黄精总皂苷和多糖的药理作用及其提取方法的研究进展

［２８］Ｂｅｇｌｅｙ ＤＪ．Ｔｈｅ ｂｌｏｏｄ—ｂｒａｉｎ
ａｎｄ
ｄｒｕｇｓ
ｔｏ
ｂａｒｒｉｅｒ：ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｆｏｒ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｅｓ
１７）：２８６１—９．
ｔｈｅ ｃｅｎｔｒａｌ
ｎｅｒｖｏｕｓ
ｓｙｓｔｅｍ［Ｊ］．Ｊ
Ｐｈａｒｍ
Ｐｈａｒｍａｅｏｉ，
［３３］叶晓霞，俞雄．多肽药物分析方法研究进展［Ｊ］．中国医药工 业杂志，２００３，３４（７）：３５７—６２． ［３４］Ｇｅｒｍａｎｎ
ｈ，
减压回收乙醇得浸膏，分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃 取，回收溶剂得石油醚浸膏，乙酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏，得 总皂甙。另有一文献ｉ３引对总皂苷的提取工艺的研究中，对此 法进行正交试验得出：８０％乙醇提取时，提取温度为６０℃。 提取时间达１．５ ｈ，提取次数应为２次，料液比应选择１：１５，黄 精皂苷含量最高。 １．２．３索氏提取法黄精用５５—６０℃的低温进行干燥，以 ７５％的乙醇作为提取剂，进行索氏提取３６０ ｒａｉｎ后，用有机溶 剂萃取。此法的提取量相对稳定¨“。 １．２．４超声波法黄精用５５—６０℃的低温进行干燥，以７５％ 的乙醇作为提取剂，进行超声１８０ ｍｉｎ后，用有机溶剂萃取。有 研究表明¨“，此法提取量相对稳定，在没有发酵罐的情况下， 超声波法提取效果最好，是提取黄精总皂苷的首选方法。 １．２．５微波法黄精用５５～６０℃的低温进行干燥，以７５％ 的乙醇作为提取剂，进行微波处理５ ｒａｉｎ后，用有机溶剂萃 取。有文献¨虬报道，用微波法提取皂苷５ ｍｉｎ左右的提取量 与超声波提取１８０ ｒａｉｎ的提取量相当。但提取量较以上三种 方法不稳定。 ２黄精多糖的药理学作用及提取方法
ＲＴ．Ｒａｐｉｄ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｎｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｈ－ ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｏｓｉｓ
Ｃａｒｅ，２０００，３（１）：４５—５０． ａｃｉｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，ｓｕｂｓｔ
ｉｎ
ａｎｄ
ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ［Ｊ］．Ｊ
Ｇ，Ｔｅｓｓａｒｉ Ｐ，Ｓａｃｃｏ Ｐ，ｅｌ ａ１．Ａｉｎｏ
ａｎｄ
ｆｏｒ
ａｎｄ ｔｈｅｒ－
ｓｐｙ：ｐｒｅｓｅｎｔ ｓｔａｔｕｓ，ｆｕｔｕｒｅ ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ
ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｅａｒ Ｊ Ｎｕｃｉ
Ｕ，Ｂｅｒｇｅｒ Ｈ，ｅｔ
ｏｎ
ａ１．Ｌｉｑｕｉｄ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ蝴
ｏｆ
Ｍｅｄ。１９９８，２５（２）：２０１—１２．
ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｉｃ ｓｔｕｄｉｅｓ ｌｅａｓｉｎｇ
基金项目：安徽省科技重点项目（Ｎｏ ０７０２０３０３０６５）；安徽省高校首批 科技创新团队基金（Ｎｏ ２００５ＴＩＸｌ０３）；安徽省研究实验基地 优秀中青年科研带头人基金（Ｎｏ ２００６２２８０５） 通讯作者：徐维平，男，主任药师，硕士生导师，研究方向：黄精总皂苷 与多糖对抑郁症的药理学作用，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｗｐ５６０６＠１６３．Ｃｏｒｎ
ｍＲＮＡ（ＲＡＧＥ ｍＲＮＡ）表达的调节作用。结果显示，ＰＳＰ可显
浸渍法
王冬梅等人¨引在研究将卷叶黄精根中甾
体皂苷化学成分及其抗菌活性时。将其切片并装入渗漉桶 中，加入体积分数为９５％的工业酒精室温浸泡，每２４ ｈ收集 提取液１次，减压浓缩。向渗漉桶中再加入新酒精，循环６次。 减逑浓缩得到乙醇提取浸膏，将乙醇提取浸膏悬浮于水，然后 依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取。正丁醇萃取液减压浓 缩得总甾体皂苷。 １．２．２加热回流法黄精用５５—６０。Ｃ的低温进行干燥，以 ７５％的乙醇作为提取剂，进行加热回流３６０ ｍｉｎ后，用有机溶 剂萃取。耗时长，但提取量相对稳定¨“。对于较大量黄精的 提取，王易芬等人¨纠采用９５％乙醇回流提取３次，每次２
Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂｉｏｍｅｄ
Ｓｃｉ
Ａｐｐｌ，２０００，７４２（２）：３５３—６２．
ａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ
ａｎｄ ｔｈｅ
ｃｏｎｔｒｏｌ
ｏｆ
ｐｒｏｔｅｉｎ
ｄｙｎａｍｉｃｓ
ｔｈｅ ｈｕｍａｎ
［３５］陈执中．细胞培养法在基因工程药物血药浓度测定中的应用进 展［Ｊ］．中国临床药学杂志。２００１，１０（２）：１２０—２． ［３６］王慧文．高效液相色谱技术在药品检验中的应用及进展［Ｊ］．安 徽医药，２００８．１２（１１）：１０８７—９１． ［３７］Ｂｒｕｄｅｌ
Ｍ，Ｋｅｒｔａｃｈｅｒ
ｋｉｄｎｅｙ［Ｊ］．Ｊ Ｎｅｐｈｒｏｌ。１９９９，１２（４）：２０３—１１． ［３１］Ｂｅｈｒ ＴＭ，Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇ
ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ
ＤＭ，Ｂｅｃｋｅｒ
Ｗ．Ｒｅｄｕｃｉｎｇ
ｐｅｐｔｉｄｅａ ａｎｄ
ｔｈｅ ｒｅｎａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ
ｕｐｔａｋｅ ｏｆ
ａｎｔｉｂｏｄｙ ｆｉ＇ａｇｍｅｎｔｓ
ｔｈｅ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｄｅｇｒａｔｉｏｎ
ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ・肛
［３２］Ｃｈｅｎ ＳＨ，Ｇａｌｌｏ ＪＭ．Ｕｓｅ ｏｆ ＣＥ ｍｅｔｈｏｄｓ ｔｏ ｅｈａｒａｅｌｅｆｉｚｅ ｔｈｅ ｐｈａｒｍａ－ ｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ｏｆ ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｄｒａｇｓ［Ｊ］．Ｅｌｅｃｔｍｐｈｏｒｏｓｉｓ，１９９８，１９（１６一
ｃａｇｏｎ
１９９６．４８（２）：１３６—４６．
［２９］Ｍａｒｉｏｔｔｉ Ｆ，Ｈｕｎｅａｎ ＪＦ，Ｍａｈｅ ｓ，ｅｔ ［Ｊ］．Ｃｕｒｔ ［３０］Ｇａｒｉｂｏｔｔｏ
ｒｏｔｅ
Ｏｐｉｎ Ｃｌｉｎ Ｎｕｔｒ Ｍｅｔａｂ
ａ１．Ｐｒｏｔｅｉｎ ｍｅｍｂｏｌｉｓｍ
ａｎｄ ｔｈｅ
ｇｕｔ
Ｉ，Ｋｅｎｎｅｄｙ ｉｎｓｕｌｉｎ ｂｙ
除９０％的实验大鼠灌胃，发现给食ＳＧ一１００（剂量３０
ｎａｇ・
ｋｇ～・ｄ。）的大鼠与未给药对照组相比，其总糖的清除率提 高了３９％。同时发现，其降血糖机制不是通过改变胰岛素的 分泌，而是通过提高外周胰岛素的敏感性来降低血糖的。 １．１．２抗肿瘤作用 Ｗａｎｇ等旧１和Ｃａｉ等¨ｏ观察了从湖北黄 精的根茎中分离的甾体皂苷ｄｉｏｓｃｉｎ和ｍｅｔｈｙｌ ｐｒｏｔｏｄｉｏｓｃｉｎ体 外对肿瘤细胞的抑制作用，实验结果表明，ｄｉｏｓｃｉｎ具有显著抑 制人白血病ＨＬ－６０细胞、人宫颈癌Ｈｅｌａ细胞、人乳腺癌ＭＤＡ— ＭＢ－４３５细胞及人肺癌Ｈ１４细胞增殖的作用，并具有良好的 剂量依赖关系。Ｄｉｏｓｅｉｎ在１５—２５ Ｉ＿Ｌｍｏｌ・Ｌ“下可以诱导Ｈｏ ６０细胞的分化和凋亡。Ｄｉｏｓｃｉｎ在１—８ ｌ山ｍｏｌ・Ｌ‘１下还可诱 导Ｈｅｌａ细胞的凋亡。Ｄｉｏｓｃｉｎ可以下调存活蛋白Ｂｃｌ－２的表 达，增强Ｃａｓｐａｓｅ－９的酶活性，但对Ｃａｓｐａｓｅ－８的酶活性影响不 明显，说明ｄｉｏｓｅｉｎ通过线粒体途径诱导了Ｈｅｌａ细胞的凋亡。 １．１．３改善学习记忆作用 黄精总皂苷（ＰＴＳ）给东莨菪碱 致学习记忆障碍模型小鼠连续灌胃５ ｄ，结果显示，ＰＳＴ在４００ ｍｇ－ｋｇ一剂量下能明显改善东模型小鼠学习记忆功能Ｈ ｏ。 １．１．４抗氧化、抗自由基作用 有研究一１针对补充黄精提取 物对大强度耐力训练大鼠心肌线粒体抗氧化能力以及ＡＴＰ 酶活性的影响发现黄精提取物可以提高大鼠Ｍｎ—ＳＯＤ、ＧＳＨ— Ｐｘ、ＣＡＴ活性，降低丙二醛（ＭＤＡ）和Ｈ：Ｏ：的含量，说明对消 除运动产生的自由基和提高机体的抗氧化能力有积极的作 用；黄精提取物能提高大强度耐力训练大鼠心肌线粒体内 Ｎａ＋一ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋一ＡＴＰａｓｅ的活性，提示其具有线粒体保 护作用。证明了黄精抗自由基氧化、阻止膜的脂质过氧化和 保护心肌线粒体结构完整的显著作用。 １．１．５对缺血心肌的保护作用 采用药物（皮下注射异丙 肾上腺素）和手术（结扎大鼠冠状动脉左前降支ＬＡＤ）两种心 肌缺血造模方法进行心血管药理实验研究¨…，以酶学、染色 组织学检测得出：黄精醇提物能明显降低Ｉｓｏ致心肌缺血大 鼠心脏组织中ＡＳＴ、ＣＫ、ＬＤＨ的活性，能明显对抗结扎ＬＡＤ
安徽医药Ａｎｈｕｉ Ｍｅｄｉｃａｌ
ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ
Ｊｏｕｒｎａｌ
２００９
Ｊｕｌ；１３（７）
・７１９－
黄精总皂苷和多糖的药理作用及其提取方法的研究进展
祝凌丽，徐维平
（安徽医科大学附属省立医院，安徽合肥２３０００１） 关键词：黄精总皂苷；黄精多糖；提取方法；药理作用 黄精是常用滋补中药。系百合科黄精属（Ｐｏｌｙｇｏｎａｔｕｍ． Ｍｉｌｌ．）多年生草本植物，药用其根茎。世界上有４０多种，我 国就有３０余种，药用品种ｌＯ余种。《中国药典》规定，药用黄 精有３种原生药：黄精（Ｐ．ｓｉｂｉｒｉｃｕｍＲｅｄｏｕｔｅ）、多花黄精（Ｐ． ｃｙｒｔｏｎｅｍａＨｕａ）和滇黄精（Ｐ．ｋｉｎｇｉａｎｕｍＣｏｌｌ．ｅｔ Ｈｅｍｓｌ）ｏ黄精性 平、味甘；归脾、肺、肾经；具有补气养阴、健脾、润肺、益肾等功 能；用于脾胃虚弱、体倦乏力、口干食少、肺虚燥咳、精血不足、 内热消渴。近年来，人们对黄精属植物的研究不断深入，已从 该属植物中分离得到很多化学成分：糖类、甾体皂苷类、黄酮 类等。其中甾体皂苷类化合物是黄精属植物中研究报道最多 的成分…，迄今为止，国内外已对黄精属的１２种植物进行了 甾体皂苷类化合物的研究，分离得到了７８种甾体皂苷，其中 有４０多个新发现的甾体皂苷成分。这些甾体皂苷的生物活 性研究多集中在降血糖、抗肿瘤、抗Ｈ１Ｖ等活性方面，细菌、 抗真菌活性的研究鲜有报道。黄精多糖（ＰＳＰ）的研究较多， 其药理活性广泛，具有增强免疫功能、抗肿瘤、抗辐射等多种 生物学活性［２，３ｊ。为了更好的开发利用黄精皂苷类和多糖成 分，开发出具有降血脂、抗肿瘤、抗ＨＩＶ活性的药物，研究者 们进行了不同方法的提取实验。本文针对黄精的化学成分黄 精总皂苷和多糖的药理学作用及其提取方法作一综述。 １黄精总皂苷药理学作用及提取方法 １．１黄精总皂苷的药理学作用 １．１．１调节血糖作用¨４ Ｃｈｏｉ等胪。用从中药玉竹中分离得 到的３个甾体皂苷（ＳＧ一１００，ＳＧ－２８０，ＳＧ－４６０）分别给予胰腺切
１．２．１
性高脂血症动物模型的血脂，同时抑制动脉内膜泡沫细胞的 形成‘圳。 ２．１．２抗衰老作用［２ｔ盈１ 滋阴作用‘２引：在研究ＰＳＰ对阴虚 模犁小鼠环核苷酸系统影响的实验中，发现黄精粗多糖能明 显提高阴虚模型小鼠的体重增长率及痛阈（Ｐ＜０．０５），能明 显降低阴虚模型小鼠血浆中ｃＡＭＰ含量及ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ的比 值（Ｐ＜０．０５）。说明黄精多糖明显的滋阴作用。 抗氧化作用：黄精粗多糖大、中、小剂苗组，并用六味地黄 丸作阳性对照旧Ｊ。实验不仅提示黄精粗多糖是黄精滋阴作 用的主要活性部位，还提示黄精粗多糖可能通过其滋阴作用 提高阴虚小鼠的抗氧化能力，从而起到延缓衰老的作用。夏 晓凯等Ⅲ１探讨ＰＳＰ的体内外抗氧化作用，发现ＰＳＰ在体外能 抑制自发的和诱导的脂质过氧化产物ＭＤＡ的生成，对・ＯＨ 和Ｏ卜等具有直接清除作用，表明该多糖在抗氧化及防衰老 方面具有一定作用。 ２．１．３抗肿瘤作用Ⅲ瑚Ｊ ＰＳＰ对Ｈ：：移植性实体瘤的抑制 与生理盐水组相比，实验组的低、中、高剂量组均有显著抑制 Ｈ趋移植性实体瘤牛长的作用（Ｐ＜０．０１），并且黄精多糖对小 鼠体质量的增加没有明显的抑制作用，说明ＰＳＰ有显著的抗 肿瘤作用和免疫凋节活性。 ２．１．４增强免疫功能用黄精粗多糖对温热药致阴虚模型 小鼠进行实验Ⅲ。川，黄精粗多糖大、中剂量都能升高模型小 鼠的胸腺、脾脏指数及血清中ＩＬ－２含量，且有统计学意义，黄 精粗多糖小剂量仅对模型小鼠的胸腺指数升高有统计学意 义。证实了能提高机体免疫力。ＰＳＰ在体内还可增强红细胞 免疫功能旧引。王红玲旧。等人发现ＰＳＰ在一定浓度范围内均 可显著增加哮喘患儿红细胞Ｃ３ｂ受体花环率且呈剂量依赖 关系，说明ＰｓＰ可增强红细胞免疫功能明显低下的哮喘患儿 的红细胞免疫功能。 ２．１．５抗单纯疱疹病毒作用 体外抗单纯疱疹病毒试验Ⅲ１ 中，Ｍ＇１３＂染色结果表明，ＰＳＰ能显著提高病毒感染的Ｖｅｒｏ细 胞的活力，对细胞有保护作用。体外和体内多项试验表明，黄 精和ＰＳＰ具有显著的增强免疫力和抗炎作用，更有学者研究 表明，黄精多糖滴眼液能治疗家兔单纯疱疹性角膜炎，且疗效 优于无环鸟苷，可能是由于ＰＳＰ的抗病毒、增强免疫和抗炎作 用协同的结果ｐ“…。 ２．１．６降低血糖的作用 有文献报道ⅢＪ，在糖尿病模型组 和治疗组腹腔注射链脲佐菌素建立小鼠糖尿病模型的基础 上，来探讨ＰＳＰ对老年糖尿病小鼠脑组织糖基化终产物受体
ｈｏｒｍｏｎｅｌ［Ｊ］．Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ａ，１９９４，６６１（１）：５５—６０． （收稿日期：２００９一Ｏｌ一１３）
万方数据
・７２０・
安徽医药Ａｎｈｕｉ Ｍｅｄｉｃａｌ
ａｎｄ Ｐｈａｒｎｕｗｅｕｔｉｃａｌ
Ｊｏｕｒｎａｌ
２００９
Ｊｕｌ；１３（７）
致大鼠心脏组织中超氧化物岐化酶（ＳＯＤ）活性的下降以及 ＭＤＡ、心肌总钙含量的增高，对心肌坏死病理变化有明显的 改善。证实黄精醇提物对心血管系统的药理作用。其作用机 制可能与减轻缺血动物细胞内各种酶类的释放、防止心肌钙 超载，减轻脂质过氧化等作用有关。 １．１．６调节免疫作用 玉竹中的甾体皂苷是以增强体液免 疫及吞噬功能为主的免疫增强剂。玉竹皂苷ＰＯＤ一Ⅲ在低 浓度时能协同亚适和最适剂量的刀豆球蛋白（Ｃｏｎ Ａ）和脂多 糖（ＬＰＳ），对淋巴细胞转化有促进作用…１以及抗菌作用一２Ｊ 等。 １．２黄精总皂苷提取方法其基本原理是醇提水沉法，有加 热回流法、索氏提取法、超声波法、微波法¨３｜。