猪瘟诊断的研究进展

合集下载
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
疫 病 防 控
中国畜牧 兽医文摘
2 1 ̄ 2卷 0 V 7 1
第6 期
猪瘟诊 断的研 究进展
魏 娟’ 孙保权 l 、 子俊
(. 1江苏省南京市六合区动物 卫生监督所 ,南京 2 1 0 : 150
2 江 苏省南京市六合区第二畜牧 兽医站 ,南京 2 10 ) . 15 0
[ 要] 猪瘟是 由猪瘟 病毒感染引起的一种急性 、热性 、接触性和猪之 间流行 的烈性传 染病 ,俗称 “ 摘 烂肠瘟” 。 目 尚 前 无有效 药物治 疗猪瘟 ,因此 ,尽早确诊是 减少猪瘟造 成损 失的有 效措 施。本文综述 了猪瘟诊 断技术方面的研究进展 ,为猪瘟 的 及 时诊断提供参考。
[ 关键 词]猪瘟 诊 断
1 概 述
3 2 分子生物学检测技术 .
.. 聚合酶链 式反应 ( T P R) 在猪瘟 诊断 中 R -C 猪瘟 ( S C F)是的一种高度接触性传染 病 ,由猪瘟病毒 引 3 2 1 反转 录一 起 ,以高 热稽 留 、出血和 高死亡率 为主要特 征 。呈 以多发性 针 对的对象 是病毒 的核酸 ,根据猪瘟 病毒基 因特定 的序列 ,
1 仇华吉 ,王秀荣 ,等. 鉴别猪瘟强毒 和弱毒的反转录一 合 复 定 的方法 ,在一块 基片表面 固定 了序 列 已知 的八核苷 酸 的探 … 李艳 ,
针。当溶液中带有荧光标记的核酸序列T T c A c A 与 A c A T T G,
套式聚合酶链式反应 ( TP R) R — C 检测方法的建立【. J 中国农 业科 1
3 防 治
4 2 剂 量 . 注射 补铁剂 时不要盲 目加大或减 少剂量 ,补 铁过多易 造 给母 猪多补 富含蛋 白质 、维生素 、矿 物质 的饲 料 ,要特 成机体铁 中毒 ,如 出现 中毒症状 时可用 肾上腺素救 治 ,补 铁 别补给铁 、铜 、锌等微量元素。 过少效果不明显。
学 , 2 0 , 3 9: 9 7 1 1 . 0 6 9( 10 — 94 )
作简单且无放射性 危害。
基 因芯 片 ( 又称 DN A芯 片 )是近 年来 分 子 生物 学 与微
・l 24 ・
中国畜牧兽医文摘
2 1年 0 1
2卷 7
第6 期
疫 病 防 控
仔猪缺铁性贫血 预防及 土思 += c 事项
邵 大 永
( 河北省承德县农牧局,承 德 0 70 ) 6 4 0
1 概况
在 中小规模养 猪场 ,仔猪 缺铁性贫 血较为 常见 。此病 一
3 4 口服补铁 剂治疗 .
仔 猪生后3 日龄起补饲铁制 剂 ,喂时将溶 液装 人奶瓶 中让 年 四季均 可发生 ,但冬春 季发病较 多 ,特别 是2 3 以内的 仔猪吸吮或滴服 ,也可滴在母猪乳房上令其吸食 ,1 7 d 周 ~2 ̄/。 . 哺乳仔 猪发病多见 ,因初生仔猪体 内储备 的铁有4 g 右 , 0 左 口服铁制剂 主要有硫酸亚 铁和铁铜合剂 ( . g m 25 硫酸 亚铁加 1g 每 天从母乳 中可获得约为 1 g 左右 ,而正常生长每天需铁 7 硫酸铜加l0 0m 水配合而成 ,约需1 l ・ m ~8 0 l 0m / d);也可用硫 头 mg ,这样 ,仔猪一般在 出生 1 周后就可能出现缺铁而发生贫血 酸亚铁10g 0 、硫酸铜2 ,研细后拌人5k 细沙或红土 ,撒人 0g g
其中,间接E IA LS 主要用于鉴别感染时会受免疫的干扰,而夹 间温度循环 、繁琐 的电泳 、 紫外观察等过程 。L M A P是一种崭 N 快速 、特异性强 的特 点 ,具 心E IA Ls 则用于猪瘟病毒的初步定型,检测猪脾脏 、肠系膜 新 的D A 扩增方法 ,具有 简单 、
C 淋巴结 、Biblioteka Baidu脏等组织中的病毒 ,能检测出是杏为猪瘟强毒感 有替代P R方法 的可能性 。 染 ,具 有高度 特异性 和敏感性 ,而且 它的试剂 比较稳定 ,操 3 3 基因芯片检测技 术 .
广泛使用猪瘟疫苗 ,近几年来猪瘟发病呈 非典 型性发病 。 目 ,由于诸多原因致使C F 前 S 是成为严 重威胁养猪业 的疾 病。虽然我国早就研制出很成熟的猪瘟兔化弱毒疫苗,但由 于猪瘟 的流行特征 发生变 化 ,发生 免疫抑 制和免疫 失败 ,感 染猪瘟后 也不 出现明显症 状 ,但持 续排毒 ,必须利用 各种诊
( lv id e Fai r a )瘟病 毒属 ( et i s vi P s v u )。基因组长1 . K ir 23 B,病 毒子 直径 4 5 m, 0 0l 病毒囊膜有5和4K 两种糖蛋白 ,核衣 l 5 6D 壳则为3 KD 白质构成 。猪 瘟病毒与 同属 的牛病毒性腹泻病 6 蛋 毒之 间 ,基 因组 序列有高 度 同源性 ,抗原 关系密切 ,存在交
症。
猪圈让仔猪 自由采食 。
2 症 状
4 注意事项
血 红 蛋 白降低 ,皮肤 和粘 膜 苍 白 ,被 毛粗 乱 ,食 欲减 4 1 时 间 . 退 ,轻度腹 泻 ,精 神萎靡 ,生长停滞 ,严重 者死亡 。同时抗 注射铁制剂 时应注 意时间 ,过早 易造成仔 猪铁 中毒 ,超 病 能力减 弱 ,容易 生病 。在 哺乳仔 猪中 ,缺铁 性贫 血的发病 过4 周龄 的猪注射有机铁 , 引起 注射部位肌 肉着 色。注射铁 可 率可达2 % 一 0 0 5 %,死亡率 可达 1% ~2 %。 0 0 制剂 的最佳 时机是在 3~4 日龄 1 次肌注 。
3 1 加 强母猪饲养管理 .
32 给仔猪注射铁制剂 .
注 射补铁 常用的补铁制剂 有右旋糖 酐铁 、铁 钴注射液 、
4 3 器械消毒 .
注射针 头及 注射部 位要进行消毒 ,保证 1 1 猪 针头 ,以防 山梨醇注射液等 。一般情 况下 ,选用 以上 1 种药物给 予仔 猪深 细菌感染。 部 肌肉注射 1 次即可 ,对 于缺铁症状表现较为严重的仔 4 4 补铁药剂使用 ~2 1 ml . 猪 ,可在间隔7d 再给予药 物减半剂量肌 肉注射 1 后 次。如对育 补铁时不宜 与其他药物混合使用 ,以免影响药效 。 种仔猪可在初生后 3 日龄时 注射 右旋 糖酐铁或铁钴注射 液 ,以 4 5 防止硫酸亚铁中毒 . 预防缺铁性 疾病 的发生 。 使用硫 酸亚铁时应 注意防止仔 猪 中毒 。在 使用硫 酸亚铁
将 我国 流行的不 同基因亚群 的猪瘟病 毒强毒 与疫苗 弱毒完 全 区分开来 ,且不与 其他猪源 病毒 和牛病毒性 腹泻病病 毒发 生 非 特异反应 。可 以较快对猪 瘟做 出准 确诊断 ,并 可将 强毒感 染 猪迅速从 弱毒疫 苗免疫猪 群 中筛选 出来 ,减少 了未感染 免 叉反应。 疫猪被误杀 的可能性 。 3 3 3 多重P R(u i lx C ) .. C m l p e P R t 指应用多对 引物 同时扩 3 诊断方法 增 一个基 因中 的几个 不 同D 片段 ,或不 同基因 的几 个D NA NA 3 1 实验室常规诊 断技术 . 3 1 1 免疫 荧光试验 ( A 用荧光 物质标记 提纯后 的猪 片段 。多重P R .. F T) C 中所设 计的多对引物对必须有 非常接近的退 火 对引物间的T 值相差悬殊 ,可引起 扩增产 物量的 m 瘟病毒抗体IG g ,再去着染猪病料 ( 病猪 扁桃体 、淋 巴结 、 温度 ,如果2 如 肾等 )的冰冻切 片或触 片 ,再在荧 光显微镜 下观察 组织细胞 差 别 ,常出现其 中一个 引物对无 明显的扩增 产物 。此外 ,靶 内是否有 亮绿色荧 光 。如 果被观察 的组织 细胞 内有 亮绿色荧 基 因D A的扩增长 度也必须 相类似 ,否则较 短的靶基 因D N NA 光 ,就说 明被检病 料 中有 猪瘟病 毒感染 。否则 ,就 是猪瘟 阴 的扩增效 率明显优 于扩增片 段较长 的D A。因此 。为 了取 得 N 性。 相 同的扩增 效率 ,必须 调节各引 物对之 间的T 值 和P R 增 m C扩 免疫 荧光试 验结 果直 观 、可靠 ,是 目前 国内外 最常用 的 产 物的 长度以及各 引物对 的量 。该方 法具有 高效 、经 济简便 方法 ,它是R br o 16 o et 于 9 5年首次报道的。主要检测病猪扁桃 等特点 ,能够快速 、准确 的诊断疾病 ,适 合大量 临床样 品中 s 体 、淋 巴结 、肾脏 、脾脏 等组织 中的猪瘟 病毒 ,在 猪瘟病毒 病 原体 的快速诊断 。 感 染早期 检 出率 较高 ,还 能检 出无 明显症状 的带毒母 猪 ,并 3 3 4 环介导等温扩增技 术 日本学者N t i .. o m 博士于20 o 0 0年 且可在 l 2小时 内判 断结 果 ,既快速又 准确 ,所 以常用 于病程 建立 了一种 新颖的恒温核酸 扩增方法 ,即环介导等 温扩增法( 1o— dae ohr a a pict n, L MP 】 op mei d stem l m lia o t i f i A ) ,其特点是针 初期诊 断 、检疫及猪场进行猪瘟净化 。 3 12 血 清学检测 方法 酶联免疫 吸附试验 ( LS 是 世 对靶 基因的6 区域设计4种特异引物 ,利用一种链置换 D A .. E IA) 个 N 界动物卫生组织推荐的猪瘟检测方法。可采用间接E IA LS 和夹 聚合酶(sD Apl e s) Bt N o m r e 在等温条件( y a 6 5℃左右) 保温几十 L LS 法进行检测,主要用于检测血清抗体和组织中病毒, 分钟 ,即可完成核 酸扩增 反应 。不需要模板 的热 变性 、长时 , IA E
与 另一引物 退火 ,并 由D 聚合酶催 化引物 延伸生成 双链靶 NA D NA,最后 扩增靶 D A,将 扩增产 物进行 电泳 ,经溴 化 乙锭 N
染色, 在紫外灯照射下 (5 可见到特异扩增区带。该 方 24 m) n 法 适用 于各 种含毒 病料 的检 测 ,可用 于临床诊 断 ,其 操作 简 单, 并且特异性强 、灵敏度高 、 复性好 ,可快速检测 。 重 断技 术对猪瘟 的抗原变异性进行检测。 3 2 2 反转 录一 .. 复合套 式聚合 酶链 式反应 (T n C ) 使 用2 R - P R 对 聚合酶链 式反应 引物扩增 完整 的片段 。对 组织材料 、细胞 2 病原体 猪 瘟 为单 股正 链 R 病 毒 。在 病毒 分 类上 属 黄病 毒科 或 肉汤培养 物 中含 量低 的猪 瘟病毒进 行二次 扩增 , 方法 能 NA 该
3 3 环境补铁 .
时开瓶 后应立 即使用 ,因其在 空气 中不能久置 ,以防 氧化成 可在猪 圈内放 些粘红 土或干燥 的深 层黄泥 土 ( 最好 是干 有毒的高价铁 ,仔猪服后会中毒 。
燥 小土块 ),将 土放在食盘上 ,让仔猪 自由采食 。
电子 学等 多学科交叉 融合而成 的一项 高新技术 ,其原 型是2 技 术提供 了新 的技术理念 ,目前 已经正进 行这方 面的研究 , O 世 纪8 年 代 中期提 出 的。基 因 片 的测序原 理是杂交 测序方 其研究成果将对我 国猪瘟 的防控具有深远意义。 O 法 ,即通 过与一组 已知序列 的核酸探 针杂交 进行核 酸序列测 参考 文献
出血为特 征的败血症 病变 。慢性经 过的病例 ,主要是 纤维素 合 成一对特 异性引 物 ,在引 物的介导 和反转 录酶 的催 化下 ,
性 坏死性肠 炎 ,常伴有副 伤寒 及 巴氏杆菌病继 发感染 。 由于 合 成R A的互补链 c N N D A,加热后 c N D A与R A链解 离 ,然后 N
相关文档
最新文档