苹果轮纹病病原菌分生孢子产生

病原菌于PDA培养基培养4d，打菌饼(直径4mm)，分别接种 到 PDA，PSA，PMA，Czapek 及 ABA培养基上,用封口膜将平皿 封好后，置于 25℃培养箱中进行黑光灯照射培养。每天记录分 生孢子器的产生及成熟释放孢子情况。
病原菌于PDA培养基培养4d，打菌饼(直径4mm)，取直径约 2.5~3 cm 的幼嫩苹果果实，用同孔径打孔器在果皮上打孔，去 除孔内果肉，填充苹果轮纹病菌菌饼。置于25℃培养箱中黑光 灯照射保湿培养。
生长季苹果枝干轮纹病菌分生孢子释放规律
四、 结论
ABA 培养基最利于苹果轮纹病菌分生孢子器的 产生，PSA 次之。接种苹果的幼嫩果实并经黑光 灯照射保湿培养也可得到大量分生孢子。
利用 PSA 培养基培养，待菌苔长满平皿后扫刷 营养体，置于 25℃黑光灯照射培养是最简单且 有良好效果的诱导产孢方法。
纯化
保存
鉴定
扫刷营养体
不同黑光灯照射条件
不同温度 不同培养基 接种未成熟苹果果实
③ 生长季枝干病菌分生孢子释放规律
分生孢子释放系统监测
分生孢子释放与树体保湿时间的关系
病原菌于PDA培养基培养4d，打菌饼(直径4mm)，置于PSA 培养基黑暗培养4d，待菌苔长满，用无菌毛笔浸润无菌水扫刷 菌苔并用封口膜封好。25℃培养箱黑暗培养，每天记录分生孢 子器的产生及成熟释放孢子情况。 ：
供试病原菌：Botryosphaeria berengeriana de Not. f. sp. piricola (Nose) Koganezawa et Sakuma
培养基：PDA培养基、PSA培养基、PMA培养 基、Czapek培养基、ABA培养基
①菌种采集鉴定
② 诱 导 产 孢
菌种 采集
分离
随机选取5棵发病的苹果树（标为1，2 ，3 ，4 ， 5 ），分别用500 mL水将病斑成片长约30cm的主干 树体喷湿后用纱布包裹保湿，隔一定时间取下纱布， 用500mL水喷保湿部位，收集流下的水，离心后在 沉淀中加入1mL水使之悬浮，取20uL镜检，计数， 前12小时每隔两小时冲洗观察一次，之后每隔 12小 时冲洗观察一次，至 72 小时。72 小时后每隔 5 天 进行一次观察，并计数。
随机选取 5 棵发生枝干轮纹病的苹果树(富士)，在其 病斑密集的枝干下方悬挂自制广口塑料瓶(瓶口与枝干相 切)，进行雨水收集，每棵树在不同方位悬挂 2 个。
每次降雨后，将收集到的雨水进行离心(5000 r/min)， 用 1 mL 蒸馏水将沉淀悬浮，取 20 μL 镜检，计数所有轮纹 病菌分生孢子数目，计算出所收集雨水中轮纹病菌分生孢 子的总数。
病原菌于PDA培养基培养4d，打菌饼(直径4mm)，置于PSA培 养基黑暗培养4d，待菌苔长满，用无菌毛笔浸润无菌水扫刷菌 苔并用封口膜封好。25℃培养箱黑暗，光照及黑暗光照交替(12h) 培养，每天记录分生孢子器的产生及成熟释放孢子情况。
病原菌于PDA培养基培养4d，打菌饼(直径4mm)，置于PSA培 养基黑暗培养4d，待菌苔长满，用无菌毛笔浸润无菌水扫刷菌 苔并用封口膜封好。分别置于10℃、15℃、20℃、25℃、30℃ 培养箱中进行黑光灯照射培养，每天记录分生孢子器的产生及 成熟释放孢子情况。
汇报人：孟亚楠 日 期：2013.10.20
一、目的 意义
苹果轮纹病菌一般条件下不易产生分生孢子， 这影响了对其生物学特性、致病机理和药剂毒力的 研究。研究掌握离体诱导产孢技术是十分必要的。
探明枝干轮纹病菌分生孢子的释放条件，了解 分生孢子的释放动态，对于病害的预防将具有重要 的指导意义。
二、材料 方法：
三、结果分析
苹果轮纹病病菌诱导产孢技术的改进：
：百度文库
分生孢子器数目：扫刷>未扫刷
分生孢子器数目： 持续进行黑光照射>黑光黑暗交替照射>持续黑暗状态
温度对分生孢子器的产生不存在很大的影响 ， 但是影响了分生孢子的释放。
分生孢子器数量： ABA培养基>PSA培养基>Czapek培养基 >PMA培养基 >PDA培养基
苹果轮纹病病菌分生孢子大量释放的主导因素是降 雨，降雨的持续时间起着决定性的作用。 在温度适宜条件下，降雨持续进行4小时后，苹果 轮纹病病菌的分生孢子就开始大量释放，4至12小 时释放的分生孢子数量达到高峰且趋于稳定，24 小时后释放的分生孢子数目明显减少，在36小时后 明显减少并趋于消失，至72小时完全消失。