人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA kit定量检测试剂盒

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人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA kit定量检测试剂盒

方法:定性/定量

检测样本:血清/血浆及相关体液

人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA kit定量检测试剂盒组成:

试剂盒组成48孔配置96孔配置保存

说明书1份1份

封板膜2片(48)2片(96)

密封袋1个1个

酶标包被板1×481×962-8℃保存

标准品0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存

标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存

酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存

样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存

显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存

显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存

终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

20倍浓缩洗涤液20ml×1瓶30ml×1瓶2-8℃保存

人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA kit定量检测试剂盒

标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

标准品的稀释:

加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

温育:操作同3。

洗涤:操作同5。

显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。途:科研ELISA 检测试剂盒.免费提供实验代测服务.

脱氧核糖核酸酶Ⅰ各种种属有:人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊;植物。

标本齐全:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水等等;

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双抗体夹心法

1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过液。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。

2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳

性对照孔)。脱氧核糖核酸酶Ⅰ

3.加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。

4.加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

5.终止反应:于各反应孔中加入2M0.05ml。

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