临床病理基本知识及病理技术
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三、标本的固定 (一)固定的意义 使各种酶灭活,防止组织自溶。保 存细胞亚结构,促进各种化学成分
在 原位凝固沉淀。 (二)固定的时机
1.10%福尔马林 1份体积市售福尔马林加9份体积缓冲液 (PH7.4)一适用于手术及活检标本固定;
2.95%酒精 适用于细胞涂片,刷片固定
3.4%戌二醛 适用于电镜标本固定
诊断病理学基本知识
病理学的研究对象
(一)人体病理学研究对象 尸体解剖(Autopsy) 活体组织检查(Biopsy) 细胞学检查(Cytology) (二)实验病理学研究对象 动物实验(Animal Experiment) 组织和细胞培养(Tissue and Cell
Culture)
诊断病理学的概念 临床实际工作中,许多病例的疾病
4.特殊固定液,如糖原固定液,等
(四)固定液的量 大于标本的4倍体积,或固定液水平面 高于标本
(五)哪些标本不必固定? 术中冰冻检查标本; 肾穿刺标本; 免疫荧光、某些免疫组化检查标本; 肌病标本
四、病理标本的长期保存 根据不同目的用不同方法 液体保存 石蜡包埋 塑料包埋 液氮保存
五、病理检查的基本过程 第一天 肉眼检查、取材,固定、
胃 沿胃大、小弯剪开 肠 沿病灶对侧纵行剪开 子宫 沿宫颈向宫底作冠状切开 肾 沿肾门作冠状切开 重点检查部位或细微病灶要作标记,并在 送检单上说明。
(三)术中冰冻切片
送标本作冰冻切片检查的原则: 只有当临床须根据冰冻切片病理报告决定
手术方式或范围时才送标本作术中冰冻检查; 剖腹活检 免疫荧光检查等标本须作冰冻切片,但
(二)肿物或器官切除标本送检 无论术前有无病理诊断,手术标
本都应送检。术前活检的病理诊断往 往有局限性甚至有误,最后诊断应根 据肿物或器官的全面检查作出。
肿物或器官切开的方法: 肿块 沿最长径线切第一刀,以后切面与第
一刀平行。 乳腺 沿肿块中央与乳头连线切第一刀。 肺叶 沿肺门作冠状切开。 食管 沿病灶对侧纵行切开。
脱 水、浸蜡。
第二天 石蜡包埋,切片,染 色,初验
第三天 复验,发出病理报告
六、病理报告的形式 (一)肯定诊断的报告 (二)未完全肯定诊断的报告,需结
合临床其他资料综合判断 1.倾向性诊断 2.可能性诊断 (三)描述性报告
七、病理报告阴性或差错的原因 1)取材失当 2)制片质量差 3)病理医生经验不足或阅片匆忙草
诊断有赖于对病变器官或组织的病理 检查,这种检查称为活体组织检查 (biopsy)。病理学关于这方面的实践 和理论范畴称诊断病理学或外科病理
一、病理诊断的重要性与局限性
(一)重要性
1.建立在全面系统病理检查基础上的 病理诊断是疾病诊断的“金标准”;
2.有计划的定期活检有助于了解疾病 的动
态变化和疗效判断;
组织抗原
第一抗体(鼠抗人) 玻片
• 可用免疫组织化学方法检测的抗原包括 人体和病原微生物的各种抗原成分。
• 免疫组织化学技术可作为核酸原位杂交 的技术基础。
三、免疫组化技术在诊断病理学中的应用 1. 肿瘤分类的鉴别诊断而不是肿瘤与非肿瘤或 良恶性肿瘤的鉴别诊断 2. 肿瘤相关标志的检测 3. 某些病原微生物的检测,如HPV、CMV、 EBV、HBV等
特异性抗体在适当条件下与组织切片中 的抗原结合后,通过标记在抗体分子上的 酶将显色剂氧化,显色物质沉淀在抗原抗 体结合的部位从而显示抗原所在的位置 (细胞膜、细胞核、胞浆)和抗原的多寡 或强弱。
二、免疫组化的基本原理
卵白素-生物素 -过氧化物酶法
氧化底物 生成棕色产物
过氧化物酶
第二抗体(羊抗鼠)
率 4)疾病形态的复杂性和病理检查的
病理学技术
1. 组织化学 2. 免疫组织化学 3. 电子显微镜 4. 基因芯片、组织芯片 5. 激光显微切割 6. 原位分子杂交、原位荧光杂交 7. 比较基因组杂交
一、免疫组织化学的概念 免疫组织化学是在免疫学和组织化学的基础
上发展起来病理学技术。用特异性的单克 隆或多克隆抗体检测组织切片中是否存在 相应抗原。
3.系统、完整的病理资料有助于认识 新的
(二)局限性 1.形态学的局限性
只能对有形态学改变的疾病,尤其是 对
有特征改变的疾病作出诊断。对无明 显
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神经内分泌肿瘤 胶质瘤
二、病理标本的采集和送检
(一)活检小标本 1.淋巴结活检
当一组淋巴结肿大时,各个淋巴结的病变常 常是不同步的。
若多组淋巴结肿大,勿取腹股沟淋巴结; 若一组多个淋巴结肿大,勿取最小淋巴结; 尽可能将淋巴结完整取出; 若疑为淋巴瘤,勿要求冰冻报告。
2.勿用电灼作病理取材 3.取材时注意:
善于识别病灶; 勿仅取坏死组织; 勿过度挤压组织,活检钳必须锐利; 若剖腹作病理活检,待得到阳性病理 报告后关腹; 刮宫标本必须全部送检。
不必作术中冰冻检查;
(四)体液(胸腹水、尿、脑脊液、痰)的送检: 新鲜(2小时内)送检或冰箱储存; 勿加固定液; 沉淀物必须送检; 指导病人取痰。
(五)送检单填写重点内容: 术中所见或病灶描写;冰冻送检单须说 明送检物是何种组织; 刮宫标本须说明末次月经日期; 疑血液病标本须说明外周血像和骨髓涂片 结果 临床诊断 可能诊断1,2,3;尽可能不 要写“肿块性质待查”,“发热原因待查” 旧病理号,以前病理诊断; 住院号;姓名;年龄;
常用免疫组化标志
标记物类别 上皮组织标记
间叶组织标记
抗体名称
细胞角蛋白(CK) CE 间A皮
波形蛋白(Vimentin) 肌动蛋白(actin) HHF35 结蛋白(desmin)
阳性标记的常见肿瘤
上皮性肿瘤 腺癌 间皮瘤 间叶组织肿瘤
肌源性肿瘤
神经内分泌标记
铬粒素A(Cg.A) 突触素(Syn)s-100蛋白 神经元特wk.baidu.com性烯醇化酶 NSE 胶质纤维酸性蛋白 GFAP