中医药实验研究专业设计
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以是为证明假说所要解决的关键问题。
• 对应用研究来说，则是为获取新观点、新
知识、新方法所要解决的关键问题。
拟解决的关键问题一直困惑设计者，需要根 据实验的特点认真考虑这一试验设计的核心问题。
研究目标：为什么要做本项研究？ 问题或假说：研究的动因。 课题名称：包括研究的主体、客体（和方法）。 研究内容：如何得到研究结果。
Smad4
MARK
ERK
JNK
p38
细胞核
丹参酚酸B(SA-B)抑制TGF-β1刺激的 HSC内ERK1/2的磷酸化
TGF-β1（10ng·ml-1） SA-B (10-6 M·L-1)
- - ++ - + +-
- p-ERK1 - p-ERK2
- ERK1
TGF-1受体 Smades
构思研究基本框架
课题名称 立项依据（背景资料） 科学假说（拟解决的关键科学问题） 研究目的 研究内容 研究方法 研究方案（或技术路线） 研究工作基础和条件 研究计划进度安排 课题组成员 研究经费
科学研究的指导思想和基本要求
• 指导思想
解放思想、实事求是、与时俱进
• 基本要求
科学性 先进性 实用性 可行性 创新点
•体外实验（in vitro）：现在多指组织或细
胞体外培养的一类实验，实验对象是培养 的器官、组织、原代或传代培养的细胞或 细胞株。
两种实验类型的特点和适用范围
实验周期 实验设备
和耗材 实验条件 组内差异 技术要求 适用范围
体内实验
体外实验
急性实验较短， 慢性实验较长。
一般较短，但须重复。
较少需要。
另一种是一项研究只深入解决一两个问 题，但把有关各方影响因素尽可能都考虑到， 逐一证实或排除，得到明确结论。
TGF TGF-R
Ras
Raf-1 MEK
cytoplasm
MAPK
P NF-1
SP-1 Gene transcription
nucleus
Smad2 Smad3
Pຫໍສະໝຸດ Baidu
P -Smad2 P -Smad3
• 应尽量选择那些机能代谢、结构和人类相
似的实验动物。
• 要选择那些解剖、生理特点符合实验目的
要求的实验动物。
• 选用不同种系实验动物的某些特殊反应，
使之适合于不同研究目的的需要。
• 应选用对同一刺激反应大的品系动物。
实验动物的随机化分组
随机化的特征： ⑴不可预测性 ⑵无人力干预 ⑶不以人们的意志为转移 ⑷独立于时间
需要细胞分离设备、超净 工作台、培养箱和显微镜等， 用于培养的耗材量较大。
受体内多系统的影响， 较难控制。
可控性强。
存在个体差异， 样本例数需要较多。
同源细胞差异不明显， 样本例数需要少。
需动物实验技术， 难度较低。
需细胞分离培养技术， 难度较高。
药效学研究、毒理学研究， 大通量药物筛选、 整体水平上形态和功能方面 组织、细胞水平上发病机制、 的分子生物学和药理学研究。 分子生物学和药理学研究。
胶原 蛋白
细胞核
PDGF受体
TGF-1 PDGF-BB
ERK
肝星状 细胞
中 药
胶原酶
胶原蛋白
Walter KOLCH . Biochem. J. (2000) 351, 289-305
TGF-β1的MAPK通路中的细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）通路与纤维化发生密切相关。
设计前准备
• 大量阅读国内外专业文献 获得思路 • 专题检索 获得方法 • 查新检索 获得创新点
确立研究课题
• 一般选常见病、多发病 • 推荐选热点，也可选空白点或失败点 • 有利于中医学或中西医结合医学发展 • 社会效益和经济效益
拟解决的关键问题
• 一般为1～2个。 • 对基础研究来说，可以是假说本身，也可
1、SA-B抑制TGF-β1刺激的HSC内ERK1/2 的磷酸化
TGF-β1（10ng·ml-1） SA-B (10-6 M·L-1)
++-+ - +-
TGF-β1（10ng·ml-1） SA-B (10-6 M·L-1)
-- + + -+ - +
p-ERK1 p-ERK2
ERK1
2 SA-B抑制TGF-β1刺激的HSC内MEK的磷 酸化
目前相当多的研究是两种实验研究互 相交叉，例如应用克隆技术和转基因技术 的应用。
利用体外实验的方法研究中药复方的 药理作用。
从模型动物中分离细胞作体外研究。
不同的实验要解决的具体问题不同， 须根据需要选择适当的实验类型。有部分 初学者认为体外实验的水平比体内实验要 高，这种观点是没有根据的。
对大多数体内实验来说，需慎 重选择实验动物的种类和品系。
TGF-β1（10ng·ml-1） SA-B (10-6 M·L-1)
-- + + -+ - +
MEK1
β-actin
P-MEK
β-actin
3、SA-B对TGF-β1刺激的HSC内Raf的磷酸 化无明显影响
TGF-β1（10ng·ml-1） - - + +
SA-B (10-6 M·L-1)
- +- +
中医药实验研究的专业设计
肝病研究所 徐列明
专业设计的定义
主要是运用专业理论及技术 知识进行研究课题的设计。
必须紧紧围绕科学假说或要解决的 问题，基于立项依据，制定研究方案或技 术路线。
一、构思研究基本框架
二、实验观察的具体内容和方法 三、实验研究中要注意的问题
研究课题确立之后，要围绕科学 假说，构思研究基本框架。
二、实验观察的具体内容和方法
对每一项具体的实验内容和方法从专业 技术理论角度进行设计。即是从专业技术理 论角度考虑该实验或试验观察应该怎么做？ 需要注意什么？怎样才能排除干扰因素，使 实验更为合理，结果更具说服力？
实验设计中的整体观念
实验设计中的“整体观念”体现在考虑 问题的全面性和严密性。
一种整体观念是“大呼隆”，选了大量的指标， 应用各种技术方法，前人已做过的都要重复再现， 全面开花。
Raf-1
β-actin
P-Raf
β-actin
实验观察对象
医学研究的实验观察对象一般分为人、 动物和组织细胞三类。
实验对象应具备两个基本条件： ①对处理因素敏感； ②对处理因素的反应必须稳定。
体内实验和体外实验
•体内实验（in vivo）：实验对象是正常的
实验动物、已制作成类似于人类疾病的模 型动物、天然基因缺陷或基因变异的动物、 转基因或基因剔除的动物等。
• 对应用研究来说，则是为获取新观点、新
知识、新方法所要解决的关键问题。
拟解决的关键问题一直困惑设计者，需要根 据实验的特点认真考虑这一试验设计的核心问题。
研究目标：为什么要做本项研究？ 问题或假说：研究的动因。 课题名称：包括研究的主体、客体（和方法）。 研究内容：如何得到研究结果。
Smad4
MARK
ERK
JNK
p38
细胞核
丹参酚酸B(SA-B)抑制TGF-β1刺激的 HSC内ERK1/2的磷酸化
TGF-β1（10ng·ml-1） SA-B (10-6 M·L-1)
- - ++ - + +-
- p-ERK1 - p-ERK2
- ERK1
TGF-1受体 Smades
构思研究基本框架
课题名称 立项依据（背景资料） 科学假说（拟解决的关键科学问题） 研究目的 研究内容 研究方法 研究方案（或技术路线） 研究工作基础和条件 研究计划进度安排 课题组成员 研究经费
科学研究的指导思想和基本要求
• 指导思想
解放思想、实事求是、与时俱进
• 基本要求
科学性 先进性 实用性 可行性 创新点
•体外实验（in vitro）：现在多指组织或细
胞体外培养的一类实验，实验对象是培养 的器官、组织、原代或传代培养的细胞或 细胞株。
两种实验类型的特点和适用范围
实验周期 实验设备
和耗材 实验条件 组内差异 技术要求 适用范围
体内实验
体外实验
急性实验较短， 慢性实验较长。
一般较短，但须重复。
较少需要。
另一种是一项研究只深入解决一两个问 题，但把有关各方影响因素尽可能都考虑到， 逐一证实或排除，得到明确结论。
TGF TGF-R
Ras
Raf-1 MEK
cytoplasm
MAPK
P NF-1
SP-1 Gene transcription
nucleus
Smad2 Smad3
Pຫໍສະໝຸດ Baidu
P -Smad2 P -Smad3
• 应尽量选择那些机能代谢、结构和人类相
似的实验动物。
• 要选择那些解剖、生理特点符合实验目的
要求的实验动物。
• 选用不同种系实验动物的某些特殊反应，
使之适合于不同研究目的的需要。
• 应选用对同一刺激反应大的品系动物。
实验动物的随机化分组
随机化的特征： ⑴不可预测性 ⑵无人力干预 ⑶不以人们的意志为转移 ⑷独立于时间
需要细胞分离设备、超净 工作台、培养箱和显微镜等， 用于培养的耗材量较大。
受体内多系统的影响， 较难控制。
可控性强。
存在个体差异， 样本例数需要较多。
同源细胞差异不明显， 样本例数需要少。
需动物实验技术， 难度较低。
需细胞分离培养技术， 难度较高。
药效学研究、毒理学研究， 大通量药物筛选、 整体水平上形态和功能方面 组织、细胞水平上发病机制、 的分子生物学和药理学研究。 分子生物学和药理学研究。
胶原 蛋白
细胞核
PDGF受体
TGF-1 PDGF-BB
ERK
肝星状 细胞
中 药
胶原酶
胶原蛋白
Walter KOLCH . Biochem. J. (2000) 351, 289-305
TGF-β1的MAPK通路中的细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）通路与纤维化发生密切相关。
设计前准备
• 大量阅读国内外专业文献 获得思路 • 专题检索 获得方法 • 查新检索 获得创新点
确立研究课题
• 一般选常见病、多发病 • 推荐选热点，也可选空白点或失败点 • 有利于中医学或中西医结合医学发展 • 社会效益和经济效益
拟解决的关键问题
• 一般为1～2个。 • 对基础研究来说，可以是假说本身，也可
1、SA-B抑制TGF-β1刺激的HSC内ERK1/2 的磷酸化
TGF-β1（10ng·ml-1） SA-B (10-6 M·L-1)
++-+ - +-
TGF-β1（10ng·ml-1） SA-B (10-6 M·L-1)
-- + + -+ - +
p-ERK1 p-ERK2
ERK1
2 SA-B抑制TGF-β1刺激的HSC内MEK的磷 酸化
目前相当多的研究是两种实验研究互 相交叉，例如应用克隆技术和转基因技术 的应用。
利用体外实验的方法研究中药复方的 药理作用。
从模型动物中分离细胞作体外研究。
不同的实验要解决的具体问题不同， 须根据需要选择适当的实验类型。有部分 初学者认为体外实验的水平比体内实验要 高，这种观点是没有根据的。
对大多数体内实验来说，需慎 重选择实验动物的种类和品系。
TGF-β1（10ng·ml-1） SA-B (10-6 M·L-1)
-- + + -+ - +
MEK1
β-actin
P-MEK
β-actin
3、SA-B对TGF-β1刺激的HSC内Raf的磷酸 化无明显影响
TGF-β1（10ng·ml-1） - - + +
SA-B (10-6 M·L-1)
- +- +
中医药实验研究的专业设计
肝病研究所 徐列明
专业设计的定义
主要是运用专业理论及技术 知识进行研究课题的设计。
必须紧紧围绕科学假说或要解决的 问题，基于立项依据，制定研究方案或技 术路线。
一、构思研究基本框架
二、实验观察的具体内容和方法 三、实验研究中要注意的问题
研究课题确立之后，要围绕科学 假说，构思研究基本框架。
二、实验观察的具体内容和方法
对每一项具体的实验内容和方法从专业 技术理论角度进行设计。即是从专业技术理 论角度考虑该实验或试验观察应该怎么做？ 需要注意什么？怎样才能排除干扰因素，使 实验更为合理，结果更具说服力？
实验设计中的整体观念
实验设计中的“整体观念”体现在考虑 问题的全面性和严密性。
一种整体观念是“大呼隆”，选了大量的指标， 应用各种技术方法，前人已做过的都要重复再现， 全面开花。
Raf-1
β-actin
P-Raf
β-actin
实验观察对象
医学研究的实验观察对象一般分为人、 动物和组织细胞三类。
实验对象应具备两个基本条件： ①对处理因素敏感； ②对处理因素的反应必须稳定。
体内实验和体外实验
•体内实验（in vivo）：实验对象是正常的
实验动物、已制作成类似于人类疾病的模 型动物、天然基因缺陷或基因变异的动物、 转基因或基因剔除的动物等。