抗菌肽的应用及存在的问题
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２ 抗菌肽转基因的研究
天然抗菌肽由于分子量小， 直接从动植物组织中提取 时 ， 分 离 提 纯 存 在 一 定 的 困 难 ， 合 成 肽 价 格 昂 贵 。因 此 将 抗 菌肽基因利用基因工程转化进微生物表达系统或导入动 植物体内， 不仅可获得量丰的抗菌肽， 而且为改造物种获 得 优 良 抗 病 品 种 提 供 了 有 效 途 径 。以 下 分 别 从 动 物 和 植 物 两个方面总结抗菌肽在转基因方面的应用。 ２．１ 转抗菌肽基因动物
１９８５ 年 ， 由 广 州 星 群 制 药 厂 、广 东 省 农 科 院 及 华 南 农 业大学合作， 以五龄家蚕熟蚕为材料， 经热激诱导后制成 的干燥粉末， 装入胶囊作口服药物治疗肝炎。经广州市传 染 病 院 （ ５２ 例 ） 、暨 南 大 学 华 侨 医 院 （ ６４ 例 ） 、广 州 中 医 院 （ ２０ 例 ） 及 其 它 临 床 单 位 共 １３２ 例 肝 炎 临 床 试 验 表 明 ， 五 龄丸具有改善肝炎病人的蛋白代谢的功能［３］ 。
抗菌肽成分为易消化吸收的氨基酸， 可作为畜禽饲料 添加剂取代或部分取代目前饲喂动物所用的抗生素， 减少 抗 生 素 对 动 物 体 的 危 害 。目 前 广 东 省 应 用 抗 菌 肽 基 因 转 化 酵母进行高效表达， 经发酵条件优化， 生产抗菌肽酵母制 剂， 用作畜禽及水产饲料添加剂， 代替抗生素预防及治疗 仔猪白痢和雏鸡白痢有明显效果。
ＷＡＣＨＩＮＧＥＲ 等 ［ １３］ 的 研 究 结 果 表 明 ， 天 蚕 素 和 蜂 毒 素 可 以 在 亚 毒 性 浓 度 下 抑 制 艾 滋 病 毒 ＨＩＶ－ １ 的 基 因 表 达 。 从 而 减 少 ＨＩＶ－１ 的 增 殖 。 １．４ 抗寄生虫作用
ＤＩＡＺ－ＡＣＨＩＲＩＣＡ 等 ［１４］ 发 现 一 种 合 成 的 天 蚕 素－ 蜂 毒 素 杂 合 体 对 莱 仕 曼 原 鞭 毛 虫 有 损 伤 作 用 。 ＳＨＡＨＡＢＵＤＤＩＮ［ １５］ 研究发现昆虫抗菌肽对感染蚊子的疟原虫的卵囊期和 孢子期有明显的损伤， 而且该抗菌肽浓度对蚊子本身没
以柞蚕蛹为材料制成的胶囊肾肝宁， 经大连水产制药 厂 １３９ 例 治 疗 慢 性 肾 炎 临 床 试 验 ， 治 愈 率 ３１．０％ ， 好 转 率 ５５．４％， 有 效 率 ８６．４％［ ３］ 。 １．２ 抗肿瘤作用
ＪＡＹＮＥＳ［４］ 首 次 报 道 抗 菌 肽 对 肿 瘤 细 胞 有 杀 伤 作 用 。韩 献 萍 等 ［５］ 报 道 了 柞 蚕 抗 菌 肽 对 人 宫 颈 癌 细 胞 也 有 杀 伤 作 用 。贾 红 武 等 ［ ６］ 从 家 蚕 蛹 血 淋 巴 中 分 离 纯 化 的 抗 菌 肽 Ｂ 组 分 对 体 外 培 养 的 巨 噬 细 胞 淋 巴 瘤 Ｕ９３７ 细 胞 、 人 髓 样 白 血
基 金 项 目 ： 广 东 省 医 药 卫 生 基 金 （ Ｎｏ．Ａ２００６３７１） 。 作 者 简 介 ： 林 承 德 （ １９８３～） ， 男 ， 医 学 检 验 专 业 ， 本 科 实 习 生 。 ＊ 通讯作者： 彭鸿娟， 女， 副教授， 主要从事基因组学与蛋白质组学
方 面 研 究 ， Ｅ－ ｍａｉｌ： ｆｌｏｒｉａｐｅｎｇ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
·８６·
［文章编号］ １６７２－３６１９（２００７）０１－００８６－０５
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｖｏｌ．７ Ｎｏ．１ Ｊａｎ．２００７ · 科学论坛 ·
抗菌肽的应用及存在的问题
林承德， 彭鸿娟＊ ， 王衍海 （ 南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系， 广州 ５１０５１５）
· ８７ ·
力 。李 乃 坚 等 ［ ２４］ 于 １９９３～１９９６ 年 间 应 用 花 粉 管 通 道 技 术 将 天蚕抗菌肽 Ｂ 基因导入烟草子房， 获得的抗青枯病转基因 株系与对照组相比， 明显推迟了发病， 病害程度及死苗率 均显著降低。 ２．３ 农业和畜牧领域
抗 菌 肽 对 一 些 农 作 物 和 经 济 作 物 病 原 菌 亦 有 作 用 。美 国 的 Ｒ＆Ｄ 报 道 ， 抗 菌 肽 可 作 为 饲 料 防 霉 剂 ； 温 刘 发 等 ［ ２５］ 应 用含抗菌肽的柞蚕免疫血淋巴粉添加于断奶仔猪饲料中， 饲喂试验表明， 柞蚕抗菌肽可减轻断奶仔猪的腹泻。他们 又将抗菌肽的发酵制剂制作为饲料添加剂喂粤黄鸡， 研究 表 明 该 制 剂 可 促 进 小 鸡 生 长 和 减 少 排 泄 物 氮 含 量 ［ ２６］ 。
肽的存在问ห้องสมุดไป่ตู้及应用前景。
【关键词】 抗菌肽； 生产方法； 应用
中 图 分 类 号 ： Ｑ５１６
文献标识码： Ａ
抗菌肽是一类广泛存在于生物体中的小分子多肽， 具 有广谱抗菌性， 理化性质稳定， 微生物不易对其产生抗药 性 ， 是 生 物 体 自 身 防 御 系 统 的 一 部 分 。自 １９７２ 年 瑞 典 科 学 家 Ｂｏｍａｎ 首 先 发 现 抗 菌 肽 以 来 ， 科 学 家 们 已 经 在 昆 虫 、被 囊 动 物 （ ｔｕｎｉｃａｔｅ） 、两 栖 动 物 、鸟 类 、鱼 类 、哺 乳 动 物 、植 物 乃 至 人 类 等 多 种 生 物 体 中 发 现 并 分 离 获 得 了 ３００ 多 种 内 源 性 抗 菌 肽 ［ １］ 。由 于 其 能 抗 革 兰 氏 阳 性 菌 、革 兰 氏 阴 性 菌 、 真 菌 ， 抑 杀 多 重 耐 药 性 菌 株 和 肿 瘤 细 胞 ， 并 且 对 病 毒 、原 虫 及 癌 细 胞 也 有 作 用 ［ １］ ， 近 二 十 年 来 ， 抗 菌 肽 在 医 药 、转 基 因 应 用 、农 业 和 畜 牧 业 、食 品 和 化 妆 品 等 领 域 均 显 示 了 广 泛 的应用前景。
【摘要】 抗菌肽是生物体抵御外源性病原微生物入侵而产生的一类多肽， 从细菌到高等哺乳动物都普遍
存 在 。 和 传 统 的 抗 生 素 相 比 ， 抗 菌 肽 分 子 量 小 、热 稳 定 性 好 ， 具 有 抗 细 菌 、真 菌 、病 毒 、原 虫 及 抑 癌 活 性 等 广 谱 杀
菌 作 用 ， 对 动 物 安 全 、无 毒 、无 副 作 用 。 本 文 介 绍 了 目 前 抗 菌 肽 在 生 产 和 应 用 领 域 方 面 的 研 究 状 况 ， 并 探 讨 抗 菌
由辽宁省农科院大连生物技术研究所等研究而成的 柞 蚕 素 ， 对 １００ 例 乙 型 肝 炎 临 床 试 验 结 果 ： 临 床 治 愈 率 ６０％、显 效 率 ２９％、有 效 率 ６％、总 有 效 率 ９５％。主 要 表 现 为 临 床 症 状 消 失 ， 体 重 、体 征 及 肝 功 能 均 有 明 显 改 善 ， ＨＢｅＡｇ 转 阴 率 达 ６２％， １００ 例 临 床 观 察 未 发 现 任 何 毒 副 作 用 ［ ３］ 。
李 丹 青 等 ［ ２０］ 用 合 成 的 柞 蚕 Ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｄ 基 因 通 过 三 亲 法 导 入 根 癌 农 杆 菌 后 感 染 烟 草 叶 盘 或 水 稻 、桑 树 等 植 物 ， 获 得 一 定 的 进 展 。 ＤＥＳＴＥＮＦＡＮＯ－ＢＥＬＴＡＮ［ ２１］ 报 道 构 建 的 Ｓｈｉｖａ－１ 植 物 表 达 载 体 导 入 烟 草 后 ， 在 转 Ｓｈｉｖａ－１ 基 因 的 烟 草 上 青 枯 病 发 病 延 迟 ， 病 情 指 数 低 ， 植 株 死 亡 率 降 低 。贾 士 荣 等 ［ ２２］ 自 １９８６ 年 开 始 选 定 昆 虫 （ 蚕 ） 细 胞 产 生 的 抗 菌 肽 ｃｅｃｒｏｐｉｎ 进 行 马 铃 薯 抗 青 枯 病 基 因 工 程 的 研 究 ， 改 造 并 合 成 了 比 ｃｅｃｒｏｐｉｎ 抗 菌 力 更 强 的 Ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｂ、Ｍｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｂ、 ｍｎｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｂ、Ｓｈｉｖａ Ａ 及 ＷＨＤ 等 抗 菌 肽 基 因 并 导 入 我 国 七 个 马 铃 薯 栽 培 品 种 中 ， 转 化 出 １０５０ 个 转 基 因 株 系 。通 过 田间试验， 筛选出 ３ 个株系， 其抗病性比起始品种提高 １～ ３ 级 。黄 大 年 等 ［ ２３］ 以 抗 菌 肽 Ｂ 基 因 受 控 于 水 稻 Ａ 组 成 一 个 嵌 合 基 因 ， 新 构 建 成 载 体 ＰＣＢ１ 后 用 基 因 枪 法 导 入 水 稻 ， 转基因水稻植株增强了对水稻白叶病和细条病的抵抗
病 Ｋ５６２ 细 胞 、肉 瘤 Ｓ１８０ 细 胞 、喉 癌 Ｈｅｐ－２ 细 胞 和 宫 颈 癌 Ｈｅｌａ 细 胞 有 明 显 的 选 择 性 杀 伤 作 用 。胡 云 龙 等 ［ ７］ 报 道 家 蚕 抗 菌 肽 对 小 鼠 Ｓ１８０ 肉 瘤 有 抑 制 作 用 。 许 玉 澄 等 ［ ８］ 研 究 表 明 ， 家 蚕 抗 菌 肽 能 显 著 抑 制 Ｓ１８０ 荷 瘤 小 鼠 的 瘤 重 和 ＥＡＣ 艾 氏 腹 水 瘤 荷 瘤 小 鼠 腹 水 的 积 累 ， 对 Ｓ１８０ 肉 瘤 和 Ｕ１４ 宫 颈 癌 的 抑 瘤 率 达 ３０％～５０％， 但 对 外 周 血 白 细 胞 数 没 有 影 响 。张 卫 民 等 ［９， １０］ 报 告 柞 蚕 抗 菌 肽 对 人 肝 癌 细 胞 ＢＥＬ－７４０２、 直 肠 癌 细 胞 ＨＲ８３４０ 均 有 杀 伤 作 用 。 赵 东 红 等 ［ １１， １２］ 在 扫 描 电 镜 下 观 察 到 家 蚕 抗 菌 肽 ＣＭ４ 对 离 体 Ｕ９３７、Ｈｅｌａ 癌 细 胞 骨 架 及 核 骨 架 有 明 显 损 伤 作 用 。抗 菌 肽 能 特 异 性 抑 制 某 些 肿瘤的生长， 对人体正常细胞无害， 极有可能成为无毒或 低毒的抗肿瘤新药。 １．３ 抗病毒作用
转 抗 菌 肽 基 因 昆 虫 ： ＤＵＲＶＡＳＵＬＡ 等 ［ １７］ 成 功 地 获 得 一 个转天蚕素 Ａ 基因共生菌。此天蚕素 Ａ 转入昆虫长红猎 蝽 （ Ｒｈｏｄｎｉｕｓｐｒｏｌｉｘｕｓ） 中 。 昆 虫 携 带 了 此 转 基 因 的 共 生 菌 后， 感染昆虫的锥虫数量明显减少或消失。
转 抗 菌 肽 基 因 鼠 ： ＲＥＥＤ 等 ［ １８］ 将 Ｓｈｉｖａ１ａ 基 因 与 小 鼠 ＩＬ－ ２ 基 因 的 ５ｃ 端 从 － ５９３ 到 ＋１１０ 区 域 以 及 ＳＶ４０ 的 多 聚 腺苷酸， 剪接信号肽基因片段一起以微注射法转入小鼠 中， 结果表明转基因鼠对布鲁氏杆菌病抵抗力明显增加， 而且这个重组基因对其他哺乳动物也同样起作用。
１ 医药领域
１．１ 抗菌作用 ＳＣＨＷＡＢ 等 ［ ２］ 曾 报 道 ， 用 合 成 的 家 兔 ＮＰ１（ 中 性 粒 细 胞
肽 ） 可 作 为 角 膜 保 存 液 Ｏｐｔｉｓｏｌ 的 杀 菌 剂 ， 含 ２００ !ｇ ／ ｍｌ ＮＰ１ 的 Ｏｐｔｉｓｏｌ 在 ４℃、２３℃、３７℃下 均 能 杀 死 ９９．９％的 金 黄 色 葡 萄 球 菌 、链 球 菌 和 绿 脓 杆 菌 ， 故 认 为 是 一 种 非 常 有 前 途 的 非抗菌素角膜保存液。
转 抗 菌 肽 基 因 蚊 子 ： 在 Ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｂ 基 础 上 构 建 成 杂 合 肽 Ｓｈｉｖａ－３， 以 蚊 肠 道 特 异 性 胰 蛋 白 酶 基 因 ５ｃ 端 区 域 作 启 动 子 、 融 合 基 因 ＧＳＴ－Ｓｈｉｖａ－３ 作 报 告 基 因 构 建 质 粒 导 入 蚊 子 产 生 一 种 转 基 因 蚊 。此 蚊 子 肠 道 内 可 合 成 并 分 泌 的 融 合 蛋 白 ＧＳＴ－Ｓｈｉｖａ－３ 对 细 菌 和 疟 原 虫 有 高 效 的 杀 伤 力 ［ １９］ 。 ２．２ 转抗菌肽植物
热带医学杂志 ２００７ 年 １ 月第 ７ 卷第 １ 期
有毒性。 １．５ 其它作用
ＪＡＹＮＥＳ 等 ［ １６］ 曾 将 细 胞 松 驰 素 作 用 于 哺 乳 动 物 细 胞 以 抑制其细胞骨架功能， 发现这种经细胞松驰素处理后的细 胞 对 抗 菌 肽 溶 胞 作 用 的 敏 感 性 大 大 增 加 了 。这 一 方 面 说 明 细胞骨架系统在细胞对抗菌肽溶胞作用的敏感性上确实 发挥着重要的负性作用； 另一方面则提示， 针对细胞骨架 蛋白的发生和抑制可能会衍生出有关抗菌肽药用开发的 新的研究方向。
天然抗菌肽由于分子量小， 直接从动植物组织中提取 时 ， 分 离 提 纯 存 在 一 定 的 困 难 ， 合 成 肽 价 格 昂 贵 。因 此 将 抗 菌肽基因利用基因工程转化进微生物表达系统或导入动 植物体内， 不仅可获得量丰的抗菌肽， 而且为改造物种获 得 优 良 抗 病 品 种 提 供 了 有 效 途 径 。以 下 分 别 从 动 物 和 植 物 两个方面总结抗菌肽在转基因方面的应用。 ２．１ 转抗菌肽基因动物
１９８５ 年 ， 由 广 州 星 群 制 药 厂 、广 东 省 农 科 院 及 华 南 农 业大学合作， 以五龄家蚕熟蚕为材料， 经热激诱导后制成 的干燥粉末， 装入胶囊作口服药物治疗肝炎。经广州市传 染 病 院 （ ５２ 例 ） 、暨 南 大 学 华 侨 医 院 （ ６４ 例 ） 、广 州 中 医 院 （ ２０ 例 ） 及 其 它 临 床 单 位 共 １３２ 例 肝 炎 临 床 试 验 表 明 ， 五 龄丸具有改善肝炎病人的蛋白代谢的功能［３］ 。
抗菌肽成分为易消化吸收的氨基酸， 可作为畜禽饲料 添加剂取代或部分取代目前饲喂动物所用的抗生素， 减少 抗 生 素 对 动 物 体 的 危 害 。目 前 广 东 省 应 用 抗 菌 肽 基 因 转 化 酵母进行高效表达， 经发酵条件优化， 生产抗菌肽酵母制 剂， 用作畜禽及水产饲料添加剂， 代替抗生素预防及治疗 仔猪白痢和雏鸡白痢有明显效果。
ＷＡＣＨＩＮＧＥＲ 等 ［ １３］ 的 研 究 结 果 表 明 ， 天 蚕 素 和 蜂 毒 素 可 以 在 亚 毒 性 浓 度 下 抑 制 艾 滋 病 毒 ＨＩＶ－ １ 的 基 因 表 达 。 从 而 减 少 ＨＩＶ－１ 的 增 殖 。 １．４ 抗寄生虫作用
ＤＩＡＺ－ＡＣＨＩＲＩＣＡ 等 ［１４］ 发 现 一 种 合 成 的 天 蚕 素－ 蜂 毒 素 杂 合 体 对 莱 仕 曼 原 鞭 毛 虫 有 损 伤 作 用 。 ＳＨＡＨＡＢＵＤＤＩＮ［ １５］ 研究发现昆虫抗菌肽对感染蚊子的疟原虫的卵囊期和 孢子期有明显的损伤， 而且该抗菌肽浓度对蚊子本身没
以柞蚕蛹为材料制成的胶囊肾肝宁， 经大连水产制药 厂 １３９ 例 治 疗 慢 性 肾 炎 临 床 试 验 ， 治 愈 率 ３１．０％ ， 好 转 率 ５５．４％， 有 效 率 ８６．４％［ ３］ 。 １．２ 抗肿瘤作用
ＪＡＹＮＥＳ［４］ 首 次 报 道 抗 菌 肽 对 肿 瘤 细 胞 有 杀 伤 作 用 。韩 献 萍 等 ［５］ 报 道 了 柞 蚕 抗 菌 肽 对 人 宫 颈 癌 细 胞 也 有 杀 伤 作 用 。贾 红 武 等 ［ ６］ 从 家 蚕 蛹 血 淋 巴 中 分 离 纯 化 的 抗 菌 肽 Ｂ 组 分 对 体 外 培 养 的 巨 噬 细 胞 淋 巴 瘤 Ｕ９３７ 细 胞 、 人 髓 样 白 血
基 金 项 目 ： 广 东 省 医 药 卫 生 基 金 （ Ｎｏ．Ａ２００６３７１） 。 作 者 简 介 ： 林 承 德 （ １９８３～） ， 男 ， 医 学 检 验 专 业 ， 本 科 实 习 生 。 ＊ 通讯作者： 彭鸿娟， 女， 副教授， 主要从事基因组学与蛋白质组学
方 面 研 究 ， Ｅ－ ｍａｉｌ： ｆｌｏｒｉａｐｅｎｇ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
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［文章编号］ １６７２－３６１９（２００７）０１－００８６－０５
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｖｏｌ．７ Ｎｏ．１ Ｊａｎ．２００７ · 科学论坛 ·
抗菌肽的应用及存在的问题
林承德， 彭鸿娟＊ ， 王衍海 （ 南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系， 广州 ５１０５１５）
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力 。李 乃 坚 等 ［ ２４］ 于 １９９３～１９９６ 年 间 应 用 花 粉 管 通 道 技 术 将 天蚕抗菌肽 Ｂ 基因导入烟草子房， 获得的抗青枯病转基因 株系与对照组相比， 明显推迟了发病， 病害程度及死苗率 均显著降低。 ２．３ 农业和畜牧领域
抗 菌 肽 对 一 些 农 作 物 和 经 济 作 物 病 原 菌 亦 有 作 用 。美 国 的 Ｒ＆Ｄ 报 道 ， 抗 菌 肽 可 作 为 饲 料 防 霉 剂 ； 温 刘 发 等 ［ ２５］ 应 用含抗菌肽的柞蚕免疫血淋巴粉添加于断奶仔猪饲料中， 饲喂试验表明， 柞蚕抗菌肽可减轻断奶仔猪的腹泻。他们 又将抗菌肽的发酵制剂制作为饲料添加剂喂粤黄鸡， 研究 表 明 该 制 剂 可 促 进 小 鸡 生 长 和 减 少 排 泄 物 氮 含 量 ［ ２６］ 。
肽的存在问ห้องสมุดไป่ตู้及应用前景。
【关键词】 抗菌肽； 生产方法； 应用
中 图 分 类 号 ： Ｑ５１６
文献标识码： Ａ
抗菌肽是一类广泛存在于生物体中的小分子多肽， 具 有广谱抗菌性， 理化性质稳定， 微生物不易对其产生抗药 性 ， 是 生 物 体 自 身 防 御 系 统 的 一 部 分 。自 １９７２ 年 瑞 典 科 学 家 Ｂｏｍａｎ 首 先 发 现 抗 菌 肽 以 来 ， 科 学 家 们 已 经 在 昆 虫 、被 囊 动 物 （ ｔｕｎｉｃａｔｅ） 、两 栖 动 物 、鸟 类 、鱼 类 、哺 乳 动 物 、植 物 乃 至 人 类 等 多 种 生 物 体 中 发 现 并 分 离 获 得 了 ３００ 多 种 内 源 性 抗 菌 肽 ［ １］ 。由 于 其 能 抗 革 兰 氏 阳 性 菌 、革 兰 氏 阴 性 菌 、 真 菌 ， 抑 杀 多 重 耐 药 性 菌 株 和 肿 瘤 细 胞 ， 并 且 对 病 毒 、原 虫 及 癌 细 胞 也 有 作 用 ［ １］ ， 近 二 十 年 来 ， 抗 菌 肽 在 医 药 、转 基 因 应 用 、农 业 和 畜 牧 业 、食 品 和 化 妆 品 等 领 域 均 显 示 了 广 泛 的应用前景。
【摘要】 抗菌肽是生物体抵御外源性病原微生物入侵而产生的一类多肽， 从细菌到高等哺乳动物都普遍
存 在 。 和 传 统 的 抗 生 素 相 比 ， 抗 菌 肽 分 子 量 小 、热 稳 定 性 好 ， 具 有 抗 细 菌 、真 菌 、病 毒 、原 虫 及 抑 癌 活 性 等 广 谱 杀
菌 作 用 ， 对 动 物 安 全 、无 毒 、无 副 作 用 。 本 文 介 绍 了 目 前 抗 菌 肽 在 生 产 和 应 用 领 域 方 面 的 研 究 状 况 ， 并 探 讨 抗 菌
由辽宁省农科院大连生物技术研究所等研究而成的 柞 蚕 素 ， 对 １００ 例 乙 型 肝 炎 临 床 试 验 结 果 ： 临 床 治 愈 率 ６０％、显 效 率 ２９％、有 效 率 ６％、总 有 效 率 ９５％。主 要 表 现 为 临 床 症 状 消 失 ， 体 重 、体 征 及 肝 功 能 均 有 明 显 改 善 ， ＨＢｅＡｇ 转 阴 率 达 ６２％， １００ 例 临 床 观 察 未 发 现 任 何 毒 副 作 用 ［ ３］ 。
李 丹 青 等 ［ ２０］ 用 合 成 的 柞 蚕 Ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｄ 基 因 通 过 三 亲 法 导 入 根 癌 农 杆 菌 后 感 染 烟 草 叶 盘 或 水 稻 、桑 树 等 植 物 ， 获 得 一 定 的 进 展 。 ＤＥＳＴＥＮＦＡＮＯ－ＢＥＬＴＡＮ［ ２１］ 报 道 构 建 的 Ｓｈｉｖａ－１ 植 物 表 达 载 体 导 入 烟 草 后 ， 在 转 Ｓｈｉｖａ－１ 基 因 的 烟 草 上 青 枯 病 发 病 延 迟 ， 病 情 指 数 低 ， 植 株 死 亡 率 降 低 。贾 士 荣 等 ［ ２２］ 自 １９８６ 年 开 始 选 定 昆 虫 （ 蚕 ） 细 胞 产 生 的 抗 菌 肽 ｃｅｃｒｏｐｉｎ 进 行 马 铃 薯 抗 青 枯 病 基 因 工 程 的 研 究 ， 改 造 并 合 成 了 比 ｃｅｃｒｏｐｉｎ 抗 菌 力 更 强 的 Ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｂ、Ｍｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｂ、 ｍｎｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｂ、Ｓｈｉｖａ Ａ 及 ＷＨＤ 等 抗 菌 肽 基 因 并 导 入 我 国 七 个 马 铃 薯 栽 培 品 种 中 ， 转 化 出 １０５０ 个 转 基 因 株 系 。通 过 田间试验， 筛选出 ３ 个株系， 其抗病性比起始品种提高 １～ ３ 级 。黄 大 年 等 ［ ２３］ 以 抗 菌 肽 Ｂ 基 因 受 控 于 水 稻 Ａ 组 成 一 个 嵌 合 基 因 ， 新 构 建 成 载 体 ＰＣＢ１ 后 用 基 因 枪 法 导 入 水 稻 ， 转基因水稻植株增强了对水稻白叶病和细条病的抵抗
病 Ｋ５６２ 细 胞 、肉 瘤 Ｓ１８０ 细 胞 、喉 癌 Ｈｅｐ－２ 细 胞 和 宫 颈 癌 Ｈｅｌａ 细 胞 有 明 显 的 选 择 性 杀 伤 作 用 。胡 云 龙 等 ［ ７］ 报 道 家 蚕 抗 菌 肽 对 小 鼠 Ｓ１８０ 肉 瘤 有 抑 制 作 用 。 许 玉 澄 等 ［ ８］ 研 究 表 明 ， 家 蚕 抗 菌 肽 能 显 著 抑 制 Ｓ１８０ 荷 瘤 小 鼠 的 瘤 重 和 ＥＡＣ 艾 氏 腹 水 瘤 荷 瘤 小 鼠 腹 水 的 积 累 ， 对 Ｓ１８０ 肉 瘤 和 Ｕ１４ 宫 颈 癌 的 抑 瘤 率 达 ３０％～５０％， 但 对 外 周 血 白 细 胞 数 没 有 影 响 。张 卫 民 等 ［９， １０］ 报 告 柞 蚕 抗 菌 肽 对 人 肝 癌 细 胞 ＢＥＬ－７４０２、 直 肠 癌 细 胞 ＨＲ８３４０ 均 有 杀 伤 作 用 。 赵 东 红 等 ［ １１， １２］ 在 扫 描 电 镜 下 观 察 到 家 蚕 抗 菌 肽 ＣＭ４ 对 离 体 Ｕ９３７、Ｈｅｌａ 癌 细 胞 骨 架 及 核 骨 架 有 明 显 损 伤 作 用 。抗 菌 肽 能 特 异 性 抑 制 某 些 肿瘤的生长， 对人体正常细胞无害， 极有可能成为无毒或 低毒的抗肿瘤新药。 １．３ 抗病毒作用
转 抗 菌 肽 基 因 昆 虫 ： ＤＵＲＶＡＳＵＬＡ 等 ［ １７］ 成 功 地 获 得 一 个转天蚕素 Ａ 基因共生菌。此天蚕素 Ａ 转入昆虫长红猎 蝽 （ Ｒｈｏｄｎｉｕｓｐｒｏｌｉｘｕｓ） 中 。 昆 虫 携 带 了 此 转 基 因 的 共 生 菌 后， 感染昆虫的锥虫数量明显减少或消失。
转 抗 菌 肽 基 因 鼠 ： ＲＥＥＤ 等 ［ １８］ 将 Ｓｈｉｖａ１ａ 基 因 与 小 鼠 ＩＬ－ ２ 基 因 的 ５ｃ 端 从 － ５９３ 到 ＋１１０ 区 域 以 及 ＳＶ４０ 的 多 聚 腺苷酸， 剪接信号肽基因片段一起以微注射法转入小鼠 中， 结果表明转基因鼠对布鲁氏杆菌病抵抗力明显增加， 而且这个重组基因对其他哺乳动物也同样起作用。
１ 医药领域
１．１ 抗菌作用 ＳＣＨＷＡＢ 等 ［ ２］ 曾 报 道 ， 用 合 成 的 家 兔 ＮＰ１（ 中 性 粒 细 胞
肽 ） 可 作 为 角 膜 保 存 液 Ｏｐｔｉｓｏｌ 的 杀 菌 剂 ， 含 ２００ !ｇ ／ ｍｌ ＮＰ１ 的 Ｏｐｔｉｓｏｌ 在 ４℃、２３℃、３７℃下 均 能 杀 死 ９９．９％的 金 黄 色 葡 萄 球 菌 、链 球 菌 和 绿 脓 杆 菌 ， 故 认 为 是 一 种 非 常 有 前 途 的 非抗菌素角膜保存液。
转 抗 菌 肽 基 因 蚊 子 ： 在 Ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｂ 基 础 上 构 建 成 杂 合 肽 Ｓｈｉｖａ－３， 以 蚊 肠 道 特 异 性 胰 蛋 白 酶 基 因 ５ｃ 端 区 域 作 启 动 子 、 融 合 基 因 ＧＳＴ－Ｓｈｉｖａ－３ 作 报 告 基 因 构 建 质 粒 导 入 蚊 子 产 生 一 种 转 基 因 蚊 。此 蚊 子 肠 道 内 可 合 成 并 分 泌 的 融 合 蛋 白 ＧＳＴ－Ｓｈｉｖａ－３ 对 细 菌 和 疟 原 虫 有 高 效 的 杀 伤 力 ［ １９］ 。 ２．２ 转抗菌肽植物
热带医学杂志 ２００７ 年 １ 月第 ７ 卷第 １ 期
有毒性。 １．５ 其它作用
ＪＡＹＮＥＳ 等 ［ １６］ 曾 将 细 胞 松 驰 素 作 用 于 哺 乳 动 物 细 胞 以 抑制其细胞骨架功能， 发现这种经细胞松驰素处理后的细 胞 对 抗 菌 肽 溶 胞 作 用 的 敏 感 性 大 大 增 加 了 。这 一 方 面 说 明 细胞骨架系统在细胞对抗菌肽溶胞作用的敏感性上确实 发挥着重要的负性作用； 另一方面则提示， 针对细胞骨架 蛋白的发生和抑制可能会衍生出有关抗菌肽药用开发的 新的研究方向。