重组蛋白表达与纯化服务(南京德泰生物2014版手册)

蛋白表达、纯化服务技术服务手册

（2014版）

活性蛋白整体方案

目录

重组蛋白表达服务 (1)

原核蛋白表达服务 (1)

可溶保证型原核蛋白表达服务（不成功，零收费，基因免费） (1)

原核上清保证型服务 (2)

重组蛋白表达鉴定服务 (3)

蛋白复性服务 (3)

高密度发酵服务 (4)

哺乳动物蛋白定制服务 (5)

瞬时转染蛋白表达服务 (5)

稳定转染蛋白表达服务 (6)

重组抗体制备服务 (7)

昆虫细胞蛋白表达服务 (8)

其他蛋白表达服务 (9)

蛋白纯化服务 (9)

密码子优化 (9)

内毒素控制及去除 (10)

病毒包装服务 (11)

活性蛋白整体方案重组蛋白表达服务

重组蛋白表达与纯化技术广泛应用于生物技术、生命科学和医学等研究领域。用于重组蛋白表达的宿主细胞通常来源于原核细胞，哺乳动物细胞，杆状病毒-昆虫细胞和酵母等蛋白表达系统。近十年来，随着药物蛋白的快速发展与应用，高纯度活性蛋白的需求量也与日俱增。南京德泰生物凭借专业的蛋白表达技术，可提供毫克至克级高纯度活性蛋白定制服务。我们的成功率在95%以上，我们专注高质量的蛋白生产，有效地节约您的成本和科研时间。

原核蛋白表达服务

德泰生物公司的大肠杆菌原核重组蛋白表达系统，可提供纯度大于95%的纯化蛋白，服务成功率大于95%。所具有的上清蛋白表达技术为客户遇到的表达量低，包涵体等问题提供全面的解决方案。研发人员的丰富蛋白复性经验、内毒素控制去除技术也使我们的原核蛋白表达服务平台广受青睐。

在重组蛋白表达实验中，大肠杆菌凭借其易于培养、繁殖迅速以及遗传稳定等优势被广泛使用。但在实验中，研究人员也会碰到一些问题：

1.目标蛋白表现为不可溶，形成包涵体。

2.蛋白质不表达或表达量很低。

3.细胞周质内含有种类繁多的内毒素。

德泰生物在大肠杆菌重组蛋白生产方面，有着数十年的研究经验。我们通过公司自有的技术对大肠杆菌表达系统进行优化，例如，表达载体与表达菌株的选择、表达条件优化、上清表达技术、蛋白质复性技术，内毒素检测控制去除技术等，可以有效解决蛋白质表达量低、目标蛋白不溶或难溶、免疫毒性等问题，蛋白成功交付率大于95％。

可溶保证型原核蛋白表达服务（不成功，零收费，基因免费）

南京德泰生物的可溶蛋白表达服务是我们原核蛋白表达技术服务的重要类型，主要适合于重组蛋白表达量低，包涵体复性难的情况。南京德泰生物的可溶蛋白保证型套餐的交付成功率大于95%，自研密码子优化技术及复性技术保证了交付蛋白的可溶性及更高的天然折叠性。

活性蛋白整体方案

原核上清保证型服务

上清蛋白表达服务是我们原核蛋白服务的高级类型，主要适合于重组蛋白上清表达量低，包涵体复性出的重组蛋白无法正常折叠，客户对上清蛋白情有独钟的情况。南京德泰生物的上清蛋白表达保证型套餐会通过优化基因序列，选择优化载体，筛选优化表达条件等多种方式保证上清蛋白的表达量。

原核上清服务流程

重组蛋白表达鉴定服务

南京德泰生物的重组蛋白表达鉴定服务是原核重组蛋白定制服务的组成之一。主要适合于已知基因序列，但表达量较少或者表达为包涵体的情况。南京德泰生物会分析基因序列和相应的蛋白序列信息。针对表达条件进行优化，并为客户提供表达过程报告。

活性蛋白整体方案

蛋白复性服务

蛋白质复性是通过人工手段将蛋白质从无活性形式转变成活性形式的过程。蛋白质复性是基因工程技术中的重要手段。在目的蛋白基因转入原核表达体系或真核表达体系进行表达时，由于表达系统的自身原因以及目的基因密码子的特异性，表达出的蛋白质很容易聚集成包涵体。

南京德泰生物提供的包涵体复性服务可以使您从繁琐的复性方法尝试中解脱出来。我们的技术服务团队拥有多年的蛋白质复性经验，已经成功应用到已交付的客户蛋白。

南京德泰生物的蛋白质复性服务会考虑到不同蛋白质包涵体的特定结构与理化特性，采用不同的变复性方法。复性条件包括pH、温度、蛋白浓度、离子浓度等。复性辅助剂包括分子伴侣、氧化还原对等。

包涵体蛋白复性过程

包涵体蛋白复性案例介绍

1.蛋白复性前:蛋白B201表达为包涵体，以单体的形式存在，没有活性。

2.复性后，蛋白获得正确的折叠，并有关键二硫键形成，二聚体活性很高

活性蛋白整体方案

高密度发酵服务

南京德泰生物的重组蛋白大规模制备服务是原核重组蛋白定制服务的组成之一。我们拥有5升、50升、1000升的发酵罐，提供流程开发、细胞高密度发酵、发酵参数优化、重组蛋白大规模制备及纯化等多项服务。

发酵流程图

活性蛋白整体方案

哺乳动物蛋白定制服务

哺乳动物细胞凭借蛋白折叠和翻译后修饰的优点，使其蛋白更接近天然蛋白，从而获得与天然蛋白相同的生物活性。由哺乳动物系统表达的重组蛋白通常应用于功能蛋白，抗体生产和临床疫苗等。

德泰生物提供的哺乳动物细胞重组蛋白表达服务，主要包括目标基因生物信息学分析，瞬时表达，稳定细胞系的开发，以及重组抗体的生产。我们通常采用无血清悬浮细胞培养的方法，对HEK293（人胚肾细胞系统）和CHO （中国仓鼠卵巢细胞系统）等宿主细胞进行培养。凭借着公司数百平米的细胞房和多名专家提供的的技术支持，我们可以同时交付多个项目，并能够根据用户的要求生产出克级重组蛋白。我们的哺乳动物细胞蛋白表达服务具有以下优势：

●自主研发高产率表达系统proEM,产能表现卓越

●自主知识产权密码子优化技术，考虑到蛋白表达的诸多因素

●数百平方百级细胞房，可同时承担客户多个项目和多个中试项目

●全程服务：设计基因、瞬转、稳定细胞株、重组抗体生产、数据及报告整理。我们提供一站式服务及终生售后。瞬时转染蛋白表达服务

瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后，仅存在于游离的载体上，不整合到细胞的染色体上。哺乳动物瞬时转染表达需要在外源基因导入哺乳动物细胞后的1-4天后，收获细胞并对目的基因进行表达分析。

哺乳动物瞬时转染表达技术服务流程