开展支原体检测的临床意义

开展支原体检测的临床意义

一、项目开展背景和意义：

支原体是一种无细胞壁、介于独立生活和细胞内寄生生活间的最小型原核生物，体积介于细菌与病毒之间，与许多泌尿生殖道感染症、围产期感染和不育症等都有关系，是性传播疾病的病原体之一，一旦感染。可对人体造成多种伤害。其中解脲脲原体(Uu)与人型支原体(Mh)是人类泌尿道和生殖道常见寄生菌之一，是引起非淋球菌性尿道炎(NGO)的主要病原体⋯。

在2014年微生物年会上，川北医学院附属医院检验科一篇关于：川东北地区泌尿生殖道沙眼衣原体（CT）、淋球菌（NG）和解脲支原体（UU）的调查报告显示，3种病原体至少一种感染的感染率为46.7%，单独感染解脲支原体的阳性率为30.5%，单独感染沙眼衣原体（CT）阳性率为4.3%，单独感染淋球菌（NG）阳性率为2.2%。混合感染中解脲支原体（UU）+沙眼衣原体（CT）阳性率为 5.1%。不同来源的标本在临床科室分布中，妇产科和皮肤科分布较高，阳性率分别为63.6%和42.2%，不同年龄段中，各种类型感染患者均与20-40岁年龄段为主，临床感染趋势显示逐年升高，并且成逐年上升趋势。应该重视该人群的检测和治疗，控制该类疾病的发生。

目前医疗单位都是采用单纯液体培养法（Uu和Mh液体培养基）检测支原体，通过液体变色来完成。其原理是支原体在液体中生长有其不同于细菌的特点，因其个体微小，在增殖过程中不导致浑浊或生成沉淀，Uu分解尿素Mh分解精氨酸均生成胺，使液体培养基由酸变碱，指示剂酚红在培养基中颜色由黄变红，所

以临床上常将液体培养基在培养48h内变红且澄清者判定为支原体生长阳性。

但支原体液体培养实际上只是一种生化鉴定，不能准确判定有无支原体感染，不能做到真正地将Uu和Mh从送检的标本分离出来，其原因为液体培养是通过添加不同底物进行生化反应来间接判断，如果送检的标本菌相复杂，或因杂菌量过大，超出培养基中抑菌剂的抑菌能力，受标本中其他能够产碱病原体影响也会变色，且常易出现培养的污染，造成结果的假阳性或假阴性，尤其是假阳性，引发大量医患纠纷。而且一种液体培养基仅凭颜色不能同时判定两种以上的支原体感染，但多年来一直没有根本的解决这个问题的根本方法。

按照国内外学者的普遍观点，固体培养法是诊断支原体有无的最佳方法，尤其是固体培养基可以在低倍显微镜下直接观察到支原体特有的典型(Uu深褐色海胆状、Mh油煎蛋样)菌落，是诊断支原体的可靠依据，彻底解决了现有液体支原体培养（包括液体支原体培养及药敏）假阳性、假阴性问题。

同一个标本，固、液培养基同时接种培养（先接种固体培养基），利用固体培养具有选择性强、特异性好的优点进行确诊, 而液体培养出具药敏结果。以固体培养基上有无菌落形态为标准，出具液体培养及药敏的结果（有菌落，则药敏有效，否则反之），即符合支原体培养鉴定金标准，同时满足了临床对药敏鉴定的需求，更具有科学的临床指导意义。

二、解脲支原体（Uu）、人型支原体（Mh）固体选择分离培养基

1、用途：

用于同时选择性分离培养解脲支原体（Ureaplasma urealyticum,简称Uu）、人型支原体（Mycoplasms homins,简称Mh）

2、原理：

在营养丰富的软琼脂培养基中,添加抑菌剂(抑制真菌、细菌生长)并提供配套的co2发生片与一个密闭的微需氧环境，能有效地保证解脲支原体和人型支原体生长出典型菌落及分解底物的生化反应，大大提高由子宫颈、尿道、咽喉部等部位分离解脲支原体和人型支原体的阳性率和准确性。

2、仪器、材料：普通或co2培养箱光学显微镜

3、规格及组成：（30人份/盒）

解脲（Uu）、人型（Mh）

30块

固体培养基

co

发生片30片

2

中文说明书1张

合格证1张

4、储存：

本试剂盒应保存于2℃--8℃，效期3个月。切勿反复冰冻！

5、标本要求：

1)、标本采集：取可疑分泌物，尽量多取。

2)、通常取样部位：女性：阴道（最好为后穹窿）、男性：尿道。

3)、标本时间：标本采集后最好在5小时内完成实验。

6、操作步骤：

1、摘种线（S 形）,划线不宜过密，

2、放入C0

2

发生片可加一滴清水

3、放入培养箱（37℃）(Uu 2

4、Mh 4824)h

4、颜色变化为初步判断 Uu阳性培养基变红色Mh阳性培养基不变色

5、结果判定：

（观察菌落形态）

镜下放大40-100倍

7、参考范围值（菌落形态描述）：

类别颜色特点形状培养基是否变色图谱

解脲（Uu）深褐色

中间有

沙粒状感

圆形变色

人型（Mh）浅颜色

典型

油煎蛋状

圆形不变色

Uu/Mh药敏液固组合培养检测特点及优势：

1、液相培养用于初步定量和药敏

2、液相试剂盒的缺点是假阳性率高、有假阴性和污染干扰严重。

3、固相培养用于分离和鉴定，也有定量作用

4、以固体培养可见菌落为金标准，可见菌落则液体培养药敏有

效，无菌落情况，即使液体培养为阳性，亦按阴性处理，所显示药敏则无效。

5、液固组合培养检测，比目前市场现有的液相试剂盒，特异性和灵敏度更好，更具有科学的临床指导意义。