病理学常用技术的原理及应用_病理学课件
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
积,包括长度、阔度、高度(厘米),实质性肿瘤量
直径,浅表部的肿瘤应注意其与皮肤的关系,是否凸 出皮面,与皮肤有无粘连,四周有无正常的皮肤组织。 注意肿瘤的质地(硬实、中等、软)各处的坚实 度是否一致,有无与周围组织粘连的情况。
• •
切面应暴露肿瘤的最大面积,以便较全面观察肿瘤内
部,巨型肿瘤应多作平行切面;
关的病理检查,应与旧片做对比。观察完毕后要提出
•
• 染色各步骤所需的时间,常受温度、切片厚度等影响。可根 据镜下观察所见酌予调整,但对组织化学反应(尤其是酶), 其时间、温度等因素务必恒定,且应做对照片。染液着色力 显著减退时应更新,染色反应不正常,应检查染液及试剂是 否失效或误用;
• 染色过程中,勿使切片干燥,以免影响细胞状态。染色完毕 后用显微镜检查染色结果,是否符合要求,并核对标本种类、 号码、数量是否无误; • 火棉胶切片除可做常规染色外,尚可做常用特殊染色及PAS、 DNA、RNA等主要组织化学染色。卡红(Carmine)使火棉胶着 色,含此染料的染色效果不佳。
石蜡包埋
• 包埋时先将融蜡倾入模型,然后以钝头热镊夹取组
织块,使病灶或指定面向下(包埋分层次的组织在
蜡中安放平正。注意防止混杂组织号码小条埋入
蜡块一侧;
•
•
蜡稍凝后,即移入冷水中加速凝固;
蜡块的大小,以在组织周围包有1~2mm之蜡为宜。
蜡块做成正方形或长0方形,以便切片。
石蜡切片法
• • • • 将切片刀装在持刀座上,刀刃与蜡块表面呈50夹角。调整后勿任意变动; 将蜡块固定于持蜡器上,并调整蜡块与刀至适当位臵; 移动刀座或持蜡器,使蜡块与刀刃接触,旋紧刀座; 以右手匀速旋转机轮,到组织已全部切出,或所需的部分已切出。微小组 织应注意勿修切过多。调节厚薄器到4~6um,继续切片,除特殊要求者, 一般勿切过厚; 以小镊取完整无划痕、厚薄均匀的切片,将其放入温水中,使展平无折, 每一蜡块多切数个切面,选择较好的切片裱于载玻片上。需要多个不同水 平切面时,应多选切片。水浴温度以低于蜡熔点10~12℃上下为宜; 裱片时使切片玻片之间无气泡,切片的位臵应端正,裱成后随即在玻片上 写上号码; 将切片放在烘片板或温箱中烘干; 有特殊要求者应按要求切片。
石蜡切片染色法
•
• • •
二甲苯去蜡(经二次)5~10min;
无水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇各1~2min,然后
蒸馏水洗3min(换数次);
苏木紫液染色约5min(视染液种类和着色情况增减); 水洗;1%酸性乙醇(盐酸1ml、70%乙醇99ml),或1%盐 酸分化。显策微镜下控制;
• 流水浸洗至少15min,至细胞核呈蓝色,也可短时水 洗后,浸于40℃温水使核变蓝。显微镜观察,若核染
水盒内,每合原则上放一块(小块组织例外),如
放入两块以上者,应在组织脱水盒上号码后注明 A、
B、C……字样,以便区分.
制片工作常规
•
• • • • • • • • • • • •
【 组织处理机脱水程序和时间 】
10%福尔马林 11小时; 85%乙醇 30分钟; 95%乙醇Ⅰ 30分钟; 95%乙醇Ⅱ 30分钟; 无水乙醇Ⅰ 30分钟; 无水乙醇Ⅱ 30分钟; 无水乙醇Ⅲ 30分钟; 丙酮 20分钟; 二甲苯Ⅰ 20分钟; 二甲苯Ⅱ 20分钟; 石蜡 30分钟; 石蜡 30分钟。
注意肿瘤切面的形状,大小和颜色,在结构上是否均
匀一致,有无出血坏死,有无包膜,有无浸润; 包埋组织块的选择:根据肿瘤的大小决定包埋组织的 块数,原则上选择肿瘤中央;
• • •
肿瘤边缘与瘤外组织相连部份,包括瘤外组织; 肉眼所见的不同性状的各部份; 所有淋巴结作包埋。
取材
检查标本,观察其大小形态、色泽、硬度及 肉眼病理改变并进行描述。检查病变部位应按诊断 的实际要求取材,组织块厚度不超过0.3cm,大小 在22×22mm范围内,放入用铅笔写好号码的组织脱
色过深或不足,应再分化或重染;
• 伊红液染1~2min后,95%乙醇二次,无水乙醇二次,
每次约1~2min;
• 苯酚二甲苯(1:4)1分钟; • 二甲苯二次,每次1分钟; • 用中性树胶或DPX以盖片封片,贴标签。
镜观检查
• • 镜观检查前应该对切片号码,标本种类;仔细阅读病 史和眼观检查记录。 要将切片全部检查到,以免漏诊。若曾做过与此次有
具,对大体标本的病变性状(形状、大小、重量、色
泽、质地、表面及切面形态、与周围组织和器官的关 系等)进行细致地解剖、观察、测量、取材和记录, 必要时可摄影留作资料。大体观察不仅是病理医师的 基本功和正确病理诊断的第一步,也是医学生学习病
理学的主要方法之。
肿瘤大体观察
注意肿瘤的部位,形态、大小、颜色以及与周围 组织关系,有无完整或不完整的包膜,测量肿瘤的体
第十七章 病理学常用技术的原理及应用
提纲
大体与组织病理学技术 组织化学与免疫组织化学技术 电子显微镜技术 原位多聚酶链式反应技术 核酸原位杂交技术 显微切割技术 流式细胞技术 比较基因组杂交技术 生物芯片技术 激光扫描共聚焦显微技术
大体与组织病理学技术
(一)大体观察 主要运用肉眼或辅以放大镜、量尺和磅秤等工
•
• • •
染色常规
• • 切片脱蜡应彻底,室温较低时更应注意,以切片在二甲苯中呈透 明状,或移入乙醇后,片上无白色斑点为佳; 特殊染色、组织化学反应,按各方法的要求进行组织固定处理, 以保证效果。对酶反应更应严格要求。凡用含升汞固定液固定的 组织,于切片脱蜡后,应经脱汞处理,方可染色。其法为:切片 经水洗2min,浸于0.5%碘酊溶液中10min,水洗;0.5%硫代硫酸钠 水溶5min,用水彻底冲洗;经蒸馏水洗后染色。在脱汞过程中, 慎防切片脱落; 各种染料试剂一般选用化学纯。各种染料着色效果常因生产厂和 批号不同而异,启用任何新品,均应先试染。配成的染液、试液 应盛于有色试剂瓶内,瓶签应写明名称、含量、配制年月日,顺 序保存于避光橱中,必要者放冰箱内。凡须临用时配制者,配量 应适当;