桔梗的化痰止咳作用
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药物称量、配制及给药的准确程度是本实验
成功与否的关键。
不能将小鼠长时间放入玻璃钟罩内，否则将
会导致小鼠死亡影响实验结果。
实验时仔细观察小鼠腹部运动，如果在小鼠
出现典型快速扬头张口，腹部急速抽动的同 时听到清脆的咳嗽声音，立即记为一次咳嗽。
二、化痰药的实验：
①小鼠酚红气管排出实验法。用小鼠通过酚红从气
实验原理
小白鼠腹腔注射酚红后，后者可 部分的从气管分泌排出有祛痰作用的 药物在使支气管分泌液增加的同时， 其由呼吸道粘膜排出的酚也随之增加。 因而可从药物对气管内酚红排泌量的 影响来观察其祛痰作用。酚红在碱性 溶液中呈红色，将从道中洗出的液体 用比色法（分光光度计）测出酚红的 排泌量。从而得出药物的祛痰作用。
管的排出量，观察药物对呼吸道分泌的影响。此法 简便，但用强碱洗出气管内酚红能损伤气管粘膜。 ②家兔酚红排出实验法。经小鼠酚红法筛选有效时， 再用家兔进行实验。 ③影响大鼠气管纤毛粘液运行速度的实验方法。用 印度墨汁（稀释4～5倍）注入气管1滴，观察药物对 大鼠气管纤毛粘液运行速度的影响，作为化痰药的 一个实验指标。
2min、3min内的咳嗽次数。记录数据。选取咳 嗽反射阳性（3min内咳嗽10次以上者）小鼠10 只。 （2）将选出的小鼠秤重，编号。给小鼠灌胃桔 梗煎剂稀释液，30min后，先让玻璃钟罩内充满 雾化的浓氨水，将小鼠装入固定器，放入玻璃 钟罩的同时予负压10kPa抽吸雾化的浓氨水，5s 后取出小鼠的同时按下秒表。记录咳嗽的潜伏 期、2min内小鼠的咳嗽次数、3min内小鼠的咳 嗽次数（以听到小鼠响亮的咳嗽声音为标准）。 求出潜伏期延长的百分率及咳嗽减少百分率。
实验器材：
动物:小鼠10只，雌雄各半（20-22g）
器材:小鼠灌胃器，秒表，负压吸引器（萨克
星），玻璃钟罩，小鼠固定装置，超声雾化 器，电子秤。 试剂:浓氨水（分析纯）（28%） ，稀盐酸 （中和氨水）。桔梗煎剂液1g/ml，苦味酸。
实验方法
（1）10kPa负压，喷雾5s，观察咳嗽潜伏期、
实验器材：
动物：小鼠10只，雌雄各半（20-22g）。禁食
12h，不禁水 药品：桔梗煎剂液1g/ml，并以蒸馏水稀释成所需 要的浓度灌胃给药,小鼠剂量为5.73ml/kg， 生理盐水。酚红，用时配制成浓度0.5%;苦 味酸,NaOH溶液 器材：超声波雾化器；可见紫外分光光度计，鼠笼 灌胃器，电子秤，手术器材，剪子，钟罩， 镊子
数据记录与处理
桔梗的化痰作用
组别 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 小鼠数 (n) 剂量 (mg/kg) 酚红排泌量 （ug/ml）
与对照组相比*P<0.05,P<0.01
注意事项
药物称量、配制及给药的准确程度是本实验成功与
否的关键。 给药至处死动物的时间必须准确 解剖时，必须将周围的组织去除干净，气管段周围 如果粘附有血液应立即用滤纸吸净。 呼吸道冲洗时，NaHCO3用量要准确，灌洗时动作要 轻，以免穿破气管和肺脏，抽推速度也尽可能相同， 并尽可能将洗液抽尽。 桔梗有毒性，只能口服，不能注射。给药量必须准 确。
桔梗的化痰止咳作用
中药学二班 第四组
实验目的
1.通过桔梗煎剂对小鼠的作用了解桔梗化痰止咳的
药理作用 2.掌握这些药物的研究方法，并进一步研究作用机 理 3.熟悉中药化痰止咳药的研究概况，掌握几种常用 的筛选方法。
实验：
一、止咳药的实验 二、化痰药的实验
一、止咳药实验法：
①小鼠氨水引咳法：用浓氨水引起小鼠咳嗽，借以观察 药物的止咳作用，是止咳药常用筛选方法之一。 ②二氧化硫致咳法：通过二氧化硫的刺激，观察咳嗽的 潜伏期，以筛选药物的镇咳作用。 ③豚鼠枸椽酸引咳法：用枸椽酸喷雾引起豚鼠咳嗽，以 观察药物的镇咳作用，豚鼠受枸椽酸刺激后引起的咳嗽声音 较大，易于记录。 ④刺激猫喉上神经引咳法：通过小鼠氨水、二氧化硫等 引咳法筛选出的镇咳药，进一步研究其作用机制是中枢性还 是末梢性，可进行本实验。凡能抑制咳嗽中枢的药物均能抑 制刺激喉上神经引起的咳嗽。
实验原理：
桔梗所含皂苷成分经口服刺激胃黏膜，反射性地 增加支气管黏膜分泌，使痰液稀释而被排出。桔梗 所含皂苷同时具有镇咳作用。小鼠灌服桔梗煎剂的 LD50为24g/kg。小鼠灌胃桔梗皂苷的LD50为420mg/kg, 腹腔注射为22.3mg/kg。 浓氨水作为化学刺激物，当被动物吸入后，作 用于呼吸道感受器，引起咳嗽。故凡能抑制咳嗽中 枢或降低呼吸道感受器敏感性的药物均有止咳作用。
数据记录与处理：
桔梗的止咳效果（n=10）
组别
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
剂量 mg/kg
潜伏期（sec） 给药前
2min 3min
咳嗽频率
给药后
2min 3min
给药前
2min 3min
给药后
2比*P<0.05,**P<0.01；
注意事项
实验步骤
药物的稀释浓度同小鼠浓氨水引咳法， 将小鼠分为两组，实验组小鼠灌胃桔梗水煎 液（0.2ml/10g），对照组小鼠灌胃生理盐水。 30min后，腹腔注射酚红溶液0.1ml/10g，注 射酚红后30 min，断颈处死小鼠，背位固定， 分离气管。剥离气管周围组织，剪下假状软 骨至气管分枝处一段气管，立即放入盛有2ml 生理盐水的试管中，加入0.1ml氢氧化钠溶液， 以721型分光光度计，波长546nm测定吸光度。 根据酚红标准曲线计算酚红含量。
成功与否的关键。
不能将小鼠长时间放入玻璃钟罩内，否则将
会导致小鼠死亡影响实验结果。
实验时仔细观察小鼠腹部运动，如果在小鼠
出现典型快速扬头张口，腹部急速抽动的同 时听到清脆的咳嗽声音，立即记为一次咳嗽。
二、化痰药的实验：
①小鼠酚红气管排出实验法。用小鼠通过酚红从气
实验原理
小白鼠腹腔注射酚红后，后者可 部分的从气管分泌排出有祛痰作用的 药物在使支气管分泌液增加的同时， 其由呼吸道粘膜排出的酚也随之增加。 因而可从药物对气管内酚红排泌量的 影响来观察其祛痰作用。酚红在碱性 溶液中呈红色，将从道中洗出的液体 用比色法（分光光度计）测出酚红的 排泌量。从而得出药物的祛痰作用。
管的排出量，观察药物对呼吸道分泌的影响。此法 简便，但用强碱洗出气管内酚红能损伤气管粘膜。 ②家兔酚红排出实验法。经小鼠酚红法筛选有效时， 再用家兔进行实验。 ③影响大鼠气管纤毛粘液运行速度的实验方法。用 印度墨汁（稀释4～5倍）注入气管1滴，观察药物对 大鼠气管纤毛粘液运行速度的影响，作为化痰药的 一个实验指标。
2min、3min内的咳嗽次数。记录数据。选取咳 嗽反射阳性（3min内咳嗽10次以上者）小鼠10 只。 （2）将选出的小鼠秤重，编号。给小鼠灌胃桔 梗煎剂稀释液，30min后，先让玻璃钟罩内充满 雾化的浓氨水，将小鼠装入固定器，放入玻璃 钟罩的同时予负压10kPa抽吸雾化的浓氨水，5s 后取出小鼠的同时按下秒表。记录咳嗽的潜伏 期、2min内小鼠的咳嗽次数、3min内小鼠的咳 嗽次数（以听到小鼠响亮的咳嗽声音为标准）。 求出潜伏期延长的百分率及咳嗽减少百分率。
实验器材：
动物:小鼠10只，雌雄各半（20-22g）
器材:小鼠灌胃器，秒表，负压吸引器（萨克
星），玻璃钟罩，小鼠固定装置，超声雾化 器，电子秤。 试剂:浓氨水（分析纯）（28%） ，稀盐酸 （中和氨水）。桔梗煎剂液1g/ml，苦味酸。
实验方法
（1）10kPa负压，喷雾5s，观察咳嗽潜伏期、
实验器材：
动物：小鼠10只，雌雄各半（20-22g）。禁食
12h，不禁水 药品：桔梗煎剂液1g/ml，并以蒸馏水稀释成所需 要的浓度灌胃给药,小鼠剂量为5.73ml/kg， 生理盐水。酚红，用时配制成浓度0.5%;苦 味酸,NaOH溶液 器材：超声波雾化器；可见紫外分光光度计，鼠笼 灌胃器，电子秤，手术器材，剪子，钟罩， 镊子
数据记录与处理
桔梗的化痰作用
组别 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 小鼠数 (n) 剂量 (mg/kg) 酚红排泌量 （ug/ml）
与对照组相比*P<0.05,P<0.01
注意事项
药物称量、配制及给药的准确程度是本实验成功与
否的关键。 给药至处死动物的时间必须准确 解剖时，必须将周围的组织去除干净，气管段周围 如果粘附有血液应立即用滤纸吸净。 呼吸道冲洗时，NaHCO3用量要准确，灌洗时动作要 轻，以免穿破气管和肺脏，抽推速度也尽可能相同， 并尽可能将洗液抽尽。 桔梗有毒性，只能口服，不能注射。给药量必须准 确。
桔梗的化痰止咳作用
中药学二班 第四组
实验目的
1.通过桔梗煎剂对小鼠的作用了解桔梗化痰止咳的
药理作用 2.掌握这些药物的研究方法，并进一步研究作用机 理 3.熟悉中药化痰止咳药的研究概况，掌握几种常用 的筛选方法。
实验：
一、止咳药的实验 二、化痰药的实验
一、止咳药实验法：
①小鼠氨水引咳法：用浓氨水引起小鼠咳嗽，借以观察 药物的止咳作用，是止咳药常用筛选方法之一。 ②二氧化硫致咳法：通过二氧化硫的刺激，观察咳嗽的 潜伏期，以筛选药物的镇咳作用。 ③豚鼠枸椽酸引咳法：用枸椽酸喷雾引起豚鼠咳嗽，以 观察药物的镇咳作用，豚鼠受枸椽酸刺激后引起的咳嗽声音 较大，易于记录。 ④刺激猫喉上神经引咳法：通过小鼠氨水、二氧化硫等 引咳法筛选出的镇咳药，进一步研究其作用机制是中枢性还 是末梢性，可进行本实验。凡能抑制咳嗽中枢的药物均能抑 制刺激喉上神经引起的咳嗽。
实验原理：
桔梗所含皂苷成分经口服刺激胃黏膜，反射性地 增加支气管黏膜分泌，使痰液稀释而被排出。桔梗 所含皂苷同时具有镇咳作用。小鼠灌服桔梗煎剂的 LD50为24g/kg。小鼠灌胃桔梗皂苷的LD50为420mg/kg, 腹腔注射为22.3mg/kg。 浓氨水作为化学刺激物，当被动物吸入后，作 用于呼吸道感受器，引起咳嗽。故凡能抑制咳嗽中 枢或降低呼吸道感受器敏感性的药物均有止咳作用。
数据记录与处理：
桔梗的止咳效果（n=10）
组别
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
剂量 mg/kg
潜伏期（sec） 给药前
2min 3min
咳嗽频率
给药后
2min 3min
给药前
2min 3min
给药后
2比*P<0.05,**P<0.01；
注意事项
实验步骤
药物的稀释浓度同小鼠浓氨水引咳法， 将小鼠分为两组，实验组小鼠灌胃桔梗水煎 液（0.2ml/10g），对照组小鼠灌胃生理盐水。 30min后，腹腔注射酚红溶液0.1ml/10g，注 射酚红后30 min，断颈处死小鼠，背位固定， 分离气管。剥离气管周围组织，剪下假状软 骨至气管分枝处一段气管，立即放入盛有2ml 生理盐水的试管中，加入0.1ml氢氧化钠溶液， 以721型分光光度计，波长546nm测定吸光度。 根据酚红标准曲线计算酚红含量。