维生素EUV图
2020/3/21
（四） TLC法
薄层板 展开剂 显色剂
硅胶G 环己烷 -乙醚（4 ：1） 硫酸（105℃ 5′）
VitE Rf = 0.7
A 3校 2 5 6 .8 正 A 3 1 2 2 5 .5 5 A 3 5 1 4 5 .2 0 A 3 6 fA32(校 5 )正 A32510% 0 A325
2020/3/21
A325校正
A325
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1、具紫外吸收 2、易氧化变质 3、能与三氯化锑呈色 4、水中不溶。
第一节 维生素A的分析
二、鉴别试验
1. 三氯化锑反应
VA 蓝色 → 紫红色 CHCl
SbCl3
3
2. 紫外吸收光谱
VA的无水乙醇溶液在328nm有最大吸收。 3、TLC
第一节 维生素A的分析
例：VA和其标准品用环己烷溶解 展开剂：环己烷—乙醚（80：20） 板：硅胶G 显色：SbCl3T.S. Rf： VA 醇 0.08 VA 醋酸酯 0.41 VA棕榈酸酯 0.75
第一节 维生素A的分析
A300 A316 A328 A340 A360 ：0.354 ：0.561 ：0.628 ：0.523 ：0.216
A300 /A328 A316/A328 A328/A328 A340/A328 A360/A328
Ai A 328
：0.555 ：0.907 ：1.000 ：0.811 ：0.299
换算因数
IU / g （纯品）
1% E1cm （纯品）
1IU=0.344g全反式维生素A醋酸酯 1g的维生素A醋酸酯就相当于
1,000,000 2,907 ,000 IU 0.344
% 1530（环己烷、 维生素A醋酸酯 E1cm
328 ）
第一节 维生素A的分析
2907000 换算因子 1900 1530
H3C N N NH2 CH2 N+ S CH2CH2OH
. Cl-.HCl
CH3
1、水中溶解 2、具紫外吸收 3、碱性中可被氧化 4、两个杂环与生物碱沉淀试剂反应
第二节 维生素B的分析
二、鉴别试验： 1、硫色素反应：
维生素B1 铁氰化钾 硫色素
荧光消失 2、沉淀反应： 沉淀试剂：碘化汞钾、三硝基酚、碘溶液、硅钨酸 H+ 正丁醇 蓝色荧光
A325校正 6.815 A325 2.555 A310 4.260 A334
A325 （校正） A325 A325
100%
效价（IU / g） E1cm 换算因数 1%
第一节 维生素A的分析
制剂 —— VitA胶丸的含量计算
平均丸重 标示量% 效价（IU/g ） 100% 标示量
第一节 维生素A的分析
a. 操作方法
在波长300、310、325、334nm处测定吸收度， 找出λmax 。 d. 判断 max不在323~327nm或A300/A325大于0.73， 先纯化后再测定。
第一节 维生素A的分析
max在323~327nm之间且A300/A325小于或等于 0.73 ，则进行校正 c.校正公式
平均丸重 1% E1cm 换算因数 100% 标示量
A 平均丸重 换算因数 100% c 标示量
A 换算因数 平均丸重 100% W 稀释度 100 标示量
第一节 维生素A的分析
第一法 第二法
测定对象 维生素A醋酸酯
方法
维生素A醇
直接取样，测定 皂化提取，测定
CH3
CH3
CH3 CH3
VE
CH3
CH3
CH3 CH3
生育酚
1、水中不溶 2、紫外吸收 3、水解成游离生育酚
第四节 维生素E的分析
名 称 R1 CH3 CH3 H H R2 CH3 H CH3 H 生物活性 1.0 0.5 0.2 0.1
α-生育酚 β-生育酚 γ-生育酚 δ-生育酚
第四节 维生素E的分析
4、哪些描述适合VitA结构及性质 A、分子具有长二烯醇侧链，易被氧化
B、具有较长的全反式共轭多烯结构
C. 含酯键，经水解后产生苯并二氢吡喃衍生
物，易被氧化 很快转变为紫红色
E、样品用无水乙醇溶解后，加硝酸加热后，
D. 与三氯化锑的无醇氯仿液中呈不稳定兰色，
呈橙红色
5、中国药典（2000年版）规定维生素 A的测定采用紫外分光光度法（三点校
第一节 维生素A的分析
三、含量测定 紫外分光光度法（三点校正法） 本法是在三个波长处分别测定吸收度，根据校 正公式计算吸收度A校正值后，再计算含量，故本 法亦称“三点校正法”
（一）“三点校正法”测定原理 1、杂质的吸收在310～340nm波长范围内呈一条 直线，且随波长的增大而吸收度变小
第一节 维生素A的分析
第三节 维生素C的分析
一、结构及性质：
CH2OH 6 H C5 OH O
4 3 2 1
O OH
HO
1、水中溶，水液酸性 2、具糖的性质 3、二烯醇结构易氧化 4、四个光学异构体 5、紫外吸收
第三节 维生素C的分析
二、鉴别试验：
1、与硝酸银反应： AgNO3 VC Ag （黑色） 2、与2、6-二氯靛酚反应
（2）计算吸收度比及比值差 吸收度比值
Ai 吸收度的比值差 A 328
Ai 规定值 A328
（3）计算校正吸收度
A328校正 3.522 A328 A316 A340
A328 （校正） A328 A328
100%
第一节 维生素A的分析
（4）换算因数
% 定义：每一个E1cm 数值所相当的效价
第一节 维生素A的分析
a. 操作方法
环己烷 样品 配制成 9 ~ 15IU ml规定波长处 测A
溶解
规定波长：300、316、328、340和360 b. 计算方法 （1）最大吸收波长确认 max 在326~329nm，第一法测定。
max 不在326~329nm，第二法测定。
第一节 维生素A的分析
B、杂质在310～340nm波长范围内呈线性吸收
C、物质对光吸收具加和性
D、维生素A与三氯化锑的无水氯仿溶液作用，
产生不稳定蓝色
E、维生素A在碱性溶液中，可被铁氰化钾氧
化生成具有蓝色荧光的硫色素
8、能发生硫色素特征反应的药物
A、维生素A B、维生素B1
C、维生素C
D、维生素E
E、烟酸
9、既具有酸性又具有还原性的药物
2、物质对光的吸收具有加和性即样品各波长的吸收 度是维生素A与杂质吸收度的代数和 （二）测定方法 第一法 测定维生素A醋酸酯 等波长差法
等波长差法：两个波长分别在1两侧12nm处， 1=328nm; 2 =316nm; 3=340nm
A328校正 3.522 A328 A316 A340
A 328校正 1900 平均丸重 标示量% 100% C(g / 100ml ) 标示量 0.605 1900 0.08262 100% 2 1 10000 0.2399 100 250 20 99.0%
第二节 维生素B的分析
一、结构与性质： vb1(盐酸硫胺)：两个碱性基团，可与酸成盐。
正法），此法又称为
A、等波长差法 B、等吸收度法 C、6/7A法 D、差示分光光度法
E、双波长分光光度法
6、维生素A的鉴别试验为
A、三氯化铁反应 B、硫酸锑反应
C、2,6-二氯靛酚反应
D、三氯化锑反应
E、间二硝基苯的碱性乙醇液反应
7、用“三点校正法”测定维生素A含量的依据是 A、维生素A可见光区有最大吸收
第九章 维生素类药物分析
应用化学教研室 孟小华
按溶解性分类
脂溶性维生素： VA、VD、VE、VK等
水溶性维生素： B族（VB1、VB2等）、VC 、 烟酸、叶酸、泛酸等
第一节 维生素A的分析
维生素A在自然界中主要来自鱼肝油 一、结构及性质：
CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH2OR
R—H 维生素A醇 R—COCH3 维生素A醋酸酯
是 A、维生素A
B、咖啡因
C、苯巴比妥
D、氯丙嗪
E、维生素C
10、使用碘量法测定维生素C的含量，
已 知 维 生 素 C 的 分 子 量 为 176.13 ， 每 1ml碘滴定液(0.1mol/L)，相当于维生
求本品中维生素A的含量？
解： 吸收度比值
吸收度的比值差
Ai 规定值 A328
A300 /A328 A316/A328 A328/A328 A340/A328 A360/A328
：0.564 － ：0.893 － ：1.000 － ：0.833 － ：0.344 －
0.555 0.907 1.000 0.811 0.299
2,6 - 二氯吲哚酚 VC 无色（试液本身为红色） 3、与碱性酒石酸铜反应 碱性酒石酸酮 VC Cu2O 红色
第三节 维生素C的分析
4、糖类的反应
VC HCl 水解 -CO2 戊糖 -H2O 糠醛 吡咯 △ 蓝色
5. 荧光反应
[O] 邻苯二胺 VC 去氢抗坏血酸 蓝色荧光
Cl
CH2OH H C OH O OH O OH
OH
Cl
Cl
Cl
CH2OH
H
OH Cl Cl
N
+
N
H C OH O O O
O
+
NH
O
O
OH
氧化型（红色）
还原型（无色）
第四节 维生素E的分析
一、结构及性质：
CH3 R2 CH3 C O O R1
CH3 R2 OH R1 O CH3
O
CH3
溶剂ห้องสมุดไป่ตู้
max 测定波长
环己烷
328 nm 5个
异丙醇
325 nm 4个
换算因数
1900
1830
第一节 维生素A的分析
VitAD胶丸中VitA的含量测定 精密称取本品(规格10000VitAIU/丸)装量差 异项下（平均装量0.08262g/丸）的内容物 0.2399g 至250ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度， 摇匀；精密量取2.0ml，置另一20 ml量瓶中，用 环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测 定最大吸收波长为328nm，并在下列波长处测得 吸收度为