人白细胞介素ELISA检测试剂盒
人白介素1β (IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
2022年修订第一版(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)产品货号:E-EL-H0149c产品规格:96T/48T/24T/96T*5Elabscience 人白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话技术部电话************电子邮箱(销售)********************电子邮箱(技术)**************************网址:具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved目录用途 (3)基本性能 (3)检测原理 (3)试剂盒组成及保存 (4)试验所需自备物品 (5)样品收集方法 (5)注意事项 (6)■ 试剂盒注意事项 (6)■ 样品注意事项 (6)样本稀释方案 (6)检测前准备工作 (7)操作步骤 (8)结果判断 (10)技术资源 (10)典型数据 (10)性能 (11)■ 精密度 (11)■ 回收率 (11)■ 线性 (11)声明 (12)Intended use (13)Character (13)Test principle (13)Kit components & Storage (14)Other supplies required (15)Sample collection (15)Note (16)■ Note for kit (16)■ Note for sample (16)Dilution Method (17)Reagent preparation (17)Assay procedure (18)Calculation of results (20)Technical resources (20)Typical data (20)Performance (21)■ Precision (21)■ Recovery (21)■ Linearity (21)Declaration (22)用途该试剂盒用于体外定量检测人 血清、血浆或其他相关生物液体中IL-1β浓度。
人白细胞介素6(IL-6)定量检测试剂盒(ELISA)
仅供科研使用,不得用于临床检验。
人白细胞介素6(IL-6)定量检测试剂盒(ELISA)说明书【产品名称】通用名称:人白细胞介素6(IL-6)定量检测试剂盒(ELISA)英文名称:Human Interleukin-6(IL-6)ELISA KIT【包装规格】48人份/盒,96人份/盒【预期用途】仅供科研使用,定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人白细胞介素6(IL-6)的浓度。
【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。
在预包被抗人白细胞介素6(IL-6)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入人白细胞介素6(IL-6)校准品和待测样本,再加入另一株HRP标记的抗人白细胞介素6(IL-6)抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。
加底物A 和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中人白细胞介素6(IL-6)的浓度正相关。
拟合校准品曲线,可以计算出样本中人白细胞介素6(IL-6)的浓度。
【主要组成成分】主要成分校准品浓度依次为:320、160、80、40、20、0 pg/ml。
校准品已经通过测试,结果表明HBs抗原阴性,HIV1、HIV2和HCV抗体阴性,由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质,本品必须按照具有潜在的感染性进行处理,处理过程应当遵循通用的安全措施。
需要但未提供的材料及耗材1、酶标仪2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml量筒7、无粉一次性乳胶手套8、质控品(可从蓝图生物科技产品研发系统中选择)【储存条件及有效期】1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期6个月。
2、开封使用后,包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中,密闭自封袋,并将全部试剂放回2-8℃冰箱。
白细胞介素6(IL-6)测定试剂盒(电化学发光免疫分析法)产品技术要求lztk
白细胞介素6(IL-6)测定试剂盒(电化学发光免疫分析法)适用范围:该试剂盒用于体外定量测定人体血清样本中白细胞介素6(IL-6)的含量。
1.1产品型号/规格:50人份/盒、100人份/盒。
1.2主要组成试剂盒由磁分离试剂(M)、试剂a(Ra)、试剂b(Rb)和定标品(IL-6-Cal)(选配)组成。
组成及含量如下:2.1 外观2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;2.1.2 磁分离试剂摇匀后应为棕色含固体微粒的均匀悬浊液,无明显凝集、无絮状物;2.1.3 其它液体组分应澄清,无异物,沉淀物或絮状物;2.1.4 包装标签应清晰、无磨损、易识别。
2.2 空白限应不大于1.5pg/mL。
2.3 准确度用IL-6国际标准品(89/548)进行检测,其测量结果的相对偏差应在±10%范围内。
2.4 线性在[5.0,5000.0]pg/mL范围内,线性相关系数(r)应不小于0.9900。
2.5 精密度2.5.1 分析内精密度在试剂盒的线性范围内,浓度为(30.0±6.0pg/mL)和(500.0±100.0pg/mL)的样品检测结果的变异系数(CV)应不大于8%。
2.5.2 批间精密度在试剂盒的线性范围内,用3个批号试剂盒分别检测浓度为(30.0±6.0pg/mL)和(500.0±100.0pg/mL)的样品,检测结果的变异系数(CV)应不大于15%。
2.6 效期末稳定性本产品效期为15个月,试剂盒在2~8℃下保存至有效期末进行检测,检测结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1的要求。
2.7 溯源性依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求,定标品溯源到IL-6国际标准品(89/548)。
人白细胞介素-10(IL-10)
人白细胞介素-10(IL-10)酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。
本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人白细胞介素-10(IL-10),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-10(IL-10)的测定。
工作原理本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人白细胞介素-10(IL-10)的水平。
向预先包被了人白细胞介素-10(IL-10)单克隆抗体的酶标孔中加入白细胞介素-10(IL-10),温育;洗涤后,加入HRP标记过的白细胞介素-10(IL-10)抗体。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样品中人白细胞介素-10(IL-10)的浓度呈正相关。
试剂盒组成需要而未提供的试剂和器材1.37℃恒温箱。
2.标准规格酶标仪。
3.精密移液器及一次性吸头4.蒸馏水,5.一次性试管6.吸水纸注意事项1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差3.建议所有标准品、样本都做双份检测。
如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
4.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.5.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
7.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
洗板方法手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少注入孔内,浸泡1-2分钟。
根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人白细胞介素 8(IL-8)定量检测试剂盒(ELISA) 说明书
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。
人白细胞介素8(IL-8)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】人白细胞介素8(IL-8)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素8(IL-8)的含量。
【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。
将标准品、待测样本加入到预先包被人白细胞介素8(IL-8)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人白细胞介素8(IL-8)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人白细胞介素8(IL-8)含量。
【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品0.3mL×6管8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4样本稀释液6mL10说明书1份5特殊稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品(1号→6号)浓度依次为:120、60、30、15、7.5、3.75pg/mL.【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。
2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。
4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
人IL-1β ELISA kit说明书
标本收集: 1. 收集血液的试管应为无热原和内毒素试管。 2. 血浆抗凝剂推荐EDTA。 3. 避免溶血,高血脂标本。 4. 标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。
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5. 标本收集后若不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。 6. 可根据实际情况,将标本做适当倍数稀释(建议做预实验,以确定稀释倍数) 。
60分钟。 5. 洗板4次。 6. 除空白孔外,加入酶结合物工作液(100ul/孔)。用封板胶纸封住反应孔,37℃孵箱孵育30分
钟。 7. 洗板4次。 8. 加入显色剂100ul/孔,避光37℃孵箱孵育10--15分钟。 9. 加入终止液100ul/孔,混匀后即刻测量OD450值(5分钟内)。
结果判断: 1. 每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。 2. 手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,以平滑线连接各标准品的坐标
灵敏度,特异性和重复性: 1. 灵敏度:最小可测人IL-1β达2pg/ml. 2. 特异性:不与IL-2,3,4,5,6,8,10,12,IFN,TNF及sTNF-RII等反应。 3. 重复性:板内,板间变异系数均<10%.
人Human白细胞介素-2IL-2ELISA检测试剂盒使用方法
人(Human) 白细胞介素-2(IL-2)ELISA 检测试剂盒使用方法用途:人IL-2 ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各种体液中的IL-2 。
本试剂盒可以检测天然和重组的IL-2 。
本试剂盒专用于科研、而非用于临床诊断。
试验原理:人IL-2 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-2 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将IL-2 和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中IL-2 的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.此试剂盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV为阴性,但没有实验室可完全保证此血制品不会传染肝炎、AIDS或其它传染病,依据当地的安全条例处理本试剂盒里的成份及血清和血浆等样品。
2.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
3.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
4.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
白介素1β,IL-1βELISA试剂盒说明书
白介素1β,IL-1βELISA试剂盒说明书白介素1β,IL-1βELISA试剂盒说明书kit规格:48孔配置/96孔配置标准品稀释液:1.5ml×1瓶酶标试剂:3ml×1瓶(48)/6ml×1瓶(96)【白介素1β,IL-1βELISA试剂盒说明书】本试剂仅供研究使用计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒组成:封板膜:2片(48)/2片(96)说明书:1份密封袋:1个标准品:2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存【白介素1β,IL-1βELISA试剂盒说明书】实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人铁蛋白(FE) 水平。
用纯化的人铁蛋白(FE) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入铁蛋白(FE) ,再与HRP标记的铁蛋白(FE) 抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的铁蛋白(FE) 呈正相关。
碧云天生物技术 Human IL-1β ELISA Kit 说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线:400-168-3301或800-8283301 订货e-mail :******************技术咨询:*****************网址:碧云天网站 微信公众号Human IL-1β ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI305Human IL-1β ELISA Kit96次产品简介:碧云天的Human IL-1β ELISA Kit (Human Interleukin-1β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白细胞介素1β酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆、细胞或组织裂解液、或细胞培养上清液中的IL-1β的ELISA 试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。
多次重复检测结果表明,最小检出量为2.2pg/ml ,与人IL-1r α、IL-1sRII 、IL-1sRI 、小鼠IL-1α、小鼠IL-1β等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
IL-1即白细胞介素-1(简称白介1),其家族由IL-1α(也称IL-1F1)、IL-1β(也称IL-1F2)、IL-1受体拮抗剂(IL-1 receptor antagonist, 简称IL-1RA, 或IL-1F3)及IL-18、IL-33和IL-1F5~F10组成。
IL-1主要由巨噬细胞产生,此外几乎所有的有核细胞,如B 细胞、NK 细胞、体外培养的T 细胞、角质细胞、树突状细胞、星形细胞、成纤维细胞、中性粒细胞、内皮细胞以及平滑肌细胞均可产生IL-1。
正常情况下只有皮肤、汗液及尿液中含有一定量的IL-1,绝大多数细胞在受到外来抗原或细菌内毒素刺激后才能合成和分泌IL-1。
IL-1β在免疫和炎症反应、骨重建(bone remodeling)、发烧、碳水化合物代谢等生理、病理过程中都有重要作用。
用ELISA试剂盒检测人白介素6IL-6的浓度
双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-6的浓度人IL-6简介:白介素6(IL-6)是一类多功能的蛋白,在宿主防御,急性期反应,免疫反应,造血功能,神经系统等方面起到重要的作用。
白介素6根据来源不同是分子量从21到28kDa不同的单链蛋白。
白介素6在多种细胞中都有表达,如T细胞、巨噬细胞、纤维原细胞、肝细胞、血管内皮细胞等。
由于IL-6具有不同的活性,所以IL-6也被称为干扰素β2(IFN-β2)、B细胞刺激因子-2(BSF-2)、杂交瘤细胞生长因子、肝细胞刺激因子、毒性T细胞分化因子、巨噬细胞粒细胞诱导因子(MGI-2A)。
白细胞介素6在B-细胞向Ig分泌细胞的转化过程起到重要的作用,参与了淋巴细胞和单核细胞的分化,诱导神经细胞在B-细胞,T-细胞,肝细胞,造血干细胞以及中枢神经系统的分化作用。
此外,肌肉运动收缩作用后白细胞介素6会被释放到血液中,进而能促进脂肪的分解并改善机体的胰岛素耐受性。
检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-6的浓度。
IL-6捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的IL-6会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
当加入生物素化的抗人IL-6抗体后,抗人IL-6抗体与IL-6接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。
生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
最后加入显色剂,若样本中存在IL-6将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。
通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,IL-6浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中IL-6浓度。
标本收集:1.标本的收集请按下列流程进行操作:A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可;B.血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;C.血浆标本,推荐用EDTA的方法收集;D.若待测样本不能及时检测,标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。
ELISA IL-6(人白介素) 操作流程
人白介素6(IL-6)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号:1910231本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-6含量。
实验原理用纯化的IL-6抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的IL-6抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IL-6呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1、酶标板:一块(96孔)2、标准品(冻干品):2瓶,请临用前15分钟内配制。
每瓶以样品稀释液稀释至1ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为10,000 pg/ml,将其稀释为500 pg/ml后,再做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成500 pg/ml,250 pg/ml,125 pg/ml,62.5 pg/ml,31.2 pg/ml,15.6 pg/ml,7.8 pg/ml,样品稀释液直接作为空白孔0 pg/ml。
如配制500 pg/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml )500 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、样品稀释液:1×25ml。
4、人白介素6:1×25ml。
5、HRP,100X:1×150 /瓶(1:100)。
临用前以HRP 1:100稀释(如:10 HRP / 990HRP稀释液),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
6、HRP稀释剂:1×12ml。
7、浓洗涤液:1×50ml/瓶。
人白细胞介素27 (IL-27)说明书
人白细胞介素27 (IL-27)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中白细胞介素27 (IL-27)的含量。
实验原理:本试剂盒应用夹心法测定标本中白细胞介素27 (IL-27)水平。
用纯化的人白细胞介素27 (IL-27)抗体包被微孔板,往微孔中依次加入白细胞介素27 (IL-27),再与HRP标记的白细胞介素27 (IL-27)抗体结合,形成免疫复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素27 (IL-27)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中白细胞介素27 (IL-27)浓度。
试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
人白细胞介素-10(IL-10)ELISA试剂盒说明书
人白细胞介素-10(IL-10)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中白细胞介素10(IL-10)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-10(IL-10)水平。
用纯化的人白细胞介素-10抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-10,再与HRP标记的羊抗人抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素-10(IL-10)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-10(IL-10)含量。
样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
人白细胞介素1a(IL-1a)
人白细胞介素1a(IL-1a)酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。
本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人白细胞介素1a(IL-1a),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素1a(IL-1a)的测定。
工作原理本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人白细胞介素1a (IL-1a)的水平。
向预先包被了人白细胞介素1a(IL-1a)单克隆抗体的酶标孔中加入白细胞介素1a(IL-1a),温育;洗涤后,加入HRP标记过的白细胞介素1a(IL-1a)抗体。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样品中人白细胞介素1a(IL-1a)的浓度呈正相关。
试剂盒组成需要而未提供的试剂和器材1.37℃恒温箱。
2.标准规格酶标仪。
3.精密移液器及一次性吸头4.蒸馏水,5.一次性试管6.吸水纸注意事项1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差3.建议所有标准品、样本都做双份检测。
如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
4.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.5.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
7.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
洗板方法手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。
根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人(Human)白细胞介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人白细胞介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被人白细胞介素6(IL-6)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB 显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人白细胞介素6(IL-6)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品(48 pg/ml)0.6mL 0.6mL 按说明书进行稀释标准品稀释液6mL 3mL 无样本稀释液6mL 3mL 无检测抗体-HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液6mL 3mL 无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:48、24、12、6、3、1.5 pg/ml试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
人白细胞介素-10(IL-10)
人白细胞介素-10(IL-10)酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。
本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人白细胞介素-10(IL-10),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-10(IL-10)的测定。
工作原理本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人白细胞介素-10(IL-10)的水平。
向预先包被了人白细胞介素-10(IL-10)单克隆抗体的酶标孔中加入白细胞介素-10(IL-10),温育;洗涤后,加入HRP标记过的白细胞介素-10(IL-10)抗体。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样品中人白细胞介素-10(IL-10)的浓度呈正相关。
试剂盒组成需要而未提供的试剂和器材1.37℃恒温箱。
2.标准规格酶标仪。
3.精密移液器及一次性吸头4.蒸馏水,5.一次性试管6.吸水纸注意事项1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差3.建议所有标准品、样本都做双份检测。
如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
4.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.5.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
7.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
洗板方法手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少注入孔内,浸泡1-2分钟。
根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人白细胞介素17(IL-17)说明书
人白细胞介素17(IL-17)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中白细胞介素17(IL-17)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-17(IL-17)水平。
用纯化的人白细胞介素-17(IL-17)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-17,再与HRP标记的羊抗人抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素-17(IL-17)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-17(IL-17)含量。
试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
人白介素1β (IL-1β)操作流程
人白介素1β(IL-1β)酶联免疫分析试剂盒使用说明书产品编号:1910221本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中白介素1β(IL-1β)含量。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗IL-1β抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-1β抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IL-1β呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1. 酶联板:一块(96孔)2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,000 pg/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别稀释1,000 pg/ml,500 pg/ml,250 pg/ml,125 pg/ml,62.5 pg/ml,31.2 pg/ml,15.6 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。
如配制500 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)1,000 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml。
4. 检测稀释液A:1×10ml。
5. 检测稀释液B:1×10ml。
6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
人白介素4(IL4)ELISA试剂盒说明书
人白介素4 (IL-4)酶联免疫分析试剂盒说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂盒仅供研究使用检测范围:ng/ml - 100 ng/ml最低检测限:ng/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的人IL-4,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-4含量。
说明:1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
概述:白细胞介素-4(白介素-4,Interleukin-4,IL-4)是II型辅助T细胞(Th2细胞)分泌的细胞因子。
白细胞介素-4的生物作用,包括刺激活化B细胞和T细胞增殖、CD4+T细胞分化成II型辅助T细胞。
它也在调节体液免疫和适应性免疫中起关键作用。
白细胞介素-4诱导B细胞抗体类别转换向IgE,上调第二型主要组织兼容性复合体的产生。
它最初被认为是B淋巴细胞分化因子(BCDF),同时也是B淋巴细胞刺激因子(BSF1)。
随着后来人和鼠IL-4被分子化克隆及表达,发现了IL-4的多种功能作用于B淋巴细胞及其他造血及非造血细胞,包括T淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞,肥大细胞、骨系及红细胞系祖细胞,纤维母细胞及内皮细胞等。
IL-4在体外及体内均呈现出抗肿瘤效应。
实验原理:用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗IL-4抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-4抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IL-4呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
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人白细胞介素ELISA 检测试剂盒
人IL-17 ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各种体液中的IL-17 。
本试剂盒可以检测天然和重组的IL-17 。
本试剂盒专用于科研、而非用于临床诊断。
试验原理:
人IL-17 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-17 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将IL-17 和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中IL-17 的浓度呈比例关系。
自备材料
1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1.此试剂盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV为阴性,但没有实验室可完全保证此血制品不会传染肝炎、AIDS或其它传染病,依据当地的安全条例处理本试剂盒里的成份及血清和血浆等样品。
2.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
3.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
4.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项
1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血
液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。
尽可能的不要使用溶血或高血脂血。
如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。
不要在37℃或更高的温度加热解冻。
应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作步骤
1.使用前,将所有试剂充分混匀。
不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复孔。
每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。
立即加入50ul的生物素标记的抗体。
盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。
重复此操作四次。
如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。
重复此操作四次。
如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育15分钟。
避免光照。
8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9.在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果分析
以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IL-17 标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IL-17 含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
试剂盒性能
1.灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。
稀释度的线性。
样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2.特异性:不与人其它细胞因子反应。
3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。