AATCC-147抗菌性能的测试方法

AATCC 147-2004 纺织品的抗菌性：平行划线法

前言：平行划线法能够满足对整理后织物上的抗菌整理剂扩散性能的评价的需要，并且这

种方法相对快速，简单精确。

AATCC 100 的方法，是一种对纺织材料的抗菌性能的评价方法，这种方法需要一定数量的步骤，这些步骤要有足够的灵敏度，但是对于常规的质量控制和筛选试验，这些步骤比较难于处理并且比较耗时。因此，当目的是通过抗菌剂向琼脂的扩散性能来描述抑菌活性的话，AATCC 147的这种方法能够满足这种需要。在平行划线法中，琼脂的表面是接种过的，这样便于区分测试的微生物和未杀菌的污染物有机体。多年来，平行划线法用于测试抗菌性能，革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性菌，已经证明是有效的。

１、目的和范围

１.１目的是检测纺织材料上的抑菌活性。这个过程的结果已经被RA委员会证明具有可重现性的，不同的实验室对材料用多种标准洗涤剂进行水洗之后，材料上仍然存在大量的抗菌剂（通过化学测试后得出的结论）。这种方法对于得到对活性的粗略估计上是有用的，这种方法中，接种液中的微生物从每个划线的一端逐渐减少到另一条划线，然后又从一条划线减少到另一条划线，导致了敏感程度的增加。抑菌区域的大小和划线的变窄是由多次水洗之后的残留的抗菌剂的抗菌性能引起的，即剩余抗菌性能的估计。

2、原理

2.1 测试材料的样品，包括作为对照但未经过处理的同样的材料，然后把它们和应琼脂放在一起。琼脂事先用测试细菌接种液划线（见图7.1和7.4）。潜伏期过后，在测试材料的下面或者沿着材料两边的一个清晰的区域的增长被打断，这表明样品具有抗菌性。细菌的标准菌株被应用，这种标准菌株对于正在测试的材料的需求是特定的。如果没有指定的细菌，金黄色葡萄球菌就可能被应用为革兰氏阳性微生物的代表。在第6部分会列出一些其他推荐的菌株。

3. 专业术语

3.1 活性，名词-对抗菌剂效能的一种评估。

3.2 抗菌剂，名词-织物上任何可以杀死细菌（杀菌剂）或干扰其繁殖、生长或细菌活性的化学物质（抑菌剂）。

3.3 抑菌圈，名词-在一种琼脂培养基的表面，一个明显的生物有机体不生长的地方。生物有机体养殖到琼脂表面并与样品直接接触。。

注：抑菌圈的出现是由于试样释放出的抗微生物因子的扩散而造成的。

4. 安全防范

安全防范

（1）在本测试中用到的一些细菌会致病，防护衣服和呼吸防护可阻止细菌的渗透；

（2）在处理所有的被污染样品和测试样之前都要先灭菌；

（3）注意在测试中所用到的化学药品的排放

注：该法不适合用于会形成胶囊状并阻止抗菌剂扩散的材料或含有抗菌中和剂的物质。

注：这些安全预防仅仅是告知的目的。这些预防只是一些测试步骤的辅助，并不是所有的要进行的步骤都要有的。在这个测试方法中，安全并适当地使用技术对材料进行处理是操作者应有的责任。我们也必须向生产厂家咨询一些特殊的细节，例如：材料的安全数据表和其他一些厂家的建议。我们也必须咨询和遵守所有的职业卫生条例的标准和规则。

4.1 这个测试由经过培训的员工进行操作，并且还需要参考美国的健康和人类服务刊物：微

生物和生物医学实验室。（见13.1）

4.2 警告：这个测试里用到的一些细菌是致病的；也就是说，能够感染人类和产生疾病。因此，我们要采取一些必要的合理的措施去消除这种对实验员和相关的环境所造成的风险。穿防护衣服和呼吸防护可阻止细菌的渗透。

4.3 我们应该遵循良好的实验室规范：在所有的试验区域内戴防护眼镜。

4.4. 小心处理所有的化学药品。

4.5 洗眼水和消防设备（安全喷淋设备）应该就近放置以备紧急使用。

4.6在处理所有的被污染样品和测试样之前都要先灭菌。

4.7 这个程序中暴露在空气中的化学药品的含量应当控制在或者低于政府部门所规定的。例如，1989年1月1日的29 CFR 1910.1000中的职业安全和卫生管理的允许暴露限值。另外，美国政府及工业卫生协会标准对化学品毒性规定的阈限值由时间加权平均值、短期暴露限值还有上限组成，一般，推荐这些作为能够空气污染物限值（见13.2）。

5.使用范围和局限性

5.1这种方法不适用于那些易于凝聚或阻抗菌剂分散的材料或包含抗菌中和物质的材

料.

6.测试用的有机体

6.1测试用细菌:

6.1.1金黄色葡萄球菌,美国模式培养物集存库NO.6538.革兰氏阳性有机体(见13.3)

6.1.2 克雷白氏肺炎杆菌, 美国模式培养物集存库NO.4532.革兰氏阳性有机体(见13.3) 6.1.3其他适合的种类的是否可用可取决于测试样品的最终用途.

6.2在任何可能的时候,测试已知的抗菌活性用于控制所谓的试样的抗菌活性标准(正面控制)。

6.3为了确定抗菌作用是否是由抗菌剂所产生的,使用其他同样的任何后处理试剂, 但是不使用这种抗菌剂,用同种材料同种方法对样品再进行测试。许多标准的纺织后处理试剂,特别是抗皱助剂和耐久压烫助剂,通常能在多次洗涤后仍具有很强的抗菌活性。

7.培养基

7.1合适的液体培养基或琼脂培养基是营养素,胰酶解大豆酪蛋白和脑心浸液。

液体培养基:

蛋白胨(见13.5) 5g

牛肉精(见13.6) 3g

蒸馏水1000ml

7.2加热至沸腾使成分分解。用1N的NaOH把pH值调整至6.8±0.1(若使用干燥培养基就没必要了)。

7.3分配1.0±0.5ml溶液至普通的细菌培养管(如125×17㎜)，并塞住并在103kPa(15psi)的压强下杀菌15分钟。

7.4琼脂培养基(见13.4)。加1.5%的细菌琼脂到液体培养基。加热至沸。测pH并调整至7.1±0.1,若有需要用NaOH调整。分配15.0±0.5ml溶液至普通的细菌培养管(如125×17㎜),塞住并在103 kPa(15psi)的压强下杀菌15分钟。(也可放在1000ml的硼硅酸盐玻璃瓶和倒入皮氏培养皿进行灭菌)

8.测试用有机体培养的保持

8.1在两周内,每天用一支4mm的接种环管把培养物转移到液体培养基(或合适的基质)。两周后,再进行一次全新的移植。在37±2℃(99±3℉)条件下进行保温培养。

8.2在培养基或合适的营养琼脂斜面上培养中保持备用的培养物。在5±1℃(41±2℉)条件下存储并每个月将其移入到新的琼脂中(见13.7) 。