cellsearch循环肿瘤细胞(CTC)试剂盒说明书自译中文版

7900001

16人份试剂盒

Cell Search

循环肿瘤细胞检测试剂盒

（上皮细胞）

IVD

使用须知

本试剂盒仅用于体外诊断

CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒用于外周血中循环肿瘤细胞（CTC）的计数，这些细胞来源于上皮细胞，即表现为CD45阴性（CD45-），EpCAM阳性（EpCAM+），细胞角蛋白8,18阳性（CK8,18+）和（或者）CK19阳性(CK19+)的细胞。

用CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒检测的CTC，存在于外周血中，这类细胞与乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌*转移患者的无进展生存期和总生存期相关。因此，CTC可以用来监控乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌患者的肿瘤细胞是否发生转移。CTC应该进行持续检测，并与其他临床诊断方式联合起来监控上述肿瘤细胞的转移。在肿瘤发生过程中的任何时间段，对CTC数量进行评估，可以预估肿瘤患者治疗后的无进展生存期和总生存期。

*在该研究中，转移性前列腺癌患者定义为血清标志物PSA在标准激素基准上，高于参考水平具有两次连续增加。这些患者通常描述为具有非雄激素依赖性，激素抗性，或去势抗性的前列腺癌。

摘要说明

肿瘤转移是指当肿瘤细胞从原发灶或转移灶剥落后，这些肿瘤细胞进入循环系统并在机体的远端定植生长的情况。血液循环中的肿瘤细胞源自于上皮细胞，而这类细胞在血液循环系统中是极罕见的。基于此，本公司推出的细胞自动化捕获仪(CELLTRACKS○R AUTOPREP○R System)通过预设程序并配合使用CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒(CELLSEARCH○R Kit)可以对样本进行标准化和自动化检测。用CELLTRACKS II分析仪或者CellSpotter分析仪，一种半自动荧光显微镜，可以对肿瘤细胞进行分析和计数。这种方法只计具有上皮细胞特性（EpCAM+, CK8,18+，和/或者CK19+）的细胞数量。

检测原理

CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒包括磁流体捕获试剂和荧光免疫试剂。磁流体试剂是一种具有磁芯的颗粒。其表面包被识别EpCAM 抗原的抗体，EpCAM是CTC特异性抗原。因此，该磁微粒可以捕获CTC。经过免疫捕获和富集后，荧光试剂用来鉴定CTC和CTC 计数。荧光试剂包括以下组成：抗CK-藻红蛋白（PE）的特异于细胞内蛋白质的细胞角蛋白抗体（上皮细胞特性）；DAPI，用于细胞核染色；和抗CD45-别藻蓝蛋白（APC）白细胞特异性抗体。

试剂/样品混合物被CELLTRACKS○R AUTOPREP○R系统分配到一个插入在MAGNEST?细胞呈现装置的暗盒中。所述MAGNEST?装置具有强磁场，能吸引磁微粒标记的上皮细胞在暗盒的表面上。CELLTRACKS ANALYZERII?分析仪，或者CellSpotter?分析仪自动扫描暗盒的整个表面，获取图像并向用户显示所有事件，其中CK-PE

和DAPI荧光染料进行共定位。图像进行最终分类，并以画廊格式呈

现给用户。所检测分析的事件当其形态学特征与肿瘤细胞一致并表现出EpCAM+，CK+，DAPI+和CD45-表型时，才被分类为肿瘤细胞。试剂盒提供的材料

试剂说明

1. 3ml 包被抗EpCAM抗体的磁流体：含有浓度为0.022%的磁微粒，这些磁微粒表面偶联有抗表皮细胞表面标志物EpCAM的鼠源单克隆抗体。缓冲溶液中含有0.03%的BSA和0.05% ProClin 300作为保护剂。（棕色瓶盖）

2. 3ml染色试剂：包含细胞角蛋白特异性鼠源单克隆抗体，该偶联藻红蛋白（PE），浓度为0.0006%和浓度为0.0012%的鼠源抗CD45分子的单克隆抗体，该抗体偶联别藻蓝蛋白（APC），保存在含有0.5％BSA和0.1％叠氮化钠的缓冲溶液中。（白色瓶盖）

3. 3ml核酸染料：浓度为0.005%的4'，6-二脒基-2-苯基二盐酸盐（DAPI）保存在0.05%

的Proclin?300缓冲溶液中。（蓝色瓶盖）

4. 3ml捕获增强试剂：包含浓度为0.02％的专有试剂用于限制铁磁流体聚团，保存在0.5％BSA和0.1％叠氮化钠缓冲溶液中。（透明

瓶盖）

5.3ml通透试剂：含有0.011％的专有通透剂，保存在0.1％叠氮化钠缓冲液中。（绿色瓶盖）

6. 3ml细胞固定液：包含25％的专有固定液成分，保存在0.1％BSA 和0.1％叠氮化钠缓冲溶液中。（红色瓶盖）

7. 2 x 110ml/瓶稀释液：含有0.1％叠氮化钠的缓冲溶液。

8. 16支Cellsearch?圆锥形管（15ml圆锥形离心管）和管帽。

9. 16个暗盒和暗盒塞子。

未提供的必需材料

1. CellSave血液保护管（货号#7900005）

2. CELLTRACKS○R AUTOPREP○R系统(Catalog #9541)

3. CELLTRACKS ANALYZER II?分析仪(Catalog #9555)，或者CellSpotter?分析仪(Catalog #9525)

4. CELLSEARCH?循环肿瘤细胞质控试剂盒(Catalog #7900003)

5. CELLTRACKS? AUTOPREP?仪器缓冲液(Catalog #7901003)

6. 能提供离心力为800 X g水平离心机。

7. 试管架

8. 微量移液器和枪头

9. 旋涡混合器

警告和注意事项

1. 本产品仅用于体外诊断。

2. 在使用本产品检测样本之前请仔细阅读说明书。

3. 注意：只能用CellSave保护管收集血液。CTC非常脆弱，需要特别保护才能进行正确分析。

4. 注意：从业人员必须遵循全面防护措施，使用实验室的安全设备（例如，护目镜、安全服、安全手套等）。

5. 注意：微生物污染会造成获得结果的不正确性，实验中应避免生物污染。

6. 警告：所有的生物样本，包括暗盒和其他与生物样本接触的材料，应该认为具有生物危害。样本如果具有传播感染的能力，必须进行及时处理。同时，废弃物应根据当地和国家的规定进行正确处理。禁止