高中生物蛋白质的提取和分离

高中生物蛋白质的提取和分离2019年3月21日
（考试总分：100 分考试时长： 120 分钟）
一、单选题（本题共计 20 小题，共计 100 分）
1、（5分）红细胞含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。

下列对血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是
A．血红蛋白的提取和分离一般按照“样品处理→粗提取→纯化→纯度鉴定→处理”
B．纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液
C．粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质
D．可经SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定
2、（5分）如表为某培养基的配方，有关叙述正确的是
B．能在此培养基上生长的是大肠杆菌
C．此培养基上生长的菌落不一定是黑紫色
D．此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准
3、（5分）根据以下腐乳制作的流程图，判断下列说法中错误的是
豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。

A．毛霉为好氧菌，为避免其无氧呼吸，码放豆腐时要注意留出一定的缝隙
B．加盐腌制可以析出豆腐中的水分使之变硬，同时也能抑制微生物的生长
C．加卤汤、密封腌制过程中，毛霉不断增殖，并产生大量的酶，分解蛋白质
D．用胶条密封瓶口时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染
4、（5分）为了保证结果准确，一般选择菌落数在何种范围的平板进行计数
A．30～100 B．30～200
C．30～300 D．30～600
5、（5分）在制作泡菜时，乳酸菌产生的乳酸可以抑制异种微生物的生长，但乳酸积累到一定程度时，又会抑制乳酸菌自身的增殖．这些现象中包括
A．竞争和种内斗争 B．捕食、竞争
C．竞争和寄生 D．互利共生和竞争
6、（5分）下列有关生物技术实践的叙述，不正确的是
A．制果酒时瓶口先通气后密封，而制果醋时需要通入氧气
B．使用加酶洗衣粉时用温水洗涤效果比用冷水洗涤效果好
C．凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法
D．制备单克隆抗体所涉及到的生物技术包括动物细胞融合、动物细胞培养和胚胎移植7、（5分）下列关于植物组织培养中植物激素使用的说法，不正确的是
A．植物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素
B．同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向
C．先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化
D．先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂和分化
8、（5分）高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是
A．将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中
B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上
C．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上
D．将转基因植物叶片接种到无菌培养基上
9、（5分）下表为某微生物培养基的配方，相关说法错误的是
B．该培养基属于固体培养，选择培养基
C．该培养基可以用来培养异养型微生物
D．该培养基除去（CH2O），加入纤维素粉即可用来培养纤维素分解菌
10、（5分）在果酒的制作过程中，下列说法正确的是
A．为避免污染，在处理葡萄时应先除去枝梗再冲洗
B．红葡萄酒中的红色是红葡萄皮中的色素进入发酵液产生的
C．果酒制作所需要的酵母菌属于异养厌氧型微生物
D．果酒暴露在空气中容易产生酸味主要是因为产生了乳酸
11、（5分）细胞破碎后，各种蛋白质就会释放出来，再根据蛋白质的不同特性进行提取。

下列关于蛋白质抽提的措施中，不正确的是
A．酸性蛋白质可用稀碱性溶液抽提
B．水溶性蛋白质可用透析液(中性缓冲液)抽提
C．脂溶性蛋白质可用有机溶剂抽提
D．碱性蛋白质可用强酸性溶液抽提
12、（5分）植物组织培养技术可以实现优良品种的快速繁殖，保持遗传性状的一致。

下列叙述正确的是
A．菊花茎段组织培养中，需对外植体进行灭菌处理
B．菊花茎段组织培养中，必须添加植物激素
C．月季花药培养中，一般从略微开放的花中选择单核期花药
D．选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期
13、（5分）关于测定亚硝酸盐含量的试验，叙述错误的是
A．发生重氮化反应需在盐酸酸化条件下进行
B．提取剂配制好后需要用浓盐酸调节pH至1
C．用比色法可精确算出泡菜中亚硝酸盐的含量
D．振荡提取时加入NaOH是为了中和酸性物质
14、（5分）植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。

在植物组织培养过程中，如何使用这两种激素更有利于胚状体的形成
A．先使用生长素，后使用细胞分裂素
B．先使用细胞分裂素，后使用生长素
C．同时使用
D．都不使用
15、（5分）取9个洁净培养皿，均分为三组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均接种0.1mL大肠杆菌菌液，37℃培养36小时后，统计菌落数（见表），以下相关叙述错误的是
B．Ⅱ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要葡萄糖
C．三组实验均采用了稀释涂布平板法，以便菌落计数
D．三组实验所使用的培养基均需62℃、30min灭菌
16、（5分）下列实验中，需保持细胞生理活性的有
A．花生种子中脂肪的鉴定
B．观察洋葱鳞片叶内表皮细胞中DNA的分布
C．探究酵母菌的呼吸方式
D．红细胞中血红蛋白的提取和分离
17、（5分）下列关于花药离体培养，认识错误的是
A．对一般植物而言，单核期的花药培养成功率最高
B．培养形成的胚状体可继续在原培养基中分化形成植株
C．确定花药发育时期最常用的方法是醋酸洋红法
D．培养基的组成是影响花药培养的主要因素之一
18、（5分）红细胞中含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白．下列对血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是
A．血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定”的顺序进行
B．纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液
C．样品处理过程中用蒸馏水的目的是使红细胞吸水涨破释放出血红蛋白
D．可经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定19、（5分）在下列选项中，没有采用植物组织培养技术的一项是A．利用花药离体培养得到单倍体植株
B．利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株
C．利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株D．利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株
20、（5分）下列关于植物组织培养中灭菌操作，错误的是A．外植体可以用酒精杀菌
B．镊子等器械需酒精灭菌
C．操作前手需酒精消毒
D．培养基需高压蒸汽灭菌
一、单选题（本题共计 20 小题，共计 100 分）
1、（5分）【答案】B
【解析】血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理→粗提取→纯化→纯度鉴定→处理，A正确；纯化过程中要用缓冲液充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液，B错误；血红蛋白溶液的粗分离采用的方法是透析，即将凝集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析，去掉分子量较小的杂质，C正确；通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后可经SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定，D正确。

2、（5分）【答案】C
【解析】此培养基是鉴别培养基，另外此培养基中含有青霉素，还具有选择作用，因此也属于选择培养基，A错误；不是所有的大肠杆菌都能在此培养基上生长，只有能抗青霉素的大肠杆菌及其他抗青霉素的微生物才能在此培养基上生长，B错误；由B的分析可知，在此培养基生长的除了抗青霉素的大肠杆菌以外，还有抗青霉素的其他微生物，因此此培养基上生长的菌落不一定是黑紫色，C正确；由于此培养基中加入了青霉素，绝大多数细菌不能在此培养基上生长，因此此培养基不可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准，D错误。

3、（5分）【答案】C
【解析】毛霉为好氧菌，为避免其无氧呼吸，码放豆腐时要注意留出一定的缝隙，A正确；加盐腌制一方面可以析出豆腐中的水分使之变硬，同时也能抑制微生物的生长，B正确；加卤汤、密封腌制，具有防腐杀菌的作用，同时使腐乳具有一定的香味，在此条件下毛霉不能生长增殖，C错误；用胶条密封瓶口时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，以防止瓶口被杂菌污染，D正确。

4、（5分）【答案】C
【解析】当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。

为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。

为了保证结果准确，一般选择菌落数在 30～300 内进行计数，C正确。

5、（5分）【答案】A
【解析】在制作泡菜时，乳酸菌产生的乳酸可以抑制异种微生物的生长，异种微生物和乳酸菌之间属于种间关系，为竞争关系；根据题干信息分析，乳酸积累到一定程度时，又会抑制乳酸菌自身的增殖，因此到了后期由于营养物质等资源的缺乏，导致种内发生斗争，故选A。

6、（5分）【答案】D
【解析】制果酒时菌种是酵母菌，瓶口先通气是为了菌种大量繁殖，后密封是为了产酒精；制果醋时菌种是醋酸菌，需要通入氧气保证其有氧呼吸，A正确；温度能影响酶的活性，使用加酶洗衣粉时用温水洗涤效果比用冷水洗涤效果好，B正确；凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法，C正确；制备单克隆抗体所涉及到的生物技术包括动物细胞融合、动物细胞培养，不涉及胚胎移植，D 错误。

7、（5分）【答案】D
【解析】植物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素，被称为“激素杠杆”，A正确；同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向，生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长，B正确；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化，C正确；先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂，但细胞不分化，D错误。

8、（5分）【答案】D
【解析】果酒制作过程缺氧、酸性环境使多数微生物不能生存，所以不进行严格的灭菌影响不大，A错误；腐乳制作时放入酒精、盐和香辛料等，具有杀菌作用，所以不进行严格灭菌影响不大，B错误；选择培养基是根据筛选的微生物代谢特点配置的，除待筛选的微生物外，其它杂菌不能生存，所以不进行严格灭菌影响不大，C错误；植物组织培养要求严格的无菌环境，如果灭菌不彻底，会造成细胞分裂分化缓慢甚至死亡，从而导致失败，D正确。

9、（5分）【答案】D
【解析】调节pH时可能污染培养基，则配制该培养基时，要先进行pH调整再灭菌，A正确；该培养基中加入琼脂，则属于固体培养基，青霉素可抑制细菌等原核生物的生长繁殖，属于选择培养基，B正确；该培养基中加入（CH2O）作为碳源，可用来培养异养型微生物，C正确；纤维素分解菌属于异养型微生物，则除去（CH2O），纤维素分解菌不能生长繁殖，D错误。

10、（5分）【答案】B
【解析】为避免污染，在处理葡萄时应先冲洗再除去枝梗，A错误；红葡萄酒中的红色是红葡萄皮中的色素进入发酵液产生的，B正确；制作果酒的微生物是酵母菌，属于兼性厌氧性生物，C错误；果酒暴露在空气中，由于氧气充足，空气中醋酸菌容易将酒精转化为醋酸而产生酸味，D错误。

11、（5分）【答案】D
【解析】酸性蛋白质可以用稀碱性溶液提取，A正确；水溶性蛋白质可用中性缓冲液提取，B正确；脂溶性蛋白质可用有机溶剂提取，C正确；强酸、强碱都会使蛋白质变性而沉淀，所以不可用强酸性溶液提取，D错误。

12、（5分）【答案】D
【解析】植物组织培养的时候是对外植体进行消毒处理，A错误；植物组织培养中可以添加人工合成的化学物质，B错误；月季的花药培养一般选择单核靠边期的花药培养成功率最高，C错误；选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，D正确。

13、（5分）【答案】C
【解析】亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，需在盐酸酸化条件下进行，A正确；配制溶液所用的提取剂为氯化镉与氯化钡，各50g溶解于1000mL蒸馏水中，用浓盐酸调节pH至1，B正确；将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量，C错误；振荡提取时加入Na OH是为了中和酸性物质，D正确。

14、（5分）【答案】C
【解析】对于植物胚状体的形成是两种激素同时使用，只有形成根或芽时的配比不同，所以C选项正确。

15、（5分）【答案】D
【解析】Ⅰ组和Ⅱ组培养基成分的差异是有无维生素，结果可以说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖，A 正确。

Ⅱ组和Ⅲ组的差异是有无葡萄糖，结果说明没有葡萄糖大肠杆菌不能正常生长，B正确。

稀释涂布平板法培养大肠杆菌便于菌落计数，C正确。

对培养基加热到62℃不能彻底灭菌，应采用高压蒸汽灭菌，D错误。

16、（5分）【答案】C
【解析】花生种子中脂肪的鉴定实验中，用的是组织样液，不需要有活性，A错误；观察洋葱鳞片叶内表皮细胞中DNA的分布实验中，经过盐酸水解后，细胞已经死亡，B错误；探究酵母菌的呼吸方式实验中，需要保持酵母菌的活性才能进行细胞呼吸，C正确；红细胞中血红蛋白的提取和分离实验中，需要将红细胞破裂才能提取到血红蛋白，因此细胞已经死亡，D错误。

17、（5分）【答案】B
【解析】一般来说，在单核时期细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高，A正确；在组织培养过程中，花药离体培养形成愈伤组织时必须转移至分化培养基上才能得到幼小植株，B错误；确定花粉发育时期的最常用方法是醋酸洋红法，这种方法能将花粉细胞核染成红色，C正确；影响花药培养成功率的因素有很多，如材料和培养条件等，D正确。

18、（5分）【答案】B
【解析】血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定”的顺序进行，A正确；纯化过程中要缓冲溶液充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液，B错误；样品处理过程中用蒸馏水的目的是使红细胞吸水涨破释放出血红蛋白，C正确；可经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定，D正确。

19、（5分）【答案】C
【解析】利用化药离体培养得到单倍体植株过程中需要用到植物组织培养，A错误。

利用基因工程培育抗虫棉用到脱分化、再分化的植物组织培养，B错误。

利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到多倍体植株，不需要用植物组织培养，C正确。

利用细胞工程培育杂种植株，也涉及脱分化、再分化的植物组织培养，D错误。

20、（5分）【答案】B
【解析】植物组织培养需要严格的无菌操作，包括：外植体应在酒精浸泡6-7s，再用无菌水清洗，A正确；整个操作过程在酒精灯火焰旁进行，同时每次使用后，对镊子等器械应进行火焰灼烧灭菌，B错误；操作前手需用酒精消毒，C正确；培养基需要用高压蒸汽灭菌，D正确。