低剂量伽玛刀照射实验性癫痫老龄大鼠海马神经元超微结构观察

１ ３ 海 马 电镜 样 品的取 材 ．
癫痫 模 型组 和癫痫 后伽 玛 刀照 射组 大 鼠经氯 胺
４ ％多 聚 甲聚 内含 ０ ２ ． ％戊 二 醛 心 脏灌 注 固定 ，
开颅后 取 海马切 １ｍｍ 大小 置 ３ ’ ％戊 二 醛 ４℃ 固定
２ ｈ。
酮 （ ０ ／ ｇ 腹 腔 注射 麻 醉 后 ， 头 固定 在 立 体 １０ｍｇ ｋ ） 将 定 向仪上 ， 露左 侧颞 叶 与顶 叶交 汇 处 皮 质 区 直 径 暴 约 ５ｍｍ。将 浸泡 青霉 素溶 液 ４ Ｕ Ｌ的棉 片 贴 在 ０ｍ ／ 暴 露 的大 脑皮 质表 面 ， 对 侧 颅 骨 相 应 位 置 钻 直 径 在 ２ｍ 孔 ， ｍ 然后 在左 右 两 侧 的 颅 骨 上 放 置银 质 电极 ，
ｏ ｓｒａｏ ａ ｓ ｄ Ｊ ．Ｎ ｕｏｕｇ ２ １ ， ２ Ｓｐ １ ： ｂｅｖｔｎｌ ｔ ｙ［ ］ ｅｒｓｒ ， ０ ０ １ （ ｕ ｐ） ｉ ｕ
２１ —２２１ ５ ．
ａｄＭＲ ｔｄ Ｊ ．Ｅ ｉ ｐｉ，２０ ， ７（ ） ４ ９— ｎ Ｉ ｕｙ［ ］ ｐｌ ｓ ｓ ｅ ａ ０６ ４ ３ ： ７
ｈ １ 、４ｈ ３ｄ ７ｄ １ 、０ｄ和 ６ ， 、２ ｈ ２ 、 、 、４ｄ ３ ０ｄ 每一 时 间处
元 的超 微 结构 变化 ， 为老 年 癫 痫 患 者 的 治疗 提 供 实
验 依据 。
１ 材 料 与 方 法
１ １实 验 动 物 分 组 ．
健康 Ｓ Ｄ大 鼠 ５ ７只 ， ２年龄 ， 性 ３ 雄 １只 ， 性 ２ 雌 ６ 只 。雄 性 体重 ４ ２～ ０ ， 性体 重 ３ ０～３ ０ｇ 由 ５ ５ ０ｇ 雌 ２ ５ ， 广州 军 区广州 总 医 院实 验 动 物 中心 提 供 ， 物 随 机 动 分组 ： 照组 ３只 ， 对 癫痫模 型 组 和癫痫 后伽 玛 刀照 射
４ ８８．
ｇｓ Ｊ ｃ ｖ ｒ ａ ｍｕ ａ ｔａ ． ｍｍａ ｋ ｉ ｎｆ ｅ ［０ Ｒ６ ｉ ，Ｓ ａ ａ ｄ Ｄ，Ｔａ ｒ Ｍ ，ｅ １ Ｇａ １］
ｓ ｒ ｅ ｙ ｆｒｅ ｌｐｓ ｅ ａｅ ｏ ｙ ｏ ｈ ｌｍｉ ｍａ ｔｍａ ｕ ｇ ｒ ｏ ｐｉ ｅ ｙ ｒ ｌ ｔｄ ｔ ｈ ｐ ｔ ａａ ｃ ｈａ ｒｏ ｓ
ｓ ｕｔｒｌ ａ ａｅ［ ］ ｅ ｒｓｒ，２０ ， ７（ ｕｐ ｔ ｃｕａ ｄ ｍ ｇ Ｊ ．ＪＮ ｕｏｕｇ ０ ２ ９ Ｓ ｐ ｌ ｒ
５ ）：６ ６—６ ３ ６ ７ ．
［５］ ［６］
Ｋｕ ｚ Ｗ ｎ Ｓ． Ｔｈ ｒｌ ｏ ｔｃ ｏ ｄ ｉ ｉ ｐｉ ｐ ｏ ｅ ｓｓ ｅ ｏｅ ｆ ｍｉｏ ｈ ｎ ｒａ ｎ ｅ ｌ ｔ ｇ ｎｅ ｉ ｅ
组各 ２ ７只 。
１ ２ 动 物 模 型 的 制 备 ．
死 ３只 ， 海马 制备 透射 电镜 样 品。另 外 ２ 取 ７只致 痫
大 鼠麻 醉 后 固 定 于 专 用 固定 架 ， 在 伽 玛 刀 室 内 放 （ 不启 动伽 玛刀 ） ｉ ， 他 处理 同癫 痫后伽 玛 刀照 ６ｍｎ其 射 组 。３只 对 照 组 老 龄 大 鼠 ， 等 渗盐 水 取 代 青 霉 用 素 ， 癫痫 模 型组方 法取 海 马制备 电镜 样 品 。 按
［ ］ ｅ ｉ Ｐｄａ ｅｒｌ ２０ ， ４ ２ ； ３ ７ ． Ｊ ．Ｓ ｍｎ ｅｉｒＮ ｕｏ， ０ ７ １ （ ） ７ — ９ ｔ
Ｕｌｒ ｓ ｒ ｃ ｕｒ ｌｏ ｓ ｒ ａ ｉ ｎ ０ ｉ ｐ ｃ ｍ ｐ ｌｎ ｕｒ ｎ ｔ ａ ｔ ｕ ｔ ａ ｂ ｅ ｖ ｔｏ ｆｈ ｐ ｏ ａ ａ ｅ ｏ ｓ ０ ｘ ｒｍ ｅ ｔ ’ｅ ｉｅ ｔｃ ａ ｅ ａ ｓａ ｔ ｒ ｅ ｐｏ ｅ ｏ Ｉ Ｄｅ ＂ ｆｅ ｌ ｉ ｎ ａ ｐｉ ｐ ｉ ｇ ｄ ｒ ｔ ｆｅ ｘ ｓ ｄ ｔ ｌ ｐｌ Ｄｏ ‘
记 录大脑 皮质 脑 电 图 ， 大 鼠左 后 肢 的 股 四 头肌 插 在
入肌 电 图 电极 ， 录 肢 体 抽 搐 时 的 Ｅ 记 ＭＧ， 以筛 选 制 作成 功 的 动 物模 型 。模 型 大 鼠均 于 １ ２ ｎ后 ０～ ０ｍｉ 左侧 肢体 和 面部肌 肉开始 抽搐 并 逐渐 加 剧 ， Ｅ 且 ＭＧ
摘 要 ：目的 ： 察 低 剂 量伽 玛 刀 照射 实验 性 老 龄 癫 痫 大 鼠 海 马神 经元 超微 结 构 的 变 化 。 方 法 ： 用 青 霉 素 定 位 浸 观 采
润 建 立 老龄 大 鼠 癫 痫 动 物 模 型 ， ５ 将 ７只 老 龄 大 鼠 分 为 对 照 组 、 痫 组 和 癫 痫 后 伽 玛 刀 照 射 组 。 照 射 周 边 剂 量 １ 癫 ２
ｅ ｌｐｓ ｐｉ ｅ ｙ： ｐｒｌｍｉ ａ ｒ ｓ ｔ ｆｏ ｅｉ ｎ ｒ ｙ ｅ ｕｌｓ ｒ ｍ ａ ｐ ｏ ｐ ｃｉｅ ｒ ｓ ｅ ｔｖ
ｎｅ ０ ｅ ｅ ｅ ａｉｎ ｎｄ ｏ ｕ ｒ ｄｕ ｔｏ ａ ｕｒ ｄ ｇ ｎ ｒｔ０ ａ ｖ ｌ ｍｅ ｅ ｃｉ ｎ： ｈｉｔ ｌｇｃ ｓｏｏ ｉ
［ 梁 军 潮 ，徐 波 涛 ，杨 红 军 ， ． 剂 量 伽 玛 刀 照射 对 ４］ 等 小 致 痫 大 鼠脑 神 经 元 ｎ Ｏ Ｎ Ｓ表 达 的 影 响 ［ ］ Ｊ ．中 国 微 侵
袭 神 经 外 科 杂 志 ，０ ８ （ １ ２—２ ． ２０ ，Ｏ ）２ ４
ｒ ｌｔｏ ｈ ｐ ｅｗｅ ｎ ａ ｉ ｔｏ ｄｏ ｅ ｎｄ ｕ ｔｏ ｌ ｎ ｅ ａｉｎｓ ｉ ｂ ｔ ｅ ｒ ｄ ａｉ ｎ ｓ ａ ｆ ｎｃｉｎａ ａ ｄ
第３卷 第 １ １ 期
２１ ０ ２年 ２月
电 子 Ｖｏ ． １ ３１． ．１ Ｎｏ
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｈ ｎ ｓ ｌｃｒ ｎ Ｍｉｒ ｓ ｏ ｙ Ｓ ｃ ｅｙ ｏ ｒ ａ ｆＣ ｉｅ ｅ Ｅ ｅ ｔ ｃ ｏ ｃ ｐ ｏ ｉｔ ｏ
２ ２— ０１ ０２
文 章 编 号 ： ０ —２ １ ２ １ ） １０ ４ －４ １ ０６ ８ （０ ２ Ｏ － ７０ ０ ０
１ ２２．
［ ８］
Ｌ ｓａ ｉｃ ｋ Ｒ， Ｖｌｄ ｋ Ｖ， Ｎｏ ｏｎ Ｊ Ｊ ， ｅ ａ ． Ｌ ｋ ｅ ｌ ａｙ ａ ｖ ｔｙ ｒ ｔ １ ｅ ｓｌ
Ｇａ ｍｍａ ｋｎｆ ｌ ｓｏ ｎｇ ｆ ｈ ｒｔ ｉ ｐ ｃ ｍｐ ｉｅ ｅ ｉｎｉ ｏ ｔ ｅ ａ ｈ ｐ ｏ ａ ｕｓ： ｔ ｅ ｈ
［ ］ ｕｒ ｐｎＮ ｕｏ， ０ ２ １ ：１９—１４ Ｊ ．Ｃ ｒ Ｏ ｉ ｅｒｌ ２０ ， ５ ７ ８．
Ｎａｒｓ ｇ ， Ｐ ｔａ ｅ Ａ， Ｋｅｔ ｎ ｎ Ｉ ｔ ａ ． Ｓ ａｕ ｉ ｍａ ｌＪ ｉ ｉ ｎｎ ｋ ｔ ｅ ，ｅ １ ｕ ｔｔ ｓ
ｅ ｉｅ ｔｃ ｓ ｎ ・ ｙ－ ｌ ｒｔ ｌａ ｓ ｏ ｅ ｐ ｒｌ ｏ ｅ ｐ ｌｐ ｉｕ ｉ １ ・ ２ ｄａ － ｄ ａｓ ｅ ｄ ｔ ｔｍ ｏ ａ ｌ ｂ ｏ
低 剂量伽玛 刀照射 实验性癫痫老龄大 鼠 海马神经元超微结构观察
杨 传 红 赖 晃 文 唐 庚 云 王 捷 ， ， ， ，梁 军 潮 ， 纯 列 ， 小 丽 詹 吴
（ 州军 区广 州总 医院 １ 医学 实验科 ；． 经 外科 ， 东 广 州 ５ ０ １ ） 广 ． ２神 广 １０ ０
［７］
Ｒｅ ｉ Ｂａ ｔｌｍ ｅ Ｆ， Ｈａ ａ ｈｉＭ ， ｅ ａ． Ｔｈｅ ｏｅ ｆ ｇｓＪ， ｒｏ ｏ ｉ ｙｓ ｔ １ ｒｌ ｏ
Ｇａ ｍｍ ａ ｋ ｉｅ ｓ ｇ ｒ ｉ ｔ ｅ ｔｅ ｔ ｅ ｔ ｏ ｓ ｖ ｒ ｎｆ ｕｒｅ ｙ ｎ ｈ ｒ ａｍ ｎ ｆ ｅ ｅ ｅ
第 ３ 卷 １
［ 耿 明 英 ， 远 ， 民 辉 ．伽 马 刀 对 红 枣 氨 酸 模 型 大 鼠 ３］ 程 许 海马形态学及苔藓纤维变化的影响［］ Ｊ ．第 三 军 医 大
学 学 报 ，０ ７ ２ （ ０ ： ５ ９ ２ ２ ０ ，９ １ ） ９ ９— ６ ．
ｅｉ ｐｉ Ｊ ．Ｅ ｉｐｉ Ｄｓｒ，２ ０ ，２ ２ ： １ ｐｌ ｓ ｓ［ ］ ｐｌ ｔ ｉ ｄ ０ ０ （ ） １３— ｅ ｅ ｅ ｃ ｏ
［ ９］
Ｍａｈｉｕ ｔ ｅ Ｄ ， Ｄｅ ｃ ｎ ａ ｏ Ｃ ， Ｐｉ ｒ Ｃ ｉ ｄ Ａ ， ｅ ａ． Ｇａ ｎａ ｔ １ ｍｍａ
ｋ ｉｅ ｓ ｒ ｅ ｆ ｒ ｈｙ ｏｈａａ ｃ ｃ ｕｓｎｇ ｒ ｆａ ｔ ｒ ｎｆ ｕ ｇ ｒ ｙ ｏ ｐ ｔ ｌ ｍｉ ａ ｉ ｅ ｒｃ ｏｙ
收 稿 日期 ：０ １ ７０ 修 订 日期 ：０ １１—０ ２ １ －８； ２ １ —１１
１ ４ 电镜 样 品制备 ．
０ １ ｏ Ｌ Ｐ Ｓ洗 ， ％ 锇 酸 后 固 定 ２ ｈ ０ １ ． ｍ ｌ Ｂ ／ １ ， ． ｍｏ ＬＰ Ｓ洗 ， 常 规 乙 醇 、 酮 脱 水 ， ｐｎ １ ｌ Ｂ ／ 按 丙 Ｅ ｏ８ ２包
发 现大 鼠股 四头肌 出现 阵发 性 肌 电活 动 ， 示 癫痫 提
体 定 向定 位架 ， 以青 霉 素导致 癫痫 为模 型 ， 研究 癫痫
３ ｄ后低 剂量 伽 玛 刀 照 射 后 不 同时 程 海 马 神 经 元 超 微 结构 的改变 ， 步探讨 癫痫 与海 马 神经元 的关 系 ， 初 探 讨低 剂 量伽玛 刀作 用于 老 龄癫痫 大 鼠后 海马 神经
作 者 简 介 ： 传 红 （９ ３一） 女 （ 族 ） 副 主 任 技 师 ．Ｅ ｍａ ： ａｇｈ ａｈｎ６ １０ ＠ ｙｈｏ ｃｒ．ｎ 杨 １６ ， 汉 ， － ｉ ｙｎｃ ｕｎ ｏｇ３ １９ ａｏ．ｏ ｃ ｌ ｎ
５ ０
电子 显 微 学 报
Ｊ ｈｎ ｌｃ ．Ｍ ｅ ｓ．Ｓｃ ．Ｃ ｉ．Ｅｅｔ ｉ ｏｃ ｏ ｒ ｒ
模 型制作 成 功 。取 制 作 成 功 ３ ｄ的青 霉 素 致 痫 Ｓ Ｄ 大鼠１ ８只 ， 胺 酮 １ ０ ｍ ／ ｇ腹 腔 注射 麻 醉 ， 氯 ０ ｇｋ 固定 于 自行设 计 的伽玛 刀 专用 大 鼠头 架 ， 行 脑 ＭＲ 冠 进 Ｉ 状 面 的连续 扫描 ， 据 图像 计算 靶 区三 维 坐标 。然 根 后 采用 ４ ｍ 准直 器 ， 行伽 玛 刀 脑组 织 照 射 ， ｍ 进 周边 剂量 ｌ ｙ 等 剂量 曲线 为 ５ ％ ， 心剂量 为 ２ ｙ ２Ｇ ， ０ 中 ４Ｇ ， 照 射 时间 为 ６ｍｉ。实验 大 鼠处死 时间 为术后 ３ｈ ６ ｎ 、
中 图分 类 号 ： ７ ２ １ Ｒ ６ ． ； ３ ６ Ｒ ４ ． ； ３ １３ Ｑ ３ 文 献标 识 码 ： Ａ
有 研究 报道 ， 癫痫 大 鼠发 作后 大量 神经 元 变性 、 坏死 ， 同时 产生 大量 的 自由基 作用 于线 粒体 ， 坏线 破 粒 体 的结 构并产 生 细 胞 毒作 用 ， 使 中枢神 经 系统 致 线 粒体 功 能 障碍 ， 响 能 量 代 谢 影 。本 研 究 用 立
Ｇ ， 剂 量 曲 线 为 ５ ％ ，． ６ ｙ等 Ｏ ０ ５ｈ～ ０ｄ后 取 靶 区 海 马 制备 电镜 样 品 ， 射 电镜 观 察 。 结 果 ： 照组 海 马神 经 元 的超 微 透 对 结 构 正 常 ； 痫 大 鼠 可见 神 经元 细胞 器 明 显 空 化 ， 分 神 经 元 凋 亡 ； 玛 刀 照 射 组 早 期 与 癫 痫 模 型 组 基 本 一 致 ， 癫 部 伽 中 期 和 晚 期部 分 结 构得 以恢 复 ， 粒 体修 复 较 为 明 显 。 结 论 ： 龄 癫 痫 大 鼠 经 低 剂 量 伽 玛 刀 照 射 ， 、 期 海 马 神 经 线 老 中 晚 元 的超 微 结 构 改 变得 以修 复 ， 为 临床 治 疗 老 龄 癫 痫 提 供 形 态 学依 据 。 可 关 键 词 ： 龄 大 鼠 ； 痫 ； 玛 刀 ； 马 神 经元 ； 微 结 构 老 癫 伽 海 超