小菜蛾颗粒体病毒Px26基因功能的初步分析
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ｍａｎ ｒ ａ ｔ ｉ ｄｉｐａｒ ｍｕｌｉ ｌ ｎｕｃｅ ｐｏ ｙ ｄ ｏ ｒ ｓ， ｓ ｔｐ ｅ １ ｏ ｌ ｈｅ ｒ ｖｉｕ
１ 材 料 和 方 法
１ １ 质 粒 、 株 及 细 胞 ． 菌
Ｉ ＭＮＰ 、 菜 夜 蛾 核 多 角 体 病 毒 （ ｐ ｄ ｐｅａ ｄ Ｖ） 甜 Ｓ ｏ ｏ ｔｒ
中图分类号 ： ５３２５ Ｘ ０． ２ 文献 标 识 码 ：Ａ
杆 状病 毒在 其复制 周期 中产 生两种 病 毒体 ： 包 含体 源 病毒 体 （ ｃ ｓ ｎｄ ｒ ｅ ｉ ｓ Ｏｃｌ ｉ — ｅｉ ｄ ｖｒ ，ＯＤ 和 ｕ ｏ ｖ ｕ Ｖ） 芽殖病 毒体 （ ｕ ｄ ｄｖｒ ｓ Ｖ） Ｏ Ｖｓ 在 于包 Ｂ ｄ ｅ ｉ ，Ｂ ． Ｄ ｕ 存 含体 中 ， 在被 宿主 昆虫吞 食后通 过膜 融合 侵染 虫体 中肠上 皮细 胞． Ｖｓ通 过 芽 殖 的方 式 从 受 感 染 细 Ｂ
有 膜融 合功 能．
小 菜蛾颗 粒体 病 毒 （ ｌｔｌ ｙｏｔｌ ｒｎ Ｐ ｕｅｌ ｘ ｌｓ ｌ ｇ ａ — ａ ｅａ
Hale Waihona Puke 胞 释放再 通过 受体 介 导 的 细胞 内吞 作 用侵 入 其 它
细胞 ， 引发虫体 系统 感 染ｕ ］ 早 期 的 研 究 发 现 ， ． 在 苜蓿 银 纹 夜 蛾 核 多 角 体 病 毒 （ ｔｇ ａ ｈ ａｉ Ａｕｏ ｒｐ ａ ｃ ｌ—
Ｐ 和其他 Ｉ ＮＰ Ｖ） 组 Ｖｓ的 Ｂ 包 膜 中存 在 一 种 主 Ｖｓ
具有 膜融 合功 能 尚不 明确 ． 本文 将采 用瞬 时表达 实
验对 Ｐ ｘ ＧＶ ｆ基 因的功 能做初 步分 析 ， ｌｙ 研究 结果
要糖 蛋 白 Ｇ ６ ． Ｐ ４为 病 毒 吸 附 在 细 胞 表 面所 Ｐ ４Ｇ ６
构 成 （ １Ａ） 对 照 实 验 质 粒 ｐ ｄ ３ 一ｇ ｐ 由 图 一 ． Ｌ １ ０ｅ ｆ Ｒｏ ｒ ｎ ｈ ｍａ ｎ教授 惠 赠． 质粒 包 含 由 Ａｃ 该 ＭＮＰ ｅ Ｖ ｉｌ
Ｐ 和 中国棉铃虫 核 多角体 病 毒 （ ｌ ｏ ｅｐ ｒ Ｖ） Ｈｅｉ ｖｒ ａａ — ｃ
讨Ｐ ２ ｘ ６的 功 能 属性 ． 验 结 果 表 明 ， ｘ ６编 码 产 物 主 要 定 位 于 被 转 染 细 胞 的 细 胞 膜 上 ， 低 ｐ 实 Ｐ ２ 在 Ｈ
诱 导 下 未 观 察 到 被 转 染 细 胞膜 融合 现象 ．
关 键 词 ： 菜 蛾 颗 粒 体 病 毒 ； ｘ ６ Ｆ蛋 白 ；瞬时 表 达 小 Ｐ ２；
ｍｉ ｅ ａ ｉ ｇ ｅ ｎ ｃ ｅ ｐ ｌ ｈ ｄ ｏ ｉｕ ， Ｈ ｅ ｒ Ｖ ） ｇ ｒ ｓｎ ｌ ｕ ｌｏ ｏ ｙ ｅ ｒ ｖ ｒ ｓ ａ ＮＰ
的 Ｆ蛋 白都 具 有类 似 于 Ｇ ６ Ｐ ４的 由低 ｐ 触 发 的 Ｈ 膜融 合功 能［ ． 基 因 的同源序 列存 在 于所 有 基 ３ 因组 序列 已知 的 Ⅱ组 ＮＰ 、 ＶｓＧＶｓ 双 翅 目 Ｎ Ｖ 以 、 Ｐ 及几 种 昆虫 Ｅ ｒｎｉｉ ｄ ｅ 毒 ， 外 ， 见 于果 蝇 ｒａ ｔ ｒ ａ 病 ｖｉ 此 还 Ｄｒｓｐ ｉ ｌｎ ｇ ｓ ｒ 和 非 洲 疟 蚊 Ａｆ ｉ ｎ ｏｏ ｈｌ ｍｅａ ｏ ａ ｔ ａ ｅ ｒｃ ａ ｍａａ ｉ ｓｕｔ 。 这 些 Ｆ 同源 蛋 白都 具 有 膜 ｌ ｒ ｍｏｑ ｉ ． ａ ｏ 融合 功能域 同源 序列 Ｅ３ Ｉ ＮＰ 基 因组含 有 截 １． 组 ］ Ｖｓ
第 ４ 卷第 １ ４ 期
２１ ０ ０年 ３月
华中师范大学学报（ 自然 科 学 版 ）
Ｊ ＯｕＲＮＡＩ ０Ｆ Ｈ ＵＡＺ Ｈ０ＮＧ Ｎ０ＲＭ ＡＬ ＵＮＩ ＶＥＲＳ ＴＹ（ ｔ ｃ． １ Ｎａ ．Ｓ ｉ ）
Ｖ ０【４ Ｎｏ． ＿４ １
Ｍ ａ． ２ Ｏ ｒ Ｏ１
文章 编 号 ：１ ０ — １ ０ ２ １ ） １０ １ ５ ０ ０ １ ９ （ ０ ０ ０ １ ５０
必需 ， 在侵 入 的过 程 中介 导 由低 ｐ 触 发 的膜 融 Ｈ
将为 深 入探 讨 Ｆ蛋 白在病 毒 侵染 过程 中的作 用奠
定基 础．
合 ， 感染 后 期 介 导 子 代 病 毒 体 通 过 芽 殖 方 式 释 在 放ｌ ．Ｉ ＮＰ ２ Ｉ组 引 Ｖｓ含 有 另 一 种 膜 融 合 蛋 白 Ｆ蛋 白． 同属 Ｉ 组 ＮＰ 的 舞毒 蛾 核 多角 体 病 毒 （ ｙ Ｉ Ｖｓ Ｌ—
ｆ ｍ ｉａ ｏ ｃ ｍｕｔｐｅ ｕ １ｏ ｏｙ ｅ ｒ ｖｒ ｓ Ａｃ ｌｉｌ ｎ ｃｅ ｐ ｌ ｈ ｄ ｏ ｉｕ ， ＭＮ—
ｕｏ ｉ ｓ ｌｙ ｌｖｒ ，Ｐ ｘ ＧＶ） Ａｇ ｅ Ｖ 同 为 颗粒 体 病 毒 ． ｕ 与 ｓＧ
有文 献 报道 Ｐｘ Ｇ ｆ基 因不 能功 能性替 代 Ａｃ ｌｙ Ｖ Ｍ— ＮＰ ｐ ４基 因 ， 目前有 关 Ｐ ｘ ＧＶ ｆ基 因是 否 Ｖｇ ６ 但 ｌｙ
小菜 蛾 颗 粒体 病毒 Ｐ ２ ｘ ６基 因功 能 的初 步分 析
张 亚琴 ，董 慧 ，孟 海 燕 ，钟 雪 萍 ，黎 路林
（ 中 师范 大学 生命 科 学 学 院 ，遗 传 调控 与 整 合 生 物学 湖北 省重 点 实 验室 ， 汉 ４ ０７ ） 华 武 ３ ０ ９
摘
要 ： Ｐｘ ６和 Ｐ ２ 一ｇ ｐ融 合 基 因 瞬 时 表 达 质 粒 对 多 种 昆 虫 传 代 细 胞 系 进 行 转 染 实 验 ， 用 ２ ｘ ６ｅ ｆ 探
ｅ ｇｕ ｍ ｕ ｔｐ ｅ ｎｕ １ｏｐ ｙｈ ｄｒ ｖ ｒ ， Ｓｅ Ｎ — ｘｉ ａ ｌｉ ｌ ｃ ｅ ｏｌ ｅ ｏ ｉｕｓ Ｍ
质粒 载体 ｐＥ ｇｐａ （ 发 表 ） 将 一 拷 贝绿 Ｉ ｅ ｆ—ｅ 未 是 色荧 光蛋 白编 码 序 列 ｅ ｆ ｇ ｐ与苜 蓿 银 纹 夜 蛾 核 多 角体病 毒 ａ ｅ基 因串联 后 插 入 ｐＥ ３１ Ｐ ｌＰ ｌ 的 下 游
短的 ｆ 因的同源序列． 表达产 物存在于 Ｂ 基 其 Ｖｓ 的包 膜 ． 近 ， ｎ等 报道 黄地 老 虎颗 粒体 病 最 Ｙｉ
毒 （ ｒ ｔ ｅ ｅｕ ｒｎ ｌｖｒ ｓ Ａｇ ｏｉ ｓｇ ｔｍ ｇａ ｕｏ ｉ ，Ａｇ ｅ ｓ ｕ ｓＧＶ） ＿ 的 厂
基 因能 够功 能 性 替代 Ａｃ ＭＮＰ 的 ｇ ６ Ｖ ｐ ４基 因 ， 具
１ 材 料 和 方 法
１ １ 质 粒 、 株 及 细 胞 ． 菌
Ｉ ＭＮＰ 、 菜 夜 蛾 核 多 角 体 病 毒 （ ｐ ｄ ｐｅａ ｄ Ｖ） 甜 Ｓ ｏ ｏ ｔｒ
中图分类号 ： ５３２５ Ｘ ０． ２ 文献 标 识 码 ：Ａ
杆 状病 毒在 其复制 周期 中产 生两种 病 毒体 ： 包 含体 源 病毒 体 （ ｃ ｓ ｎｄ ｒ ｅ ｉ ｓ Ｏｃｌ ｉ — ｅｉ ｄ ｖｒ ，ＯＤ 和 ｕ ｏ ｖ ｕ Ｖ） 芽殖病 毒体 （ ｕ ｄ ｄｖｒ ｓ Ｖ） Ｏ Ｖｓ 在 于包 Ｂ ｄ ｅ ｉ ，Ｂ ． Ｄ ｕ 存 含体 中 ， 在被 宿主 昆虫吞 食后通 过膜 融合 侵染 虫体 中肠上 皮细 胞． Ｖｓ通 过 芽 殖 的方 式 从 受 感 染 细 Ｂ
有 膜融 合功 能．
小 菜蛾颗 粒体 病 毒 （ ｌｔｌ ｙｏｔｌ ｒｎ Ｐ ｕｅｌ ｘ ｌｓ ｌ ｇ ａ — ａ ｅａ
Hale Waihona Puke 胞 释放再 通过 受体 介 导 的 细胞 内吞 作 用侵 入 其 它
细胞 ， 引发虫体 系统 感 染ｕ ］ 早 期 的 研 究 发 现 ， ． 在 苜蓿 银 纹 夜 蛾 核 多 角 体 病 毒 （ ｔｇ ａ ｈ ａｉ Ａｕｏ ｒｐ ａ ｃ ｌ—
Ｐ 和其他 Ｉ ＮＰ Ｖ） 组 Ｖｓ的 Ｂ 包 膜 中存 在 一 种 主 Ｖｓ
具有 膜融 合功 能 尚不 明确 ． 本文 将采 用瞬 时表达 实
验对 Ｐ ｘ ＧＶ ｆ基 因的功 能做初 步分 析 ， ｌｙ 研究 结果
要糖 蛋 白 Ｇ ６ ． Ｐ ４为 病 毒 吸 附 在 细 胞 表 面所 Ｐ ４Ｇ ６
构 成 （ １Ａ） 对 照 实 验 质 粒 ｐ ｄ ３ 一ｇ ｐ 由 图 一 ． Ｌ １ ０ｅ ｆ Ｒｏ ｒ ｎ ｈ ｍａ ｎ教授 惠 赠． 质粒 包 含 由 Ａｃ 该 ＭＮＰ ｅ Ｖ ｉｌ
Ｐ 和 中国棉铃虫 核 多角体 病 毒 （ ｌ ｏ ｅｐ ｒ Ｖ） Ｈｅｉ ｖｒ ａａ — ｃ
讨Ｐ ２ ｘ ６的 功 能 属性 ． 验 结 果 表 明 ， ｘ ６编 码 产 物 主 要 定 位 于 被 转 染 细 胞 的 细 胞 膜 上 ， 低 ｐ 实 Ｐ ２ 在 Ｈ
诱 导 下 未 观 察 到 被 转 染 细 胞膜 融合 现象 ．
关 键 词 ： 菜 蛾 颗 粒 体 病 毒 ； ｘ ６ Ｆ蛋 白 ；瞬时 表 达 小 Ｐ ２；
ｍｉ ｅ ａ ｉ ｇ ｅ ｎ ｃ ｅ ｐ ｌ ｈ ｄ ｏ ｉｕ ， Ｈ ｅ ｒ Ｖ ） ｇ ｒ ｓｎ ｌ ｕ ｌｏ ｏ ｙ ｅ ｒ ｖ ｒ ｓ ａ ＮＰ
的 Ｆ蛋 白都 具 有类 似 于 Ｇ ６ Ｐ ４的 由低 ｐ 触 发 的 Ｈ 膜融 合功 能［ ． 基 因 的同源序 列存 在 于所 有 基 ３ 因组 序列 已知 的 Ⅱ组 ＮＰ 、 ＶｓＧＶｓ 双 翅 目 Ｎ Ｖ 以 、 Ｐ 及几 种 昆虫 Ｅ ｒｎｉｉ ｄ ｅ 毒 ， 外 ， 见 于果 蝇 ｒａ ｔ ｒ ａ 病 ｖｉ 此 还 Ｄｒｓｐ ｉ ｌｎ ｇ ｓ ｒ 和 非 洲 疟 蚊 Ａｆ ｉ ｎ ｏｏ ｈｌ ｍｅａ ｏ ａ ｔ ａ ｅ ｒｃ ａ ｍａａ ｉ ｓｕｔ 。 这 些 Ｆ 同源 蛋 白都 具 有 膜 ｌ ｒ ｍｏｑ ｉ ． ａ ｏ 融合 功能域 同源 序列 Ｅ３ Ｉ ＮＰ 基 因组含 有 截 １． 组 ］ Ｖｓ
第 ４ 卷第 １ ４ 期
２１ ０ ０年 ３月
华中师范大学学报（ 自然 科 学 版 ）
Ｊ ＯｕＲＮＡＩ ０Ｆ Ｈ ＵＡＺ Ｈ０ＮＧ Ｎ０ＲＭ ＡＬ ＵＮＩ ＶＥＲＳ ＴＹ（ ｔ ｃ． １ Ｎａ ．Ｓ ｉ ）
Ｖ ０【４ Ｎｏ． ＿４ １
Ｍ ａ． ２ Ｏ ｒ Ｏ１
文章 编 号 ：１ ０ — １ ０ ２ １ ） １０ １ ５ ０ ０ １ ９ （ ０ ０ ０ １ ５０
必需 ， 在侵 入 的过 程 中介 导 由低 ｐ 触 发 的膜 融 Ｈ
将为 深 入探 讨 Ｆ蛋 白在病 毒 侵染 过程 中的作 用奠
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合 ， 感染 后 期 介 导 子 代 病 毒 体 通 过 芽 殖 方 式 释 在 放ｌ ．Ｉ ＮＰ ２ Ｉ组 引 Ｖｓ含 有 另 一 种 膜 融 合 蛋 白 Ｆ蛋 白． 同属 Ｉ 组 ＮＰ 的 舞毒 蛾 核 多角 体 病 毒 （ ｙ Ｉ Ｖｓ Ｌ—
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有文 献 报道 Ｐｘ Ｇ ｆ基 因不 能功 能性替 代 Ａｃ ｌｙ Ｖ Ｍ— ＮＰ ｐ ４基 因 ， 目前有 关 Ｐ ｘ ＧＶ ｆ基 因是 否 Ｖｇ ６ 但 ｌｙ
小菜 蛾 颗 粒体 病毒 Ｐ ２ ｘ ６基 因功 能 的初 步分 析
张 亚琴 ，董 慧 ，孟 海 燕 ，钟 雪 萍 ，黎 路林
（ 中 师范 大学 生命 科 学 学 院 ，遗 传 调控 与 整 合 生 物学 湖北 省重 点 实 验室 ， 汉 ４ ０７ ） 华 武 ３ ０ ９
摘
要 ： Ｐｘ ６和 Ｐ ２ 一ｇ ｐ融 合 基 因 瞬 时 表 达 质 粒 对 多 种 昆 虫 传 代 细 胞 系 进 行 转 染 实 验 ， 用 ２ ｘ ６ｅ ｆ 探
ｅ ｇｕ ｍ ｕ ｔｐ ｅ ｎｕ １ｏｐ ｙｈ ｄｒ ｖ ｒ ， Ｓｅ Ｎ — ｘｉ ａ ｌｉ ｌ ｃ ｅ ｏｌ ｅ ｏ ｉｕｓ Ｍ
质粒 载体 ｐＥ ｇｐａ （ 发 表 ） 将 一 拷 贝绿 Ｉ ｅ ｆ—ｅ 未 是 色荧 光蛋 白编 码 序 列 ｅ ｆ ｇ ｐ与苜 蓿 银 纹 夜 蛾 核 多 角体病 毒 ａ ｅ基 因串联 后 插 入 ｐＥ ３１ Ｐ ｌＰ ｌ 的 下 游
短的 ｆ 因的同源序列． 表达产 物存在于 Ｂ 基 其 Ｖｓ 的包 膜 ． 近 ， ｎ等 报道 黄地 老 虎颗 粒体 病 最 Ｙｉ
毒 （ ｒ ｔ ｅ ｅｕ ｒｎ ｌｖｒ ｓ Ａｇ ｏｉ ｓｇ ｔｍ ｇａ ｕｏ ｉ ，Ａｇ ｅ ｓ ｕ ｓＧＶ） ＿ 的 厂
基 因能 够功 能 性 替代 Ａｃ ＭＮＰ 的 ｇ ６ Ｖ ｐ ４基 因 ， 具