嗜麦芽窄食单胞菌基因同源性分析_吴锦

◇临床医学◇

嗜麦芽窄食单胞菌基因同源性分析

吴

锦1，胡立芬1，2，沈为华2，朱玉林2，刘艳艳2，李家斌

2(1．安徽医科大学第一附属医院中心实验室;2．安徽医科大学细菌耐药研究所，安徽合肥230022)

摘要：目的

了解2005—2010年安徽省临床分离的嗜麦芽窄食单胞菌并通过基因同源性分型，推测菌株地流行性趋势，为控制

医院感染的发生提供科学的理论依据。方法收集安徽省细菌耐药监控网中的34家不同级别医院2005—2010年（每年9月1日—30日）临床分离的嗜麦芽窄食单胞菌188株，采用全自动微生物分析仪对标本进行重新鉴定。提取全基因组DNA ，应用随

机引物PCR 方法对菌株进行基因分型分析菌株克隆流行传播情况。结果对188株基因分型，发现2005、2007及2009年的菌株均表现不同的基因亚型；2006年678和702号、2008年的824和826号、2010年的186和18号菌株分别是同一基因亚型，追

踪临床资料发现它们均来自于同一医院同一科室，说明可能存在同一克隆株在院内传播的情况。结论同一克隆株的嗜麦芽窄食单胞菌在同一医院同科室的出现，提示该菌有造成医院感染流行的隐患，因此临床医生在控制基础疾病抗感染的同时，应该高度警惕此菌的存在，及时采取措施，减少该菌的临床感染及流行。关键词：嗜麦芽窄食单胞菌；基因同源性；聚合酶链反应

Detection of β-lactamase and quinolone resistance gene in

Stenotrophomonas maltophilia

WU Jing 1，HU Li-fen 1，2

，SHEN Wei-hua 2，et al

（1．The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University ；2．Institute of Bacterial Resistance

in Anhui Medical University ，Hefei ，Anhui 230022，China ）

Abstract ：Objective

To investigate the epidemiology by genotyping among isolates ，in order to provide a scientific basis for the control

of nosocomial infection．Methods

In this study ，during the month of September from 2005to 2010，188clinical S．maltophilia isolates

were collected from 34different graded hospitals which were the members of Anhui Center for Surveillance of Bacterial Resistance．The i-solates were identified by using the Microscan Walkaway-40System．Total DNA of the 102clinical isolates from 2005to 2008collection was extracted by suspending several overnight colonies in 0．5mL of double-distilled water and heating the mixture at 100ħfor 10min．The epidemic spread of S．maltophilia isolates was detected by random primer PCR method for genotyping．Results

By genotyping of the

188isolates ，we found that all the isolates in 2005，2007and 2009showed different geneotypes ，but isolate 678and 702in 2006，isolate 824and 826in 2008，isolate 186and 187in 2010shared the same geneotypes respectively．After tracking clinical data we found that they were from the same department in the same hospital respectively．Our results revealed that cross-colonization might be possible among the patients who are followed up at the same center．Conclusions

The occurrence of the same geneotype isolates in the same department

suggests that the bacteria have the risk of causing nosocomial infection epidemic．Therefore ，clinicians should be aware of the bacteria in control underlying debilitating diseases of patients ，and take measures to reduce the infection of the bacteria．Key words ：Stenotrophomonas maltophilia ；geneotype ；PCR 基金项目：国家自然科学基金（No 81101313；No 81172737）

通信作者：李家斌，男，教授，博士生导师，研究方向：临床细菌耐药机

制，

E-mail ：lijiabin948@vip．sohu．com 嗜麦芽窄食单胞菌（Stenotrophomonas Maltophilia ，

SMA ）属于非发酵菌，随着各种抗菌药物在临床中的广泛使用及辅助医疗设备对人体有创治疗的进展，该菌的感染率不断上升，已成为医院感染的重要病原菌之一，主要导致身体衰弱患者和免疫受损患者的院内感染，它的临床致病性越来越受到重视。为了进一步提高对嗜麦芽窄食单胞菌医院感染的预防和诊治水平，本研究通过基因同源性分型，推测菌株地流行性趋势，为控制医院感染的发生提供科学的理论依据。1材料与方法

1．1

菌株来源与分离鉴定

收集2005—2010年6年期间9月份安徽省临床分离的嗜麦芽窄食单胞菌188株（不包括6

名感染者二次分离的菌株），菌株主要来源于呼吸科、血液内科、胸腹外科、急诊ICU 、血透科、消化内科等，质控菌株ATCC 27853，大肠埃希菌ATCC 25922均由安徽省细菌耐药性中心保存。1．2

主要仪器与试剂Mueller-Hinton （M-H ）培养基，琼脂粉

等均购自英国Oxiod 公司。多点接种仪（AQS Manufacturing

公司，英国）、电热恒温培养箱（上海精宏公司）、细菌比浊仪器（Oxiod ，英国）、超低温冰箱（日本三洋制冷设备公司）、移液器（Eppendorf 公司，德国）、一次性玻璃试管及一次性细菌

培养皿（杭州爱思进生物技术有限公司）。ND-1000紫外分光光度计（基因公司，美国），DNA 扩增仪（Biometra 公司，德

国），电泳仪（北京六一仪器厂DYY．10C 型），凝胶成像分析系统（上海天能科技有限公司），引物由上海生工公司合成；ExTaqDNA 聚合酶、dNTPs 、Taq buffer 、loading buffer 和DNA marker 均购自大连宝生物公司，琼脂糖购自美国Invitrogen 公

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34·安徽医药Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2013Jan ;17(1)