腐殖酸提取具体步骤详解(1)

试剂配制：

1mol/L 盐酸（1L）、1mol/L NaOH溶液（1L）、6mol/L 盐酸（1L）、0.1mol/L KOH溶液（1L）

仪器：

1L试剂瓶4个，1L容量瓶3个，500ml容量瓶1个，玻璃棒、100ml量筒1个，250ml量筒1个，1L烧杯1个，500ml烧杯2个，50ml烧杯1个。

药品：

37%浓盐酸、NaOH、KOH、蒸馏水。

1、冷冻干燥

（1）取100g左右泥于5号自封袋（205 E2抽屉）中，称量完后，将泥在袋中尽量铺开，增大表面积，赶尽袋中空气后，密

封。

（2）贴标签，写清姓名、样品名、日期。放入-20℃冰箱冷（211双开门）冻24h。

（3）取培养皿（211烘箱上面），上面铺一层锡箔纸（205 A1抽屉），将冷冻好的泥样掰成一块块后放在铺锡箔纸的培养皿

中，即可进冷干机。

（4）冷干机（205,203或101都有）使用前要预约（填写机器旁边的预约本子），用之前要注意上次别人用完后有没有排气，

放进样品，盖上盖子后，真空、冷冻，3~4d取出。使用的

时候一定要写清楚使用人姓名及样品放入时间（也是写在预

约本子上）。具体使用方法，到时候不清楚再找师兄师姐询

问。

2、磨碎过筛：冷干后的样品取出后，研钵磨碎（211小房间的柜子顶层），过2mm筛（205烘箱上），过筛后样品存放于自封袋，4℃冰箱保存（211好几个）。

3、取塑料离心管1（211 B9厨子里），标签（姓名、样品名），称取质量，记录。取g过筛后的样品加入到离心管中，加入ml1M盐酸（质量/体积=1/10），摇匀，测pH1~2。

4、pH计的使用：以211的为例。提前准备好：洗瓶（蒸馏水）、卫生纸、烧杯（装废液）。

（1）、标定：开机---设置---读数---选择3点---读数，电极插入4.00标准溶液，点击“校准”，屏幕右下方出现“1”，待读数稳定后（出现），拿出电极，蒸馏水清洗，擦干。电极插入6.86标准液，点击“校准”，出

现“2”，至稳定，清洗擦干。同样方法标定第三个值9.18，第三次稳定后，会显示一个斜率值，一般为80多或90多。在90多以上说明可以使用。标定后清洗干净电极。

（2）、测定：将混合液摇匀，插入电极，带读数稳定后读数。（测完泥的电极一定要清洗干净）

（3）、清洗：使用完后，用蒸馏水将极清洗电极，用卫生纸擦干，浸入管套。

5、振荡：离心管盖紧盖子，上振荡机，时间设定1h。用完记得关

6、离心：离心管必须对称放置，奇数样品用等量的水培一个对称样品。内盖拧紧，外盖必须盖紧（不会弹起来），开机，调整转速、时间。运行。每次使用完毕，都要将离心机盖儿打开，使得热量或者水气

自然蒸发（如使用了低温离心，可能有结冰，则要等冰融化，及时用干燥棉纱布擦洗干净），等无明显水汽时再盖上盖子。

7、分离上清液：倒出还是用注射器抽？（待确定），取清夜至新离心管2（称量、标签）。封盖4℃保存。

8、称离心管1+残渣质量，算出残渣质量，按残渣质量：NaOH溶液体积=1：10加入1M NaOH溶液，此过程在氮气气氛下完成（氮气气瓶的压力小于1MPa不可使用）。

9、上述混合液，振荡4h，静置过夜。离心，上清液取至离心管3（称量、标签），管1及内部残渣可弃掉。用6mol/L的盐酸调节管3中液体的pH至1左右（建议用滴管取，边滴边用pH计测，滴管位置问黄君洁），调好后静置12h。

10、离心，分离处上清液至离心管4（称量、标签）。

管2和管4中清夜分别为FA（a）和FA（b），放4℃冰箱待测。